Ocena zachowań związanych z interakcjami społecznymi

Ogólnym celem poniższego eksperymentu jest zbadanie interakcji społecznych i pamięci u myszy. Wyjątkowość tej metody polega na tym, że umieszcza mysz kontrolną pod drucianym kubkiem, umożliwiając zwierzęciu doświadczalnemu swobodne inicjowanie lub kończenie interakcji, jednocześnie zapobiegając bezpośredniemu kontaktowi po przyzwyczajeniu się do centralnej komory. Mysz eksperymentalna może swobodnie eksplorować dwie inne komnaty, jedną z pustym kubkiem, a drugą zawierającą nieznaną mysz.

Następny krok pozwala myszy na swobodny wybór między znanym już zwierzęciem a nowo wprowadzoną drugą myszką. Ostatecznie można uzyskać wyniki, które pokazują różnice w naturalnej towarzyskości i preferencji dla nowości społecznych u myszy eksperymentalnych i kontrolnych. Główną przewagą tej techniki nad istniejącymi metodami, takimi jak jednokomorowy test interakcji społecznych lub test rezydenta intruza, jest to, że wszelki bezpośredni kontakt fizyczny między myszami podczas tej procedury jest zabroniony, co pozwala zwierzęciu doświadczalnemu na swobodę przerywania lub inicjowania interakcji społecznych.

Test towarzyskości i preferencji Crawleya do nowości społecznych jest przeprowadzany w prostokątnym trzykomorowym pudełku. Każda komora ma wymiary 19 na 45 centymetrów, a ścianki działowe wykonane są z przezroczystej pleksi. Środkowa część otwiera się, aby umożliwić swobodny dostęp do każdej komory.

Druciane kubki potrzebne do tej procedury powinny być wystarczająco duże, aby pomieścić pojedynczą mysz i mieć otwory, które umożliwiają dużą wymianę powietrza, ale uniemożliwiają bezpośrednią interakcję fizyczną. Umieść po jednej filiżance z każdej strony komory, zachowanie podczas testu jest rejestrowane. Korzystając z programu Observer 6.0, wszystkie komory są czyszczone 70% etanolem między myszami, a następnie za pomocą kaly, jeden do pięciu do jednego między klatkami, aby zapobiec węchowemu odchyleniu Q i zapewnić odpowiednią dezynfekcję, odpowiednio rozpocznij od przyzwyczajenia zwierząt doświadczalnych do środowiska testowego przez 30 minut.

Gdy oba kubki są na miejscu, a ścianki działowe są zamknięte, wprowadź naiwną mysz do centralnej komory i odczekaj pięć minut na aklimatyzację. Umieść obcą mysz kontrolną w drucianym kubku zabezpieczającym, naprzemiennie umieszczaj kontrolę od lewej do prawej strony komory między próbami. Po okresie przyzwyczajenia usuń ścianki między przedziałami, aby umożliwić testerowi swobodną eksplorację wszystkich trzech komór, natychmiast rozpocznij monitorowanie i rejestrowanie zachowania przez 10 minut.

W tym przykładzie program Observer służy do monitorowania zachowań w czasie rzeczywistym za pomocą kodów dla interesujących nas parametrów, rejestrowania czasu trwania i liczby bezpośrednich lub aktywnych kontaktów między badaną myszą a pustą miseczką lub obudową kubka, obcą myszką. Aktywny kontakt to albo bezpośredni kontakt, albo rozciągnięcie ciała osoby badanej w obszarze od trzech do pięciu centymetrów wokół kubka. Rejestruj także czas trwania i liczbę innych zachowań.

Należą do nich chodzenie, samodzielność, pielęgnacja, brak jakichkolwiek ruchów ciała przez więcej niż pięć sekund lub zamarzanie, a także wszelkie nietypowe zachowania, takie jak skakanie, powtarzające się zachowanie i tak dalej. Rejestrowany jest również czas trwania i liczba wejść do każdej komory. Uważa się, że mysz znajduje się w komorze, gdy weszła jej głowa i cztery pory.

Aby przetestować nowość społeczną lub preferencje, umieść drugą mysz kontrolną nieznajomą dwójkę w kubku po przeciwnej stronie komory. Monitoruj te same parametry, jak opisano powyżej, przez dodatkowe 10 minut. Wyczyść wszystkie komory 70% etanolem, a następnie kalejdo jeden do pięciu do jednego i zademonstruj wcześniej oprócz ręcznej oceny eksperymentów.

Zdecydowanie zaleca się korzystanie z systemu rejestracji wideo, ponieważ umożliwia to przegląd danych eksperymentalnych w trybie offline w przyszłości przez niezależnego obserwatora lub tę samą osobę, a także umożliwia włączenie dodatkowych parametrów drugorzędnych w razie potrzeby. Zazwyczaj zwierzę typu dzikiego spędza znacznie więcej czasu w komorze z obcym w porównaniu z komorą z pustym kubkiem, co wskazuje na normalną towarzyskość, motywację społeczną i przynależność u myszy z trzema nokautami alfa GSK. Nie ma jednak istotnych różnic między czasem spędzonym z pustym kubkiem w porównaniu z kubkiem zawierającym obcy, co wskazuje na upośledzoną towarzyskość w tym modelu zwierzęcym.

Druga sesja testu ma na celu ocenę nowości społecznej i pamięci społecznej. Zwykle zwierzę w typie dzikim przypomina sobie swój poprzedni kontakt z obcym i ma tendencję do spędzania więcej czasu z nowo napotkaną myszą, co wskazuje na nienaruszoną pamięć społeczną i predylekcję do nowych doświadczeń. W przeciwieństwie do myszy typu dzikiego, trzy zmutowane zwierzęta alfa GSK nie wykazują preferencji dla komory zawierającej nowo wprowadzoną mysz w stosunku do komory zawierającej a.

Teraz znajome, obojętne zachowanie myszy z nokautem w tym teście wskazuje na zmniejszoną motywację społeczną i nowość Po tej procedurze. Inne metody, takie jak elevated plus Mac light duck box, open field, FST TS T, mogą być wykonywane w celu udzielenia odpowiedzi na dodatkowe pytania dotyczące emocji i lęku oraz depresji, które mogą mieć wpływ na wyniki tego testu lub ich ogólną interpretację.