June 26th, 2011
Использование отечественных и миниатюрных свиней в науке значительно увеличилось в последние годы. Демонстрируя, как выполнять интубация, катетеризация мочевого пузыря трансуретральной, бедренная артерия и вена катетеризации, а также transcardial перфузии, мы нацелены на дальнейшее увеличение стоимости Геттингене minipigs в биомедицинских исследованиях.
Эндотрахеальная интубация должна проводиться всякий раз, когда мини-пиг подвергается общей анестезии, чтобы облегчить операцию, поскольку она поддерживает открытые дыхательные пути, обеспечивает вспомогательную вентиляцию легких и защищает дыхательные пути от аспирата. Мини-пига можно интубировать из разных положений, но держать животное на спине, как правило, проще для тех, кто регулярно проводит интубацию человека, поскольку он представляет дыхательные пути аналогичным образом, помимо средств вспомогательной вентиляции. Оборудование, необходимое для эндотрахеальной интубации: стропы для открывания рта, отсасывание низкого давления с тупым наконечником, ветеринарный ларингоскоп с прямым лезвием длиной от 17 до 25 сантиметров, шприц с воздушным стетоскопом и клейкой лентой.
Для взрослого потрошения и мини-пигов. Подходит эндотрахеальная трубка размером от пяти до семи миллиметров. В этом видео использовалась 5,5-миллиметровая трубка.
Мини-пига кладут на спину и правильно поддерживают. Для того чтобы гортанный проход оставался прямым, язык слегка вытягивается, а челюсть удерживается в открытом положении помощником. Без чрезмерного растяжения головы вращение дыхательных путей или чрезмерное выпрямление головы может закупорить дыхательные пути, что затруднит идентификацию гортанного отверстия.
Ларингоскоп используется для вдавливания языка, а кончик отсасывания используется для смещения надгортанника от мягкого неба. Затем кончик ларингоскопа используется для прижима надгортанника вверх к основанию языка, открывая гортанное отверстие. При вскрытии ретиноидов в поле зрения попадают хрящи и голосовые связки, а эндотрахеальная трубка мягко продвигается с небольшим вращением в трахею.
По истечении срока действия манжета трубки надувается в соответствии со спецификациями производителя. Стараясь избегать чрезмерного раздувания, которое может вызвать отек и отек дыхательных путей, свиньям устанавливают бронх для вентиляции правой черепно-легочной доли. Поэтому важно разместить трубку над бифуркацией трахеи.
Этому способствует использование правильного размера трубки и крепление проксимального конца трубки на уровне рыла с помощью скотча. Когда мини-пиг правильно интубирован, необходимо прощупать свободное прохождение воздуха через трубку, а аускультация грудной клетки должна выявить дыхательные звуки как в левой, так и в правой части грудной клетки. При подключении аппарата ИВЛ с системой мониторинга к мини-пигу должны быть измерены физиологические показатели выдоха, углекислого газа, а также можно наблюдать кривую углекислого газа, которая следует за характером дыхания, определяемым настройками аппарата ИВЛ.
Эндотрахеальная интубация мини-пиг может быть сложной задачей, потому что гортанный проход узкий, а слизистая оболочка голосовых связок легко травмируется. Если используется слишком большая трубка или слишком большая сила, использование спрея с ксилокаином или мышечного релаксанта может облегчить введение трубки. Но применением нервно-мышечных блокаторов должен заниматься только персонал, хорошо обученный таким процедурам.
Катетеризация мочевого пузыря может быть использована в качестве способа контроля выработки мочи, что может предоставить полезную информацию о состоянии гидратации, а также о функции почек и сердечно-сосудистой системы во время длительных хирургических процедур. Катетеризация мочевого пузыря через мочеиспускательный канал легко проводится у самок свиней. В то время как эта процедура чрезвычайно сложна, возможно, невозможна у самцов для взрослых мини-пигов, катетер Фолея французского размера восемь или 10 подходит из-за кривизны и размера наружной уретры.
Предпочтительнее вскрывать катетер с помощью стилета. Необходимое оборудование включает в себя щипцы с тупым наконечником зеркала, шприц с физиологической смазкой, а также закрытый системный мешок для отвода мочи. Для того, чтобы наилучшим образом визуализировать наружное отверстие уретры во время катетеризации, мини-пиг кладут на спину с опорой под поясничную область.
В то время как ассистент тянет задние ноги за кран, женское наружное отверстие уретры располагается на дне влагалища, примерно от одной трети до половины расстояния до шейки матки. Однако, поскольку животное размещается на спине, положение отверстия уретры будет казаться перевернутым. Катетер контролируется с помощью щипцов с тупым концом, поэтому кончик катетера находится в продолжении щипцов.
Осторожно введите катетер в отверстие уретры. Уретра легко травмируется, если во время катетеризации используется слишком большая сила, однако первоначально может ощущаться небольшое сопротивление до тех пор, пока катетер не пройдет через наружный мочевой сфинктер. Если эта проблема не устранена, это может свидетельствовать о том, что животное недостаточно глубоко усыпляется.
Решение состоит в том, чтобы подождать некоторое время и дать анестезии подействовать. Когда катетер достигнет мочевого пузыря, удалите его, и будет видно, как моча течет. Надуйте баллон физиологическим раствором в соответствии со спецификациями производителя и аккуратно вытащите катетер до тех пор, пока баллон не зацепится за шейку мочевого пузыря.
Приложите закрытую систему мочеприемника для дренажа, прикрепите катетер к хвосту скотчем, чтобы избежать случайного смещения катетера. При обращении с животным при надлежащей подготовке и опыте трансуретральная катетеризация мочевого пузыря может быть выполнена без особых трудностей. Эта малоинвазивная процедура позволяет предотвратить загрязнение хрупкого медицинского технического оборудования и болезненное расширение мочевого пузыря, что может нанести вред животному и повлиять на ход эксперимента из-за повышенного тонуса блуждающего нерва и изменения физиологических параметров.
Артериальная и венозная катетеризация полезна для получения повторных образцов крови и контроля различных физиологических параметров. При проведении катетеризации сосудов в исследованиях выживаемости необходимо использовать строгую асептическую технику, чтобы избежать инфекций. Необходимое оборудование включает в себя скальпель, тупой кончик, хирургические ножницы, тканевые щипцы, малый тупой кончик, хирургические щипцы, небольшой самоудерживающийся тканевой ретрактор, хирургические заменители иглодержателя, шов с иглой гепаринизированного физиологического раствора в качестве промывочной жидкости для поддержания проходимости катетера.
Две канюли 18 калибра для внутривенных вливаний, две четыре французские блестящие оболочка с интродьюсером и сельдингером G проволокой. Глубина анестезии оценивается путем тестирования межпальцевого болевого рефлекса. К бедренной артерии и вене приближаются, мини-пиг кладут на спину, а заднюю ногу отводят латерально.
Определите в кожной складке между грацилисом и сарториозной мышцей, где исчезает пульсация поверхностной части медиальной подкожной артерии. Сделайте продольный поверхностный разрез кожи краниально до этого места, тем самым избегая непреднамеренного повреждения медиальных подкожных сосудов. С помощью ножниц с тупым концом рассеките подлежащую подкожную клетчатку.
Фасциальное отделение сарториусной и грацилисной мышц разделено краниально к месту проникновения медиальных подкожных сосудов. Сначала с помощью небольшого тупого наконечника, хирургических щипцов, а затем пальцевым путем две группы мышц разделяются с помощью небольшого самоудерживающегося тканевого ретрактора, при этом стараясь не повредить бедренный нерв и сосуды, артерия изолируется на протяжении примерно одного-двух сантиметров. Используя тупое рассечение, поверните скошенную иглу ven flon так, чтобы просвет был направлен вверх.
Слегка согните иглу, чтобы она легче следовала за искривлением сосуда. Не забудьте проверить, может ли игла по-прежнему двигаться вперед и назад. Артерия проколотывается.
Игла втягивается, и направляющий провод сельдингера вводится через вентиляционную трубку. Извлеките венфлоновую трубку, осторожно надавливая на артерию, чтобы обеспечить фиксацию G-проволоки. Оболочка с интродьюсером вставляется поверх проволоки рассола и выдвигается в нужное положение, после чего интродьюсер и проволока удаляются.
Бедренная вена расположена чуть ниже и медиально от артерии. После изоляции вены с помощью тупой диссекции вену канюлируют, как описано ранее для артерии. Чтобы убедиться, что и артерия, и вена катетеризированы правильно, возьмите кровь из обоих оболочек и сравните цвет образцов.
При взятии образца крови не забудьте впоследствии промыть катетеры гепаринизированным физиологическим раствором. Для того, чтобы сохранить проходимость катетера, катетеры фиксируются, а кожа закрывается. С помощью нескольких швов вокруг артерии и вены может быть наложена петля сосуда, чтобы зафиксировать сосуды перед пункцией.
Несмотря на его преимущества, мы обычно избегаем этого дополнительного шага, потому что он требует чрезмерного рассечения сосудов и увеличивает риск повреждения боковых и глубоких ветвей. На данном видео показано, как провести катетеризацию бедренных сосудов. Катетеризация сосудов бедренной кости предпочтительнее, чем катетеризация сосудов шейки для облегчения доступа.
При проведении экспериментов с использованием кадровой стереотаксической нейрохирургии и визуализации мозга транскардиальная перфузия является наиболее эффективным методом фиксации и дает выдающиеся результаты. При подготовке органов мини пиг к гистологии и гистохимии для проведения процедуры необходимо следующее оборудование. Необходимые для перфузионной системы жидкости, шприц с канюлей для внутривенного введения, пентобарбитальный скальпель, тупой наконечник, хирургические ножницы, ножницы для костей и два больших самоудерживающихся щипца, из которых, по крайней мере, один имеет изогнутый кончик.
Самоудерживающийся стернальный ретрактор не является абсолютно необходимым, но он значительно облегчает процедуру. Транскардиальная перфузия должна проводиться в хорошо проветриваемом помещении с системой вытяжки дыма высокой мощности и оборудованием, позволяющим собирать обильные восемь жидкостей и кровь для последующей безопасной утилизации. После введения смертельной дозы Пента-барбитала проверьте межпальцевый болевой рефлекс.
Наилучший доступ к сердцу и аорте обеспечивается с помощью срединной стернотомии. Сделайте глубокий продольный разрез кожи, идущий от манубриума до мечевидного отростка грудины. Получите доступ к грудной полости, сделав небольшой разрез в диафрагме чуть ниже мечевидного отростка.
Вставьте костные ножницы в грудную полость и рассеките пополам При выполнении этой процедуры необходимо соблюдать осторожность грудины, потому что сердце может быть прилегающим в каком-то месте к внутренней части грудины. После того, как грудина будет разделена, вставьте самоудерживающийся стернальный ретрактор и откройте грудную полость, если она еще не повреждена, сделайте небольшой разрез в перикарде в верхней части сердца, а затем пальцево вскройте перикардиальный мешок. Определите левый желудочек, правый оракул и аорту.
Вместе с верхней кавальной веной сделайте небольшой поверхностный надрез возле верхушки сердца и получите доступ к левому желудочку, проперфорировав миокард тупым наконечником. Вставьте перфузионную канюлю внутрь левого желудочка и переместите кончик канюли в аорту. Когда канюля прощупается между вторым и третьим пальцем в аорте, зажмите канюлю на место.
С помощью самоудерживающихся изогнутых щипцов сделайте разрез в правом оракуле и начните вводить фиксатор через перфузионную канюлю. Можно почувствовать поток обильной восьмерки в аорте, и кровь будет изливаться через разрезанный правый оракул, поскольку приток перфузии восьмерки в сосуды мини-пига продолжается. Обратите внимание, как системное изобилие параформальдегидом вызывает гиперэкстензию конечностей и подергивание поверхностной мускулатуры из-за альдегидного перекрестного сцепления нервов и мышц.
При использовании системы перфузии с питанием от сжатого воздуха обязательно снимите канюлю или зажмите прозрачную силиконовую трубку до того, как канистра опустеет, чтобы избежать попадания воздуха в сосудистую систему. В данном видео мы используем систему перфузии, работающую на сжатом воздухе, а не на гравитации. Преимущество систем, использующих сжатый воздух, заключается в том, что гидростатическое давление является постоянным в течение всего процесса, что в конечном итоге обеспечивает наилучшее изобилие органов.
В этой статье рассматривается растущее использование мини-свинок Гёттингена в биомедицинских исследованиях, с акцентом на такие важные процедуры, как интубация и катетеризация. Она направлена на улучшение понимания и применения этих методов в научных исследованиях.