Ensaio de eletrotaxia: um método para observar a locomoção em C. elegans

- Sem estímulos sensoriais, o movimento de C. elegans é geralmente para frente e é interrompido por reversões e curvas - manobras aleatórias de reorientação que resultam em uma mudança de direção. C. elegans são eletrorreceptores. Ou seja, eles podem sentir campos elétricos. Quando expostos a uma corrente contínua suave ou CC, os vermes se movem em um caminho reto e ininterrupto na direção do eletrodo negativo ou cátodo, um comportamento denominado eletrotaxia.

Para observar com mais precisão a locomoção do verme, coloque o animal em um dispositivo microfluídico e aplique um campo elétrico DC. Inverta a direção do campo e o verme virará para o lado oposto - na direção do cátodo. Aplique uma corrente alternada, AC, e o worm irá parar. A mudança alternada na direção do campo sobrecarrega os sistemas neuromotores do verme, resultando na imobilização do verme. Reaplique o campo DC e o worm retomará o movimento para frente em direção ao cátodo.

No protocolo de exemplo a seguir, veremos uma configuração demonstrando um ensaio de eletrotaxia em um dispositivo microfluídico.

- Comece esta etapa colocando o microcanal recém-montado em um estágio móvel xy- de um microscópio com uma câmera mo