Name: Het afstemmen van de contractiliteit en vervormingsmodi van actieve op actine gebaseerde assemblages in vitro: van tweedimensionale actieve netwerken tot druppels van vloeibare kristallen (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-11T16:50:00.000+00:00
Duration: 6 min 48 s
Description: Ontdek methoden voor het bereiden van quasi-tweedimensionale actine-assemblages met gekruiste verbindingen en vloeibare kristaleigenschappen. Dit protocol verbetert de reproduceerbaarheid in zachte biologische materialen.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<ol><li>Marchetti, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Hydrodynamics+of+soft+active+matter%5BTitle%5D)+AND+%22Rev+Mod+Phys%22%5BJournal%5D)">Hydrodynamics of soft active matter.</a> Rev Mod Phys. 85 (3), 1143-1189 (2013).</li>
<li>Needleman, D., Dogic, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Active+matter+at+the+interface+between+materials+science+and+cell+biology%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mater%22%5BJournal%5D)">Active matter at the interface between materials science and cell biology.</a> Nat Rev Mater. 2 (9), 17048(2017).</li>
<li>Murrell, M., Oakes, P. W., Lenz, M., Gardel, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Forcing+cells+into+shape%3A+the+mechanics+of+actomyosin+contractility%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Mol+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Forcing cells into shape: the mechanics of actomyosin contractility.</a> Nat Rev Mol Cell Biol. 16 (8), 486-498 (2015).</li>
<li>Cáceres, R., Abou-Ghali, M., Plastino, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reconstituting+the+actin+cytoskeleton+at+or+near+surfaces+in+vitro%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim+Biophys+Acta+Mol+Cell+Res%22%5BJournal%5D)">Reconstituting the actin cytoskeleton at or near surfaces in vitro.</a> Biochim Biophys Acta Mol Cell Res. 1853 (11), 3006-3014 (2015).</li>
<li>Burla, F., Mulla, Y., Vos, B. E., Aufderhorst-Roberts, A., Koenderink, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((From+mechanical+resilience+to+active+material+properties+in+biopolymer+networks%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Phys%22%5BJournal%5D)">From mechanical resilience to active material properties in biopolymer networks.</a> Nat Rev Phys. 1 (4), 249-263 (2019).</li>
<li>Bezanilla, M., Gladfelter, A. S., Kovar, D. R., Lee, W. -L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cytoskeletal+dynamics%3A+a+view+from+the+membrane%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Cytoskeletal dynamics: a view from the membrane.</a> J Cell Biol. 209 (3), 329-337 (2015).</li>
<li>Alfaro-Aco, R., Petry, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Building+the+microtubule+cytoskeleton+piece+by+piece%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">Building the microtubule cytoskeleton piece by piece.</a> J Biol Chem. 290 (28), 17154-17162 (2015).</li>
<li>Sanchez, T., Chen, D. T. N., DeCamp, S. J., Heymann, M., Dogic, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Spontaneous+motion+in+hierarchically+assembled+active+matter%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Spontaneous motion in hierarchically assembled active matter.</a> Nature. 491 (7424), 431-434 (2012).</li>
<li>Foster, P. J., Fürthauer, S., Shelley, M. J., Needleman, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Active+contraction+of+microtubule+networks%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Active contraction of microtubule networks.</a> eLife. 4, e10837(2015).</li>
<li>Murrell, M. P., Gardel, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((F-actin+buckling+coordinates+contractility+and+severing+in+a+biomimetic+actomyosin+cortex%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">F-actin buckling coordinates contractility and severing in a biomimetic actomyosin cortex.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 109 (51), 20820-20825 (2012).</li>
<li>Weirich, K. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Liquid+behavior+of+cross-linked+actin+bundles%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Liquid behavior of cross-linked actin bundles.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 114 (9), 2131-2136 (2017).</li>
<li>Alvarado, J., Sheinman, M., Sharma, A., MacKintosh, F. C., Koenderink, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+motors+robustly+drive+active+gels+to+a+critically+connected+state%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Phys%22%5BJournal%5D)">Molecular motors robustly drive active gels to a critically connected state.</a> Nat Phys. 9 (9), 591-597 (2013).</li>
<li>Keber, F. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topology+and+dynamics+of+active+nematic+vesicles%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Topology and dynamics of active nematic vesicles.</a> Science. 345 (6201), 1135-1139 (2014).</li>
<li>Zhang, R., Kumar, N., Ross, J. L., Gardel, M. L., De Pablo, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interplay+of+structure%2C+elasticity%2C+and+dynamics+in+actin-based+nematic+materials%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Interplay of structure, elasticity, and dynamics in actin-based nematic materials.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 115 (2), E124-E133 (2018).</li>
<li>Schaller, V., Weber, C., Semmrich, C., Frey, E., Bausch, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Polar+patterns+of+driven+filaments%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Polar patterns of driven filaments.</a> Nature. 467 (7311), 73-77 (2010).</li>
<li>Blanchoin, L., Boujemaa-Paterski, R., Sykes, C., Plastino, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Actin+dynamics%2C+architecture%2C+and+mechanics+in+cell+motility%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol+Rev%22%5BJournal%5D)">Actin dynamics, architecture, and mechanics in cell motility.</a> Physiol Rev. 94 (1), 235-263 (2014).</li>
<li>Bendix, P. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+quantitative+analysis+of+contractility+in+active+cytoskeletal+protein+networks%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">A quantitative analysis of contractility in active cytoskeletal protein networks.</a> Biophys J. 94 (8), 3126-3136 (2008).</li>
<li>Köhler, S., Schaller, V., Bausch, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+formation+in+active+networks%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Mater%22%5BJournal%5D)">Structure formation in active networks.</a> Nat Mater. 10 (6), 462-468 (2011).</li>
<li>Backouche, F., Haviv, L., Groswasser, D., Bernheim-Groswasser, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Active+gels%3A+dynamics+of+patterning+and+self-organization%5BTitle%5D)+AND+%22Phys+Biol%22%5BJournal%5D)">Active gels: dynamics of patterning and self-organization.</a> Phys Biol. 3 (4), 264-273 (2006).</li>
<li>Svitkina, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Actin+cell+cortex%3A+structure+and+molecular+organization%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Actin cell cortex: structure and molecular organization.</a> Trends Cell Biol. 30 (7), 556-565 (2020).</li>
<li>Reymann, A. -C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Actin+network+architecture+can+determine+myosin+motor+activity%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Actin network architecture can determine myosin motor activity.</a> Science. 336 (6086), 1310-1314 (2012).</li>
<li>Reymann, A. -C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nucleation+geometry+governs+ordered+actin+network+structures%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Mater%22%5BJournal%5D)">Nucleation geometry governs ordered actin network structures.</a> Nat Mater. 9 (10), 827-832 (2010).</li>
<li>Vogel, S. K., Petrasek, Z., Heinemann, F., Schwille, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Myosin+motors+fragment+and+compact+membrane-bound+actin+filaments%5BTitle%5D)+AND+%22eLife%22%5BJournal%5D)">Myosin motors fragment and compact membrane-bound actin filaments.</a> eLife. 2, e00116(2013).</li>
<li>Liebe, N. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bioinspired+membrane+interfaces%3A+controlling+actomyosin+architecture+and+contractility%5BTitle%5D)+AND+%22ACS+Appl+Mater+Interfaces%22%5BJournal%5D)">Bioinspired membrane interfaces: controlling actomyosin architecture and contractility.</a> ACS Appl Mater Interfaces. 15 (9), 11586-11598 (2023).</li>
<li>Thoresen, T., Lenz, M., Gardel, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Thick+filament+length+and+isoform+composition+determine+self-organized+contractile+units+in+actomyosin+bundles%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Thick filament length and isoform composition determine self-organized contractile units in actomyosin bundles.</a> Biophys J. 104 (3), 655-665 (2013).</li>
<li>Stachowiak, M. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Self-organization+of+myosin+II+in+reconstituted+actomyosin+bundles%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Self-organization of myosin II in reconstituted actomyosin bundles.</a> Biophys J. 103 (6), 1265-1274 (2012).</li>
<li>Winkelman, J. D., Bilancia, C. G., Peifer, M., Kovar, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ena%2FVASP+enabled+is+a+highly+processive+actin+polymerase+tailored+to+self-assemble+parallel-bundled+F-actin+networks+with+fascin%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Ena/VASP enabled is a highly processive actin polymerase tailored to self-assemble parallel-bundled F-actin networks with fascin.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 111 (11), 4121-4126 (2014).</li>
<li>Stam, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Filament+rigidity+and+connectivity+tune+the+deformation+modes+of+active+biopolymer+networks%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Filament rigidity and connectivity tune the deformation modes of active biopolymer networks.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 114 (47), E10037-E10045 (2017).</li>
<li>Weirich, K. L., Stam, S., Munro, E., Gardel, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Actin+bundle+architecture+and+mechanics+regulate+myosin+II+force+generation%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Actin bundle architecture and mechanics regulate myosin II force generation.</a> Biophys J. 120 (10), 1957-1970 (2021).</li>
<li>Scholz, M., Weirich, K. L., Gardel, M. L., Dinner, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tuning+molecular+motor+transport+through+cytoskeletal+filament+network+organization%5BTitle%5D)+AND+%22J+Soft+Mat%22%5BJournal%5D)">Tuning molecular motor transport through cytoskeletal filament network organization.</a> J Soft Mat. 16 (8), 2135-2140 (2020).</li>
<li>Spudich, J. A., Watt, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+regulation+of+rabbit+skeletal+muscle+contraction%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Chem%22%5BJournal%5D)">The regulation of rabbit skeletal muscle contraction.</a> J Biol Chem. 246 (15), 4866-4871 (1971).</li>
<li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+F-actin+bundler+%CE%B1actinin+Ain1+is+tailored+for+ring+assembly+and+constriction+during+cytokinesis+in+fission+yeast%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Biol+Cell%22%5BJournal%5D)">The F-actin bundler αactinin Ain1 is tailored for ring assembly and constriction during cytokinesis in fission yeast.</a> Mol Biol Cell. 27 (11), 1821-1833 (2016).</li>
<li>Skau, C. T., Kovar, D. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fimbrin+and+tropomyosin+competition+regulates+endocytosis+and+cytokinesis+kinetics+in+fission+yeast%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Biol%22%5BJournal%5D)">Fimbrin and tropomyosin competition regulates endocytosis and cytokinesis kinetics in fission yeast.</a> Curr Biol. 20 (16), 1415-1422 (2010).</li>
<li>Vignjevic, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+fascin+in+filopodial+protrusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Role of fascin in filopodial protrusion.</a> J Cell Biol. 174 (6), 863-875 (2006).</li>
<li>Margossian, S. S., Lowey, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+myosin+and+its+subfragments+from+rabbit+skeletal+muscle%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">Preparation of myosin and its subfragments from rabbit skeletal muscle.</a> Methods Enzymol. 85, 55-71 (1982).</li>
<li>Palmgren, S., Ojala, P. J., Wear, M. A., Cooper, J. A., Lappalainen, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interactions+with+PIP2%2C+ADPactin+monomers%2C+and+capping+protein+regulate+the+activity+and+localization+of+yeast+twinfilin%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Interactions with PIP2, ADPactin monomers, and capping protein regulate the activity and localization of yeast twinfilin.</a> J Cell Biol. 155 (2), 251-260 (2001).</li>
<li>Craig, S. W., Lancashire, C. L., Cooper, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preparation+of+smooth+muscle+alphaactinin%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Enzymol%22%5BJournal%5D)">Preparation of smooth muscle alphaactinin.</a> Methods Enzymol. 85, 316-321 (1982).</li>
<li>Verkhovsky, A. B., Borisy, G. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonsarcomeric+mode+of+myosin+II+organization+in+the+fibroblast+lamellum%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Biol%22%5BJournal%5D)">Nonsarcomeric mode of myosin II organization in the fibroblast lamellum.</a> J Cell Biol. 123 (3), 637-652 (1993).</li>
<li>LeBel, R. G., Goring, D. A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Density%2C+viscosity%2C+refractive+index%2C+and+hygroscopicity+of+mixtures+of+water+and+dimethyl+sulfoxide%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chem+Eng+Data%22%5BJournal%5D)">Density, viscosity, refractive index, and hygroscopicity of mixtures of water and dimethyl sulfoxide.</a> J Chem Eng Data. 7 (1), 100-101 (1962).</li>
<li>Lengsfeld, A. M., Lowt, I., Wielandt, T., Dancker, P., Hasselbach, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interaction+of+phalloidin+with+actin%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Interaction of phalloidin with actin.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 31, 846(1974).</li>
<li>Chowdhury, M. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dendronized+fluorosurfactant+for+highly+stable+waterinfluorinated+oil+emulsions+with+minimal+interdroplet+transfer+of+small+molecules%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Dendronized fluorosurfactant for highly stable waterinfluorinated oil emulsions with minimal interdroplet transfer of small molecules.</a> Nat Commun. 10 (1), 4546(2019).</li>
<li>Alvarado, J., Mulder, B. M., Koenderink, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Alignment+of+nematic+and+bundled+semiflexible+polymers+in+cellsized+confinement%5BTitle%5D)+AND+%22J+Soft+Mat%22%5BJournal%5D)">Alignment of nematic and bundled semiflexible polymers in cellsized confinement.</a> J Soft Mat. 10 (14), 2354-2364 (2014).</li>
<li>Weirich, K. L., Israelachvili, J. N., Fygenson, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bilayer+edges+catalyze+supported+lipid+bilayer+formation%5BTitle%5D)+AND+%22Biophys+J%22%5BJournal%5D)">Bilayer edges catalyze supported lipid bilayer formation.</a> Biophys J. 98 (1), 85-92 (2010).</li>
<li>Tan, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Topological+chaos+in+active+nematics%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Phys%22%5BJournal%5D)">Topological chaos in active nematics.</a> Nat Phys. 15 (10), 1033-1039 (2019).</li>
<li>Nasirimarekani, V., Strübing, T., Vilfan, A., Guido, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tuning+the+properties+of+active+microtubule+networks+by+depletion+forces%5BTitle%5D)+AND+%22Langmuir%22%5BJournal%5D)">Tuning the properties of active microtubule networks by depletion forces.</a> Langmuir. 37 (26), 7919-7927 (2021).</li>
<li>Heymann, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Studies+on+solgel+transformations%3A+I.+the+inverse+solgel+transformation+of+methylcellulose+in+water%5BTitle%5D)+AND+%22Trans+Faraday+Soc%22%5BJournal%5D)">Studies on solgel transformations: I. the inverse solgel transformation of methylcellulose in water.</a> Trans Faraday Soc. 31, 846(1935).</li>
</ol>

<a href="https://app.jove.com/t/6643">This corrects</a> the article <a href="https://dx.doi.org/10.3791/68127">10.3791/68127</a>

An erratum was issued for:&#160;<a href="https://www.jove.com/t/68127">Tuning the Contractility and Deformation Modes of Active Actin-Based Assemblies In Vitro: From Two-Dimensional Active Networks to Liquid Crystal Drops</a>. The Affiliations&#160;section was&#160;updated.

Erratum: Tuning the Contractility and Deformation Modes of Active Actin-Based Assemblies In Vitro: From Two-Dimensional Active Networks to Liquid Crystal Drops

<table><tbody><tr><td>0.6 mL microcentrifuge tube</td><td>Fisher Scientific</td><td>05-408-123</td><td></td></tr><tr><td>008-Fluorosurfactant</td><td>RAN Biotechnologies</td><td>00115081361-6525</td><td>Alternatief voor voorgemengde oplossing</td></tr><tr><td>008-FluoroSurfactant in HFE7500</td><td>RAN Biotechnologies</td><td>008-FluoroSurfactant-2wtH-50G</td><td>Voorgemengde oplossing</td></tr><tr><td>2-mercaptoethanol (&beta;-mercaptoethanol)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>63689</td><td>CAS-nummer: 60-24-2 Stockoplossing: 25 mM in MilliQ-water, bewaard bij 4 &deg;C</td></tr><tr><td>4-(2-Hydroxyethyl)piperazine-1-ethane-sulfonic acid (HEPES)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>H3375</td><td>CAS-nummer: 7365-45-9</td></tr><tr><td>5 min Epoxy</td><td>Devcon</td><td>14250</td><td></td></tr><tr><td>Actin</td><td>Cytoskeleton, Inc.</td><td>AKL99-A</td><td>>99% zuivere konijnenskeletspier (Alternatief voor zuiveren)</td></tr><tr><td>Actin (rhodamine labeled)</td><td>Cytoskeleton, Inc.</td><td>AR05-A</td><td>Konijnenskeletspier (Alternatief voor zuiveren)</td></tr><tr><td>Adenosine 5&prime;-triphosphate (ATP)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A6419</td><td>CAS-nummer: 34369-07-8 Stockoplossing: 25 mM in MilliQ-water, bewaar bij -20 &deg;C Bewaar bevroren om hydrolyse te voorkomen</td></tr><tr><td>Calcium Chloride (CaCl2)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>C5670</td><td>CAS-nummer: 10043-52-4</td></tr><tr><td>Capping Protein (Muis)</td><td></td><td></td><td>Gezuiverde overexpressie uit E.coli met een HisTag Stockoplossing: 20 mM in capping-eiwitbuffer bij -80 &deg;C</td></tr><tr><td>Catalase uit runderlever</td><td>Sigma Aldrich</td><td>C9322</td><td>CAS-nummer: 9001-05-2 Stockoplossing: 85 ku/mL, bewaar gesplitst met glucose-oxidase bij -20&deg;C</td></tr><tr><td>Dekglas</td><td>Fisherbrand</td><td>12544C</td><td>Borosilicaat, #1.5, 24 mm x 40 mm Fisherbrand niet Fisher Finest</td></tr><tr><td>D-(+)-Glucose</td><td>Sigma Aldrich</td><td>G8270</td><td>CAS-nummer: 50-99-7 Stockoplossing: 225 mg/mL in MilliQ-water, bewaar bij -20 &deg;C</td></tr><tr><td>Dithiothreitol (DTT)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>3860-OP</td><td>CAS-nummer: 3483-12-3 Stockoplossing: 1 M in MilliQ-water, bewaar bij -20 &deg;C</td></tr><tr><td>Dubbelzijdig plakband</td><td>3M</td><td>3136</td><td></td></tr><tr><td>Ethyl alcohol 200 Proof</td><td>PHARMCO</td><td>111000200</td><td>CAS-nummer: 64-17-5 200 proof</td></tr><tr><td>Ethylene glycol-bis(2-aminoethylether)-N,N,N&prime;,N&prime;-tetraacetic acid (EGTA)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>E3889</td><td>CAS-nummer: 67-42-5</td></tr><tr><td>Ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>E9884</td><td>CAS-nummer: 60-00-4</td></tr><tr><td>Glucose Oxidase</td><td>Sigma Aldrich</td><td>345386</td><td>CAS-nummer: 9001-37-0 Stockoplossing: 135 mg/mL in MilliQ-water, bewaar gesplitst met catalase bij -20 &deg;C</td></tr><tr><td>Glycerol</td><td>Sigma Aldrich</td><td>356352M</td><td>CAS-nummer: 56-81-5</td></tr><tr><td>Imidazole</td><td>Fisher Bioreagents</td><td>BP305-50</td><td>CAS-nummer: 288-32-4</td></tr><tr><td>Magnesium Chloride (MgCl2)</td><td>Fisher Bioreagents</td><td>BP214</td><td>CAS-nummer: 7786-30-3, 7791-18-6</td></tr><tr><td>Methylcellulose</td><td>Sigma Aldrich</td><td>M0512</td><td>CAS-nummer: 9004-67-5 15 centipoise</td></tr><tr><td>Microscope Slides Plain</td><td>Electron Microscopy Sciences/Gold Seal</td><td>63710-05</td><td>3"x1", 1 mm dik</td></tr><tr><td>MilliQ water</td><td>Millipore</td><td>CUFBI001</td><td>Ultrapuur water</td></tr><tr><td>Novec-7500 Engineered Fluid</td><td>3M</td><td>7100134816</td><td>Alternatief voor voorgemengde oplossing</td></tr><tr><td>Potassium Chloride (KCl)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P3911</td><td>CAS-nummer: 7447-40-7</td></tr><tr><td>Potassium Phosphate (KPO4)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>P3786</td><td>CAS-nummer: 7758-11-4</td></tr><tr><td>Konijnenskeletspier acetonpoeder</td><td>Pel-Freez Biologicals</td><td>41995-1</td><td>Gebruikt bij het zuiveren van actin (alternatief voor aankoop) Bewaar rond 30 mM in actin Buffer G bij -80 &deg;C</td></tr><tr><td>Sodium Azide</td><td>Sigma Aldrich</td><td>71289</td><td>CAS-nummer: 26626-22-8</td></tr><tr><td>Tetramethylrhodamine-C6-maleimide</td><td>AnaSpec</td><td>AS-81445</td><td>CAS-nummer: 174568-68-4 Gebruikt bij het zuiveren van actin (alternatief voor aankoop) Bewaar rond 30 mM in actin Buffer G bij -80 &deg;C. Gebruikt bij het labelen van actin (alternatief voor aankoop)</td></tr><tr><td>Tris Hydrochloric Acid (Tris HCl)</td><td>Sigma Aldrich</td><td>648317</td><td>CAS-nummer: 1185-53-1</td></tr><tr><td>Ultrasoon bad</td><td>Emerson Branson</td><td>CPX2800H</td><td></td></tr></tbody></table>

het afstemmen van de contractiliteit en vervormingsmodi van actieve op actine gebaseerde assemblages in vitro: van tweedimensionale actieve netwerken tot druppels van vloeibare kristallen

Tuning the Contractility and Deformation Modes of Active Actin-Based Assemblies In Vitro: From Two-Dimensional Active Networks to Liquid Crystal Drops

Het afstemmen van de contractiliteit en vervormingsmodi van actieve op actine gebaseerde assemblages in vitro: van tweedimensionale actieve netwerken tot druppels van vloeibare kristallen

Actin cytoskeleton-based materials are widely investigated as model cellular materials to elucidate physical mechanisms of cell mechanics, such as shape ...

tuning-contractility-deformation-modes-active-actin-based-assemblies

Research

JoVE Journal

Biology

Biologie

We demonstreren de bereiding van op siloxaan-gebaseerde en op epoxy-gebaseerde vloeibare kristal elastomeren (LCEs) en LCE-nanocomposietmaterialen. De LCEs worden gekenmerkt met betrekking tot omkeerbare spanning, vloeibare kristal ordening en stijfheid. Als een mogelijke toepassing demonstreren we hun gebruik als vormgevoelige substraten in een op maat gemaakt apparaat voor actieve celkweek.

Voorbereiding van de Monodomain Liquid Crystal Elastomers en Liquid Crystal elastomeer Nanocomposieten

Hier fabriceren we 3D polymere micro/nanostructuren waarbij zowel de vorm als de moleculaire uitlijning met nanometernauwkeurigheid kunnen worden ontworpen door gebruik te maken van direct laserschrijven. Lichtgeïnduceerde vervorming van verschillende typen vloeibare kristallijne elastomeer microstructuren kan op microscopische schaal worden bestuurd.

Free-form Light Actuators - Fabricage en Controle van de Aandrijving in microscopische schaal

Deze studie geeft een methode voor 3D, bioafbreekbare, schuimachtige cellen steigers basis van biocompatibele zijketen vloeibaar kristal elastomeren (LCEs) te bereiden. Confocale microscopie experimenten tonen aan dat schuimachtige LCEs zorgen voor celhechting, proliferatie en de spontane uitlijning van C2C12s myoblasten.

Synthese van biocompatibel Liquid Crystal elastomeerschuimen als Cell Stellingen voor 3D Ruimtelijke Cell Cultures

Het doel van het protocol is het creëren van vloeibaar kristallijne polymeerlagen die mechanisch onder continu licht bestraling oscilleren kunnen. We beschrijven zeer gedetailleerd de Ontvangenis van vrijstaande films, van de vloeibare kristallen uitlijning methode om de foto-bediening. Het experimentele protocol toegepast ter voorbereiding van dit materiaal is breed toepasbare.

Voorbereiding van vloeibare kristallen netwerken macroscopische oscillerende beweging door licht geïnduceerde

Dit artikel beschrijft het proces van de microfluidic en de parameters te bereiden geregelde deeltjes uit vloeibaar kristallijne elastomeren. Dit proces maakt de voorbereiding van de bedieningsrichting deeltjes en de variatie van de grootte en de vorm (van oblate te sterk prolate, kern-shell, en Janus morphologies) evenals de omvang van de bediening.

Microfluidic voorbereiding van vloeibaar kristallijne elastomeer actuatoren

We presenteren protocollen voor eenvoudige actinefilamentmicrofluïdische assays, in combinatie met fluorescentiemicroscopie, waarmee men individuele actinefilamenten in realtime nauwkeurig kan volgen terwijl ze sequentieel worden blootgesteld aan verschillende eiwitoplossingen.

Microfluïdica en fluorescentiemicroscopie gebruiken om de assemblagedynamiek van single actinefilamenten en -bundels te bestuderen

Dit protocol beschrijft de vorming van ondersteunde lipide bilayers en de toevoeging van cytoskeletale filamenten en motoreiwitten om de dynamiek van gereconstitueerde, membraangebonden cytoskeletale netwerken te bestuderen met behulp van fluorescentiemicroscopie.

Reconstitutie van membraangebonden minimale actinecorticosterces op ondersteunde lipidebilagen

In dit manuscript demonstreren we de experimentele technieken om het F-actinecytoskelet in te kapselen in gigantische unilamellaire lipideblaasjes (ook wel liposomen genoemd), en de methode om een cortex-biomimicking F-actinelaag te vormen aan de binnenste folder van het liposoommembraan.

In vitro Reconstitutie van het Actin Cytoskelet Inside Giant Unilamellar Vesicles

Dit artikel presenteert protocollen voor het engineeren en karakteriseren van afstembare driedimensionale composietnetwerken van co-verstrengelde actinefilamenten en microtubuli. Composieten ondergaan actieve herstructurering en ballistische beweging, aangedreven door myosine II- en kinesinemotoren, en worden afgestemd op de relatieve concentraties actine, microtubuli, motoreiwitten en passieve crosslinkers.

Reconstitueren en karakteriseren van Actin-Microtubule Composieten met instelbare motoraangedreven dynamica en mechanica

Hier worden methoden gepresenteerd voor het bereiden van actieve nematica uit microtubuli en kinesinemotoren, inclusief eiwitvoorbereiding en -constructie en het gebruik van putten voor actieve nematische opsluiting.

Vormen, beperken en observeren van op microtubule gebaseerde actieve nematica

In dit werk wordt een in vitro reconstitutiebenadering gebruikt om de poro-elasticiteit van actomyosinegels onder gecontroleerde omstandigheden te bestuderen. De dynamiek van de actomyosinegel en het ingebedde oplosmiddel worden gekwantificeerd, waardoor de netwerkporo-elasticiteit wordt aangetoond. We bespreken ook de experimentele uitdagingen, veelvoorkomende valkuilen en relevantie voor celcytoskeletmechanica.

De mechanica van (poro-)elastische contractiele actomyosinenetwerken als modelsysteem van het celcytoskelet

Ontdek methoden voor het bereiden van quasi-tweedimensionale actine-assemblages met gekruiste verbindingen en vloeibare kristaleigenschappen. Dit protocol verbetert de reproduceerbaarheid in zachte biologische materialen.

Het afstemmen van de contractiliteit en vervormingsmodi van actieve op actine gebaseerde assemblages in vitro: van tweedimensionale actieve netwerken tot druppels van vloeibare kristallen (Video) | JoVE Journal

Het afstemmen van de contractiliteit en vervormingsmodi van actieve op actine gebaseerde assemblages in vitro: van tweedimensionale actieve netwerken tot druppels van vloeibare kristallen

Meer video's verkennen