Методики Рукав гастрэктомия и Modified Ру-ан-Y желудочного шунтирования у мышей

Общая цель этих хирургических вмешательств заключается в измерении метаболических эффектов рукавной гастрэктомии и шунтирования по Ру на мышиной модели. Этот метод может помочь ответить на ключевой вопрос в области ожирения и метаболизма о молекулярном механизме, участвующем в метаболических приростах, наблюдаемых после бариатрической хирургии. Основное преимущество этих методов заключается в том, что они стимулируют клинические последствия бариатрической хирургии, которые наблюдаются у человека на мышиной модели.

При рукавной гастрэктомии, после подтверждения соответствующего уровня анестезии путем защемления пальцев ног, нанесите мазь на глаза мыши, а с помощью электрической бритвы побрейте живот от грудины до таза. Накройте брюшную полость полиэтиленовой пленкой, а животное положите в лежачем положении на грелку. Вырежьте в полиэтиленовой пленке окошко, а кожу продезинфицируйте раствором повидон-йода.

Затем поместите животное под бинокулярный микроскоп, и с помощью скальпеля сделайте разрез кожи по средней линии от грудины до середины живота. Затем защитите кожу стерильным компрессом, смоченным 37 градусами Цельсия солевым раствором, и с помощью ватных палочек мягко мобилизуйте желудок, освобождая орган от боковых тесных соединительнотканных прикреплений, чтобы обеспечить его полную экстернализацию. Поместите гемостатический коллагеновый компресс позади отраженного органа.

Затем с помощью нерассасывающихся швов 8.0 перевязать сосуды привратника и пищевода вдоль желудка до большего искривления, после чего следует гастротомия на анатомической линии между пилорическим и сердечным отделами желудка. С помощью двух смоченных ватных тампонов удалите остатки пищи с каждой стороны желудка. Затем с помощью микроножниц разрежьте желудок вдоль границы между глазным дном и телом, а отверстие желудка закройте нерассасывающимися швами 8,0 от желудочно-пищеводного перехода до конца разреза.

Завершите резекцию желудка по большей кривизне, чтобы удалить примерно 80% желудка, применяя гемостатический коллагеновый компресс по мере необходимости. Закройте отверстие привратной области желудка еще одним нерассасывающимся швом 8.0 и аккуратно прокатите двумя смоченными ватными тампонами по направлению к каждой стороне живота, чтобы подтвердить, что шов не протекает. Снимите кровоостанавливающие коллагеновые компрессы из брюшной полости, и верните живот в его естественное положение, оставив один гемостатический коллагеновый компресс против шва.

Затем используйте нерассасывающиеся швы 5.0, чтобы закрыть мышечный слой брюшной стенки и кожу. Для шунтирования желудка по Ру сделайте разрез кожи по средней линии от грудины до середины живота, защищая кожу стерильным компрессом, смоченным физиологическим раствором 37 градусов Цельсия. Выведите кишечник наружу, и измерьте расстояние в восьми сантиметрах от привратника.

Используя нерассасывающиеся швы 5.0, наложите две лигатуры на кишечник по обе стороны от восьмисантиметровой отметки и разрежьте ткань между швами. Затем поместите проксимальную конечность ткани в верхний левый квадрант брюшной полости, а дистальную конечность, обращенную к пищеварительной конечности, на шесть сантиметров ниже проксимальной конечности. С помощью микроножниц разрежьте как проксимальный отдел конечности, так и петлю кишечника, и сделайте два антиментеральных разреза одинаковой длины.

Затем с помощью двух нерассасывающихся швов 8.0 сделайте боковой анастомоз, сначала поместив дорсальный боковой анастомоз, а затем вентральный боковой анастомоз. Аккуратно проведите двумя смоченными ватными тампонами по направлению к каждой стороне анастомоза, чтобы убедиться, что шов не протекает, и осторожно выведите живот наружу, как только что показано. Поместите рассасывающийся гемостатический коллагеновый компресс позади органа и с помощью изогнутых микрощипцов проведите нерассасывающийся шов 5.0 через сальник для перевязки привратника.

Разрежьте вентральную сторону желудка на расстоянии 1,5 см от привратника и дистального отдела конечности, сделав два разреза одинаковой длины, с последующим проведением дорсально-вентрального анастомоза из стороны в сторону с двумя нерассасывающимися нитями 8,0. Убедитесь, что шов не протекает. Затем закройте мышечный слой брюшной стенки и кожу 5,0 нерассасывающимися швами, и введите 25 миллилитров на килограмм теплого солевого раствора путем подкожной инъекции.

Когда мышь полностью оправится от анестезии, поместите животное одного в клетку при температуре 30 градусов Цельсия в инкубаторе на пять дней с ежедневным приемом железа и витаминов и обезболиванием, а также свободным доступом к гелевому диетическому корму в течение первых двух дней. На третий день после операции вновь введите в рацион животного твердую пищу. На протяжении всего протокола наблюдается прогрессирующее улучшение показателя послеоперационной выживаемости, что указывает на необходимость интенсивной хирургической подготовки для освоения ограничительной мальабсорбционной бариатрической техники или хирургической техники RYGB.

Мыши, перенесшие рукавную гастрэктомию и RYGB, продемонстрировали значительную потерю веса через 14 дней после операции по сравнению с фиктивными контрольными животными. Ежедневное потребление пищи животными снижается более чем на треть в течение 14-дневного периода после рукавной гастрэктомии, в то время как этот анорексигенный эффект не наблюдается между мышами типа и мышами RYGB. Животные также демонстрируют улучшенную толерантность к глюкозе после обоих типов операций.

Кроме того, тяжелая анемия, которая наблюдается у мышей RYGB, уменьшается при приеме добавок железа в течение 28 дней после операции. После освоения эти методы могут быть выполнены менее чем за 50 минут при рукавной гастрэктомии и за 90 минут при шунтировании желудка по Ру-эн-И, если они выполнены правильно. При проведении этих процедур важно помнить, что процедуры до- и послеоперационного ухода почти так же важны, как и хирургическая техника.

После этих процедур могут быть выполнены другие методы, такие как операция по отведению желчных путей, чтобы ответить на дополнительные вопросы о прогностической роли желчных кислот в эффектах бариатрической хирургии. После разработки эти методы проложили путь исследователям в области ожирения, диабета, гипертонии и дислипидемии, чтобы выявить механизм полезной метаболитной функции у диких и генетически модифицированных мышей. После просмотра этого видео у вас должно сложиться хорошее представление о том, как проводить бариатрическую хирургию на мышиной модели.