Name: Patroszenie ciała szklistego i siatkówki myszy do analiz proteomicznych (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-04-03T15:00:00.000+00:00
Duration: 2 min 39 s
Description: Naucz się techniki patroszenia ciała szklistego i siatkówki myszy do analiz proteomicznych. Metoda obejmuje wycięcie przedniego odcinka, wirowanie i izolację czystych próbek tkanek okularnych.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Finansowanie zostało zapewnione przez Fight for Sight oraz Research to Prevent Blindness.

1. Disekcja segmentu przedniego. 
<ol>
	<li>Tkankę twardówki za limbusEM chwyta się pęsetą 0,22, stabilizując gałkę oczną.</li>
	<li>Za pomocą skalpela mikrosurgicalnego wykonuje się liniowe nacięcie rogówki od limbusa do limbusa.</li>
	<li>Następnie używa się pęsety Colibri 0,12 do chwycenia rogówki w miejscu nacięcia.</li>
	<li>Płyn z przedniej komory oka jest następnie wchłaniany za pomocą chirurgicznego tamponu Weck-Cel.</li>
</ol>
2. Ewisceracja soczewki.
<ol>
	<li>Do stabilizacji gałki ocznej używa się pęsety Colibri 0.12, chwytającej rogówkę.</li>
	<li>Za soczewkę, w stronę tylnej części gałki ocznej, wprowadza się precyzyjny uchwyt do zakrzywionych igieł (lub zakrzywioną pęsetę chirurgiczną). Uchwyt do igieł jest częściowo zamknięty i przesuwany do przodu. Pęsetą wywierany jest nacisk na zewnętrzną powierzchnię twardówki, co wypycha soczewkę do przodu przez nacięcie rogówki, nie uszkadzając ściany oka. Ciało szkliste ma postać półprzezroczystego żelu i jest częściowo przylega do soczewki.</li>
	<li>Tkankę soczewki i ciała szklistego umieszcza się następnie w filtrowanej probówce do wirowania zawierającej 20 µl koktajlu inhibitorów proteaz (Roche) rozpuszczonego w PBS.</li>
</ol>
3. Ewisceracja siatkówki.
<ol>
	<li>Nadal stabilizuj gałkę oczną, chwytając nacięcie rogówki pęsetą Colibri 0,12.</li>
	<li>Subtelny zakrzywiony uchwyt igłowy (lub zakrzywiona pęseta chirurgiczna) zostaje umieszczony tak daleko w stronę tylnej części gałki ocznej, jak to możliwe, w pobliżu nerwu wzrokowego. Uchwyt igłowy jest częściowo zamknięty i przesuwany do przodu. Pęsetą wywiera się nacisk na zewnętrzną powierzchnię twardówki, co wypycha siatkówkę do przodu przez nacięcie rogówki. Ciało szkliste ma postać przeźroczystego żelu przylegającego do siatkówki. Siatkówka jest widoczna jako żółta, unaczyniona tkanka. Wszelkie pasma tkanki pigmentowej można usunąć pęsetą.</li>
	<li>Tkanka siatkówkowo-szklista zostaje następnie umieszczona w filtrowanej probówce do wirowania zawierającej tkankę soczewkowo-szklistą.</li>
</ol>
4. Wirowanie z filtrowaniem.
<ol>
	<li>Przefiltrowaną probówkę do wirowania umieszcza się w wirówce laboratoryjnej. Wirować przy 14 000 x G przez 12 minut.</li>
	<li>Odssać eluat z dolnej komory, który stanowi ciało szkliste. Siatkówka pozostaje w górnej komorze. Próbki te mogą zostać wykorzystane do badań białek.</li>
</ol>
5. Reprezentatywne wyniki
Próbki ciała szklistego przeanalizowano za pomocą SDS-PAGE (Rysunek 2). Próbki wykorzystano również do oznaczenia aktywności enzymatycznej (Rysunek 3).
<img src="/files/ftp_upload/2795/2795fig1.jpg" alt="Struktura oka człowieka i myszy; schemat porównujący anatomię soczewki i ciała szklistego." data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="Rycina 1"> 
Rycina 1. Schemat oka myszy. Przekrój schematyczny oka ludzkiego i mysiego pokazuje względnie mniejszą objętość ciała szklistego w oku myszy ze względu na większą soczewkę.
<img src="/files/ftp_upload/2795/2795fig2.jpg" alt="Wynik elektroforezy białek SDS-PAGE, ścieżki ciała szklistego i siatkówki, widoczne markery masy cząsteczkowej." data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="Rysunek 2"> 
Rysunek 2. Jednowymiarowa elektroforeza SDS-PAGE ciała szklistego i siatkówki myszy. Profile białkowe ciała szklistego myszy, 13,6 mg/mL (ścieżka 1) oraz siatkówki, 11,35 mg/mL (ścieżka 2). Elektroforezę żelową przeprowadzono przy 150 kV przez 45 minut, barwiąc żel barwnikiem fluorescencyjnym Flamingo i wizualizując za pomocą systemu obrazowania VersaDoc (BioRad, Hercules, CA).
<img src="/files/ftp_upload/2795/2795fig3.jpg" alt="Wykres słupkowy przedstawiający aktywność siatkówki; porównanie kontroli pozytywnej i negatywnej; wyniki eksperymentalne." data-altupdatedat="1788235205000" data-alt="Rycina 3"> 
Rycina 3. Aktywność enzymu dysmutazy ponadtlenkowej (SOD) w ciele szklistym myszy i człowieka. Pomiar całkowitej aktywności SOD (zestaw do kolorymetrycznego oznaczenia aktywności SOD, #AB65354, Abcam, Inc, Cambridge, MA) przeprowadzono na ciele szklistym i siatkówce pobranych drogą ewakuacji z myszy linii DBA oraz myszy albinosów. Wyniki te porównano z aktywnością SOD w ludzkim ciele szklistym oraz ludzkiej siatkówce pobranej z oczu dawców po śmierci w celu określenia aktywności względnej. Próbki nie-rozcieńczonego ciała szklistego aspirowano ręcznie za pomocą igły 23G, 11 a siatkówkę pobierano poprzez otwarcie gałki ocznej i wycięcie tkanki od kompleksu nabłonka pigmentowego siatkówki (RPE)/naczyniówki. Chociaż test nie rozróżnia izoform SOD, aktywność SOD w ciele szklistym prawdopodobnie odzwierciedla obecność SOD3, ponieważ jest to jedyna izoforma pozakomórkowa.12 Aktywność SOD w siatkówce prawdopodobnie odzwierciedla wszystkie trzy izoformy SOD: wewnątrzkomórkową SOD1, mitochondrialną SOD2 oraz pozakomórkową SOD3. 12 W przypadku wysoce czułych testów enzymatycznych, w tym wspomnianego testu SOD, istnieje możliwość kontaminacji krzyżowej białek, co wymaga dalszych badań. Słupki błędów reprezentują SEM.

<ol><li>Bishop, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+macromolecules+and+supramolecular+organisation+of+the+vitreous+gel%5BTitle%5D)+AND+%22Prog.+Retin.+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">Structural macromolecules and supramolecular organisation of the vitreous gel.</a> Prog. Retin. Eye Res. 19, 323-344 (2000).</li>
<li>Gao, B. B., Chen, X., Timothy, N., Aiello, L. P. &amp, Feener, E. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+the+vitreous+proteome+in+diabetes+without+diabetic+retinopathy+and+diabetes+with+proliferative+diabetic+retinopathy%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Proteome+Res%22%5BJournal%5D)">Characterization of the vitreous proteome in diabetes without diabetic retinopathy and diabetes with proliferative diabetic retinopathy.</a> J. Proteome Res. 7, 2516-2525 (2008).</li>
<li>Izuta, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracellular+SOD+and+VEGF+are+increased+in+vitreous+bodies+from+proliferative+diabetic+retinopathy+patients%5BTitle%5D)+AND+%22Mol.+Vis%22%5BJournal%5D)">Extracellular SOD and VEGF are increased in vitreous bodies from proliferative diabetic retinopathy patients.</a> Mol. Vis. 15, 2663-2672 (2009).</li>
<li>Sebag, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Molecular+biology+of+pharmacologic+vitreolysis%5BTitle%5D)+AND+%22Trans.+Am.+Ophthalmol.+Soc%22%5BJournal%5D)">Molecular biology of pharmacologic vitreolysis.</a> Trans. Am. Ophthalmol. Soc. 103, 473-494 (2005).</li>
<li>Smith, R. S., John, S. W. M., Nishina, P. M., Sundberg, J. P. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSmith%2C+RS+%22Systematic+evaluation+of+the+mouse+eye%3A+Anatomy%2C+pathology%2C+and+biomethods%22">Systematic evaluation of the mouse eye: Anatomy, pathology, and biomethods</a>. , CRC Press. 161-195 (2002).</li>
<li>Ihanamaki, T., Metsaranta, M., Rintala, M., Vuorio, E., Sandberg-Lall, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ocular+abnormalities+in+transgenic+mice+harboring+mutations+in+the+type+II+collagen+gene%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Ophthalmol%22%5BJournal%5D)">Ocular abnormalities in transgenic mice harboring mutations in the type II collagen gene.</a> Eur. J. Ophthalmol. 6, 427-435 (1996).</li>
<li>Kaarniranta, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+for+Stickler%27s+syndrome%3A+ocular+phenotype+of+mice+carrying+a+targeted+heterozygous+inactivation+of+type+II+%28pro%29collagen+gene+%28Col2a1%5BTitle%5D)+AND+%22Exp.+Eye+Res%22%5BJournal%5D)">A mouse model for Stickler's syndrome: ocular phenotype of mice carrying a targeted heterozygous inactivation of type II (pro)collagen gene (Col2a1.</a> Exp. Eye Res. 83, 297-303 (2006).</li>
<li>Marneros, A. G. &amp, Olsen, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Age-dependent+iris+abnormalities+in+collagen+XVIII%2Fendostatin+deficient+mice+with+similarities+to+human+pigment+dispersion+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Age-dependent iris abnormalities in collagen XVIII/endostatin deficient mice with similarities to human pigment dispersion syndrome.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 44, 2367-2372 (2003).</li>
<li>Martin, A. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathogenesis+of+persistent+hyperplastic+primary+vitreous+in+mice+lacking+the+arf+tumor+suppressor+gene%5BTitle%5D)+AND+%22Invest.+Ophthalmol.+Vis.+Sci%22%5BJournal%5D)">Pathogenesis of persistent hyperplastic primary vitreous in mice lacking the arf tumor suppressor gene.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 45, 3387-3396 (2004).</li>
<li>Song, B. J., Tsang, S. H., Lin, C. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+models+of+retinal+degeneration+and+targets+for+gene+therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Gene.+Ther.+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">Genetic models of retinal degeneration and targets for gene therapy.</a> Gene. Ther. Mol. Biol. 11B, 229-262 (2007).</li>
<li>Skeie, J. M., Mahajan, V. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dissection+of+Human+Vitreous+Body+Elements+for+Proteomic+Analysis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Dissection of Human Vitreous Body Elements for Proteomic Analysis.</a> J Vis Exp. , (2011).</li>
<li>Ciechanowski, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+synthesis+is+not+the+reason+for+decreased+activity+of+extracellular+superoxide+dismutase+in+patients+with+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Arch+Med+Res%22%5BJournal%5D)">Impaired synthesis is not the reason for decreased activity of extracellular superoxide dismutase in patients with diabetes.</a> Arch Med Res. 36, 148-153 (2005).</li>
</ol>

Doświadczenia na zwierzętach przeprowadzono zgodnie z wytycznymi Association for Research and Vision in Ophthalmology dotyczącymi wykorzystania zwierząt w badaniach okulistycznych i wzroku.

Myszy transgeniczne stanowią istotny model badania chorób siatkówki i ciała witrażowego.6-10 Ciało witrażowe myszy zajmuje jednak znacznie mniejszą proporcję oka w porównaniu z ludzkim ciałem witrażowym, co wynika z obecności dużej soczewki w oku myszy.5 Utrudnia to izolację i oczyszczanie ciała witrażowego myszy. Zrozumienie zmian białkowych zachodzących w ciele witrażowym podczas takich schorzeń, jak proliferacyjna retinopatia cukrzycowa, zwyrodnienie plamki związane z wiekiem, zapalenie błony naczyniowej oka oraz odwarstwienie siatkówki, pozwoli na wgląd w mechanizmy ich postępu. Niniejszy wizualizowany protokół eksperymentalny umożliwia pozyskanie i oczyszczenie ciała witrażowego myszy, maksymalizując jednocześnie wydajność białek do analiz enzymatycznych i proteomicznych.

<table><tbody><tr><td>Skalpel mikrochirurgiczny BD Beaver 15&amp;#x00B0;</td><td>BD Biosciences</td><td>374881</td><td></td></tr><tr><td>PBS, pH 7.4</td><td>Invitrogen</td><td>70011-044</td><td></td></tr><tr><td>Pęseta do szycia Fine-Castroviejo 0.22</td><td>Storz Ophthalmics</td><td>E1805</td><td></td></tr><tr><td>Pęseta Colibri 0.12</td><td>Storz Ophthalmics</td><td>2/132</td><td></td></tr><tr><td>Filtr wirówkowy Microcon Ultracel YM-100 lub YM-50</td><td>EMD Millipore</td><td>42412, 42415</td><td></td></tr><tr><td>Zestaw do kolorymetrycznego oznaczenia aktywności SOD</td><td>Abcam</td><td>Ab65354</td><td></td></tr><tr><td>Surgical spears Weck-Cel</td><td>Medtronic Inc.</td><td>0008680</td><td></td></tr><tr><td>Koktajl inhibitorów proteaz</td><td>Roche Group</td><td>11 836 170 001</td><td></td></tr><tr><td>Fluorescencyjny barwnik do żeli Flamingo</td><td>Bio-Rad</td><td>161-04910</td><td></td></tr></tbody></table>

ewisceracja ciała szklistego i siatkówki myszy do analiz proteomicznych

Evisceration of Mouse Vitreous and Retina for Proteomic Analyses

Choć siatkówka myszy stała się ważnym modelem genetycznym w badaniach nad dziedzicznymi chorobami siatkówki, ciało szkliste myszy pozostaje wciąż słabo zbadane. Ciało szkliste to wysoce wodnista macierz zewnątrzkomórkowa pokrywająca siatkówkę, w której podczas przebiegu choroby gromadzą się białka wewnątrz- i zewnątrzgałkowe.1-3 Nieprawidłowe interakcje między ciałem szklistym a siatkówką leżą u podstaw wielu schorzeń, takich jak odwarstwienie siatkówki, proliferacyjna retinopatia cukrzycowa, zapalenie błony naczyniowej oraz proliferacyjna witreoretinopatia.1,4 Względna objętość ciała szklistego myszy jest znacznie mniejsza niż w przypadku człowieka (Rysunek 1), ponieważ soczewka myszy zajmuje niemal 75% gałki ocznej.5 Sprawia to, że badania biochemiczne ciała szklistego myszy są trudne do przeprowadzenia. W niniejszym artykule wideo prezentujemy technikę wycinania i izolowania ciała szklistego myszy z siatkówki, co umożliwi wykorzystanie transgenicznych modeli mysich do dokładniejszego zdefiniowania roli tej macierzy zewnątrzkomórkowej w rozwoju chorób witreoretinalnych.

Technika sekcji ilustruje proces usuwania ciała szklistego, siatkówki oraz soczewki z oka myszy, ich rozdzielenie za pomocą wirowania oraz charakterystykę z wykorzystaniem analiz białkowych.

Ewisceracja ciała szklistego i siatkówki myszy do analiz proteomicznych

Choć siatkówka myszy stała się istotnym modelem genetycznym w badaniach nad dziedzicznymi chorobami siatkówki, ciało szkliste myszy pozostaje wciąż słabo zbadane. Ciało szkliste to...

Ludzkie oko jest wypełnione płynną macierzą zewnątrzkomórkową nazywaną ciałem szklistym, podobnie jak w oku myszy. Przestrzeń ta jest w większości wypełniona przez soczewkę. Aby wyizolować ciało szkliste i siatkówkę, musimy najpierw przeprowadzić dyssekcję segmentu przedniego, ustabilizować oko za pomocą pęsety i użyć bardzo ostrego ostrza, aby wykonać pojedyncze nacięcie w poprzek rogówki.Tępe ostrze może przerwać rogówkę i wymagać kilku pociągnięć. Gąbka komórkowa WEX służy do absorpcji płynu z komory przedniej. Strzałki wskazują miejsca, w których za pomocą pęsety wyciśniemy soczewkę i ciało szkliste, częściowo zamykając pęsetę i pociągając ją do przodu.Soczewka wygląda jak przezroczysta sfera, a za nią znajduje się ciało szkliste. W tym przykładzie ciało szkliste pozostaje przylegać do tylnej części soczewki; aby wyizolować siatkówkę, pęsetę do siatkówki umieszcza się głębiej, w pobliżu nerwu wzrokowego, następnie delikatnie ściska się i ciągnie do przodu. Siatkówka przypomina żółty, żelatynowaty materiał.W niektórych przypadkach siatkówka, ciało szkłowate i soczewka mogą zostać usunięte jako jedna wspólna tkanka. Kolejnym krokiem jest izolacja i rozdzielenie tych trzech tkanek przy użyciu urządzenia do wirowania z filtrem. Element filtrujący umieszcza się w górnej części probówki typu Eppendorf, a następnie dodaje roztwór soli fizjologicznej buforowanej fosforanem.W miarę izolowania poszczególnych tkanek są one umieszczane w górnej studni zawierającej filtr. Soczewki znajdują się w górnym lewym rogu, a siatkówka i ciało szkliste w dolnym prawym. Probówki umieszczono w mikrowirówce i wirowano przy 14 000 G przez 12 minut.Ciało szkliste opadnie na dno probówki typu Eppendorf, a siatkówka pozostanie w górnej części. Za pomocą pęsety oddzielimy soczewkę od siatkówki, a następnie wyizolujemy siatkówkę z górnej części probówki. Wszystkie te tkanki można umieścić w probówkach typu Eppendorf, a następnie poddać obróbce w celu przeprowadzenia analiz proteomicznych.

evisceration-of-mouse-vitreous-and-retina-for-proteomic-analyses

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Wyjęcie szklistki i siatkówki myszy w celu przeprowadzenia analiz proteomicznych

Niniejszy film przedstawia skuteczną technikę różnicowania i preparowania poszczególnych półprzezroczystych struktur ciała szklistego ludzkiego oka w materiale pośmiertnym.

Disekcja elementów ludzkiego ciała szklistego do analizy proteomicznej

Trawienie trypsyny jest jedną z najczęściej używanych metod analizy unaczynienia siatkówki. Manuskrypt ten szczegółowo opisuje metodę, w tym kluczowe zmiany mające na celu optymalizację techniki i usunięcie tkanki nienaczyniowej przy jednoczesnym zachowaniu ogólnej architektury naczyń.

Protokół trawienia trypsyny do analizy unaczynienia siatkówki w modelu myszy

Opracowaliśmy poziome przygotowanie siatkówki dorosłego ssaka z płaszczyzną przekroju równoległą do powierzchni siatkówki. Pola dendrytyczne neuronów siatkówki o orientacji niepromieniowej nie zostały obcięte, co pozwoliło na badanie przetwarzania sygnału za pomocą patch-clamp i technik obrazowania.

Przygotowanie poziomych wycinków siatkówki dorosłej myszy do badań elektrofizjologicznych

Ten protokół przedstawia dwie techniki izolowania subkomórkowych przedziałów fotoreceptorów mysich pręcików do analizy białek. Pierwsza metoda wykorzystuje żywe siatkówki i celulozową bibułę filtracyjną do oddzielenia zewnętrznych segmentów pręcika, podczas gdy druga wykorzystuje liofilizowane siatkówki i taśmę klejącą do odklejania wewnętrznych i zewnętrznych warstw segmentów pręcika.

Dwie metody peelingu do izolacji przedziałów komórek fotoreceptorowych w siatkówce myszy w celu analizy białek

Retinopatia cukrzycowa jest jedną z głównych przyczyn ślepoty. Histologia, test rozpadu bariery krew-siatkówka i angiografia fluorescencyjna są cennymi technikami pozwalającymi zrozumieć patofizjologię siatkówki, co może jeszcze bardziej zwiększyć skuteczność badań przesiewowych leków przeciwko retinopatii cukrzycowej.

Ocena patofizjologiczna siatkówki w modelu szczurzym

Ten protokół opisuje metodę izolacji mysich komórek śródbłonka siatkówki po urodzeniu, zoptymalizowanych pod kątem wydajności, czystości i żywotności komórek. Komórki te nadają się do sekwencjonowania nowej generacji.

Izolacja mysich komórek śródbłonka siatkówki do sekwencjonowania nowej generacji

Test ochronny został opracowany do monitorowania odporności układu krwionośnego siatkówki na śmierć z powodu urazów związanych z cukrzycą/retinopatią cukrzycową, takich jak stres oksydacyjny i cytokiny.

Test do wykrywania ochrony naczyń krwionośnych siatkówki przed śmiercią związaną z cukrzycą u myszy

Ten protokół opisuje szczegółowe kroki przygotowania próbek siatkówki do objętościowej mikroskopii elektronowej, skupiając się na cechach strukturalnych końcówek fotoreceptorów siatkówki.

Przygotowanie próbek siatkówki do objętościowej mikroskopii elektronowej

Perycyty w unaczynieniu siatkówki zostały zbadane za pomocą barwienia immunofluorescencyjnego z receptorem czynnika wzrostu pochodzenia płytkowego β po retro-orbitalnym wstrzyknięciu fluorescencyjnej lektyny pomidorowej. Znakowaną siatkówkę poddano dalszej obróbce metodą oczyszczania tkanek i zamontowano w całości w celu wizualizacji trójwymiarowych widoków perycytów otaczających naczynia krwionośne siatkówki pod mikroskopem konfokalnym.

Wizualizacja 3D perycytów naczyniowych siatkówki myszy za pomocą immunostainingu

Siatkówka wykazuje złożoną organizację przestrzenną w całej swojej strukturze laminarnej. Nowoczesna transkryptomika przestrzenna i techniki sekwencjonowania wymagają wycinków tkanek o grubości &lt; 20 μm, co ogranicza ich zastosowanie w badaniach siatkówki. Ta świeżo zamrożona metoda kriosekcji pozwala uzyskać cienkie przekroje siatkówki myszy, zachowując jednocześnie płaskie relacje przestrzenne, umożliwiając kompleksowe mapowanie molekularne blaszek.

En face Kriosekcja siatkówki myszy w celu przeprowadzenia wielowymiarowej przestrzennej analizy molekularnej

Naucz się techniki patroszenia ciała szklistego i siatkówki myszy do analiz proteomicznych. Metoda obejmuje wycięcie przedniego odcinka, wirowanie i izolację czystych próbek tkanek okularnych.

Ewisceracja ciała szklistego i siatkówki myszy do analiz proteomicznych

Przeglądaj więcej filmów