Использование хирономид (Diptera), поверхностно-Плавающие куколки экзувии как Bioassessment протокола Rapid для водоемов

Общая цель данной процедуры заключается в описании методов сбора и обработки хирономинантов, поверхностных плавающих образцов зрачка для оценки качества воды. Это достигается путем сбора сначала полевых образцов Chiron pupil ex из водной среды. На втором этапе из каждого полевого образца отбирается подвыборка из 300 образцов, и образцы разделяются на отдельные морфологические группы.

На последнем этапе несколько представителей из каждой группы устанавливаются на предметные стекла микроскопа. В конечном счете, образцы идентифицируются по родам или видам для оценки условий качества воды. Основное преимущество этого метода по сравнению с существующими методами, такими как традиционный отбор проб бентических макробеспозвоночных, заключается в том, что сбор и обработка проб эффективны, экономичны и применимы практически во всех водных средах.

Использование этого метода позволяет получить ценную информацию для исследований биологического мониторинга и может дать представление о том, как участки меняются с течением времени из-за возмущений, загрязнения или изменения климата. Хотя мы сосредоточимся на том, как этот метод может быть использован в среде обитания ручья, его можно легко применить к другим водным системам, таким как реки, озера, пруды, присяжные или каменные бассейны. Поместите внутрь одну этикетку с датой и местностью, а также одну этикетку снаружи одной банки с образцами для каждого образца, который необходимо собрать.

Затем для каждого образца с лотком для личинок в одной руке и ситом в другой опустите лоток для личинок в воду, где скапливается экссудат зрачка, когда экссус водяного зрачка и мусор попадают в лоток для личинок или образец через сито. После 10 минут сбора используйте бутылку, наполненную водой, собранной из досягаемости пробы, чтобы сконцентрировать любой мусор в одной области сита. Затем с помощью щипцов и струи этанола осторожно перенесите эксус зрачка в соответствующую заранее маркированную банку для образца и заполните банку этанолом.

Чтобы начать отбор образцов, поместите соответствующую дату и место нахождения в одну пробирку доктора для каждого образца экссудата зрачка и заполните флакон этанолом на три четверти. Затем снимите крышку с соответствующей банки для образцов и проверьте, нет ли прикрепленного зрачка ex на крышке. С помощью бутылки с этанолом аккуратно смойте содержимое крышки в чашке Петри.

Затем снимите этикетку с внутренней стороны банки с образцом. Аккуратно смойте содержимое этикетки в чашке Петри и отложите этикетку в сторону. Затем переложите содержимое банки с образцом в белый лоток для личинок и промойте банку этанолом, чтобы убедиться, что в банке не осталось экссудата зрачков.

Перенесите красноречивый зрачок остатков экссудата и этанол из лотка для личинок в чашку Петри. Убедитесь, что образец покрыт этанолом. Затем поместите чашку Петри под стереомикроскоп и систематически сканируйте чашку на наличие микроорганизмов.

Далее с помощью щипцов перенесите зрачковый экссудат из чашки в соответствующий соответствующий флакон. Старайтесь не собирать сломанный или высохший экссудат зрачков, чтобы избежать проблем с идентификацией в будущем. Когда весь видимый экссудат зрачков будет перенесен, покрутите и просканируйте чашку еще три раза на наличие дополнительных образцов, включая те, которые могут быть прикреплены к стенкам чашки.

Когда будет выбрано 300 учеников, верните остаток из чашки Петри в лоток для личинок и промойте чашку Петри этанолом. Затем переложите остаток из лотка для личинок в пустую банку для образцов. Добавьте на банку этикетку с датой и местонахождением и накройте ее крышкой, чтобы отсортировать образцы.

Вылейте exus зрачка из промаркированного флакона в чашку Петри, наполненную достаточным количеством этанола, чтобы покрыть образцы. Затем под стереомикроскопом используйте внешние морфологические характеристики Chiron Pub ex, чтобы разделить образцы на morph axa и перенести различные морфы Axa в отдельно помеченные флаконы. Три четверти заполнены этанолом или примером при классификации по Celi thax используют различия в наличии, размере, форме и окраске грудного рога для различения образцов.

При классификации по брюшной полости используйте шипы, волоски и шпоры брюшных сегментов и анальной доли для отделения морфиса. После сортировки заполните одну лунку многолуночной пластины для каждого аксона морфа 95% этанолом и поместите несколько представлений каждого таксона морфо в отдельные лунки пластины по крайней мере на 10 минут, чтобы обеспечить достаточное высыхание. Затем, пока образцы высыхают, пометьте слайды соответствующей коллекцией сайтов и идентификационной информацией, чтобы смонтировать эксус для людей.

Прикрепите шаблон предметного стекла к предметному столику микроскопа и поместите предметное стекло поверх этого шаблона. Затем нанесите каплю URL на предметное стекло так, чтобы она приближалась по размеру защитного стекла, и с помощью щипцов аккуратно постучите представителем первого аксона морфа по лабораторной салфетке, чтобы удалить излишки этанола. Теперь вставьте образец в URL-адрес и используйте щипцы с наконечником позвоночника и зонд для препарирования, чтобы отделить сефа такс от брюшной полости.

Самым сложным аспектом этой процедуры является развитие необходимой ловкости рук для рассечения головного мозга от брюшной полости во время монтажа предметного стекла. Чтобы обеспечить успех диссекции, используйте щипцы с тонким наконечником или диссекционные зонды, чтобы отделить отщепение между головной мышцей и первым брюшным сегментом. Как показано, Разделите головную грудь вдоль эсального шва.

Затем откройте головную ткань так, чтобы края шва оказались на противоположных сторонах, и ориентируйте ее так, чтобы вентральная сторона находилась на расстоянии друг от друга. Расположите брюшную полость спинной стороной вверх и поместите ее непосредственно под сефа такс. Затем, удерживая крышку под углом в один дюйм, медленно опускайтесь вниз и опускайте крышку, чтобы уменьшить образование пузырьков воздуха.

Наконец, слегка надавите на покровное стекло, чтобы сплющить образец, и используйте составной микроскоп для определения рода образца, установленного на предметном стекле На этих графиках показаны кривые таксономического накопления образцов из зрачков, собранных из 16 городских озер в Миннесоте, чтобы определить общее количество видов в каждом озере. Каждая строка данных представляет одно из озер, а каждая точка данных представляет собой ежемесячную пробу, собранную с апреля по октябрь 2005 года, демонстрируя, что получение четырех проб на озеро восстановило большую часть сообщества Хирона и обнаружило любые важные сезонные колебания в озерах. Долгосрочные мониторинговые исследования хиронов могут быть использованы для оценки изменения климата в озерах по всей Миннесоте, поскольку изменения в экологических переменных, таких как глубина озера и концентрация фосфора, могут повлиять на кумулятивные виды, обнаруженные в градиенте химического состава озера.

Действительно, как показано на этом графике, кумулятивное число встречающихся видов увеличивается по мере увеличения отношения средней концентрации фосфора к средней глубине. Наиболее важным этапом для успешного сбора экссудата у учащихся является обнаружение областей с высоким накоплением экссудата в пределах исследуемой территории. Приступая к выборке образцов в лаборатории, важно медленно сканировать содержимое чашки Петри, так как некоторые образцы могут быть слегка пигментированы и прилипать к размеру чашки.

После просмотра этого видео у вас должно сложиться хорошее представление о том, как собирать и обрабатывать образцы плавающих зрачков для проектов, направленных на мониторинг и оценку качества воды.