0 visualizações • 4:39 min. • April 30th, 2023
- Comece pulsando Drosophila anestesiada junto com tampão em um liquidificador para quebrar as moscas em pequenos pedaços. Filtre a mistura através de uma malha para remover as partes grandes do corpo. Em seguida, deixe os ovos afundarem enquanto os fragmentos maiores permanecem na superfície e podem ser removidos.
Repita esse processo usando uma malha menor para remover detritos adicionais. Colete os ovos em um frasco e, se os ovos forem tratados com um medicamento, faça-o neste momento. Em seguida, remova o líquido e substitua-o por fixador. Adicione heptano para ajudar o fixador a penetrar na membrana que envolve o ovo.
Em seguida, lave o fixador com PBS. Para corar os oócitos, remova as membranas externas protetoras para permitir a penetração de anticorpos. Pipete os oócitos na parte fosca de uma lâmina de vidro. Coloque uma lamínula sobre os ovos e role suavemente a lamínula em um movimento para frente e para trás para separar mecanicamente o córion e a membrana vitelina do ovo. Os oócitos estão agora prontos para serem corados.
No protocolo de exemplo, estaremos preparando oócitos em meiose I para corar e visualizar o aparelho fusiforme.
- Para começar, pré-corte o interior d
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