Wczesne wykrywanie farmakologicznej dysfunkcji hemodynamicznej nerek za pomocą technologii sonograficznej u szczurów

Ogólnym celem tej procedury jest zapewnienie krok po kroku metodologii sonograficznej wykrywania dysfunkcji nerek przy użyciu szczurzego modelu nefrotoksyczności wywołanej lekiem. Osiąga się to poprzez uprzednie ustawienie sondy ultradźwiękowej za pomocą systemu szynowego i odizolowanie aorty. Następnie kąt sondy jest regulowany, aby uzyskać pełny widok nerki na środku ekranu, a obraz w trybie B jest przechowywany przy użyciu najwyższej możliwej liczby klatek na sekundę.

Następnie otwierane jest okienko akustyczne z kolorowym dopplerem w celu wyizolowania tętnicy nerkowej i żyły nerkowej. Na koniec fala pulsacyjna lub żółta linia wskaźnika PW służy do oceny przepływu w prawej tętnicy nerkowej, a sinistore służy do zbierania danych z najwyższą możliwą liczbą klatek na sekundę. Ostatecznie obrazowanie ultrasonograficzne o wysokiej rozdzielczości służy do pokazania zmian hemodynamicznych w nerkach po ostrym uszkodzeniu nerek wywołanym cisplatyną.

Metoda ta może odpowiedzieć na kluczowe pytania w dziedzinie monitorowania funkcji nerek, takie jak zmiany hemodynamiczne spowodowane uszkodzeniem nerek. Chociaż metoda ta może zapewnić wgląd w hemodynamikę nerek, może być również stosowana w innych systemach, takich jak modele mysie. W dniu 0, po znieczuleniu zwierząt zgodnie z protokołem tekstowym i nałożeniu maści do oczu, użyj ostrza nr 40 i kremu do depilacji, aby usunąć włosy z klatki piersiowej.

Monitorując parametry życiowe zwierzęcia, skonfiguruj system ultrasonograficzny MS250 o wysokiej rozdzielczości z częstotliwością środkową 21 MHz podłączony do aktywnego portu i aplikacją ustawioną na nerkę. Umieść znieczulone zwierzę w pozycji leżącej na platformie i za pomocą systemu szyn ustaw sondę ultradźwiękową na linii środkowej zwierzęcia pod kątem 90 stopni do lewej linii przymostkowej izolującej aortę. Z tej pozycji przesuń platformę ze zwierzęciem tak, aby sonda znalazła się na poziomie lewej lub prawej tętnicy nerkowej.

Za pomocą mikromanipulatorów obejrzyj tętnicę nerkową. Następnie wyreguluj kąt sondy, przechylając ją lekko wzdłuż osi Y sondy, aby uzyskać pełny widok nerki na środku ekranu. Po zobrazowaniu miedniczki nerkowej i tętnicy nerkowej należy sinistore obrazy przy użyciu najwyższej liczby klatek na sekundę dozwolonej przy użyciu używanej sondy.

Następnie naciśnij kolorowego dopplera na klawiaturze, aby włączyć okno akustyczne kolorowego dopplera. Upewnij się, że głębokość ostrości leży w środku nerki. Użyj sinistore, aby zapisać dane z najwyższą możliwą liczbą klatek na sekundę.

Aby przechwytywać obrazy w widoku fali pulsacyjnej lub PW, kliknij PW, aby wyświetlić żółtą linię wskaźnika na ekranie. Za pomocą klucza kąta PW umieść żółtą linię w tętnicy nerkowej pod kątem równoległym do kierunku przepływu przez naczynie, upewniając się, że kąt Dopplera jest mniejszy niż 60 stopni. W tym trybie okno akustyczne dzieli się na sekcję górną i dolną.

Użyj sinistore, aby uchwycić obraz przebiegów, które wskazują prędkość przepływu tętniczego przy szczytowym skurczu i rozkurczu. Po wykonaniu badania obrazowego umieść zwierzę pod lampą grzewczą w czystym obszarze rekonwalescencji w pozycji leżącej mostka. Należy stale monitorować parametry życiowe zwierzęcia aż do pełnego wyzdrowienia ze znieczulenia przed powrotem do domu inwentarza.

Dwadzieścia cztery godziny po przeprowadzeniu obrazowania początkowego należy podać zwierzętom poddanym działaniu wstrzyknięcie międzyotrzewnowe 10 miligramów na kilogram cisplatyny w pojedynczej dawce. Zwierzętom kontrolnym należy podać sól fizjologiczną pożywką. Postępując zgodnie z przedstawionym tutaj harmonogramem i monitorując parametry życiowe zwierzęcia, przeprowadź obrazowanie ultrasonograficzne, jak pokazano wcześniej w filmie.

Przeprowadzić analizę danych zgodnie z wytycznymi zawartymi w protokole tekstowym. Obrazy przedstawione w tym badaniu zostały wykonane przez jednego operatora, a dane obrazowe zostały przeanalizowane przez jednego badacza. Wyniki wykazały, że u zwierząt leczonych cisplatyną stężenie kreatyniny w surowicy wynosi od 0,5 do 2,1 w dniu 6.

Prawidłowy poziom kreatyniny wynosi mniej niż 1,1. Obrazy ultrasonograficzne oferują wysoką czułość w porównaniu z danymi histologicznymi pokazanymi w poniższych badaniach. W dniu 6 histologia wykazała spójne wzorce ostrych uszkodzeń śródmiąższowych kanalików w nerkach leczonych cisplatyną w porównaniu ze zdrowymi zwierzętami leczonymi solą fizjologiczną.

Wykorzystując obrazowanie ultrasonograficzne o wysokiej rozdzielczości do pomiaru zmian hemodynamicznych w nerkach, nie stwierdzono zmian morfologii u zwierząt bez leczenia cisplatyną między dniem 0 a 6, podczas gdy morfologię pulsus parvus wykryto u zwierząt leczonych cisplatyną w dniu 6. RI oznacza indeks rezystancyjny, a PI oznacza indeks pulsacyjny. Górne granice dla normalnego RI i PI wynoszą odpowiednio 0,7 i 1,15 u szczurów.

Pomiar tych wskaźników w celu oceny zmian hemodynamicznych w nerkach wykazał znaczny wzrost u obu zwierząt leczonych cisplatyną w dniu 6. Podczas wykonywania tej procedury ważne jest, aby upewnić się, że zwierzę ma normalne parametry życiowe w znieczuleniu. Po opracowaniu technika ta utorowała drogę naukowcom zajmującym się zmianami hemodynamicznymi w ultrasonografii nerek po ostrym uszkodzeniu nerek.

Po obejrzeniu tego filmu powinieneś dobrze zrozumieć, jak obrazować nerkę za pomocą małego zwierzęcego modelu ostrego uszkodzenia nerek.