Ontwikkeling en evaluatie van een rattenmodel van kraakbeendefecten van volledige dikte

Dit protocol bootst niet alleen het voorkomen en de ontwikkeling van klinische FTCD na, maar biedt ook een betrouwbaar diermodel voor het evalueren van therapeutische behandelingen tegen FTCD. Maar deze techniek is eenvoudig uit te voeren en maakt groeiobservatie direct na de blessure mogelijk. Deze techniek kan met succes klinische kraakbeendefecten nabootsen en biedt een platform voor het bestuderen van het pathologische proces van kraakbeendefecten en het ontwikkelen van overeenkomstige therapeutische geneesmiddelen.

Deze methode zou kunnen worden toegepast om traumatische kraakbeendefecten te bestuderen, namelijk posttraumatische artrose. Wanneer u deze techniek voor de eerste keer probeert, is het belangrijk om het scheenbeen en het kuitbeen in een hoek van 90 graden te buigen om het cochleair van de femorale condylus volledig bloot te leggen en de boor loodrecht op het kraakbeenoppervlak te houden. Begin met het plaatsen van een verdoofde rat op de operatietafel in rugligging.

Plaats een steriel gordijn over de rat, waardoor het geschoren en gedesinfecteerde kniegewricht zichtbaar wordt. Maak met behulp van een scalpelblad nummer 11 een verticale incisie van één centimeter in het midden van het kniegewricht. En snijd het gewrichtskapsel en de quadriceps femorispees langs de mediale patellarand.

Draai vervolgens de patella naar buiten en buig het scheenbeen en het kuitbeen in een hoek van 90 graden, om het femorale condylus cochleair bloot te leggen. Maak met behulp van een cirkelvormige boor van 1,6 millimeter een volledig dikte 0,1 millimeter diep kraakbeendefect in het femorale condylus cochleair. Veeg de operatieplaats af met wattenbollen gedrenkt in 0,9% zoutoplossing en vervang de patella.

Houd vervolgens de knie in een verlengde positie en hecht de incisie laag voor laag met behulp van niet-absorbeerbare 4-0 hechtingen. Om de mechanische onttrekkingsdrempel of MWT"van de ratten te meten, plaatst u het dier in een enkele plastic kamer op een gaasplatform. Plaats de gaasbodem 50 centimeter boven een tafel.

Begin met de MWT-meting na 30 minuten aanpassing. Druk vervolgens de Von Frey-gloeidraad loodrecht op het planteroppervlak van de achterpoot van de rat. Buig vervolgens de borstel gedurende twee seconden en vermijd het dikste deel van het centrale deel van de poot.

Verhoog het stimulusgewicht geleidelijk van 4 gram, totdat een positieve reactie zoals pootterugtrekking of likken optreedt. 3 dagen na het modelleren vertoonden de ratten in de modelgroep een verminderde MWT in vergelijking met de schijngroep. Suggereert hyperalgesie in de modelgroep.

De MWT van de modelgroep bleef zelfs na 17 dagen laag. Indicatief voor de lengte van de pijngevoeligheid. Histopathologische kleuring van de schijngroep toonde een duidelijk gewrichts- en intact kraakbeenoppervlak, een gelijkmatige verdeling van de chondrocyten en een hoge expressie van type-II collageen.

Daarentegen toont de modelgroep depressieve kraakbeenoppervlakken, verloren chondrocyten, verhoogde expressie van matrixmetalloproteinase MMP13 en verminderde expressie van type-II collageen. Het belangrijkste om te onthouden is dat patella moet worden verminderd voordat het hecht.