Для просмотра этого контента требуется подписка на JoVE. Войдите или начните свой бесплатный пробный период.

Исследовательская статья

Терапевтическая эффективность 308-нм эксимерного лазера в сочетании с матрином при витилиго путем модуляции сывороточных иммуноглобулинов и воспалительных цитокинов

368 просмотров

⸱

DOI:

10.3791/70371

⸱

10 марта 2026 г.

 ,  ,  ,  , 
1Department of Dermatology, Xingtai People's Hospital

В этой статье

Краткое содержание

Совместное использование 308-нм эксимерного лазера и оральной матрины значительно усилило репигментацию при витилиго, способствуя регенерации меланоцитов и восстановлению иммунного баланса. Эта двухмодальная терапия снизила уровень провоспалительных цитокинов, нормализовала иммуноглобулины, повысила уровень IL-10 и достигла высшей клинической эффективности с отличной безопасностью и толерантностью к пациентам.

Аннотация

Витилиго — это хроническое аутоиммунное депигментирующее заболевание, характеризующееся потерей функциональных меланоцитов и аномальной активацией иммунитета. Несмотря на достижения в фототерапии, клинические реакции остаются непоследовательными, в основном из-за постоянной воспалительной активности и недостаточной регуляции иммунитета. В этом исследовании изучалась терапевтическая эффективность и иммунологические механизмы сочетания 308-нм эксимерной лазерной фототерапии с оральной матриной — натуральным алкалоидом, обладающим противовоспалительными и иммунорегуляторными свойствами. Всего 232 пациента с несегментным витилиго были проспективно назначены на монотерапию эксимерным лазером или комбинированную терапию в течение 12 недель. Клиническое улучшение оценивалось с помощью индекса оценки области витилиго (VASI), а иммуноглобулины и цитокины в сыворотке анализировали для оценки системной иммуномодуляции. Обе схемы обеспечивали значительную репигментацию, однако комбинированная терапия достигла более выраженного снижения VASI (с 9,72 ± 3,24 на исходном уровне до 5,76 ± 2,18 после лечения), чем только эксимерный лазер (с 9,68 ± 3,37 до 6,63 ± 2,34, стр . < 0,001). Доля пациентов с отличной или хорошей репигментацией была заметно выше при комбинированной схеме (76,7%) по сравнению с монотерапией (58,7%). Параллельно уровни IgG в сыворотке заметно снизились (13,72 ± 2,64 г/л до 11,85 ± 2,18 г/л, p < 0,001), тогда как уровень IgA умеренно вырос (2,07 ± 0,68 г/л до 2,23 ± 0,61 г/л, p = 0,041). Провоспалительные цитокины, включая IFN-γ и IL-17, были значительно снижены ( оба p < 0,001), а противовоспалительные IL-10 увеличились с 8,3 ± 3,2 до 12,9 ± 3,5 pg/mL (p < 0,001). Улучшение VASI коррелировало обратно с изменениями IFN-γ (r = –0,482, p < 0,05) и IL-17 (r = –0,451, p < 0,001), а также положительно с повышением IL-10 (r = 0,503, p < 0,001). Эти результаты показывают, что матрин повышает эффективность эксимерного лазера, способствуя регенерации меланоцитов и восстановлению иммунного равновесия, устанавливая двухмодальную стратегию на основе биомаркеров для точного и долговечного управления витилиго.

Введение

Витилиго — хроническое приобретённое дегигментирующее кожное заболевание, характеризующееся селективным разрушением или дисфункцией эпидермальных меланоцитов, что приводит к развитию хорошо выраженных белых макул разного размера и распределения. Он поражает примерно 0,5–2% мирового населения, без гендерных или расовых предпочтений, и часто проявляется до 30лет 1,2 года. Хотя заболевание не угрожает жизни, оно накладывает значительную психосоциальную и эмоциональную нагрузку, значительно снижая самооценку, социальное функционирование и качествожизни 3. Патогенез витилиго остаётся многофакторным и неполностью проясненным, включая генетическую предрасположенность, окислительный стресс, аутоиммунные реакции и нейрогуморальныефакторы 4. Недавние данные особенно подчеркивают ключевую роль иммунной дисрегуляции как в начале, так и в поддержании разрушения меланоцитов 5,6. В эпидермисе аутореактивные цитотоксические Т-лимфоциты CD8⁺ распознают меланоцитные антигены, такие как тирозиназа и gp100, высвобождая перфорин и гранзим B для индуцированияапоптоза 7. Одновременно провоспалительные цитокины, включая интерферон-γ (IFN-γ), фактор некроза опухолей α (TNF-α), интерлейкин-1β (IL-1β), IL-6 и IL-17, усиливают воспалительный каскад, ухудшают выживаемость меланоцитов и подавляют миграцию пигментныхклеток 8. Дисбаланс между регуляторными Т-клетками (Treg) и эффекторными Т-клетками дополнительно способствует устойчивой иммунной активации и потере меланоцитов9. Таким образом, терапевтические стратегии, направленные как на стимулирование регенерации меланоцитов, так и на восстановление иммунного гомеостаза, имеют большое клиническое значение.

Помимо локальных иммунных аномалий, всё больше данных указывает на то, что витилиго представляет собой системное аутоиммунное заболевание. Изменения уровня иммуноглобулинов в сыворотке (IgG, IgA и IgM) были зафиксированы у пациентов, что отражает генерализованную активацию B-клеток и аномальный гуморальныйиммунитет 10,11. Нарушение выработки иммуноглобулина может способствовать формированию аутоантител против специфических к меланоцитарным антигенам, усугубляя повреждение тканей. Кроме того, цитокиновая среда у пациентов с витилиго часто демонстрирует повышенный уровень IFN-γ, TNF-α, IL-6, IL-17 и IL-23, что указывает на системную иммунную активацию за пределами кожипоражений 12,13. Эти иммунные медиаторы не только выступают в роли патогенных факторов, но и коррелируют с активностью болезни и терапевтическим ответом, что делает их потенциальными биомаркерами для мониторингалечения 14. Поэтому вмешательства, способные восстановить иммунный баланс — за счёт модуляции как клеточных, так и гуморальных иммунных ответов — могут обеспечить лучшие и устойчивые клинические результаты. Несмотря на наличие топических кортикостероидов, ингибиторов кальциневрина, системных иммуносупрессантов и фототерапии, эффективность лечения остаётся неудовлетворительной для многих пациентов, особенно у тех, у кого есть обширное или рефрактерноезаболевание 15. В результате комбинированные подходы, направленные на несколько патофизиологических механизмов, получили популярность в последние годы.

Фототерапия давно является краеугольным камнем в управлении витилиго. Среди различных методов 308-нм эксимерный лазер (EL) стал одним из наиболее целенаправленных и эффективных вариантов для локализованноговитилиго 16,17. Он доставляет монохроматическое UVB-излучение на расстоянии 308 нм непосредственно к депигментированным поражениям, тем самым стимулируя пролиферацию и миграцию меланоцитов из волосяных фолликулов, минимизируя воздействие окружающей здоровойткани 18. По сравнению с традиционным узкополосным УФ-лазером, эксимерный лазер обладает быстрым началом репигментации, сокращением времени совокупного воздействия и улучшенным профилем безопасности19,20. Механистически низкодозовое облучение 308-нм индуцирует локальную иммуномодуляцию, снижая активность клеток Лангерганса в эпидермии, увеличивая инфильтрацию Treg и усиливая меланогенез за счёт апрегуляции тирозиназы и связанного с микрофтальмией транскрипционного фактора (MITF)21. Однако ответы остаются переменными, и многие пациенты не достигают полной репигментации. Чрезмерное или длительное облучение может парадоксально вызвать выброс воспалительных цитокинов — таких как IL-1β, IL-6 и TNF-α — и дальнейшее повреждениемеланоцитов 22,23. Таким образом, хотя лечение эксимерным лазером эффективно стимулирует регенерацию меланоцитов, её эффективность может быть ограничена одновременной воспалительной активацией. Эта двойственность подчёркивает необходимость дополнительных методов терапии, способных уменьшать воспаление и повышать иммунную толерантность во время фототерапии.

Matrine, натуральный алкалоид хинолизидина, извлекаемый из Sophora flavescens (Ku Shen), недавно привлёк значительное внимание как иммуномодуляторное и противовоспалительное средство с низкойтоксичностью 24,25. Экспериментальные исследования показали, что матрин может подавлять сигнальные пути NF-κB и JAK/STAT, снижать выработку провоспалительных цитокинов (включая IFN-γ, TNF-α и IL-6), а также способствовать экспрессии противовоспалительных медиаторов, таких какIL-10 26. При иммунно-связанных заболеваниях матрин показал эффективность в модулировании дифференцировки Th1/Th17, усилении функции регуляторных Т-клеток и нормализации профилей иммуноглобулинов27,28. Кроме того, матрин проявляет антиоксидантное и антиапоптотическое действие, которое может защищать меланоциты от повреждений, вызванных окислительнымстрессом 29. Хотя эти свойства делают матрин привлекательным кандидатом для аутоиммунных кожных заболеваний, немногие исследования изучали её роль в витилиго. Сочетание матрин с фототерапией представляет собой новый терапевтический подход: матрин может ослаблять воспалительные микроокружения, стабилизировать гомеостаз меланоцитов и усиливать лазерно-индуцированный меланогенез. Кроме того, системная иммунорегуляторная активность матрины может дополнять локальные эффекты эксимерного лазера, обеспечивая синергетическую клиническую пользу. Насколько нам известно, ни одно предыдущее клиническое исследование не изучало комплексное использование 308-нм эксимерного лазера и матрин при витилиго или не оценивало его иммунологические корреляты с помощью профилирования сывороточных биомаркеров.

Исходя из этой логики, мы выдвинули гипотезу, что сочетание 308-нм эксимерного лазера и матрин обеспечит лучшую терапевтическую эффективность по сравнению с монотерапией эксимерным лазером, одновременно способствуя регенерации меланоцитов и подавляя аномальную иммунную активацию. В частности, мы предположили, что дополнительное введение матрина повысит клиническую репигментацию, уменьшит уровень иммуноглобулина в сыворотке (IgG, IgA и IgM) к физиологическому балансу и снизит воспалительные цитокины, такие как IFN-γ, TNF-α и IL-17, одновременно увеличивая противовоспалительные цитокины. В этом исследовании мы систематически оценивали клинические результаты, иммунологические параметры и их корреляции у пациентов с витилиго, проходящих лечение этой комбинированной терапией. Новизна этого исследования заключается в его двойном механистическом фокусе — локальной фотобиологической стимуляции и системной модуляции иммунитета — а также в интеграции количественного анализа биомаркеров для выяснения терапевтических механизмов. Проясняя иммунорегуляторное влияние матрин в сочетании с таргетной фототерапией, наша работа направлена на создание основанной на доказательствах для новой терапевтической парадигмы в управлении витилиго. В конечном итоге эти результаты могут продвинуть область к точным, иммунно-управляемым фототерапевтическим стратегиям, которые обеспечивают не только репигментацию, но и долгосрочную стабилизацию заболевания и профилактику рецидивов.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Протокол

Это исследование проводилось в соответствии с этическими принципами Хельсинкской декларации и институциональными нормативами, регулирующими исследования на людях. Исследование было проведено в соответствии с этическими принципами Хельсинкской декларации и одобрено Этическим комитетом Синтайской народной больницы, отделением дерматологии (ID одобрения: 2021[029]). Все участники предоставили письменное информированное согласие перед участием.

Отбор пациентов
Всего 232 пациента с клинически диагностированным витилиго были зарегистрированы в течение трёх лет с января 2021 по декабрь 2023 года. Всем участникам был поставлен диагноз несегментарный витилиго (генерализованный или локализованный тип) и классифицированы как стабильные или прогрессирующие на основе отсутствия или наличия новых поражений в течение 3 месяцев до зачисления. Продолжительность заболевания и распределение поражения фиксировались на исходном уровне. Критерии зачисления включали людей в возрасте от 18 до 65 лет со стабильным или прогрессующим витилиго, подтвержденным дерматологами с помощью клинического обследования, освещения лампой Вуда и дермоскопии. Критериями исключения были беременность, лактация, фотоаллергические расстройства, системные аутоиммунные заболевания, тяжёлая депрессия печени или почек, а также предварительное применение системных кортикостероидов, иммунодепрессантов или фототерапии в течение 3 месяцев. Все процедуры проводились под постоянным этическим контролем, обеспечивая комфорт и безопасность пациента на протяжении всего курса лечения.

Обзор исследования и рабочий процесс лечения
Общий рабочий процесс исследования, включая регистрацию пациентов, распределение групп, последующую оценку и анализ биомаркеров, иллюстрируется на рисунке 1. Подходящие участники были распределены в соотношении 1:1 к одной из двух параллельных групп исследования: монотерапии 308-нм эксимерным лазером (только эксимерным лазером; n = 116) и группе комбинированной терапии (308-нм эксимерный лазер плюс пероральная матрина; n = 116). Распределение групп проводилось с использованием компьютерно сгенерированной случайной последовательности, подготовленной независимым сотрудником исследователей, не участвовавшим в оценке результатов; Назначения размещались в последовательно, запечатанных конвертах и открывались после регистрации для определения распределения лечения. Терапевтический рабочий процесс состоял из трёх основных этапов: (1) базовая оценка и документация, (2) 12 недель активного лечения согласно назначенной схеме и (3) оценка после лечения, включая лабораторное тестирование иммуноглобулинов и воспалительных цитокинов в сыворотке. Каждому пациенту был разработан стандартизированный план лечения, одинаковые интервалы последующего наблюдения и единообразные процедуры лабораторного анализа. Клинические фотографии и VASI-оценка проводились дерматологами, не обращая внимания на распределение лечения. Все процедуры проводились в кабинете дерматологической фототерапии Народной больницы Синтайя при контролируемых условиях окружающей среды (температура в комнате 22–24 °C, относительная влажность 40%–60%).

Подготовка участка обработки
Перед каждой лазерной сессией целевые депигментированные участки аккуратно очищались стерильным физиологическим раствором и вытирались медицинской марлей без ворса. Была осмотрена кожа поражений для подтверждения отсутствия инфекции, экскориации или корки. Если за один визит лечили более одного поражения, каждое из них подготовлялось и лечилось последовательно. Поражения, превышающие одно поле облучения, делились на соседние поля облучения, а окружающая нормальная кожа была защищена непрозрачным УФ-блокирующим листом для каждого поля для минимизации ненужного воздействия. Пациентам рекомендовали избегать местных средств, фотосенсибилизирующей косметики или духов в течение 24 часов до процедуры. Защитные очки носили как пациент, так и оператор на протяжении всей процедуры.

Процедура облучения эксимерным лазером 308 нм
Использовалась монохроматическая 308-нм ксенон-хлоридная (XeCl) эксимерная лазерная система. Все лазерные сеансы проводились двумя обученными дерматологами по стандартизированному протоколу для обеспечения стабильного энергетического выхода, расстояния облучения и воспроизводимости. Выход прибора проверялся с помощью калиброванного УФ-измерителя мощности перед каждым днём обработки, а все системы проходили еженедельную калибровку сертифицированным техником для поддержания погрешности ниже ±5%. Перед первым облучением минимальная доза эритемы (MED) для каждого пациента определялась путём постепенного применения доз (100–400 мДж/см²) к небольшим участкам на внутренней стороне предплечья и оценки реакции эритемы через 24 часа; Результаты фотографировались и записывались в карты пациентов. В дополнительной таблице 1 приведена представительная документация MED и график корректировки дозы по сессиям. MED был определен как минимальная тестовая доза, вызывающая чётко различимую, однородную эритему через 24 часа. Начальная доза лечения была установлена на уровне 80%–90% от индивидуального MED, а последующие изменения дозы следовали заранее определённому алгоритму, основанному на 24-часовом ответе на эритему предыдущей сессии (увеличение на 10–20% при отсутствии или лёгкой эритеме, сохранение той же дозы при умеренной эритеме и снижение на 10–20% при образовании мозолей или значительной боли). Начальная терапевтическая доза была установлена на уровне 150–250 мДж/см² (примерно 80%–90% от индивидуального MED). Каждая сессия начиналась с удобного сидения пациента на регулируемом кресле. Лазерный прибор держался перпендикулярно (90°) коже на расстоянии 10–15 см, а круглые или прямоугольные поля облучения были выровнены так, чтобы полностью покрыть депигментированные участки с минимальным перекрытием. Облучение длилось 1–3 с на каждое поле экспозиции, в зависимости от флуэнса. Дозы впоследствии увеличивались на 10–20% за сеанс согласно предыдущему ответу на эритему; Если наблюдалась умеренная эритема, предыдущая доза сохранялась, тогда как волдыри или боль требовали снижения на 10–20%. Максимальная доза не превышала 2000 мДж/см². Каждая сессия охватывала все видимые поражения и длилась 10–20 минут, в зависимости от степени. Процедуры проводились два раза в неделю с интервалом не менее 72 часов между сессиями в течение общего периода 12 недель (24 сеанса). После облучения был нанесен тонкий слой стерильного геля на основе алоэ для снятия местной эритемы. Пациентам было рекомендовано избегать воздействия солнца в течение 48 часов и использовать солнцезащитный крем широкого спектра действия (SPF >30) на протяжении всего лечения. Поражения с репигментацией >50% сохранялись при тех же параметрах до достижения стабильной пигментации.

Оральное введение матрины
В комбинированной группе был подготовлен стерильный водный экстракт корней Sophora flavescens в соответствии с Китайской фармакопеей (издание 2020 года)30 и стандартизирован до концентрации 5 мг/мл с чистотой ≥98%, подтвержденной высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ). Раствор хранился при 4 °C в янтарных стеклянных бутылках для предотвращения фотодеградации. Случайные партийные тесты подтвердили концентрацию алкалоидов (5 ± 0,3 мг/мл) и микробную стерильность. Каждый пациент получал матринный раствор перорально в дозе 0,3 г (60 мл) дважды в день в течение 12 недель, синхронизированно с графиком лазерного лечения. Дозировка была выбрана на основе предыдущих фармакологических данных, демонстрирующих эффективную иммуномодуляцию с благоприятным профилем безопасности при хронических воспалительныхдерматозах 31,32. Пациентам рекомендовали принимать раствор через 30 минут после еды, чтобы минимизировать дискомфорт в желудочно-кишечном тракте и избегать алкоголя, крепкого чая и острой пищи во время терапии, чтобы снизить печёночную нагрузку. Лёгкую тошноту или усталость контролировали за счёт небольшого количества тёплой воды. Соблюдение лечения оценивалось с помощью дневника приема лекарств и проверки возврата бутылок при каждом повторном приёме. Безопасность оценивалась на каждом визите с помощью структурированного изучения симптомов и документирования побочных эффектов, включая дискомфорт в желудочно-кишечном тракте, усталость и любые признаки, указывающие на печёночную непереносимость. В период наблюдения не разрешалось принимать дополнительные системные препараты, местные кортикостероиды или иммуносупрессанты для предотвращения сбивать с толку эффектов.

Оценка клинического ответа
Изменения пигментации оценивались на исходных этапах и на 4, 8 и 12 неделях двумя опытными дерматологами, не имевшими информации о лечении. Стандартизированные цифровые фотографии делались при одинаковых настройках освещения и камеры (расстояние 60 см, экспозиция 1/60 с, ISO 200). Степень репигментации была количественно измерена с помощью Индекса оценки области витилиго (VASI). Поражения дополнительно были распределены на четыре категории: отличные (≥75% репигментация), хорошие (50–74%), умеренные (25%–49%), плохие (<25%). Пациенты также проходили 10-балльную Визуальную аналоговую шкалу (VAS) для удовлетворения и облегчения симптомов. При каждом визите фиксировались побочные явления, такие как эритема, жжение, ворит, волдыри и гиперпигментация.

Сбор образцов сыворотки
Для анализа биомаркеров у каждого пациента на начальном этапе и в конце 12-й недели с помощью трубок для отделения сыворотки собирали кровь натощак (5 мл). Образцы свертывали в течение 30 минут при комнатной температуре и центрифугировали при 800 x g в течение 10 минут при 4 °C. Супернатантная сыворотка была аликотирована в криовиалы объемом 0,5 мл и хранилась при −80 °C до анализа. Все образцы были обработаны в течение 2 часов после сбора для минимизации деградации цитокинов.

Количественная оценка иммуноглобулинов в сыворотке
Концентрации сыворотки IgG, IgA и IgM были определены с помощью автоматизированной иммунофелометрии согласно инструкциям производителя. Калибровочные кривые были подготовлены с использованием последовательных разбавлений эталонных стандартов. Каждый анализ включал сыворотки контроля качества в высоких и низких концентрациях. Измерения экспрессировались в г/л и повторялись дважды для обеспечения вариации внутри анализа < 5%. Точность и калибровка прибора ежедневно проверялись с помощью отслеживаемых контрольных стандартов. Результаты записывались в электронном виде и просматривались двумя независимыми техниками, ослеплёнными к информации о пациентах.

Измерение воспалительных цитокинов
Профилирование цитокинов включало IFN-γ, TNF-α, IL-1β, IL-6, IL-17 и IL-10, количественно оценённые с помощью платформы мультиплексного ферментно-связанного иммуносорбентного анализа (ELISA). Подготовка реагентов следовала стандартному протоколу производителя. Кратко, в каждую яму, покрытую антителами, добавляли 100 мкл разбавленной сыворотки и инкубировали в течение 2 часов при 37 °C. После промывки с фосфатно-буферным физиологическим раствором с содержанием 0,05% Tween-20 (PBST) было добавлено 100 мкл биотинилированного антитела для обнаружения и инкубировалось в течение 1 часа. Затем скважины инкубировали со стрептавидином-хреновой пероксидазой в течение 30 минут, после чего развивалась цветокраска с использованием субстрата тетраметилбензидина (TMB) в течение 10 минут в темноте. Реакция была остановлена с помощью 50 мкл серной кислоты 2 моль/л, а поглощение измерялось на 450 нм с помощью считывателя микропластин. Стандартные кривые были получены на основе последовательных разбавлений рекомбинантных цитокинов, а концентрации выражались в pg/mL. Все образцы измерялись в дубликатах. Для обеспечения воспроизводимости межанализовый коэффициент вариации (CV) поддерживался ниже 10%. Пустые скважины содержали буфер без сыворотки, а отрицательные контрольные — матрицу без цитокинов, обработанную идентично образцам и эквивалентную стандарту 0 пг/мл для подтверждения специфичности анализа. Любые гемолизованные или липемические образцы были исключены из итогового анализа.

Статистический анализ
Данные вводились в специализированную электронную базу данных и проверялись на точность двумя независимыми менеджерами данных. Размер выборки оценивался на основе ожидаемого размера эффекта (Коэнов d = 0,5) при α = 0,05 и степени (1–β) = 0,8, что дало минимум 100 участников на группу. Для контроля множественных сравнений между цитокиноми при необходимости применялась коррекция Бонферрони. При необходимости применялась многомерная линейная регрессия для корректировки потенциальных факторов, включая возраст, пол, продолжительность заболевания и исходную площадь поражения. Нормальное распределение непрерывных переменных было проверено с помощью теста Шапиро–Уилка. Описательная статистика была представлена как среднее ± стандартного отклонения (SD) для нормально распределенных данных или как медиана (межквартильный диапазон, IQR) для искаженных данных. Изменения до и после лечения анализировались с помощью парных t-тестов, тогда как сравнения между группами анализировались с независимыми t-тестами или тестами Mann–Whitney U по мере необходимости. Категориальные данные сравнивались с хи-квадратом или точным тестом Фишера. Корреляции между уровнем цитокинов, иммуноглобулинами и улучшением пигментации оценивались с помощью коэффициента корреляции Пирсона. Все анализы проводились с SPSS v26.0 (RRID: SCR_002865), и двухсторонний p < 0.05 считался статистически значимым.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Результаты

Исходные клинические характеристики показали сопоставимые демографические и болезненные профили между группами
Всего 232 пациента с несегментным витилиго были зачислены и равномерно распределены в группу эксимеров (n = 116) или группу комбинированной терапии, получающую лазер плюс оральную матрину (n = 116). Исходные демографические и клинические параметры, включая возраст (35,8 ± 6,0 против 35,4 ± 5,6 года), распределение полов (мужчины/женщины: 59/57 пр...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Обсуждение

В данном исследовании представлен комбинированный терапевтический подход, интегрирующий 308-нм эксимерный лазер с оральной матриной для лечения несегментного витилиго. Основное предположение заключается в том, что двойная модуляция — локальная фотобиологическая стимуляция меланоцитов в сочетании с системной иммунорегуляцией — может обеспечить более устойчивую и устойчивую репигментацию, чем эксимерная группа. Результаты подтверждают эту гипотезу: комбинированная терапия обеспечила более ...

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Раскрытие информации

Нет финансовых конфликтов интересов, которые нужно раскрывать.

Благодарности

Авторы выражают признательность всей команде кафедры дерматологии за их усердную работу на протяжении всего проекта.

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Материалы

Список материалов, использованных в этой статье
ИмяКомпанияКаталожный номерКомментарии
308-нм XeCl Excimer Laser SystemSTRATA Skin Sciences (XTRAC)Velocity 400 (модель)Нацелен 308-нм УФБ-лазер для лечения поражений витилиго; проверьте модель на вашем сайте; или эквивалентное устройство
– 80 градусов; C Ultra-Low FreezerThermo ScientificСерия Forma 900 (модель 980)Длительное хранение в сыворотке
96-колодцевые пластины ELISA (с высоким связыванием)Корнинг Костар9018Если используете собственные рабочие процессы для покрытия или одиночные плексы
Регулируемое медицинское креслоMidmark641 Кафедра по процедурамПозиционирование пациента для обеспечения постоянной дистанции облучения
Успокаивающий гель на основе алое3M9236Тонкий послеоблучительный слой для облегчения эритемы; или эквивалентный медицинский гель
Янтарная стеклянная бутылка (500 мл)Фишербранд02-897-2JСветозащищённое хранилище при температуре 4 градуса; C — матринный раствор
Аналитический баланс (0,1 мг)МЕТТЛЕР ТОЛЕДОME104EГравиметрическая подготовка и контроль качества
Автоматизированный иммунонефелометрSiemens HealthineersСистема BN ProSpecКоличественно оценивает IgG/IgA/IgM по производителю. с IFU
Этикетки штрихкодов (крио-безопасные)Диверсифицированные биотехнологииCRY-1000Отслеживание образцов и цепочка хранения
Набор антител для биотинилированного обнаруженияMSDВключено в панельСопоставление для захвата антител
Солнцезащитный крем широкого спектра SPF и GE; 30Neutrogena070501017052 (Ultra Sheer SPF 50)Фотозащита после сессии; Пункт амбулаторного консультирования
Калибраторы иммуноглобулиновSiemens HealthineersN Белок Стандарт SLОтслеживаемая калибровка для нефелометрии
Control Sera (High/Low) для Ig AssaysSiemens HealthineersКонтроль N/T белкаЕжедневный контроль качества нефелометрических пробегов
Криогенные флаконы, 0,5 млТермонаучный нунк375418сывороточные аликвоты; внешняя нить; Без ДНКаз/РНазы
ДерматоскопDermLiteDL4Поляризованный портативный дерматоскоп для осмотра поражений
Карта масштаба дермоскопии/фотографии3GenКарточка по масштабу/цветуОбеспечивает согласованность цвета между временными точками
Цифровая камера для стандартизированных изображенийКанонEOS 80DФиксированное расстояние 60 см; экспозиция 1/60 с; ISO 200; Рекомендуется штатив
Холодильная центрифуга с фиксированным угломЭппендорф5810 R800 и раз; g, 10 мин, 4 и градус; Отделение сыворотки C
Столбец ВЭЖХ (C18, 4,6 раза; 250 мм, 5 и микро; m)AgilentZORBAX Eclipse Plus C18, 959990-902Рутинное отделение алкалоидов; или эквивалент
Система HPLCAgilent1260 Инфинити II (G7111B)Проверка чистоты и пакетная стандартизация матрин
Анализ / измерение изображенийImageJ (NIH)1.54 (RRID:SCR_003070)Опциональное количественное определение области поражения по фотографиям
Медицинская марля без лина (стерильная)Johnson & Джонсон546112Зона сушки после очистки
Matrine (≥ 98%, HPLC)MedChemExpressHY-N0156Пероральная подготовка раствора; Проверьте соответствие местных поставщиков и фармакопеи
Считыватель микропластин (450 нм)BioTek (Agilent)Синергия H1Поглощение на расстоянии 450 нм; Коррекция длины пути
Мойка микропластинBioTek (Agilent)ELx405Автоматизированные циклы мойки; снижает вариабельность
Мультиплексная панель человеческих цитокинов (кастомный 6-плекс)Обнаружение мезомасштабов (MSD)Платформа U-PLEX (K15067L)Включает IFN-γ, TNF-α, IL-1β, IL-6, IL-17A, IL-10; или эквивалент
Планшеты PBSGibco18912-014Подготовка PBS к промывам/буферам
Плёнки для герметизации пластинБио-РадMSB1001Предотвращает испарение во время инкубаций
Защитные УФ-очки (оператор)Ювекс (Honeywell)S0360X Ultra-Spec 2000Защита глаз оператора; Используйте специализированную пару
Защитные УФ-очки для пациентаЮвекс (Honeywell)S0360X Ultra-Spec 2000УФ-блокирующие очки для безопасности пациентов во время облучения
Трубки для отделения сыворотки (SST II Advance)BD Vacutainer367955Анализ крови натощак на начальном уровне и на 12-й неделе
Статистическое программное обеспечениеIBMСтатистика SPSS v26.0 (RRID:SCR_002865)Первичный анализ данных по протоколу
Стерильный физиологический раствор (0,9%)Бакстер2B1324 (500 мл)Очищение от поражений перед каждой лазерной процедурой
Стоп-раствор (2 м H2SO4)Сигма-Олдрич258105Останавливает реакцию TMB
Streptavidin-HRPThermo ScientificN100Реагент для обнаружения; Совместимый с наборами
Субстрат TMB (ELISA)Thermo Scientific34028Хромогенное развитие; 10 минут в темноте
Штатив с маркером расстоянияМанфроттоMKCOMPACTLT-BKПоддерживает постоянное расстояние между камерой и объектом
До 20 лет (для PBST 0,05%)Сигма-ОлдричP1379Поверхностно-активное вещество для буфера для промывки
УФ-радиометр / измеритель мощностиМеждународные световые технологииILT2400Для ежедневной проверки результатов и тестирования MED; с детектором SED240/NS254 или эквивалентом
УФ-блокирующая непрозрачная драпировка/листТорлабыBK5 Blackout FabricПокрывает обычную кожу, чтобы избежать непреднамеренного контакта; или эквивалент
Таблицы оценок VASI (печатные)Внутри компанииNA-VASI-2025Стандартизированные клинические формы оценки; архив с идентификатором темы
Вуд' s Lamp (UV-A, 365 нм)СпектролайнENF-260CКлиническая диагностика и оценка края поражения
Вуд' Капюшон лампы-щитаDermLiteDL HoodУлучшает контрастность при УФ-А обследовании

Ссылки

  1. Brunner, P. M., et al. Transcriptomic profiling of vitiligo patients shows polar immune dysregulation in involved and uninvolved skin. J Allergy Clin Immunol. 156 (4), 993-1007 (2025).
  2. Carbone, M. L., et al. Insight into immune profile associated with vitiligo onset and anti-tumoral response in melanoma patients receiving anti-PD-1 immunotherapy. Front Immunol. 14, 1197630(2023).
  3. Lerner, G., et al. Regulatory T cell dysregulation in vitiligo: A meta-analysis and systematic review of immune mechanisms and therapeutic perspectives. Int J Dermatol. 64 (12), 2247-2256 (2025).
  4. Lu, J., et al. Identification of shared biomarkers and immune infiltration signatures between vitiligo and Hashimoto's thyroiditis. Clin Cosmet Investig Dermatol. 17, 311-327 (2024).
  5. Ma, B., Wang, X. Unravelling the molecular mechanisms and immune landscape of vitiligo: A comprehensive bioinformatics study on melanogenesis-related genes. Ann Hum Biol. 52 (1), 2468692(2025).
  6. Okamura, K., Suzuki, T. Genetics and epigenetics in vitiligo. J Dermatol Sci. 117 (3), 45-51 (2025).
  7. Yang, M., Wang, H., Zhang, R. Bioinformatics analysis of oxidative stress-related genes and immune infiltration patterns in vitiligo. Clin Cosmet Investig Dermatol. 18, 475-489 (2025).
  8. Al Abadie, M. S., Chaiyabutr, C., Patel, K. X., Gawkrodger, D. J. Vitiligo and psychological stress: A hypothesis integrating the neuroendocrine and immune systems in melanocyte destruction. Int J Dermatol. 63 (7), 841-843 (2024).
  9. Hu, Y., Wang, S. B., Wang, K., He, M. J. From phenotype to molecules: Unveiling the genetic and immunological bridges between autoimmune diseases and vitiligo. Clin Cosmet Investig Dermatol. 17, 2475-2486 (2024).
  10. Jin, S., et al. The role of regulatory T cells in vitiligo and therapeutic advances: A mini-review. Inflamm Res. 73 (8), 1311-1332 (2024).
  11. Li, J., et al. The relationship between psoriasis and vitiligo: From a comprehensive study. Skin Res Technol. 30 (7), e13868(2024).
  12. Patel, R., et al. Prevalence of vitiligo among children and adolescents in the United States. Dermatology. 239 (2), 227-234 (2023).
  13. Rao, H., et al. Case report: Immune checkpoint inhibitor-related vitiligo-like depigmentation in non-melanoma advanced cancer: A report of three cases and a pooled analysis of individual patient data. Front Oncol. 12, 1099108(2022).
  14. Sun, C., Ding, H., Zhang, L., Wang, J., Su, M. Co-regulatory mechanisms and potential markers of oxidative stress-related genes in vitiligo and alopecia areata. Skin Res Technol. 30 (8), e70001(2024).
  15. Wang, X., et al. Circulating memory T cells and TCF1 (+) T cells aid in diagnosis and monitor disease activity in vitiligo. J Pharm Anal. 14 (11), 100998(2024).
  16. Wu, L., Han, T., Wang, Y., Li, S., Li, C. Epigenetic regulation in vitiligo: Mechanisms, challenges, and therapeutic opportunities. Curr Opin Immunol. 95, 102580(2025).
  17. Xie, B., Zhu, Y., Shen, Y., Xu, W., Song, X. Treatment update for vitiligo based on autoimmune inhibition and melanocyte protection. Expert Opin Ther Targets. 27 (3), 189-206 (2023).
  18. Chen, J., et al. Mif inhibition alleviates vitiligo progression by suppressing CD8 (+) T cell activation and proliferation. J Pathol. 260 (1), 84-96 (2023).
  19. Kano, S., et al. Differences in the immune microenvironment between improved and non-improved cases of vitiligo after halo nevus excision. J Dermatol Sci. 109 (3), 136-142 (2023).
  20. Liu, H., Wang, Y., Le, Q., Tong, J., Wang, H. The ifn-γ-cxcl9/CXCL10-CXCR3 axis in vitiligo: Pathological mechanism and treatment. Eur J Immunol. 54 (4), e2250281(2024).
  21. Lo, J., Hanania, H. L., Keiser, M. F., Patel, A. B. Immune checkpoint inhibitor-induced vitiligo in cancer patients: Characterization and management. Arch Dermatol Res. 315 (6), 1697-1703 (2023).
  22. Lu, L., et al. Vitiligo associated with type 2 immune inhibitors: Faers analysis and literature review. J Dermatol. 52 (6), 1008-1014 (2025).
  23. Mazzetto, R., et al. Anti-tumor immunity and vitiligo: From immune-related adverse reactions to protection from cancer. Immunotherapy. 16 (13), 841-843 (2024).
  24. Starace, M., et al. Immune checkpoint inhibitor-induced vitiligo-like depigmentation. JAMA Dermatol. 161 (2), 216-218 (2025).
  25. Xin, Y., Yuan, T., Wang, J. Circulating immune cells and vitiligo: A bidirectional two-sample mendelian randomization study. Front Immunol. 15, 1391186(2024).
  26. Yang, P., et al. Single-cell transcriptomics reveals peripheral immune responses in non-segmental vitiligo. Front Immunol. 14, 1221260(2023).
  27. Ezzedine, K., et al. Efficacy and safety of oral ritlecitinib for the treatment of active nonsegmental vitiligo: A randomized phase 2b clinical trial. J Am Acad Dermatol. 88 (2), 395-403 (2023).
  28. Gay-Mimbrera, J., et al. Comprehensive single-cell chromatin and transcriptomic profiling of peripheral immune cells in nonsegmental vitiligo. Br J Dermatol. 193 (1), 115-124 (2025).
  29. Liu, K., et al. Jak inhibitors in immune regulation and treatment of vitiligo. Cytokine Growth Factor Rev. 80, 87-96 (2024).
  30. National Pharmacopoeia Commission. Pharmacopoeia of the People’s Republic of China. Volume I, 2020 Edition, China Medical Science Press. Beijing. (2020).
  31. Huang, P., et al. Matrine regulates Th1/Th2 inflammatory responses by inhibiting the Hsp90/nf-κb signaling axis to alleviate atopic dermatitis. Kaohsiung J Med Sci. 39 (5), 501-510 (2023).
  32. Shi, H. J., et al. Oxymatrine therapy inhibited epidermal cell proliferation and apoptosis in severe plaque psoriasis. Br J Dermatol. 181 (5), 1028-1037 (2019).
  33. Seneschal, J., et al. Worldwide expert recommendations for the diagnosis and management of vitiligo: Position statement from the international vitiligo task force-part 2: Specific treatment recommendations. J Eur Acad Dermatol Venereol. 37 (11), 2185-2195 (2023).
  34. Seong, S. H., Oh, S. H. Up-and-coming drugs for the treatment of vitiligo. Ann Dermatol. 36 (4), 197-208 (2024).
  35. Upadhya, S., Andrade, M. J., Shukla, V., Rao, R., Satyamoorthy, K. Genetic and immune dysregulation in vitiligo: Insights into autoimmune mechanisms and disease pathogenesis. Autoimmun Rev. 24 (8), 103841(2025).
  36. Wang, Y., et al. Innate immune activation in vitiligo: Mechanisms and pathophysiological implications. Front Immunol. 16, 1631074(2025).
  37. Zhang, M., et al. Vitiligo: An immune disease and its emerging mesenchymal stem cell therapy paradigm. Transpl Immunol. 76, 101766(2023).
  38. Luo, L., Zhu, J., Guo, Y., Li, C. Mitophagy and immune infiltration in vitiligo: Evidence from bioinformatics analysis. Front Immunol. 14, 1164124(2023).
  39. Sant'anna-Silva, A. C. B., et al. Vitiligo auto-immune response upon oxidative stress-related mitochondrial DNA release opens up new therapeutic strategies. Clin Transl Med. 14 (8), e1810(2024).
  40. Sibbald, C. Alopecia areata: An updated review for 2023. J Cutan Med Surg. 27 (3), 241-259 (2023).
  41. Wang, L., et al. Advances in psoriasis research: Decoding immune circuits and developing novel therapies. Int J Mol Sci. 26 (18), 9233(2025).

Доступ ограничен. Войдите в систему или начните пробный период, чтобы просмотреть этот контент.

Перепечатки и разрешения

Больше статей

Лечение витилиготерапия матриномиммуномодуляциярегенерация меланоцитовфототерапияиндекс VASIанализ цитокинов

Эта статья была опубликована

Видео скоро будет доступно

Связаться с нами
Порекомендовать библиотеке

Конфиденциальность

Условия использования

Политики

© 2026 MyJoVE Corporation. Все права защищены.