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Artigo de investigação

Eficácia terapêutica do laser excímero de 308 nm combinado com matrina no vitiligo por modulação de imunoglobulinas séricas e citocinas inflamatórias

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DOI:

10.3791/70371

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10 de março de 2026

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1Department of Dermatology, Xingtai People's Hospital

Neste artigo

Resumo

O uso combinado de um laser excímero de 308 nm e matrine oral aumentou significativamente a repigmentação no vitiligo, promovendo a regeneração dos melanócitos e restaurando o equilíbrio imunológico. Essa terapia de modalidade dupla reduziu as citocinas pró-inflamatórias, normalizou imunoglobulinas, elevou a IL-10 e alcançou eficácia clínica superior, com excelente segurança e tolerância do paciente.

Resumo

O vitiligo é um distúrbio autoimune crônico de despigmentação caracterizado pela perda de melanócitos funcionais e ativação imune aberrante. Apesar dos avanços na fototerapia, as respostas clínicas permanecem inconsistentes, em grande parte devido à atividade inflamatória persistente e à regulação imunológica inadequada. Este estudo investigou a eficácia terapêutica e os mecanismos imunológicos da combinação da fototerapia a laser excímero de 308 nm com matrina oral, um alcaloide natural com propriedades anti-inflamatórias e imunautoratórias. Um total de 232 pacientes com vitiligo não segmentar foi designado prospectivamente para receber monoterapia a laser excímero ou terapia combinada por 12 semanas. A melhora clínica foi avaliada usando o Índice de Pontuação da Área do Vitiligo (VASI), e imunoglobulinas séricas e citocinas foram analisadas para avaliar a modulação imunológica sistêmica. Ambos os regimes produziram repigmentação significativa, mas a terapia combinada conseguiu uma redução mais pronunciada do VASI (de 9,72 ± 3,24 no início para 5,76 ± 2,18 após o tratamento) do que o laser excímero sozinho (de 9,68 ± 3,37 a 6,63 ± 2,34, p < 0,001). A proporção de pacientes que demonstraram excelente ou boa repigmentação foi notavelmente maior com o regime combinado (76,7%) em comparação com a monoterapia (58,7%). Paralelamente, os níveis séricos de IgG caíram significativamente (13,72 ± 2,64 g/L para 11,85 ± 2,18 g/L, p < 0,001), enquanto os níveis de IgA subiram modestamente (2,07 ± 0,68 g/L para 2,23 ± 0,61 g/L, p = 0,041). Citocinas pró-inflamatórias, incluindo IFN-γ e IL-17, foram significativamente reduzidas ( ambas p < 0,001), enquanto a anti-inflamatória IL-10 aumentou de 8,3 ± 3,2 para 12,9 ± 3,5 pg/mL (p < 0,001). A melhora do VASI correlacionou-se inversamente com as mudanças do IFN-γ (r = –0,482, p < 0,05) e IL-17 (r = –0,451, p < 0,001), e positivamente com a elevação do IL-10 (r = 0,503, p < 0,001). Esses achados demonstram que o matrine aumenta a eficácia do laser excímero ao promover a regeneração dos melanócitos e restaurar o equilíbrio imunológico, estabelecendo uma estratégia dual-modal baseada em biomarcadores para o manejo preciso e duradouro do vitiligo.

Introdução

Vitiligo é um distúrbio crônico e adquirido da pele despigmentante, caracterizado pela destruição ou disfunção seletiva dos melanócitos epidérmicos, levando ao desenvolvimento de machículas brancas bem definidas de tamanho e distribuição variáveis. Afeta aproximadamente 0,5%–2% da população global, sem predileção por gênero ou raça, e frequentemente se manifesta antes dos 30 anos. Embora a doença não seja fatal, ela impõe um peso psicossocial e emocional substancial, prejudicando significativamente a autoestima, o funcionamento social e a qualidade devida 3. A patogênese do vitiligo permanece multifatorial e incompletamente elucidada, envolvendo predisposição genética, estresse oxidativo, reações autoimunes e fatoresneurohumorais 4. Evidências recentes enfatizaram particularmente o papel fundamental da desregulação imune tanto na iniciação quanto na persistência da destruição dosmelanócitos 5,6. Na epiderme, os linfócitos T citotóxicos CD8⁺ autorreativos reconhecem antígenos melanócitos como tirosinase e gp100, liberando perforina e granzima B para induzir aapoptose7. Simultaneamente, citocinas pró-inflamatórias, incluindo interferon-γ (IFN-γ), fator de necrose tumoral α (TNF-α), interleucina-1β (IL-1β), IL-6 e IL-17, amplificam a cascata inflamatória, prejudicam a sobrevivência dos melanócitos e inibem a migração das célulaspigmentárias 8. O desequilíbrio entre as células T reguladoras (Tregs) e as células T efetoras contribui ainda mais para a ativação imunológica persistente e a perda demelanócitos 9. Assim, estratégias terapêuticas voltadas tanto para promover a regeneração dos melanócitos quanto para restabelecer a homeostase imune são de grande importância clínica.

Além das anomalias imunes locais, evidências crescentes indicam que o vitiligo representa uma condição autoimune sistêmica. Níveis alterados de imunoglobulinas séricas (IgG, IgA e IgM) foram documentados em pacientes, refletindo ativação generalizada das células B e imunidade humoralanormal 10,11. A produção desregulada de imunoglobulinas pode facilitar a formação de autoanticorpos contra antígenos específicos de melanócitos, agravando danos tecidos. Além disso, o meio de citocinas em pacientes com vitiligo frequentemente apresenta elevados IFN-γ, TNF-α, IL-6, IL-17 e IL-23, sugerindo ativação imunológica sistêmica além da pelelesional 12,13. Esses mediadores imunes não apenas atuam como impulsionadores patogênicos, mas também se correlacionam com a atividade da doença e a resposta terapêutica, posicionando-os como potenciais biomarcadores para o monitoramentodo tratamento 14. Portanto, intervenções capazes de restaurar o equilíbrio imunológico — modulando tanto as respostas imunes celulares quanto humorais — podem oferecer resultados clínicos superiores e duradouros. Apesar da disponibilidade de corticosteroides tópicos, inibidores de calcineurina, imunossupressores sistêmicos e fototerapia, a eficácia do tratamento continua insatisfatória para muitos pacientes, especialmente aqueles com doença extensa ourefratária 15. Consequentemente, abordagens combinadas que visam múltiplos mecanismos fisiopatológicos ganharam força nos últimos anos.

A fototerapia há muito tempo é uma pedra fundamental no manejo do vitiligo. Entre várias modalidades, o laser excímero (EL) de 308 nm emergiu como uma das opções mais direcionadas e eficazes para vitiligo localizado 16,17. Ele fornece radiação UVB monocromática a 308 nm diretamente sobre lesões despigmentadas, estimulando assim a proliferação e migração de melanócitos dos folículos capilares, minimizando a exposição do tecido saudável ao redor18. Comparado ao UVB convencional de banda estreita, o laser excímero oferece vantagens de início rápido da repigmentação, menor tempo de exposição acumulado e melhor perfil de segurança 19,20. Mecanicamente, a irradiação de baixa dose de 308 nm induz imunomodulação local ao reduzir a atividade das células epidérmicas de Langerhans, aumentar a infiltração de Treg e aumentar a melanogênese por meio da regulação para cima da tirosinase e do fator de transcrição associado à microftalmia (MITF)21. No entanto, as respostas permanecem variáveis, e muitos pacientes não conseguem alcançar a repigmentação completa. Irradiação excessiva ou prolongada pode, paradoxalmente, desencadear a liberação de citocinas inflamatórias — como IL-1β, IL-6 e TNF-α — e ainda mais lesão dosmelanócitos 22,23. Assim, embora o tratamento com laser excímero estimule efetivamente a regeneração dos melanócitos, sua eficácia pode ser limitada pela ativação inflamatória concomitante. Essa dualidade ressalta a necessidade de terapias auxiliares capazes de mitigar a inflamação e melhorar a tolerância imunológica durante a fototerapia.

Matrina, um alcaloide natural de quinolizidina extraído de Sophora flavescens (Ku Shen), tem atraído considerável atenção recentemente como agente imunomodulador e anti-inflamatório com baixatoxicidade 24,25. Estudos experimentais demonstraram que a matrine pode suprimir as vias de sinalização NF-κB e JAK/STAT, reduzir a produção de citocinas pró-inflamatórias (incluindo IFN-γ, TNF-α e IL-6) e promover a expressão de mediadores anti-inflamatórios comoIL-10-26. Em doenças relacionadas ao sistema imunológico, o matrine demonstrou eficácia na modulação da diferenciação Th1/Th17, no aprimoramento da função reguladora das células T e na normalização dos perfis deimunoglobulinas 27,28. Além disso, a matrine apresenta efeitos antioxidantes e antiapoptóticos que podem proteger os melanócitos contra lesões induzidas por estresseoxidativo 29. Embora essas propriedades tornem a matrina uma candidata atraente para doenças autoimunes de pele, poucos estudos exploraram seu papel no vitiligo. A combinação do matrine com a fototerapia apresenta uma abordagem terapêutica inovadora: o matrine pode atenuar o microambiente inflamatório, estabilizar a homeostase dos melanócitos e potenciar a melanogênese induzida por laser. Além disso, a atividade imunorreguladora sistêmica do matrine pode complementar os efeitos locais do laser excímero, resultando em benefício clínico sinérgico. Até onde sabemos, nenhum estudo clínico anterior investigou de forma abrangente o uso combinado do laser excímero 308-nm e matrine no vitiligo ou avaliou seus correlatos imunológicos por meio de perfil de biomarcadores séricos.

Com base nessa lógica, hipotetizamos que a combinação do laser excímero de 308 nm e matrine proporcionaria eficácia terapêutica superior em comparação com a monoterapia com laser excímero, promovendo simultaneamente a regeneração dos melanócitos e suprimindo ativação imune aberrante. Especificamente, postulamos que a administração matrina auxiliar aumentaria as taxas de repigmentação clínica, modularia os níveis de imunoglobulina sérica (IgG, IgA e IgM) rumo ao equilíbrio fisiológico e reduziria citocinas pró-inflamatórias como IFN-γ, TNF-α e IL-17, ao mesmo tempo em que aumentaria as citocinas anti-inflamatórias. Neste estudo, avaliamos sistematicamente os desfechos clínicos, parâmetros imunológicos e suas correlações em pacientes com vitiligo tratados com essa terapia combinada. A novidade desta investigação está em seu foco mecanicista duplo — estimulação fotobiológica local e modulação imune sistêmica — e na integração da análise quantitativa de biomarcadores para elucidar mecanismos terapêuticos. Ao esclarecer o impacto imunarregulador da matrine quando combinada com fototerapia direcionada, nosso trabalho visa fornecer uma base baseada em evidências para um novo paradigma terapêutico no manejo do vitiligo. Em última análise, esses achados podem avançar o campo rumo a estratégias de fototerapia precisas e guiadas pelo sistema imunológico, que promovam não apenas a repigmentação, mas também a estabilização da doença a longo prazo e a prevenção de recaídas.

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Protocolo

Esse estudo foi conduzido de acordo com os princípios éticos da Declaração de Helsinque e os regulamentos institucionais que regem a pesquisa humana. O estudo foi conduzido de acordo com os princípios éticos da Declaração de Helsinque e aprovado pelo Comitê de Ética do Hospital Popular de Xingtai, Departamento de Dermatologia (ID de aprovação: 2021[029]). Todos os participantes forneceram consentimento informado por escrito antes da participação.

Seleção de pacientes
Um total de 232 pacientes clinicamente diagnosticados com vitiligo foram inscritos em um período de 3 anos, de janeiro de 2021 a dezembro de 2023. Todos os participantes foram diagnosticados com vitiligo não segmentar (tipo generalizado ou localizado) e classificados como estáveis ou progressivos com base na ausência ou presença de novas lesões dentro de 3 meses antes do alistamento. A duração da doença e a distribuição das lesões foram registradas no início da linha. Os critérios de inscrição incluíam indivíduos de 18 a 65 anos com vitiligo estável ou progressivo confirmado por dermatologistas por meio de exame clínico, iluminação da lâmpada de Wood e dermoscopia. Os critérios de exclusão foram gravidez, lactação, distúrbios fotoalérgicos, doença autoimune sistêmica, disfunção hepática ou renal severa e uso prévio de corticosteroides sistêmicos, imunossupressores ou fototerapia em até 3 meses. Todos os procedimentos foram realizados sob supervisão ética contínua, garantindo o conforto e a segurança do paciente durante todo o tratamento.

Visão geral do estudo e fluxo de trabalho do tratamento
O fluxo de trabalho geral do estudo, incluindo o recrutamento de pacientes, alocação de grupos, avaliações de acompanhamento e análise de biomarcadores, está ilustrado na Figura 1. Os participantes elegíveis foram designados em proporção 1:1 para um dos dois grupos de estudo paralelos: o grupo de monoterapia com laser excímero de 308 nm (apenas laser excimer; n = 116) e o grupo de terapia combinada (laser excímero de 308 nm mais matrine oral; n = 116). A alocação de grupos foi realizada usando uma sequência aleatória gerada por computador, preparada por um membro independente da equipe de pesquisa que não participou da avaliação de resultados; As atribuições eram colocadas em envelopes sequencialmente numerados e lacrados e abertas após o recrutamento para determinar a alocação do tratamento. O fluxo de trabalho terapêutico consistiu em três fases principais: (1) avaliação e documentação da linha inicial, (2) 12 semanas de tratamento ativo de acordo com o regime designado e (3) avaliação pós-tratamento, incluindo testes laboratoriais de imunoglobulinas séricas e citocinas inflamatórias. Cada paciente recebeu um plano de cuidados padronizado, intervalos de acompanhamento idênticos e procedimentos uniformes de análise laboratorial. Fotografias clínicas e pontuação VASI foram realizadas por dermatologistas cegos à alocação de tratamento. Todos os procedimentos foram realizados na suíte de fototerapia dermatológica do Hospital Popular de Xingtai sob condições ambientes controladas (temperatura ambiente 22–24 °C, umidade relativa 40%–60%).

Preparação da área de tratamento
Antes de cada sessão de laser, as áreas despigmentadas do alvo foram suavemente limpas com soro fisiológico estéril e secadas com gaze médica sem fiapos. A pele lesional foi inspecionada para confirmar a ausência de infecção, excoriação ou crostas. Quando mais de uma lesão foi tratada em uma única visita, cada lesão foi preparada e tratada sequencialmente. Lesões que excederam um único campo de irradiação foram subdivididas em campos de irradiação adjacentes, e a pele normal ao redor foi protegida com uma folha opaca bloqueadora de UV para cada campo, minimizando a exposição desnecessária. Os pacientes foram orientados a evitar agentes tópicos, cosméticos fotosensitizantes ou perfumes por 24 horas antes do tratamento. Óculos protetores foram usados tanto pelo paciente quanto pelo operador durante todo o procedimento.

Procedimento de irradiação a laser excímero de 308 nm
Foi utilizado um sistema monocromático de laser excímero de xenon-cloreto (XeCl) de 308 nm. Todas as sessões de laser foram realizadas por dois dermatologistas treinados sob um protocolo padronizado para garantir energia consistente, distância de irradiação e reprodutibilidade. A saída do dispositivo era verificada com um medidor de potência UV calibrado antes de cada dia de tratamento, e todos os sistemas passavam por calibração semanal por um técnico certificado para manter uma margem de erro abaixo de ±5%. Antes da primeira irradiação, a dose mínima de eritema (MED) para cada paciente era determinada aplicando doses incrementais (100–400 mJ/cm 2) em pequenas áreas testadas no antebraço interno e avaliando a resposta do eritema após 24 horas; Os resultados foram fotografados e registrados nos prontuários dos pacientes. Uma documentação representativa da MED e um gráfico de ajuste de dose sessão a sessão são fornecidos na Tabela Suplementar 1. A MED foi definida como a menor dose de teste produzindo um eritema uniforme e claramente discernível às 24 horas. A dose inicial do tratamento foi definida em 80%–90% da medicação individual (MED), e as mudanças subsequentes seguiram um algoritmo pré-definido baseado na resposta ao eritema de 24 horas da sessão anterior (aumento de 10%–20% para eritema ausente ou leve, manutenção da mesma dose para eritema moderado e redução de 10%–20% para bolhas ou dor significativa). A dose terapêutica inicial foi definida em 150–250 mJ/cm2 (aproximadamente 80%–90% da MED individual). Cada sessão começava com o paciente confortavelmente sentado em uma cadeira ajustável. A ferramenta laser era mantida perpendicularmente (90°) à pele a uma distância de 10–15 cm, e campos de irradiação circulares ou retangulares eram alinhados para cobrir totalmente áreas despigmentadas com sobreposição mínima. A irradiação durava de 1 a 3 s por campo de exposição, dependendo da fluência. As doses foram subsequentemente aumentadas entre 10% e 20% por sessão, de acordo com a resposta prévia ao eritema; Se ocorreu eritema moderado, a dose anterior foi mantida, enquanto bolhas ou dor justificaram uma redução de 10% a 20%. A dose máxima não ultrapassou 2.000 mJ/cm2. Cada sessão cobriu todas as lesões visíveis e durou de 10 a 20 minutos, dependendo da extensão. Os tratamentos foram realizados 2 vezes por semana, com pelo menos 72 horas entre as sessões, ao longo de um período total de 12 semanas (24 sessões). Após a irradiação, uma fina camada de gel estéril à base de aloe foi aplicada para aliviar o eritema local. Os pacientes foram orientados a evitar exposição ao sol por 48 horas e a usar protetor solar de amplo espectro (FPS >30) durante todo o tratamento. Lesões com repigmentação de >50% continuaram sob os mesmos parâmetros até que a pigmentação fosse estável.

Administração da matrine oral
No grupo combinado, um extrato aquoso estéril de raízes de Sophora flavescens foi preparado de acordo com a Farmacopeia Chinesa (edição de 2020)30 e padronizado para uma concentração de 5 mg/mL com pureza de ≥98%, verificada por cromatografia líquida de alto desempenho (HPLC). A solução era armazenada a 4 °C em frascos de vidro âmbar para evitar a fotodegradação. Testes aleatórios em lote confirmaram a concentração de alcaloides (5 ± 0,3 mg/mL) e a esterilidade microbiana. Cada paciente recebeu a solução matrina por administração oral em uma dose de 0,3 g (60 mL) duas vezes ao dia durante 12 semanas, sincronizada com o esquema de tratamento a laser. A dosagem foi selecionada com base em dados farmacológicos anteriores que demonstravam imunomodulação eficaz com perfil de segurança favorável em dermatoses inflamatóriascrônicas 31,32. Os pacientes foram orientados a tomar a solução 30 minutos após as refeições para minimizar desconfortos gastrointestinais e evitar álcool, chá forte e alimentos apimentados durante a terapia, a fim de reduzir a carga hepática. Náusea leve ou fadiga era controlada com a administração de uma pequena quantidade de água morna. A adesão ao tratamento foi avaliada por meio de um diário de medicamentos e verificação de devolução por garrafa em cada consulta de acompanhamento. A segurança foi avaliada em cada consulta por meio de investigação estruturada dos sintomas e documentação de eventos adversos, incluindo desconforto gastrointestinal, fadiga e quaisquer sinais sugestivos de intolerância hepática. Nenhum medicamento sistêmico adicional, corticosteroide tópico ou imunossupressor foi permitido durante o período de observação para evitar efeitos de confusão.

Avaliação da resposta clínica
As alterações de pigmentação foram avaliadas no início da linha de entrada e nas semanas 4, 8 e 12 por dois dermatologistas experientes, cegos às informações do tratamento. Fotografias digitais padronizadas foram tiradas sob idênticas configurações de iluminação e câmera (distância 60 cm, exposição 1/60 s, ISO 200). O grau de repigmentação foi quantificado usando o Índice de Pontuação da Área do Vitiligo (VASI). As lesões foram ainda classificadas em quatro categorias: Excelentes (≥75% de repigmentação), Bons (50%–74%), Moderados (25%–49%), Fracos (<25%). Os pacientes também completaram uma Escala Visual Analógica (VAS) de 10 pontos para satisfação e alívio dos sintomas. Eventos adversos como eritema, ardência, prurito, bolhas e hiperpigmentação foram documentados em cada consulta.

Coleta de amostras de soro
Para análise de biomarcadores, o sangue periférico em jejum (5 mL) foi coletado de cada paciente no início da linha e ao final da semana 12, utilizando tubos de separação sérica. As amostras foram deixadas coagular por 30 minutos em temperatura ambiente e centrifugadas a 800 x g por 10 minutos a 4 °C. O soro sobrenadante foi alicotado em crioviais de 0,5 mL e armazenado a −80 °C até análise. Todas as amostras foram processadas em até 2 horas após a coleta para minimizar a degradação das citocinas.

Quantificação das imunoglobulinas séricas
As concentrações séricas de IgG, IgA e IgM foram determinadas por imunonefelometria automatizada, seguindo as instruções do fabricante. Curvas de calibração foram preparadas usando diluições seriais dos padrões de referência. Cada ensaio incluía soros de controle de qualidade em concentrações altas e baixas. As medições foram expressas em g/L e repetidas 2x para garantir variação intra-ensaio < 5%. A precisão e calibração do instrumento eram verificadas diariamente usando padrões de controle rastreáveis. Os resultados foram registrados eletronicamente e revisados por dois técnicos independentes, cegos às informações dos pacientes.

Medição de citocinas inflamatórias
O perfil de citocinas incluiu IFN-γ, TNF-α, IL-1β, IL-6, IL-17 e IL-10, quantificados usando uma plataforma de ensaio imunossorvente ligado a enzimas multiplex (ELISA). A preparação do reagente seguiu o protocolo padrão do fabricante. Brevemente, 100 μL de soro diluído foram adicionados a cada poço revestido com anticorpos e incubados por 2 horas a 37 °C. Após lavagem com soro tampão fosfatado contendo 0,05% Tween-20 (PBST), 100 μL de anticorpo de detecção biotinilado foram adicionados e incubados por 1 hora. Os poços foram então incubados com estreptavidina-peroxidase de rábano forte por 30 minutos, seguidos pelo desenvolvimento da cor usando substrato de tetrametilbenzidina (TMB) por 10 minutos no escuro. A reação foi interrompida com 50 μL de ácido sulfúrico de 2 mol/L, e a absorvância foi medida em 450 nm usando um leitor de microplacas. Curvas padrão foram geradas a partir de diluições seriais de citocinas recombinantes, e as concentrações foram expressas como pg/mL. Todas as amostras foram medidas em duplicado. Para garantir a reprodutibilidade, o coeficiente de variação (CV) entre ensaios foi mantido abaixo de 10%. Poços em branco continham tampão de ensaio sem soro, e poços de controle negativo continham matriz sem citocinas processada idênticamente às amostras e equivalente ao padrão 0 pg/mL para confirmar a especificidade do ensaio. Quaisquer amostras hemolizadas ou lipêmicas foram excluídas da análise final.

Análise estatística
Os dados eram inseridos em um banco de dados eletrônico dedicado e verificados para precisão por dois gestores de dados independentes. O tamanho da amostra foi estimado com base no tamanho do efeito esperado (d de Cohen = 0,5) com α = 0,05 e potência (1–β) = 0,8, resultando em um mínimo de 100 participantes por grupo. Para controlar múltiplas comparações entre citocinas, a correção de Bonferroni foi aplicada quando apropriado. A regressão linear multivariada foi aplicada quando necessário para ajustar possíveis fatores de confusão, incluindo idade, sexo, duração da doença e área basal da lesão. A distribuição normal das variáveis contínuas foi verificada usando o teste de Shapiro–Wilk. Estatísticas descritivas foram apresentadas como média ± desvio padrão (DE) para dados normalmente distribuídos ou como mediana (intervalo interquartil, IQR) para dados enviesados. As mudanças antes e após o tratamento foram analisadas usando testes t pareados, enquanto comparações entre grupos foram analisadas com testes t de amostra independente ou testes Mann–Whitney U, conforme apropriado. Os dados categóricos foram comparados com o qui-quadrado ou teste exato de Fisher. As correlações entre os níveis de citocinas, imunoglobulinas e a melhora da pigmentação foram avaliadas usando o coeficiente de correlação de Pearson. Todas as análises foram realizadas com SPSS v26.0 (RRID: SCR_002865), e um p < bilateral de 0,05 foi considerado estatisticamente significativo.

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Resultados

Características clínicas de base demonstraram perfis demográficos e de doenças comparáveis entre os grupos
Um total de 232 pacientes com vitiligo não segmentar foi incluído e distribuído igualmente ao grupo excimer (n = 116) ou ao grupo de terapia combinada que recebeu laser mais matrine oral (n = 116). Parâmetros demográficos e clínicos basais, incluindo idade (35,8 ± 6,0 vs. 35,4 ± 5,6 anos), distribuição sexual (masculino/feminino: 59/57 vs. 59/57...

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Discussão

Este estudo apresenta uma abordagem terapêutica combinada que integra um laser excímero de 308 nm com matrina oral para o tratamento do vitiligo não segmentar. A proposição central é que a dupla modulação — estimulação fotobiológica local dos melanócitos combinada com irregulação sistêmica — pode alcançar uma repigmentação mais robusta e sustentada do que o grupo excímero. Os achados apoiam essa hipótese: a terapia combinada produziu pigmentação perifolicular mais precoce, maior redução ...

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Divulgações

Não há conflitos financeiros de interesse a serem divulgados.

Agradecimentos

Os autores gostariam de reconhecer toda a equipe do Departamento de Dermatologia pelo trabalho árduo ao longo do projeto.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Sistema de Laser Excímero XeCl de 308 nmCiências da Pele STRATA (XTRAC)Velocity 400 (Modelo)Laser UVB de 308 nm direcionado para lesões de vitiligo; Verifique o modelo no seu local; ou dispositivo equivalente
– 80 e graus; C Freezer Ultra-BaixoTermo CientíficaSérie Forma 900 (Modelo 980)Armazenamento sérico de longo prazo
Placas ELISA de 96 Poços (Alta Ligação)Colega de Corning9018Se estiver usando revestimento interno ou fluxos de trabalho single-plex
Cadeira Médica AjustávelMidmark641 Chefe de ProcedimentosPosicionamento do paciente para distância de irradiação consistente
Gel calmante à base de aloe3M9236Camada fina pós-irradiação para alívio do eritema; ou gel médico equivalente
Garrafa de Vidro Âmbar (500 mL)Fisherbrand02-897-2JArmazenamento protegido contra luz em 4 graus; C para solução matrina
Balanço Analítico (0,1 mg)METTLER TOLEDOME104EPreparação gravimétrica e controle de qualidade
Imunonefelômetro AutomatizadoSiemens HealthineersSistema BN ProSpecQuantifica IgG/IgA/IgM por fabricante' s IFU
Etiquetas de Código de Barras (Cryosafe)Biotecnologia DiversificadaCRY-1000Rastreamento de amostras e cadeia de custódia
Conjunto de Anticorpos de Detecção BiotiniladaMSDIncluído com o painelCombinado para capturar anticorpos
Protetor solar de amplo espectro e protetor solar (SPF) & ge; 30Neutrogena070501017052 (FPS Ultra Transparente 50)Fotoproteção pós-sessão; Item de aconselhamento ambulatorial
Calibradores para ImunoglobulinasSiemens HealthineersN Protein Standard SLCalibração rastreável para nefelometria
Soros de controle (alto/baixo) para ensaios de IgSiemens HealthineersControles da Proteína N/TControle de qualidade diário das corridas nephelométricas
Frascos criogênicos, 0,5 mLTermo Científica Nunc375418Aliquotas séricas; tópico externo; Livre de DNase/RNase
DermatoscópioDermLiteDL4Dermatoscópio polarizado portátil para inspeção de lesões
Cartão de Dermoscopia/Escala de Fotografia3GenCartão de Referências de Escala/CorGarante consistência de cor entre os pontos de tempo
Câmera Digital para Imagens PadronizadasCanonEOS 80DDistância fixa 60 cm; exposição 1/60 s; ISO 200; Tripé recomendado
Centrífuga refrigerada de ângulo fixoEppendorf5810 R800 e vezes; G, 10 min, 4 e graus; Separação do soro de C
Coluna HPLC (C18, 4,6 e vezes; 250 mm, 5 e micro; m)AgilentZORBAX Eclipse Plus C18, 959990-902Separação rotineira de alcaloides; ou equivalente
Sistema HPLCAgilent1260 Infinity II (G7111B)Verificação de pureza e padronização em lote da matrine
Análise / Medição de ImagensImageJ (NIH)1,54 (RRID:SCR_003070)Quantificação opcional da área da lesão a partir de fotografias
Gaze médica sem fiapos (Estéril)Johnson & Johnson546112Área de tratamento de secagem após a limpeza
Matrine (≥ 98%, HPLC)MedChemExpressHY-N0156Preparação de solução oral; Verifique a conformidade com fornecedores locais e a farmacopeia
Leitor de Microplacas (450 nm)BioTek (Agilent)Sinergia H1Absorção a 450 nm; Correção do comprimento do caminho
Arruela de MicroplacasBioTek (Agilent)ELx405Ciclos de lavagem automatizados; Reduz a variabilidade
Painel Multiplex de Citocinas Humanas (Custom 6-plex)Descoberta em Escala Mesosiana (MSD)Plataforma U-PLEX (K15067L)Inclui IFN-&gamma, TNF-&alpha, IL-1&beta, IL-6, IL-17A, IL-10; ou equivalente
PBS TabletsGibco18912-014Preparação PBS para lavagens/buffers
Filmes Selantes de PlacasBio-RadMSB1001Previne a evaporação durante as incubações
Óculos UV de proteção (operador)Uvex (Honeywell)S0360X Ultra-Especificação 2000Proteção ocular para operadores; Use par dedicado
Óculos UV de proteção (paciente)Uvex (Honeywell)S0360X Ultra-Especificação 2000Óculos bloqueadores de UV para segurança do paciente durante a irradiação
Tubos de Separação Sérica (SST II Advance)BD Vacutainer367955Coleta de sangue em jejum no início da linha de entrada e na semana 12
Software EstatísticoIBMEstatísticas SPSS v26.0 (RRID:SCR_002865)Análise de dados primários por protocolo
Soro fisiológico estéril (0,9%)Baxter2B1324 (500 mL)Limpeza da lesão antes de cada sessão de laser
Solução de Parar (2 M H2SO4)Sigma-Aldrich258105Para a reação da TMB
Streptavidina-HRPTermo CientíficaN100Reagente de detecção; Compatível com kits
Substrato de TMB (ELISA)Termo Científica34028Desenvolvimento cromogênico; 10 minutos no escuro
Tripé com Marcador de DistânciaManfrottoMKCOMPACTLT-BKMantém distância constante entre câmera e sujeito
Pré-adolescente-20 (para PBST 0,05%)Sigma-AldrichP1379Tensioativo tampão de lavagem
Radiômetro UV / Medidor de PotênciaTecnologias Internacionais de LuzILT2400Para verificação diária de produção e testes MED; com detector SED240/NS254 ou equivalente
Cortina/Lençol Opaco Bloqueador de Raios UVThorlabsTecido Opaco BK5Cobre a pele normal para evitar exposição não intencional; ou equivalente
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Wood' Lâmpada s (UV-A, 365 nm)EspectrolinaENF-260CDiagnóstico clínico e avaliação da borda da lesão
Wood' Escudo da Lâmpada sDermLiteDL HoodMelhora o contraste no exame UV-A

Referências

  1. Brunner, P. M., et al. Transcriptomic profiling of vitiligo patients shows polar immune dysregulation in involved and uninvolved skin. J Allergy Clin Immunol. 156 (4), 993-1007 (2025).
  2. Carbone, M. L., et al. Insight into immune profile associated with vitiligo onset and anti-tumoral response in melanoma patients receiving anti-PD-1 immunotherapy. Front Immunol. 14, 1197630(2023).
  3. Lerner, G., et al. Regulatory T cell dysregulation in vitiligo: A meta-analysis and systematic review of immune mechanisms and therapeutic perspectives. Int J Dermatol. 64 (12), 2247-2256 (2025).
  4. Lu, J., et al. Identification of shared biomarkers and immune infiltration signatures between vitiligo and Hashimoto's thyroiditis. Clin Cosmet Investig Dermatol. 17, 311-327 (2024).
  5. Ma, B., Wang, X. Unravelling the molecular mechanisms and immune landscape of vitiligo: A comprehensive bioinformatics study on melanogenesis-related genes. Ann Hum Biol. 52 (1), 2468692(2025).
  6. Okamura, K., Suzuki, T. Genetics and epigenetics in vitiligo. J Dermatol Sci. 117 (3), 45-51 (2025).
  7. Yang, M., Wang, H., Zhang, R. Bioinformatics analysis of oxidative stress-related genes and immune infiltration patterns in vitiligo. Clin Cosmet Investig Dermatol. 18, 475-489 (2025).
  8. Al Abadie, M. S., Chaiyabutr, C., Patel, K. X., Gawkrodger, D. J. Vitiligo and psychological stress: A hypothesis integrating the neuroendocrine and immune systems in melanocyte destruction. Int J Dermatol. 63 (7), 841-843 (2024).
  9. Hu, Y., Wang, S. B., Wang, K., He, M. J. From phenotype to molecules: Unveiling the genetic and immunological bridges between autoimmune diseases and vitiligo. Clin Cosmet Investig Dermatol. 17, 2475-2486 (2024).
  10. Jin, S., et al. The role of regulatory T cells in vitiligo and therapeutic advances: A mini-review. Inflamm Res. 73 (8), 1311-1332 (2024).
  11. Li, J., et al. The relationship between psoriasis and vitiligo: From a comprehensive study. Skin Res Technol. 30 (7), e13868(2024).
  12. Patel, R., et al. Prevalence of vitiligo among children and adolescents in the United States. Dermatology. 239 (2), 227-234 (2023).
  13. Rao, H., et al. Case report: Immune checkpoint inhibitor-related vitiligo-like depigmentation in non-melanoma advanced cancer: A report of three cases and a pooled analysis of individual patient data. Front Oncol. 12, 1099108(2022).
  14. Sun, C., Ding, H., Zhang, L., Wang, J., Su, M. Co-regulatory mechanisms and potential markers of oxidative stress-related genes in vitiligo and alopecia areata. Skin Res Technol. 30 (8), e70001(2024).
  15. Wang, X., et al. Circulating memory T cells and TCF1 (+) T cells aid in diagnosis and monitor disease activity in vitiligo. J Pharm Anal. 14 (11), 100998(2024).
  16. Wu, L., Han, T., Wang, Y., Li, S., Li, C. Epigenetic regulation in vitiligo: Mechanisms, challenges, and therapeutic opportunities. Curr Opin Immunol. 95, 102580(2025).
  17. Xie, B., Zhu, Y., Shen, Y., Xu, W., Song, X. Treatment update for vitiligo based on autoimmune inhibition and melanocyte protection. Expert Opin Ther Targets. 27 (3), 189-206 (2023).
  18. Chen, J., et al. Mif inhibition alleviates vitiligo progression by suppressing CD8 (+) T cell activation and proliferation. J Pathol. 260 (1), 84-96 (2023).
  19. Kano, S., et al. Differences in the immune microenvironment between improved and non-improved cases of vitiligo after halo nevus excision. J Dermatol Sci. 109 (3), 136-142 (2023).
  20. Liu, H., Wang, Y., Le, Q., Tong, J., Wang, H. The ifn-γ-cxcl9/CXCL10-CXCR3 axis in vitiligo: Pathological mechanism and treatment. Eur J Immunol. 54 (4), e2250281(2024).
  21. Lo, J., Hanania, H. L., Keiser, M. F., Patel, A. B. Immune checkpoint inhibitor-induced vitiligo in cancer patients: Characterization and management. Arch Dermatol Res. 315 (6), 1697-1703 (2023).
  22. Lu, L., et al. Vitiligo associated with type 2 immune inhibitors: Faers analysis and literature review. J Dermatol. 52 (6), 1008-1014 (2025).
  23. Mazzetto, R., et al. Anti-tumor immunity and vitiligo: From immune-related adverse reactions to protection from cancer. Immunotherapy. 16 (13), 841-843 (2024).
  24. Starace, M., et al. Immune checkpoint inhibitor-induced vitiligo-like depigmentation. JAMA Dermatol. 161 (2), 216-218 (2025).
  25. Xin, Y., Yuan, T., Wang, J. Circulating immune cells and vitiligo: A bidirectional two-sample mendelian randomization study. Front Immunol. 15, 1391186(2024).
  26. Yang, P., et al. Single-cell transcriptomics reveals peripheral immune responses in non-segmental vitiligo. Front Immunol. 14, 1221260(2023).
  27. Ezzedine, K., et al. Efficacy and safety of oral ritlecitinib for the treatment of active nonsegmental vitiligo: A randomized phase 2b clinical trial. J Am Acad Dermatol. 88 (2), 395-403 (2023).
  28. Gay-Mimbrera, J., et al. Comprehensive single-cell chromatin and transcriptomic profiling of peripheral immune cells in nonsegmental vitiligo. Br J Dermatol. 193 (1), 115-124 (2025).
  29. Liu, K., et al. Jak inhibitors in immune regulation and treatment of vitiligo. Cytokine Growth Factor Rev. 80, 87-96 (2024).
  30. National Pharmacopoeia Commission. Pharmacopoeia of the People’s Republic of China. Volume I, 2020 Edition, China Medical Science Press. Beijing. (2020).
  31. Huang, P., et al. Matrine regulates Th1/Th2 inflammatory responses by inhibiting the Hsp90/nf-κb signaling axis to alleviate atopic dermatitis. Kaohsiung J Med Sci. 39 (5), 501-510 (2023).
  32. Shi, H. J., et al. Oxymatrine therapy inhibited epidermal cell proliferation and apoptosis in severe plaque psoriasis. Br J Dermatol. 181 (5), 1028-1037 (2019).
  33. Seneschal, J., et al. Worldwide expert recommendations for the diagnosis and management of vitiligo: Position statement from the international vitiligo task force-part 2: Specific treatment recommendations. J Eur Acad Dermatol Venereol. 37 (11), 2185-2195 (2023).
  34. Seong, S. H., Oh, S. H. Up-and-coming drugs for the treatment of vitiligo. Ann Dermatol. 36 (4), 197-208 (2024).
  35. Upadhya, S., Andrade, M. J., Shukla, V., Rao, R., Satyamoorthy, K. Genetic and immune dysregulation in vitiligo: Insights into autoimmune mechanisms and disease pathogenesis. Autoimmun Rev. 24 (8), 103841(2025).
  36. Wang, Y., et al. Innate immune activation in vitiligo: Mechanisms and pathophysiological implications. Front Immunol. 16, 1631074(2025).
  37. Zhang, M., et al. Vitiligo: An immune disease and its emerging mesenchymal stem cell therapy paradigm. Transpl Immunol. 76, 101766(2023).
  38. Luo, L., Zhu, J., Guo, Y., Li, C. Mitophagy and immune infiltration in vitiligo: Evidence from bioinformatics analysis. Front Immunol. 14, 1164124(2023).
  39. Sant'anna-Silva, A. C. B., et al. Vitiligo auto-immune response upon oxidative stress-related mitochondrial DNA release opens up new therapeutic strategies. Clin Transl Med. 14 (8), e1810(2024).
  40. Sibbald, C. Alopecia areata: An updated review for 2023. J Cutan Med Surg. 27 (3), 241-259 (2023).
  41. Wang, L., et al. Advances in psoriasis research: Decoding immune circuits and developing novel therapies. Int J Mol Sci. 26 (18), 9233(2025).

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