Name: Modelo murino de impacto cortical controlado para a indução de traumatismo cranioencefálico (Vídeo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-08-16T14:45:00.000+00:00
Duration: 5 min 1 s
Description: Aprenda a induzir traumatismo cranioencefálico em camundongos usando o modelo de impacto cortical controlado. Este método padronizado permite avaliar alterações teciduais, hemorragias e respostas comportamentais em neurociência.

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Este trabalho foi apoiado pelos institutos nacionais de saúde Grant GM117341 e The American College of cirurgiões C. James Carrico Research Fellowship para S.J.S.

Todos os procedimentos foram aprovados pelo Comitê institucional de cuidados e uso de animais da Universidade Northwestern. C57BL/6 camundongos foram comprados no laboratório Jackson e grupo alojado em uma instalação de barreira no centro de medicina comparativa na Northwestern University (Chicago, IL). Todos os animais foram alojados em 12/12 h de luz/ciclo escuro com acesso gratuito à comida e água.
1. induzir anestesia
<ol><li>Anestesie o camundongo com cetamina (125 mg/kg) e xilazina (10 mg/kg) injetado intraperitonealmente.</li>
</ol>2. sinais vitais que monitoram cada 15 minutos
<ol><li>Monitore a temperatura, a frequência respiratória e a cor da pele. O rato deve sentir-se quente ao toque. A pele deve aparecer rosa e bem perfused. A frequência respiratória deve variar 50 – 70 respirs por minuto.</li>
</ol>3. procedimentos pré-cirúrgicos
<ol><li>Pesar todos os ratos no dia anterior à indução da lesão.</li>
	<li>Esterilizar um conjunto de instrumentos cirúrgicos por autoclavagem para cada sujeito experimental. Esterilizar o dispositivo de impacto antes de usar.</li>
	<li>Prepare uma gaiola da recuperação coloc uma gaiola limpa sobre uma almofada de aquecimento elétrica ajustada ao ajuste "baixo" e posicionado em uma maneira tal que os ratos possam se afastar do calor uma vez ambulatory.</li>
	<li>Configurar o teatro operacional dentro de uma capa de fluxo laminar esterilizado.<ol>
<li>Posicione o quadro de operação estereotótaxo.</li>
		<li>Prenda o dispositivo impactante ao frame Stereotaxic.</li>
		<li>Ajuste o dispositivo de accionar com os parâmetros biomecânicos desejados para a velocidade e o tempo de permanência. Nota: neste protocolo uma lesão cerebral grave é descrita utilizando uma ponta de impacto de 3 mm de diâmetro através de uma craniectomia de 5 mm de diâmetro com a velocidade definida em 2,5 m/s e um tempo de permanência de 0,1. Uma escala larga de parâmetros biomecânicos pode ser usada para induzir o espectro cheio de TBI.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Don novo equipamento de proteção pessoal e luvas estéreis.</li>
	<li>Depilar a pele do local operatório usando cortadores elétricos.</li>
	<li>Aplique a pomada opthalmic protetora aos olhos do rato para impedir ferimento e a secagem córneos.</li>
	<li>Coloque o mouse no teatro operacional.</li>
	<li>Prepare a pele com uma esfoliação cirúrgica baseada em iodo alternada com álcool três vezes.</li>
</ol>4. aplicação do impacto cortical controlado
<ol><li>Incise o couro cabeludo 1 cm na linha média com um bisturi expondo o crânio.</li>
	<li>Posicione o mouse dentro de um quadro de operação estereotódico, fixando os ossos temporais bilaterais entre as barras de orelha em miniatura e bloqueando os incisivos dentro de uma pinça de incisão, criando uma preensão de três pontos estável na cabeça do mouse.</li>
	<li>Retrair o couro cabeludo para longe do local operatório com um hemostato ou pinça de travamento para garantir que o couro cabeludo não entra em contato com a broca durante a craniectomia.</li>
	<li>Identifique as suturas sagital e coronal no crânio exposto. Nota: Este protocolo centra a craniectomia 2 mm à esquerda da sutura sagital e 2 mm rostral para a sutura coronal.</li>
	<li>Realize uma craniectomia usando uma broca com uma broca de trefina.<ol>
<li>Para realizar a craniectomia, primeiro ative a broca na velocidade máxima e, em seguida, aplique a broca de trefina perpendicular ao crânio no local da craniectomia.</li>
		<li>Aplique a pressão delicada, mesmo à broca uma vez que o contato é feito com o crânio. Uma ligeira "dar" será sentida uma vez que a broca penetra através do crânio. Não penetre na dura subjacente. Nota: Este protocolo utiliza um bocado de broca do trephine de 5 milímetros para executar o craniectomy.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Use o fórceps e uma agulha hipodérmica do calibre pequeno para remover a aleta do osso, expondo inteiramente o Mater subjacente da dura.</li>
	<li>Gire a ponta do pêndulo para o campo operatório e abaixe-a até que ela faça contato com a dura-máter exposta. Uma vez que o contato é feito o sensor do contato do instrumento fará um tom audível para alertar o cirurgião que o contato estêve feito. Isso marcará o ponto zero do qual a profundidade de deformação é definida. Nota: Este protocolo utiliza uma ponta de impacto de 3 milímetros para gerar uma lesão severa. As pontas tão pequenas quanto 1 milímetro podem ser usadas para aplicar ferimento mais localizado.</li>
	<li>Retraia a ponta impactante e ajuste a profundidade de impacto desejada abaixando a posição do impactor no frame Stereotaxic. Nota: neste protocolo nós descrevemos uma lesão severa ajustando a profundidade da deformação a 2 milímetros.</li>
	<li>Aplique a lesão ativando o pêndulo no dispositivo de acionamento.</li>
	<li>Gire o dispositivo de impacto para fora do campo e retire o animal do quadro estereotódico.</li>
</ol>5. fechamento cirúrgico do local
<ol><li>Controle o sangramento do crânio e a superfície cortical ferida com pressão direta de um aplicador derrubado algodão estéril.</li>
	<li>Seque o crânio com um aplicador de ponta de algodão estéril.</li>
	<li>Feche o couro cabeludo sobre a craniectomia usando um adesivo cirúrgico comercialmente disponível ou sutura de monofilamento. Nota: neste protocolo um adesivo cirúrgico veterinário é usado para fechar o couro cabeludo. A aba óssea não é substituída e é descartada.</li>
</ol>6. cuidados e monitorização pós-operatórios
<ol><li>Administrar analgesia pós-operatória (por exemplo, buprenorfina de liberação sustentada 0,1 – 0,5 mg/kg administrada por via subcutânea fornecendo 72 h de analgesia sustentada).</li>
	<li>Coloque o animal na posição de recuperação de decúbito lateral em uma gaiola pré-aquecida limpa.</li>
	<li>Observe os animais até acordar e móvel, em seguida, devolver cada mouse para a sua gaiola de casa.</li>
	<li>Garanta o acesso gratuito à comida e à água. Ingestão normal de alimentos e água normalmente retomar dentro de uma a duas horas após a lesão.</li>
	<li>Medir o peso corporal a cada três dias durante todo o experimento.</li>
</ol>

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<li>Trahanas, D. M., Cuda, C. M., Perlman, H., Schwulst, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+Activation+of+Infiltrating+Monocyte-Derived+Cells+After+Mild+and+Severe+Traumatic+Brain+Injury%5BTitle%5D)+AND+%22Shock%22%5BJournal%5D)">Differential Activation of Infiltrating Monocyte-Derived Cells After Mild and Severe Traumatic Brain Injury.</a> Shock. 43 (3), 255-260 (2015).</li>
<li>Makinde, H. M., Cuda, C. M., Just, T. B., Perlman, H. R., Schwulst, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Nonclassical+Monocytes+Mediate+Secondary+Injury%2C+Neurocognitive+Outcome%2C+and+Neutrophil+Infiltration+after+Traumatic+Brain+Injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Immunology%22%5BJournal%5D)">Nonclassical Monocytes Mediate Secondary Injury, Neurocognitive Outcome, and Neutrophil Infiltration after Traumatic Brain Injury.</a> Journal of Immunology. 199 (10), 3583-3591 (2017).</li>
<li>Thompson, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Lateral+fluid+percussion+brain+injury%3A+a+15-year+review+and+evaluation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Lateral fluid percussion brain injury: a 15-year review and evaluation.</a> Journal of Neurotrauma. 22 (1), 42-75 (2005).</li>
<li>Marmarou, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+model+of+diffuse+brain+injury+in+rats.+Part+I%3A+Pathophysiology+and+biomechanics%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">A new model of diffuse brain injury in rats. Part I: Pathophysiology and biomechanics.</a> Journal of Neurosurgery. 80 (2), 291-300 (1994).</li>
<li>Reneer, D. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+multi-mode+shock+tube+for+investigation+of+blast-induced+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">A multi-mode shock tube for investigation of blast-induced traumatic brain injury.</a> Journal of Neurotrauma. 28 (1), 95-104 (2011).</li>
<li>Ma, X., Aravind, A., Pfister, B. J., Chandra, N., Haorah, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Animal+Models+of+Traumatic+Brain+Injury+and+Assessment+of+Injury+Severity%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Neurobiology%22%5BJournal%5D)">Animal Models of Traumatic Brain Injury and Assessment of Injury Severity.</a> Molecular Neurobiology. , (2019).</li>
<li>Makinde, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Monocyte+depletion+attenuates+the+development+of+posttraumatic+hydrocephalus+and+preserves+white+matter+integrity+after+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Monocyte depletion attenuates the development of posttraumatic hydrocephalus and preserves white matter integrity after traumatic brain injury.</a> PLoS One. 13 (11), e0202722(2018).</li>
<li>Osier, N. D., Dixon, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Controlled+Cortical+Impact+Model%3A+Applications%2C+Considerations+for+Researchers%2C+and+Future+Directions%5BTitle%5D)+AND+%22Frontiers+in+Neurology%22%5BJournal%5D)">The Controlled Cortical Impact Model: Applications, Considerations for Researchers, and Future Directions.</a> Frontiers in Neurology. 7, 134(2016).</li>
<li>Iaccarino, C., Carretta, A., Nicolosi, F., Morselli, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Epidemiology+of+severe+traumatic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neurosurgical+Sciences%22%5BJournal%5D)">Epidemiology of severe traumatic brain injury.</a> Journal of Neurosurgical Sciences. 62 (5), 535-541 (2018).</li>
</ol>

Os autores não têm conflitos financeiros de interesse.

Existem várias etapas que são críticas para a aplicação de uma lesão confiável e consistente. Primeiro, o mouse deve chegar a um plano profundo de anestesia cirúrgica, garantindo nenhum movimento durante o desempenho da craniectomia. Embora numerosos regimes anestésicos possam ser utilizados para induzir anestesia geral em roedores, os anestésicos que induzem a depressão respiratória, como anestésicos inalatórios, podem resultar em parada respiratória quando combinados com TCE grave. Este protocolo utiliza cetamina (125 ...

Os centros para o controle da doença e a prevenção de ferimento estimam que aproximadamente 2 milhões americanos sustentam um ferimento de cérebro traumático (TBI) cada ano1,2. Na verdade, a TBI contribui para mais de 30% de todas as mortes relacionadas a lesões nos Estados Unidos com custos de saúde chegando a $80000000000 anualmente e quase $4000000 por pessoa por ano, sobrevivendo a um TBI severo3,4,5. O impacto da TBI é destacado pelas complicações neurocognitivas e neuropsiquiátricas de longo prazo significativas sofridas por seus sobreviventes com o início insidioso de deficiências comportamentais, cognitivas e motoras denominadas encefalopatia traumática crônica (CTE) 6 anos de , 7 anos de , 8 . º , 9 anos de , 10. mesmo eventos de concussão subclínicos — os impactos que não resultam em sintomas clínicos — podem levar à disfunção neurológica de longo prazo11,12.
Modelos animais para o estudo da TBI têm sido empregados desde o final dos anos 1800 ' s13. Na década de 1980, foi desenvolvido um pêndulo pneumático com o objetivo de modelar a TBI. Este método é referido agora como o impacto cortical controlado (CCI)14. O controle e a reprodutibilidade do CCI levaram os pesquisadores a adaptar o modelo para uso em roedores15. O nosso laboratório utiliza este modelo para induzir o TBI através de um Impactador disponível comercialmente e dispositivo de acionamento eletrônico16,17. Este modelo é capaz de produzir uma escala larga de Estados clìnica aplicáveis de TBI dependendo dos parâmetros biomecânicos usados. A avaliação histologic de cérebros de TBI depois que uma lesão severa induzida em nosso laboratório demonstra a perda cortical e hippocampal ipsilateral significativa assim como o edema e a distorção contralaterais. Adicionalmente, o CCI produz um comprometimento consistente na função motora e cognitiva, medido por ensaios comportamentais18. As limitações ao CCI incluem a necessidade para a craniotomia e a despesa de adquirir o dispositivo do impactor e de accionar.
Vários modelos adicionais de TBI existem e estão bem estabelecidos na literatura, incluindo o modelo de percussão de fluido lateral, modelo de queda de peso e modelo de lesão de jateamento19,20,21. Embora cada um desses modelos tenha suas próprias vantagens distintas, suas principais desvantagens são a lesão mista, a alta mortalidade e a falta de padronização, respectivamente22. Além disso, nenhum desses modelos oferece precisão, precisão e reprodutibilidade do CCI. Ajustando os parâmetros biomecânicos de entrada para o dispositivo de acionamento, o modelo CCI permite que o investigador controle preciso sobre o tamanho da lesão, profundidade da lesão, e energia cinética aplicada ao cérebro. Isso dá aos investigadores a capacidade de aplicar todo o espectro de TBI para áreas específicas do cérebro. Ele também permite a maior reprodutibilidade do experimento para experimentar.

<table><tbody><tr><td>Solução estéril de xilazina para injeção AnaSed</td><td>LLOYD, Inc.</td><td></td><td></td>5939911020</tr><tr><td>Buprenorfina SR Lab 0,5 mg / mL</td><td>Zoopharm-Wildlife Pharmaceuticals USA</td><td>BSRLAB0.5-182012</td><td></td></tr><tr><td>Micromotor rotativo de alta velocidade KiT0</td><td>Foredom Electric Company</td><td>K.1070</td><td></td></tr><tr><td>Imapact um para estereotaxix CCI</td><td>Leica Biosystems Nussloch GmbH</td><td>39463920</td><td></td></tr><tr><td>Cetathesia Cetamina HCl Injeção USP</td><td>Henry Schein, Inc</td><td>56344</td><td></td></tr><tr><td>Base Estereotáxica Específica para Mouse</td><td>Leica Biosystems Nussloch GmbH</td><td>39462980</td><td></td></tr><tr><td>Trephines para Micro Broca</td><td>Fine Science Tools, Inc</td><td>18004-50</td><td></td></tr></tbody></table>

modelo murino de impacto cortical controlado para a indução de traumatismo cranioencefálico

Murine Model of Controlled Cortical Impact for the Induction of Traumatic Brain Injury

Os centros de controle de doenças e prevenção de lesões estimam que quase 2 milhões pessoas sustentam uma lesão cerebral traumática (TBI) todos os anos nos Estados Unidos. Na verdade, a TBI é um fator contribuinte para mais de um terço de toda a mortalidade relacionada a lesões. No entanto, os mecanismos celulares e moleculares subjacentes à fisiopatologia da TBI são pouco compreendidos. Assim, os modelos pré-clínicos de TCE capazes de replicar os mecanismos de lesão pertinentes à TBI em pacientes humanos são uma necessidade de pesquisa crítica. O modelo controlado do impacto cortical (CCI) de TBI utiliza um dispositivo mecânico para impactar diretamente o córtice exposto. Embora nenhum modelo possa recapitular completamente os padrões de lesões diferentes e a natureza heterogênea da TBI em pacientes humanos, o CCI é capaz de induzir uma ampla gama de TBI clinicamente aplicável. Além disso, CCI é facilmente padronizado permitindo que os investigadores para comparar os resultados através de experimentos, bem como em grupos de investigação. O seguinte protocolo é uma descrição detalhada de aplicar um CCI severo com um dispositivo de impacto comercialmente disponível em um modelo murino de TBI.

O pêndulo monta diretamente no quadro estereotódico, permitindo até 10 μm de resolução para o controle do ponto de impacto, profundidade e penetração. As forças eletromagnéticas empregadas podem transmitir velocidades de impacto variando de 1,5 – 6 m/s. Isto permite a precisão incomparável e a reprodutibilidade sobre a escala inteira do TBI clìnica relevante. Os investigadores podem executar experimentos piloto mudando os parâmetros de lesão, como o tamanho da ponta do pêndulo, a velocidade de impacto e a profundidade de...

Aqui nós descrevemos um protocolo para a indução de ferimento de cérebro traumático murino através de um impacto cortical controlado da abrir-cabeça.

Modelo murino de impacto cortical controlado para a indução de traumatismo cranioencefálico

The Centers for Disease Control and Injury Prevention estimate that almost 2 million people sustain a traumatic brain injury (TBI) every year in the ...

O impacto cortical controlado é fácil de padronizar entre indivíduos e experimentos e permite a aplicação de todo o espectro de lesão cerebral traumática em regiões precisamente definidas do cérebro. Demonstrando este procedimento está Meca Islam, um técnico de pesquisa no meu laboratório. Esta técnica continua sendo a forma mais consistente e reprodutível de induzir lesão cerebral traumática em roedores.Antes de iniciar o procedimento, conecte o dispositivo de impacto ao quadro de operação estereotaxic. Se o dispositivo de atuação com os parâmetros biomecânicos desejados para a velocidade experimental adequada e tempo de poço. Don novos equipamentos de proteção individual e luvas estéreis e confirmar a falta de resposta ao beliscão do dedo do dedo no rato experimental anestesiado.Use cortadores para raspar a pele para o local cirúrgico e aplicar pomada nos olhos do animal. Em seguida, coloque o rato no centro cirúrgico e prepare a pele raspada com três esfregões cirúrgicos sequenciais à base de iodo e álcool. Para induzir uma lesão cerebral cortical controlada, primeiro use um bisturi para fazer uma incisão de um centímetro ao longo da linha média do couro cabeludo para expor o crânio.Retire o couro cabeludo do local de operação e identifique as suturas sagiais e coronais no crânio exposto. Para realizar uma craniectomia, equipe um microdrill com uma broca de trefina de cinco milímetros para ativar a broca em velocidade máxima e aplicar o bit perpendicular ao crânio dois milímetros à esquerda da sutura sagital e dois milímetros rostral à sutura coronal com pressão suave e uniforme. Uma pequena doação será sentida quando a broca penetrar no crânio.Use fórceps e uma agulha hipodérmica de pequeno calibre para remover a aba óssea, expondo totalmente a dura mater subjacente e gire a ponta impactante para o campo operacional. Fixar os ossos temporais bilaterais entre as barras de ouvido em miniatura do quadro estereotaxic e travar os incisivos dentro do grampo incisivo para criar um suporte estável de três pontos na cabeça do mouse. Abaixe a ponta até fazer contato com a dura mater exposta.O sensor de contato do instrumento fará um tom audível para alertar que o contato foi feito. Retire a ponta impactante do ponto zero e baixe a posição do impactador no quadro estereotaxic para definir a profundidade de impacto desejada. Em seguida, ativo o impactador no dispositivo de atuação antes de girar o dispositivo de volta para fora do campo para permitir que o animal seja removido do quadro.Imediatamente após a lesão, aplique pressão direta de um aplicador de algodão estéril no crânio e superfície cortical ferida para controlar qualquer sangramento e use um aplicador fresco para secar o crânio. Feche o couro cabeludo sobre a craniectomia de acordo com as técnicas padrão e administre analgesia pós-operatória. Em seguida, coloque o animal na posição de recuperação do decúbito lateral em uma gaiola limpa pré-aquecida com monitoramento até a recumbência total e meça o peso corporal a cada três dias ao longo do experimento.A entrega da lesão como demonstrado resulta em uma hemorragia intraparenquimal subdural e subaracnóide. A avaliação histológica de seções traumáticas de tecido cerebral após lesão grave revela uma perda cortical e hipocampal ipsilateral significativa, bem como edema e distorção contralateral. A imagem de MR de cérebros gravemente feridos também demonstra perda progressiva de tecido e substituição por fluido cerebra-espinhal.O impacto cortical controlado induz uma lesão confiável e consistente que é capaz de produzir uma ampla gama de lesões cerebrais clinicamente aplicáveis. Nosso método de impacto cortical controlado gera um modelo murino de lesão cerebral traumática grave para análise comportamental e de imagem e produz tecidos para análise molecular e celular.

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Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neurociência

Este vídeo demonstra o procedimento para induzir uma lesão cerebral traumática de crânio aberto em um camundongo, fazendo uma incisão na linha média do crânio, perfurando o crânio e removendo a aba óssea para expor o córtex cerebral e aplicando alta pressão para induzir trauma. A ferida é então suturada para preparar o modelo de camundongo para experimentos subsequentes.

Gerando um modelo de camundongo com lesão cerebral traumática usando uma sonda impactadora

Este vídeo demonstra o procedimento para induzir traumatismo cranioencefálico (TCE) em um modelo de camundongo. Um camundongo anestesiado com o crânio exposto é levado para criar uma abertura no crânio e, em seguida, uma lesão cortical controlada é induzida usando um dispositivo de impacto. A lesão danifica o tecido cerebral, causando comprometimento da função cognitiva e da coordenação motora.

Gerando um modelo de camundongo de lesão cerebral traumática usando um dispositivo impactador

Fonte: Macheda, T., et. al. Modelo de cabeça fechada controlado eletromagnética de lesão cerebral traumática leve em camundongos. J. Vis. Exp. (2022)Este vídeo demonstra o procedimento para induzir um traumatismo craniano fechado em um modelo de camundongo usando um quadro estereotáxico. O impacto controlado replica lesões cerebrais traumáticas leves, permitindo que os pesquisadores estudem os efeitos neurológicos e a recuperação medindo os reflexos e o comportamento pós-lesão.

Indução de Traumatismo Cranioencefálico Leve em Modelo de Camundongo

Lesões cerebrais traumáticas (TCEs) continuam sendo um sério problema de saúde. Utilizando o modelo de cirurgia de impacto cortical controlado, pesquisas sobre os efeitos do TCE e possíveis métodos de tratamento podem ser realizadas.

Controlado Modelo Impact Cortical para lesão cerebral traumática

Os atletas absorvem várias centenas de lesões cerebrais traumáticas leves (mTBI) / concussões todos os anos; No entanto, a conseqüência disso no cérebro é mal compreendida. Portanto, um modelo animal de mTBI único e repetitivo que replica consistentemente sintomas clinicamente relevantes fornece os meios para avançar o estudo do mTBI e concussão.

Um modelo de mouse de lesões cerebrais traumáticas leves simples e repetitivas

Este protocolo demonstra as metodologias para um modelo do rato do ferimento de cérebro traumático do abrir-crânio e a transplantação de pilhas células-derivadas pluripotentes induzidas humanas cultivadas no local da lesão. Os testes comportamentais e histologic dos resultados destes procedimentos são descritos igualmente em breve.

Modelo de impacto cortical controlado da lesão cerebral do rato com transplantação terapêutica de células neurais pluripotentes induzidas humanas da pilha de haste

Hemorragia intraparenquimatosa e neuroinflamação acompanhadas de contusão cerebral podem desencadear lesão cerebral secundária grave. Este protocolo detalha um modelo de impacto cortical controlado por camundongos (CCI), permitindo que os pesquisadores estudem a contusão por hemorragia e respostas imunes pós-traumáticas e explorem possíveis terapêuticas.

Um modelo pré-clínico de impacto cortical controlado para hemorragia traumática, contusão e neuroinflamação

O protocolo descreve traumatismo cranioencefálico leve em modelo de camundongo. Em particular, um protocolo passo-a-passo para induzir um traumatismo cranioencefálico fechado na linha média leve e a caracterização do modelo animal são totalmente explicados.

Modelo de Lesão Cerebral Traumática Leve em Camundongos com Controle Eletromagnético

Aqui, apresentamos um protocolo para estabelecer um modelo animal de traumatismo cranioencefálico fechado replicando o resultado da neuroimagem de lesão cerebral traumática leve não complicada com a estrutura cerebral preservada na fase aguda e atrofia cerebral de longo prazo. A ressonância magnética longitudinal é o principal método usado para evidência.

Desenvolvimento de um modelo de traumatismo cranioencefálico leve não complicado modificado pelo método de perda de peso e evidenciado por ressonância magnética

Lateral fluido percussão (LFP), um modelo estabelecido de lesão cerebral traumática em camundongos, é demonstrada. LFP preenche três critérios principais para modelos animais: relevância, fiabilidade, validade e clínicos. O procedimento, que consiste em craniotomia cirúrgico, a fixação do cubo seguida de indução de lesão, resultando em lesões focais e difusas, é descrito.

Percussão Fluid lateral: Modelo de Lesão em Ratos

Aprenda a induzir traumatismo cranioencefálico em camundongos usando o modelo de impacto cortical controlado. Este método padronizado permite avaliar alterações teciduais, hemorragias e respostas comportamentais em neurociência.

Modelo murino de impacto cortical controlado para a indução de traumatismo cranioencefálico

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