Name: Listopad 2012: W tym miesiącu w JoVE (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-11-01T15:01:00.000+00:00
Duration: 3 min 5 s
Description: Poznaj metodę izolacji bakterii magnetotaktycznych z próbek wody słodkiej przy użyciu kapilary szklanej. Technika ta umożliwia wizualizację mikroskopową i otwiera nowe możliwości badań biotechnologicznych.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

<a href="https://www.jove.com/video/4003">Generowanie myszy pochodzących z indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych</a>
Michael J. Boland1, Jennifer L. Hazen1, Kristopher L. Nazor1, Alberto R. Rodriguez2, Greg Martin2, Sergey Kupriyanov2, Kristin K. Baldwin1 
1Centrum Neuronauk Dorris &amp; Katedra Biologii Komórki, The Scripps Research Institute, 2Centrum Genetyki Myszy, The Scripps Research Institute 
Generowanie linii indukowanych pluripotencjalnych komórek macierzystych (iPSC) prowadzi do powstania linii o różnym potencjale rozwojowym, nawet jeśli przechodzą one standardowe testy pluripotencji. W niniejszym opracowaniu opisujemy protokół otrzymywania myszy pochodzących całkowicie z iPSC, co definiuje linie iPSC jako posiadające pełną pluripotencję1.
<a href="https://www.jove.com/video/50016">Analiza rozwoju komórek Schwanna myszy wzdłuż rosnących aksonów</a>
Stephan Heermann1, 2, Kerstin Krieglstein1, 3 
1Katedra Embriologii Molekularnej, Instytut Anatomii i Biologii Komórki, Uniwersytet we Fryburgu , 2Katedra Neuroanatomii, Uniwersytet w Heidelbergu, 3FRIAS, Uniwersytet we Fryburgu 
W niniejszej pracy opisujemy test migracji komórek Schwanna (SC), w którym komórki SC są w stanie rozwijać się wzdłuż wydłużających się aksonów.
<a href="https://www.jove.com/video/50027">Lekki system oparty na słuchawkach do manipulowania sprzężeniem zwrotnym słuchowym u ptaków śpiewających</a>
Lukas A. Hoffmann1, 2, Conor W. Kelly1, 3, David A. Nicholson1, 2, Samuel J. Sober1 
1Katedra Biologii, Emory University, 2Program Doktorancki z Neuronauki, Emory University, 3Program Neuronauki i Biologii Behawioralnej, Emory University
Opisujemy konstrukcję i montaż zminiaturyzowanych słuchawek, które umożliwiają zastąpienie naturalnego sprzężenia zwrotnego słuchowego u ptaka śpiewającego zmanipulowanym sygnałem akustycznym. Sprzęt do cyfrowego przetwarzania dźwięku w czasie rzeczywistym jest wykorzystywany do manipulowania emitowanym śpiewem, wprowadzania błędów do sprzężenia zwrotnego słuchowego za pośrednictwem słuchawek oraz stymulowania procesów uczenia się motoryki wokalnej.
<a href="https://www.jove.com/video/50086">Przesiewanie modyfikatorów czerniaka z wykorzystaniem autochtonicznego modelu nowotworowego u ryb zebrafish</a>
Sharanya Iyengar1, Yariv Houvras2, 3, Craig J. Ceol1 
1Program in Molecular Medicine i Department of Cancer Biology, University of Massachusetts Medical School, 2Departments of Surgery and Medicine, Weill Cornell Medical College , 3Departments of Surgery and Medicine, New York Presbyterian Hospital
Przedstawiono szybką metodę przesiewową w celu identyfikacji modyfikatorów czerniaka z wykorzystaniem autochtonicznego modelu nowotworowego u rybek zebrafish. Metoda ta wykorzystuje wektor miniCoopR, który umożliwia ekspresję kandydackich genów czerniaka w melanocytach. Opisano metodę uzyskiwania krzywych przeżywalności bez czerniaka, test inwazji, protokół barwienia przeciwciałami melanocytów łusek oraz test transplantacji czerniaka.
<a href="https://www.jove.com/video/50117">Pomiary sztywności zginania biopolimerów z wykorzystaniem testów poślizgu</a>
Douglas S. Martin, Lu Yu, Brian L. Van Hoozen 
Katedra Fizyki, Lawrence University
Opisano metodę pomiaru długości persystencji lub sztywności zginania biopolimerów. Metoda ta wykorzystuje test poślizgu mikrotubul napędzany przez kinezynę do eksperymentalnego wyznaczenia długości persystencji pojedynczych mikrotubul i jest możliwa do zaadaptowania do testów poślizgu opartych na aktynie.
<a href="https://www.jove.com/video/50123">Kolekcjonowanie, izolacja i wzbogacanie naturalnie występujących bakterii magnetotaktycznych ze środowiska</a>
Zachery Oestreicher1, Steven K. Lower1, 2, Wei Lin3, Brian H. Lower2 
1School of Earth Sciences, The Ohio State University, 2Wydział Środowiska &amp; Zasoby Naturalne, The Ohio State University, 3Instytut Geologii i Geofizyki Chińskiej Akademii Nauk 
Prezentujemy metodę zbierania bakterii magnetotaktycznych (MTB), którą można zastosować do próbek wód naturalnych. Bakterie MTB można izolować i wzbogacać z próbek osadów przy użyciu stosunkowo prostego układu wykorzystującego naturalny magnetyzm tych bakterii. Wyizolowane MTB mogą być następnie szczegółowo badane zarówno za pomocą mikroskopii świetlnej, jak i elektronowej.
<a href="https://www.jove.com/video/2168">Myszy transjądrowe o zdefiniowanej specyficzności receptorów limfocytów T przeciwko Toxoplasma gondii uzyskane metodą SCNT</a>
Oktay Kirak1, Eva-Maria Frickel1, Gijsbert M. Grotenbreg1, 2, Heikyung Suh1, Rudolf Jaenisch1, 3, Hidde L. Ploegh1, 3 
1 , Whitehead Institute for Biomedical Research, 2Zakłady Mikrobiologii i Nauk Biologicznych, National University of Singapore, 3Katedra Biologii, Massachusetts Institute of Technology
Wykazujemy tutaj, że przeprogramowanie epigenetyczne za pomocą transferu jąder komórek somatycznych (SCNT) może być wykorzystane jako narzędzie do generowania modeli mysich o zdefiniowanej specyficzności receptorów limfocytów T (TCR). Te myszy transjądrowe wykazują ekspresję odpowiadającego TCR z ich locus endogennego pod kontrolą promotora endogennego.

Nie zgłoszono konfliktów interesów.

listopad 2012: miesiąc w jove

November 2012: This Month in JoVE

W tym wydaniu Oestreicher et al. pokazują, jak izolować bakterie magnetotaktyczne z próbek wody słodkiej i koncentrować je na jednym końcu szklanej kapilary. Bakterie magnetotaktyczne można następnie wizualizować za pomocą mikroskopii świetlnej i elektronowej transmisyjnej oraz wykorzystywać w różnych innych analizach.
Również w wydaniu z listopada 2012 r. Boland et al. demonstrują, jak przeprogramować fibroblasty w indukowane pluripotencjalne komórki macierzyste (iPSCs) oraz jak izolować linie iPSC do wstrzykiwania do blastocyst tetraploidalnych, co zostało wcześniej zaprezentowane w <a href="http://www.jove.com/video/2168/transnuclear-mice-with-pre-defined-t-cell-receptor-specificities">JoVE</a>. Choć pipetowania ustnego zazwyczaj się nie zaleca ze względu na możliwe niekorzystne skutki, niniejszy protokół wymaga zastosowania tej techniki, wykonanej ostrożnie, w celu manipulacji embrionami. Jest to jedna z rzadkich okazji, kiedy pipetowanie ustne w laboratorium jest dopuszczalne. Jeśli indukowane komórki są w pełni pluripotencjalne, mogą one doprowadzić do powstania myszy donoszonych, pochodzących całkowicie z iPSCs.
W JoVE Neuroscience, Heermann i Krieglstein prezentują metodę wizualizacji rozwoju komórek Schwanna wzdłuż rosnących aksonów. W tym celu autorzy hodują eksplantaty zwojów szyjnych na matrycach kolagenowych i traktują je czynnikiem wzrostu nerwów lub innymi substancjami. Żele kolagenowe można następnie wizualizować za pomocą obrazowania time-lapse z wykorzystaniem mikroskopii fluorescencyjnej lub w polu jasnym, obserwując migrację wzdłuż aksonów w kierunku peryferii.
Również w JoVE Neuroscience, Hoffmann et al. zakładają małe słuchawki ptakom śpiewającym, aby zbadać, w jaki sposób wykorzystują one sprzężenie zwrotne słuchowe do korygowania swojego śpiewu. Autorzy demonstrują, jak skonstruować słuchawki i przymocować je do głowy ptaka; następnie, poprzez regulację sygnału akustycznego, mogą badać obliczeniowe i neurofizjologiczne podstawy uczenia się wokalnego u ptaków.
W JoVE Clinical &amp; Medycyna Translacyjna, Iyengar i wsp. wykorzystują model nowotworowy u rybek danio pręgowanych do badania genów mogących modyfikować patogenezę czerniaka. Odbywa się to poprzez uprzednie stworzenie transgenicznych rybek danio pręgowanych wykazujących ekspresję badanego genu. Następnie można przeprowadzić różne analizy w celu zbadania, w jaki sposób poszczególne geny wpływają na czerniaka, w tym na jego występowanie, inwazyjność i zdolność do transplantacji.
W JoVE Bioengineering Martin et al. prezentują test ślizgania w celu pomiaru sztywności zgięciowej biopolimerów (takich jak mikrotubule). Poprzez przytwierdzenie białek motorycznych do szkiełka przedmiotowego i dodanie znakowanych fluorescencyjnie mikrotubul, autorzy mogą analizować dynamikę polimerów cytoszkieletu.
Niniejszy podgląd podsumowuje zaledwie kilka znaczących artykułów wideo w listopadowym wydaniu JoVE z 2012 roku. Zapraszamy do odwiedzin w ciągu całego listopada, aby zapoznać się z pełnymi wersjami tych oraz wielu innych artykułów.

W tym numerze Oestreicher et al. pokazują, jak izolować bakterie magnetotaktyczne z próbek słodkiej wody i koncentrować je na jednym końcu szklanej kapilary. Bakterie magnetotaktyczne można następnie wizualizować za pomocą mikroskopii świetlnej i elektronowej w transmisji oraz wykorzystywać w różnych innych analizach.

Listopad 2012: Miesiąc w JoVE

W obecnym numerze Oestreicher i wsp. pokazują, jak izolować bakterie magnetotaktyczne z próbek słodkiej wody oraz jak zagęścić te bakterie na jednym końcu szklanej kapilary. Bakterie magnetotaktyczne można następnie wizualizować za pomocą mikroskopii świetlnej i transmisyjnej elektronowej oraz wykorzystać w różnych innych analizach. Również w listopadowym numerze z 2012 roku Boland i wsp. demonstrują, jak przeprogramować fibroblasty w indukowane pluripotencjalne komórki macierzyste (iPSC) oraz jak izolować linie iPSC w celu ich wstrzyknięcia do blastocyst tetraploidalnych, co było wcześniej zaprezentowane w JoVE. Choć pipetowania ustnego ogólnie się nie zaleca ze względu na możliwe działania niepożądane, niniejszy protokół wymaga zastosowania tej techniki, wykonanej z należytą starannością, w celu manipulacji embrionami. Jest to jedna z nielicznych okazji, gdy pipetowanie ustne w laboratorium jest dopuszczalne. Jeśli indukowane komórki są w pełni pluripotencjalne, mogą one doprowadzić do narodzin myszy rozwiniętych do pełnego terminu, pochodzących całkowicie z iPSC. W JoVE Neuroscience Heermann i Krieglstein prezentują metodę wizualizacji rozwoju komórek Schwanna wzdłuż rosnących aksonów. W tym celu autorzy hodują eksplantaty zwojów szyjnych na macierzach kolagenowych i traktują eksplantaty czynnikiem wzrostu nerwów lub innymi substancjami. Żele kolagenowe można następnie wizualizować za pomocą obrazowania poklatkowego w mikroskopii fluorescencyjnej lub jasnego pola, obserwując migrację wzdłuż aksonów w stronę obwodu. Również w JoVE Neuroscience Hoffmann i wsp. zakładają miniaturowe słuchawki ptakom śpiewającym, aby zbadać, w jaki sposób wykorzystują one sprzężenie zwrotne słuchowe do korygowania swojego śpiewu. Autorzy demonstrują, jak skonstruować słuchawki i przymocować je do głowy ptaka; następnie, poprzez regulację sygnału akustycznego, mogą badać obliczeniowe i neurofizjologiczne podstawy uczenia się wokalnego u ptaków. W JoVE Clinical & Translational Medicine Iyengar i wsp. wykorzystują model nowotworu u rybek danio pręgowanych do badania genów, które mogą modyfikować patogenezę czerniaka. Odbywa się to poprzez uprzednie stworzenie transgenicznych rybek danio pręgowanych wykazujących ekspresję interesującego genu. Następnie można przeprowadzić różne analizy, aby zbadać, jak poszczególne geny wpływają na czerniaka, w tym na jego wystąpienie, inwazję i zdolność do transplantacji. W JoVE Bioengineering Martin i wsp. prezentują test poślizgu do pomiaru sztywności zgięciowej biopolimerów (takich jak mikrotubule). Poprzez przytwierdzenie białek motorowych do szkiełka przedmiotowego i dodanie znakowanych fluorescencyjnie mikrotubul, autorzy mogą analizować dynamikę polimerów cytoszkieletu. Niniejszy przegląd podsumowuje zaledwie kilka znaczących artykułów wideo w listopadowym numerze JoVE z 2012 roku. Zapraszamy do odwiedzin w ciągu całego listopada, aby zapoznać się z pełnymi wersjami tych i wielu innych artykułów.

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Listopad 2012: Ten miesiąc w JoVE

Poznaj metodę izolacji bakterii magnetotaktycznych z próbek wody słodkiej przy użyciu kapilary szklanej. Technika ta umożliwia wizualizację mikroskopową i otwiera nowe możliwości badań biotechnologicznych.

Listopad 2012: W tym miesiącu w JoVE (Wideo) | JoVE Journal

Wendy Chao

Aaron Kolski-Andreaco

Listopad 2012: Miesiąc w JoVE

Przeglądaj więcej filmów