Medindo Coordenação Motora em Ratos

O objetivo geral deste procedimento é medir a coordenação motora em camundongos. Isso é feito primeiro testando na haste do rotor de aceleração. Em seguida, a coordenação motora é testada na barra onal.

O animal também pode ser testado em hastes estáticas. Por fim, o desempenho nas barras paralelas pode ser medido. Em última análise, podem ser obtidos resultados que mostram se o camundongo tem alguma deficiência na coordenação motora.

Geralmente, os indivíduos novos nesta técnica terão dificuldades devido à dificuldade de colocar corretamente o mouse no aparelho para todos os testes a seguir. Traga os ratos para a sala experimental cinco a 20 minutos antes do teste para garantir que estejam totalmente acordados. A cena da haste do rotor aqui foi construída na Universidade de Oxford.

A haste tem três centímetros de diâmetro com uma série de sulcos paralelos em sua superfície, que ajudam os ratos a segurá-la com mais eficiência. Um flange de cada lado impede que o mouse saia da haste. Eles têm 30 centímetros de diâmetro e seis centímetros de distância.

A haste é fixada a 30 centímetros da base do aparelho. Uma superfície acolchoada macia é colocada na base para amortecer quaisquer quedas antes de iniciar o teste. Prepare a haste do rotor definindo uma velocidade inicial de quatro rotações por minuto e uma taxa de aceleração de 20 rotações por minuto.

Para começar, segure o mouse pela cauda e traga-o em direção à haste em um ângulo de 45 graus abaixo da horizontal. Solte rapidamente o animal quando ele estiver quase tocando a haste. Alternativamente, o mouse pode ser abaixado em um pino e o pino será usado para transferir o animal para a vara.

Inicie a aceleração 10 segundos depois de colocar o mouse na haste e observe a velocidade com que o mouse cai. Se o rato cair antes de cinco segundos e for provavelmente devido a uma má colocação por parte do experimentador, o resultado não deve ser registado e o ensaio reiniciado se o rato cair antes de 10 segundos. Observe o tempo e permita ao animal mais duas tentativas.

Para animais que permanecem nos últimos 10 segundos, registre a velocidade com que o animal cai. Ocasionalmente, o rato pode parar de andar e, conseqüentemente, algum ataque ao redor da haste antes de cair. É útil observar a velocidade dessa ocorrência.

O desempenho é calculado como a velocidade média entre as tentativas. Por exemplo, um mouse que cai antes de 10 segundos uma vez e permanece ligado até 12 rotações por minuto. A segunda vez marca quatro mais 12 divididos por dois, igualando oito rotações por minuto.

A barra horizontal mede a força e a coordenação dos membros de queda, enquanto uma barra de dois milímetros de diâmetro é mais comumente usada. Barras de diâmetro maior podem fornecer pontuações de desempenho mais refinadas. Barras de latão de 38 centímetros de comprimento são mantidas 49 centímetros acima da superfície da bancada por uma coluna de suporte de madeira.

As barras são mantidas sob tensão quando encaixadas nos entalhes dos suportes que são ligeiramente unidos. Comece o teste com a barra de dois milímetros. Segure o mouse pela cauda e coloque-o na bancada em frente ao aparelho.

Deslize-o rapidamente. Para trás cerca de 20 centímetros para alinhar seu corpo perpendicular à barra rapidamente. Levante o animal permitindo que ele segure a barra horizontal no centro apenas com seus quatro poros.

Solte a cauda ao iniciar simultaneamente um cronômetro. Se o mouse não conseguir agarrar a barra e o posicionamento do experimentador pode ser a causa. Não registre a queda e teste novamente o animal após um breve descanso.

Se o mouse cair antes de cinco segundos, e isso aparentemente não se deve à má colocação do experimentador, repita até três vezes na tentativa de obter uma pontuação superior a cinco segundos. Registre o tempo que o mouse cai ou o tempo até que um quatro pobres toque em uma coluna com um tempo máximo de teste de 30 segundos, tome a melhor pontuação como o datu Direito para marcar a barra horizontal. Se a massa cair entre um e cinco segundos, marque um entre seis segundos e 10 segundos.

Marque dois entre 11 segundos e 20 segundos. Marque três entre 21 segundos e 30 segundos. Marque quatro caindo após 30 segundos ou apenas permanecendo na barra até 30 segundos.

Marca cinco, e o mouse também marca cinco se tocar uma extremidade. Suporte com suas quatro portas a qualquer momento durante o teste. Se uma pontuação de cinco for alcançada na barra de dois milímetros, o animal pode ser testado em barras mais grossas após um breve descanso.

O sistema de pontuação para as barras de quatro e seis milímetros é o mesmo que para a barra de dois milímetros, e a pontuação final é o total acumulado. Assim, um mouse que marca cinco na barra de dois milímetros, mas cai da barra de quatro milímetros após 13 segundos. Pontuações cinco mais oito.

Neste teste de coordenação motora, dows ou hastes de madeira de espessura variável, 35 28, 22 15 e nove milímetros de diâmetro, cada um com 60 centímetros de comprimento, afixados por uma pinça G a uma prateleira de laboratório a 60 centímetros do chão. Uma marca é feita a 10 centímetros da extremidade perto do banco para denotar a linha de chegada. Para começar, coloque o mouse na extremidade mais larga da haste mais larga, de costas para a prateleira, registre o tempo que leva para o animal se orientar em direção à prateleira e esse tempo total de trânsito.

Se o mouse virar de cabeça para baixo e se agarrar abaixo da haste durante a orientação, atribua-o arbitrariamente à pontuação máxima de 120 segundos. O animal não é testado nas outras hastes e também recebe um valor máximo de trânsito. Se o mouse cair ou atingir o tempo máximo de teste de 120 segundos após a orientação, não o teste em hastes mais estreitas.

Uma pontuação máxima também é atribuída se o mouse virar de cabeça para baixo enquanto atravessa a haste após a orientação, retorne o mouse para a gaiola inicial e deixe-o descansar antes do teste. A próxima haste menor. Coloque o animal na haste menor, conforme mostrado anteriormente.

Se o mouse cair antes de cinco segundos, substitua-o e permita até mais duas tentativas. Registre o tempo para inverter a haste ou até que o mouse caia. Para montar as barras paralelas suportam duas barras, de um metro de comprimento e quatro milímetros de diâmetro, separadas por 30 milímetros em suporte de madeira.

Colunas 60 centímetros acima do chão. Coloque o mouse no centro das duas barras com seu eixo longitudinal perpendicular às barras. Ambos os poros frontais devem estar em uma barra com ambos os poros posteriores na outra barra.

A pontuação é semelhante à das hastes estáticas. Duas medidas são tomadas: o tempo até que o mouse se oriente 90 graus em relação à posição inicial e o tempo até atingir um dos suportes finais. Da mesma forma, a orientação e o trânsito devem ser alcançados sem que o animal vire de cabeça para baixo, caso contrário, o tempo máximo é alocado.

Se o animal cair antes de cinco segundos, provavelmente é devido a uma má colocação e o animal deve ser testado novamente. Uma haste estática foi originalmente usada para monitorar o progresso da doença em camundongos mutantes com ou sem enriquecimento ambiental em suas gaiolas domésticas. O programa de enriquecimento atrasou drasticamente o início da disfunção motora na haste, que foi paralela a um atraso no início do aperto fraco das costas.

Um sinal geral de camundongos infectados com câncer neurológico e scrapy mostrou uma diminuição no desempenho da barra horizontal a partir da semana 16 após a injeção no teste da haste do rotor a partir da semana 18 e nas hastes estáticas a partir de pelo menos a semana 19. As lesões do hipocampo não tiveram efeito sobre nenhuma medida da capacidade motora, mas 1 2 9 s dois camundongos SV foram prejudicados em relação à tensão C 57 black six na haste do rotor e hastes estáticas após seu desenvolvimento. Esta técnica abriu caminho para os investigadores da doença de Huntington estudarem os efeitos do enriquecimento ambiental em ratinhos mutantes da doença de Huntington.