drosófila Quantificação da Junção Neuromuscular (NMJ): Um Método para Avaliar a Morfologia e Função Sináptica

- Primeiro, imunocorar larvas de Drosophila com marcadores que destacam diferentes aspectos das JNMs ou junções neuromusculares. Esta é a região onde a terminação de um axônio do neurônio motor entra em contato com um músculo, e sua morfologia é usada como uma leitura da função sináptica.

O axônio termina em vários ramos que formam protuberâncias chamadas botões. Os neurotransmissores são liberados dos botões e causam contração muscular. As áreas de liberação de neurotransmissores são chamadas de zonas ativas. Aqui, um marcador é específico para uma proteína sináptica que delineia a NMJ, e o outro marcador é para uma proteína presente em zonas ativas.

Em seguida, adquira imagens NMJ usando microscopia e avalie quantitativamente sua morfologia com um software de análise de imagem semiautomatizado. Aplique uma série predefinida de comandos de software às imagens. Os arquivos de saída contêm imagens NMJ analisadas e resultados de morfologia. As características que podem ser medidas incluem número e área de superfície de botões, comprimento NMJ e número de ramificações, número de compartimentos NMJ não conectados e número de zonas ativas.

No exemplo a seguir, analisaremos a morfologia