October 1st, 2007
Меня зовут Ханг Мун. Я работаю с профессором по презервативам. Мы с ним работаем со сценой XYJ, чтобы создать 3D-структуру ячейки.
Здравствуйте, меня зовут.Э. и Линн, и я работаю над проектом клеточной печати с инкапсуляцией клеток, носителями и гелями. Это соленоид для выброса клетки и клеточной смеси aros через клеточную среду. Клапан so приводится в действие двумя сигнальными линиями.
Здесь сигнальная линия идет от сухой доски. Сигнал пришел отсюда. Эта линия через эту линию, та является первым генератором функции.
Итак, первый генерируется нашим запрограммированным способом. Так что, если вы хотите, вы хотите изменить кошелек, вы можете изменить программу с помощью переключающей линии, или вы можете управлять этим процессом генератором на компьютере. Клапан ячейки открывается и закрывается под действием электрического сигнала, но ячейка питается по этой линии.
Клетка и среда или агрогель подаются через шприцы-шприцы. Шприцы находятся внутри воды, внутри шприца находится пресс-свет воздуха. Сжатый воздух подается из резервуара, как здесь линия.
Таким образом, маленькая леска и излучаемый воздух проходят через воздушный фильтр. Воздушный фильтр улавливает пыль и другие виды грязи. То есть генератор давления, как мы его называем, генерирует сигнал, используемый для открытия солнечного воздушного колпака или закрытого солнечного воздушного клапана, который подключается через разъем P-I-B-U-S-V.
Таким образом, мы можем использовать USB-порт непосредственно на нашем компьютере, ноутбуке. Так что здесь он соединен с той стороной. И тогда мы можем управлять через контрольный ноутбук здесь.
Так что если мы хотим синхронизировать движение сцены и открытие колокола, то управлять им можно с помощью того же контроллера, что и ноутбук. Таким образом, мы можем контролировать время, когда он открывается, когда закрывается, когда он движется и когда останавливается. И мы можем синхронизировать движение и открытие звонка.
Эта ступень называется моторизованной ступенью. Он автоматически перемещается по линии сигнала смерти и двигателю. Так что моторизация составляет 0,1 микрометра.
Так что в идеале он может нарисовать линию до 100 миллиметровой линии. Итак, ось струи движется, поднимается и опускается вот так. Таким образом, он контролирует колпачок между подложкой и солнечным поясом.
Таким образом, он может контролировать высоту выброса. Этот субстрат связан со стадиями XY здесь, X здесь и Y там. Так что это движение по плану XY.
Таким образом, он рисует некоторую функцию демонстрации правых ступеней трех Xs, X, Y, и G.So ось струи или ось XY здесь управляется сигналом. Таким образом, здесь сигнальная линия подключена к контроллеру движения. У этого контроллера движений вообще нет ручного переключателя, потому что им нельзя управлять вручную.
Управление им осуществляется с помощью портативного компьютера. Итак, ноутбук подключен. Задняя часть контроллера, у нас есть три xs для печатающей ячейки XY jet.
Таким образом, он выдает три разных вида сигналов независимо друг от друга. А затем контроллер движения обменивается данными через разъемы rf 2, 3, 2 и напрямую подключается к USV. А затем USV подключается к ноутбуку.
Так что ноутбук контролируется заемщиком. Мы используем программу AutoCAD, делаем путь поколения А вот так, бац. А затем он меняется на машинный язык вот так.
Таким образом, машинный язык переносится в подобное, что простой символ и цифры тому подобное. Есть каждая позиция, связанная со стадиями X, Y, Z, здесь я выбираю файл, содержаю эту программу, а затем открываю программу для скачивания таким образом. И затем я выбираю из файла, как делает то же самое, текстовый файл.
Просто загружается текстовый файл, выбирается текстовый файл и автоматически загружается с ноутбука на контроллер com, а затем передается персонаж BAM, как я уже упоминал ранее, БАМ. В этой колбе находятся N IH 3G три фибрбластные клетки мыши. И я собираюсь сначала аспирировать старые СМИ.
Этот процесс заключается в прохождении ячеек и приклеивании ячеек к дну колбы. Итак, после аспирации среды, я собираюсь ввести шесть RYS, в которых содержится фермент. Хорошо? Итак, после того, как трипсин был помещен в колбу, нам нужно подождать три-пять минут, пока клетки не отделятся от дна колбы.
Теперь мы готовы поместить фильтрующий материал и пропустить элементы в центрифужную трубку. Это разбавление один к одному. Итак, я добавляю шесть миллионов этого фильтрующего материала прямо здесь и собираюсь немного промыть пилы, чтобы убедиться, что все они прошли.
И теперь ячейки готовы к центрифугированию в этой пробирке. Теперь мы собираемся центрифугировать эти элементы со скоростью тысяча оборотов в минуту от трех до пяти минут. Теперь, когда клетки превратились в гранулы, я собираюсь аспирировать надосадочную жидкость.
Теперь я собираюсь промыть клетки с помощью PBS. А это к, это для окрашивания клеток. Морилки, которые мы используем, являются эстеразными субстратами.
Хорошо, теперь мы снова будем центрифугировать и вращать клетки до неба. И я собираюсь аспирировать PBS и смолить клетки. Я в СМИ, чтобы с мной считались.
Я смешиваю клетки так, чтобы, когда мы возьмем пробу, концентрация была равномерной по всей пробирке. Теперь я собираюсь взять сотню микролитров клеток, чтобы измерить плотность клеток. Сейчас я вношу сто микролитров типа и синевы, которая является пятном.
Мы подождем от трех до пяти минут, чтобы пятно проникло в мембраны мертвых клеток. Когда мы считаем ячейки, синие мы не считаем. Клетки готовы к подсчету с помощью гемоцитометра, я собираюсь перенести по 50 микролитров клеточной смеси на каждую сторону гемоцитометра.
Хорошо, я собираюсь накрыть его стеклянной затворной стороной. У гемоцитометра есть две стороны. Я собираюсь посчитать первую сторону, и после подсчета обеих сторон, я возьму среднее значение, а затем умножу на два, потому что у нас было разведение один к одному с типом синего цвета.
Таким образом, в основном плотность наших клеток будет составлять 135 умножить на 10 к четырем ячейкам на мил. Для нашего эксперимента мы будем использовать клеточный раствор с концентрацией полмиллиона клеток на мил. Итак, поскольку у нас 13,5 миллионов клеток, я проведу реанимацию подвешений ячеек в 27 миллионах сред.
Мы используем два разных типа морилки. Это анализ живых мертвецов из молекулярных зондов. Наше первое пятно называется кальций
.Второе наше окрашивание называется гомодимер AUM. Окрашивает омертвевшие клетки. Мы используем синее возбуждение, чтобы получить зеленую флуоресценцию, и зеленое возбуждение, чтобы получить красную флуоресценцию Для этих двух пятен, когда мы визуализируем наш кубик, раствор будет приготовлен в PBS.
Итак, сначала я собираюсь перевести пять мил PBS в трубку, буферизованную фосфатным солевым раствором. Это солевой раствор. Теперь я собираюсь добавить полмикролитра кальция на мил.
Теперь я добавляю 2,5 микролитра кальция am в тюбик и два микролитра гомодимера на милль PBS. Вот машина btex. Благодаря этому ячейка и среда хорошо распределяются по всему объему.
Теперь загружаем ячейку на 200 микролитров на семерку вот здесь. И затем мы надеваем колпачок, он плотно закрыт вот так, вот так, я открываю клапан, и затем поступает легкий воздух под давлением, и затем я регулирую ремень вот так. А затем при этом меняется давление.
Поэтому я приспосабливаюсь. Давление составляет пять фунтов на квадратный дюйм. Внутреннее давление трубки составляет пять фунтов на квадратный дюйм.
Отсюда сюда он соединялся через отверстие внутри. Итак, мы просто открываем колпак здесь, а затем ячейка вводится под давлением пяти фунтов на квадратный дюйм, а затем начинает открываться. А затем запускается клапан Sona.
А затем скатываем субстрат. Его подложка представляет собой простое предметное стекло. А затем мы загружаем нужную часть, и я накладываю скотч для эскизов, чтобы закрепить подложку вот так, верно?
И просто я это исправляю. Итак, мы устанавливаем все это, ячейку, клапан и субстрат во время движения начинают работать. Итак, мы настраиваем все это, а затем открываем запуск клапана.
И тогда мы перемещаем сцену вот так, верно? Затем мы создаем узор на подложке, узор на подложке и бац персонаж. Я собираюсь погрузить эти капли, которые мы напечатали, в раствор красителя, который мы сделали ранее.
А теперь капли будут инкубироваться в течение 10 минут, а затем визуализироваться. Сначала я собираюсь настроить изображение через окуляр. Наше первое изображение — это просто изображение в ярком поле.
Я собираюсь выключить свет и поменять фильтр так, чтобы у нас было синее возбуждение, которое будет показывать зеленую флуоресценцию. И третье изображение, которое мы сделаем, это мертвые клетки, это краситель Thm Homodimer. А с зеленым светом мы получим красную флуоресценцию.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
В этой статье рассматривается разработка 3D клеточной структуры с использованием проекта клеточной печати. Исследование включает инкапсуляцию клеток и использование сред и гелевых материалов для улучшения процесса печати.
This work presents a programmable microfluidic platform for precise cell encapsulation and deposition, enabling reproducible 3D cellular architectures. The system supports early-stage target validation by providing controlled microenvironments for phenotypic screening and mechanistic de-risking of cellular responses. Integration with automated staging and valve control enhances throughput and reproducibility in discovery workflows.
The method positions itself within the discovery continuum from Early Discovery to Lead Identification by enabling hypothesis-driven cellular patterning and quantitative response measurement.