Предлагаем ознакомиться с материалами выпуска за май 2013 года JoVE — The Journal of Visualized Experiments.
Что появилось первым: курица или яйцо? В этом фундаментальном вопросе отсутствует жизненно важный компонент репродукции: сперматозоид. Прежде чем что-либо произойдет, сперматозоид должен доплыть до яйцеклетки и слиться с ней. Эти события в значительной степени зависят от путей передачи сигнала, опосредованных ионами кальция (Ca2+). Следовательно, для изучения функции сперматозоидов полезно измерять изменения концентрации Ca2+ в сперматозоидах. Это может быть осуществлено с помощью кальций-чувствительных флуоресцентных красителей, которые Mata-Martínez et al. используют в четырех флуорометрических методах для мониторинга динамики Ca2+ в сперматозоидах человека: традиционной флуориметрии, флуориметрии с остановленным потоком, проточной цитометрии и визуализации одиночных клеток.
Переходя к другой части мужской репродуктивной системы, мы представляем статью, посвященную раку предстательной железы — одной из ведущих причин смерти от рака среди мужчин в Соединенных Штатах. Было недавно показано, что в клетках рака предстательной железы человека фермент, называемый аргинин-деиминазой (ADI), индуцирует аутофагию — механизм гибели клеток, при котором клетка фактически поглощает собственные компоненты. Для дальнейшего изучения этого механизма Changou et al. разработали метод визуализации с использованием количественной 3D-флуоресцентной микроскопии, что позволило им точно отслеживать морфологические изменения в клетках при прохождении процесса аутофагии. Данная методика поможет исследователям в изучении потенциальных терапевтических средств для лечения рака предстательной железы.
В журнале JoVE Bioengineering в предыдущих статьях были представлены методы выделения шелковых желез пауков, получения рекомбинантных белков паучьего шелка в бактериях и прядения очищенных белков в волокна для потенциального применения в биомедицине (Jeffrey et al., 2011; Hsia et al., 2012). В этом месяце Lang et al. представляют новое применение паучьего шелка: создание устройств для фильтрации воздуха с использованием нетканого полотна из электроформованных рекомбинантных белков паучьего шелка. Если коммерческие фильтры покрыть слоем паучьего шелка, их эффективность фильтрации может повыситься. Авторы демонстрируют способы электроформования волокон, обработки нетканых шелковых полотен и анализа полотен с помощью сканирующей электронной микроскопии (СЭМ). В завершение авторы демонстрируют воздухопроницаемость и эффективность фильтрации.
В JoVE Clinical & Translational Medicine Heckman et al. демонстрируют метод определения минимальной дозы ультрафиолетового излучения, вызывающей эритему (солнечный ожог) у конкретного человека. УФ-излучение часто применяется для лечения различных заболеваний кожи, таких как псориаз, акне и экзема; поскольку чувствительность к УФ-излучению индивидуальна, данный метод позволяет определить подходящую дозу для терапии. Для контроля площади и продолжительности УФ-облучения кожи используется патч Daavlin. На следующий день оцениваются изменения цвета кожи для определения минимальной дозы УФ, необходимой для возникновения эритемы.
В JoVE Neuroscience Piotrowska-Nitsche и Caspary демонстрируют, как культивировать срезы эмбрионального нейроэпителия мыши и проводить прижизненную визуализацию различных флуоресцентных маркеров. Этот метод позволяет исследователям наблюдать за поведением клеток, например, за делением одиночных клеток, in situ и в режиме реального времени.
Вы только что ознакомились с некоторыми из главных материалов JoVE за май. Посетите веб-сайт, чтобы просмотреть полные статьи, а также многие другие публикации в JoVE: The Journal of Visualized Experiments.