Implantação de um Cuff Carotid para Triggering Shear-estresse aterosclerose induzida em camundongos

Resumo

O manguito constricting apresentado neste artigo é projetado para induzir a aterosclerose na artéria carótida comum murino. Devido à forma cônica de sua luz interior do manguito implantado gera regiões bem definidas de baixa, alta tensão e de cisalhamento oscilatório desencadear o desenvolvimento de lesões ateroscleróticas de diferentes fenótipos inflamatórios.

Resumo

É amplamente aceito que as alterações na tensão de cisalhamento vascular desencadear a expressão de genes inflamatórios em células endoteliais e, assim, induzir a aterosclerose (revisto em ¹ e ^2). O papel do estresse de cisalhamento tem sido extensivamente estudada in vitro investigando a influência da dinâmica do fluxo em cultura de células endoteliais ^1,3,4 e in vivo em animais maiores e os seres humanos ^1,5,6,7,8. No entanto, altamente reprodutível modelos animais de pequeno porte permitindo a investigação sistemática da influência da tensão de cisalhamento sobre o desenvolvimento da placa são raros. Recentemente, Nam et al. ⁹ introduziu um modelo de camundongo em que a ligadura de ramos da artéria carótida cria uma região de baixo fluxo e oscilatório. Embora este modelo faz com que a disfunção endotelial e rápida formação de lesões ateroscleróticas em camundongos hiperlipidêmicos, não se pode excluir que a resposta inflamatória observada é, pelo menos em parte, uma conseqüência of endotelial e / ou danos navio devido a ligadura.

A fim de evitar tais limitações, um manguito de cisalhamento modificando foi desenvolvido com base em dinâmica de fluidos calculado, cuja forma de cone lúmen interno foi escolhida para criar regiões definidas de baixa, alta tensão e de cisalhamento oscilatório dentro da artéria carótida comum ^10. Ao aplicar este modelo em camundongos apolipoproteína E (ApoE) knockout alimentados com uma dieta elevada de colesterol do tipo ocidental, lesões vasculares desenvolver a montante ea jusante do manguito. Seu fenótipo é correlacionada com a dinâmica do fluxo regional ¹¹ como confirmado por Ressonância Magnética in vivo (MRI) ^12: tensão de cisalhamento baixa e laminar a montante do manguito provoca a formação de placas extensas de um fenótipo mais vulneráveis, enquanto a jusante de cisalhamento oscilatório de estresse o manguito induz lesões ateroscleróticas estável ^11. Nas regiões de alta tensão de cisalhamento e fluxo laminar de alta dentro do manguito,normalmente não são observadas placas ateroscleróticas.

Em conclusão, o procedimento manguito cisalhamento modificando-se de uma abordagem cirúrgica confiável para produzir fenotipicamente diferentes lesões ateroscleróticas em camundongos deficientes em ApoE.

Protocolo

1. Preparando o modificador de tensão de cisalhamento (manguito)

1. O modificador de tensão de cisalhamento consiste em duas metades longitudinal de um cilindro com um lúmen em forma de cone. As cascas são feitas de meia polyetherketone termoplásticas produzidas por um processo de fundição de plástico. Os elementos elenco são enviados ao mesmo tempo ligado ao corredor. Assim, as conchas meia tem que ser cortado antes do uso. Cada elenco contém cascas de metade dos diferentes tamanhos variando de 150 M - 300 mm (diâmetro interno menor no final a jusante).
2. A preparação cuff deve ser realizada sob um microscópio cirúrgico.
3. ....

Discussão

A fim de minimizar a variação experimental é recomendado para trabalhar com animais de quase a mesma idade e com a história mesma dieta. Uma investigação publicada recentemente demonstra que o modificador de tensão de cisalhamento aplicada em camundongos tipo selvagem pode ser um bom modelo para a investigação de disfunção endotelial e no início de respostas inflamatória induzida pelo fluxo alterou a dinâmica ^13. No entanto, para o inquérito da placa aterosclerótica desenvolvimento transgênicos modelos de rat.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Nome	Companhia	Comentários
Modificador de tensão de cisalhamento (polyetherketone)	Promolding BV http://promolding.nl	Os moldes são enviados para fora, enquanto ainda está conectado ao corredor. Assim, os elementos individuais têm que ser cortado antes do uso.