В настоящем документе приводится подробное описание того, как построить животное модель анхепатической фазы (ишемия печени) у крыс, чтобы облегчить фундаментальные исследования ишемии-реперфузии травмы после трансплантации печени.
Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.
Методическая статья
Травма ишемии-реперфузии органов путем моделирования гемодинамических изменений в модели трансплантации печени крыс
В этой статье
Краткое содержание
Аннотация
Ортопедическая трансплантация печени (OLT) у крыс является проверенной и проверенной моделью животных, используемой для предоперационных, интраоперационных и послеоперационных исследований, включая ишемию-реперфузию (ИРИ) внегепатических органов. Эта модель требует многочисленных экспериментов и устройств. Продолжительность анхепатической фазы тесно связана со временем развития ИРИ после трансплантации. В этом эксперименте мы использовали гемодинамические изменения, чтобы вызвать экстрагепатические повреждения органов у крыс и определили максимальное время толерантности. Время до самой тяжелой травмы органа варьировалось для различных органов. Этот метод можно легко воспроизвести, а также может быть использован для изучения ИРИ внегепатических органов после трансплантации печени.
Введение
Ишемия-реперфузия травмы (ИРИ) является распространенным осложнением после трансплантации печени. Печеночная ИРИ является патологическим процессом, включающим ишемию опосредованное повреждение клеток и ненормальное ухудшение реперфузии печени. Печеночная ИРИ и местный врожденный иммунный ответ можно разделить на горячие и холодные ИРИ, в соответствии с различиями в клиническойсреде 1. Горячая ИРИ вызвана травмой стволовых клеток, как правило, в результате трансплантации печени, шока и травмы2. Холодный ИРИ является осложнением трансплантации печени, вызванной эндотелиальных клеток и периферической циркуляции
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Протокол
Комитет по этике животных одобрил эксперимент Гуанси-Медицинского университета (No20190920). Все животные были поставлены Центром экспериментов на животных Гуанси медицинского университета. Мы использовали SPF мужчин Sprague Доули крыс (200-250 г, 10-12 недель), хранится под комнатной температурой 25 ± 2 градусов по Цельсию и влажность 50 ± 10%. Кормление было прекращено за 24 часа до операции; однако вода была обеспечена.
ПРИМЕЧАНИЕ: Один оператор может выполнять все операции без микрохирургии или хирургического микроскопа.
1. Операция
- После взвешивания, анестезировать крыс с изофлюран (5%) с помощью а....
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Результаты
Толерантность крыс к ишемии печени
В этой модели животных, сайты, на которых кровеносные сосуды были лигатированы во время работы показаны на рисунке 1. Крысы были случайным образом разделены на 5 групп для ишемии в течение 15 минут (I15 группы), 30 минут (I30 группы), 45 минут (I45 группы), 60 минут (I60), и фиктивной группы, с 10 крыс в каждой группе. Выживаемость каждой группы наблюдалась через 14 дней после операции. Все крысы выжили в группе I15, группе I30 и фиктивн.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Обсуждение
OLT у крыс является идеальной моделью для изучения сохранения органов в области трансплантации печени, ИРИ, отторжения трансплантата, иммунной толерантности, патологии трансплантации и фармакологии, гомотрансплантации и ксенотрансплантации. В настоящее время он широко используется в экспериментальных исследованиях трансплантации печени.
В ходе экспериментальных исследований мы впервые ввели интраперитонеаленную анестезию пентобарбитала натрия и обнаружили, что это привело к высокой послеоперац.......
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Раскрытие информации
Авторы этой рукописи не имеют конфликта интересов, чтобы раскрыть.
Благодарности
Мы хотели бы отметить полезные предложения д-ра Вэнь-тао Ли и д-ра Цзи-хуа Ву из Второй аффилированной больницы Гуанси-Медицинского университета. Авторы хотели бы поблагодарить наших товарищей по команде за полезные комментарии и дискуссии. Авторы также хотели бы поблагодарить анонимных рецензентов и редакторов JoVE за их комментарии. Особая благодарность должна идти к родителям доктора Yuan для их непрерывной поддержки и ободрения. Работа была поддержана Фондом естественных наук Нинбо (2014A610248).
....Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Материалы
| Имя | Компания | Каталожный номер | Комментарии |
|---|---|---|---|
| 4% раствор параформальдегида | Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd | P804536 | |
| сушильная печь на воздухе | Shanghai Binglin Electronic Technology Co., Ltd. | BPG | |
| Аланинаминотрансфераза (АЛТ) Kit | Elabscience Biotechnology Co.,Ltd | E-BC-K235-S аммиак | |
| Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd | 10002118 | ||
| амилаза Kit | Elabscience Biotechnology Co.,Ltd | E-BC-K005-M | |
| безводный этанол | Sinopharm Chemical Reagents Co. | Ltd 100092183 | |
| животных аппарат для анестезии | Shenzhen Ruiwode Life Technology Co. Ltd | R640 | |
| набор аспартатаминотрансферазы (АСТ) | Rayto Life and Analytical Sciences Co., Ltd. | S03040 | |
| . | SIEMENS AG FWB:SIE, NYSE:SI Co., Ltd. | 2400 | |
| Биосистемы (когда необходимо) | Chengdu Taimeng Electronics Co., Ltd. | BL-420F | |
| Центрифуга | Baiyang Medical Instrument Co., Ltd. | Защитное стекло BY-600A | |
| Jiangsu Shitai Experimental Equipment Co. Ltd | 10212432C | ||
| креатинин Kit | Rayto Life and Analytical Sciences Co., Ltd. | S03076 | |
| обезвоживающая машина | Венгрия 3DHISTECH Co., Ltd | Закладочная машина Donatello серии 2 | |
| Hubei Xiaogan Kuohai Medical Technology Co., Ltd. | KH-BL1 | ||
| замороженная машина | Wuhan Junjie Electronics Co., Ltd | JB-L5 | |
| раствор гематоксилин-эозинового красителя | Wuhan Saiwell Biotechnology Co., Ltd | G1005 | |
| высокоэффективный парафин | воск Shanghai huayong paraffin wax co., Ltd | Q/YSQN40-91 | |
| соляная кислота | Sinopharm Chemical Reagents Co. Ltd | 10011018 | |
| щипцы для интраокулярных линз (ИОЛ) | Guangzhou Guangmei Medical Equipment Co., Ltd. | JTZRN | |
| Isoflurane | Shenzhen Ruiwode Life Technology Co. Ltd | — | |
| микроножницы (когда необходимо) | Шанхайская фабрика хирургических инструментов | WA1010 | |
| иглодержатели | Шанхайская фабрика хирургических инструментов | J32010 | |
| нейтральная резинка | Shanghai Huashen Healing Equipment Co., Ltd. | — | |
| нормальный оптический микроскоп | Nikon Instrument Shanghai Co., Ltd | Nikon Eclipse CI | |
| офтальмологические щипцы | Шанхайская фабрика хирургических инструментов | J3CO30 | прямые |
| офтальмологические щипцы | Шанхайская фабрика хирургических инструментов | JD1060 | гибка |
| офтальмологических ножниц | Шанхайская фабрика хирургических инструментов | J1E0 | |
| патологический слайсер | Shanghai Leica Instrument Co., Ltd | RM2016 | |
| пипетки | Dragon Laboratory Instruments Co., Ltd. | ||
| втягивающие устройства | Beijing Jinuotai Technology Development Co., Ltd. | Сканер JNT-KXQ | |
| Венгрия 3DHISTECH Co., Ltd | Pannoramic 250 | ||
| слайд | Wuhan Saiwell Biotechnology Co., Ltd | G6004 | |
| ксилол | Sinopharm Chemical Reagents Co., Ltd | 1330-20-7 |
Ссылки
- Dar, W. A., Sullivan, E., Byon, J. S., Eltzschig, H., Ju, C. Ischaemia reperfusion injury in liver transplantation: Cellular and molecular mechanisms. Liver International. 39 (5), 788-801 (2019).
- Qiao, P. F., Yao, L., Zhang, X. C., Li, G. D., Wu, D. Q.
Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.
Перепечатки и разрешения
