Использование метода рукав в мышиной модели аортальной трансплантации - обучающее видео
October 22nd, 2017
Мы представляем ортотопическая аорты трансплантации модель с помощью метода рукав мышей. Это очень быстрое анастомоза метод, который может использоваться в исследованиях сосудистых заболеваний.
При этой процедуре аорта донора размещается в ортопноэлезном положении, а поверхностные прикусы забираются в питательный сосуд. Обезболивайте мышей смесью 1,5 объемного процента изофлурана и 100% кислорода через лицевую маску. Положите мышь на платформу в лежачем положении и примотайте все ножки к операционному столу.
Нанесите офтальмологическую мазь на глаза, чтобы предотвратить сухость во время процедуры. Проверьте рефлексы, пощипывая задние лапы, чтобы убедиться, что мышь достаточно обезболилась. Удалите все волосы с живота.
Нанесите крем для депиляции или используйте бритву. Проводят операцию в стерильных условиях. Продезинфицируйте брюшную полость.
Чтобы удалить донорскую аорту, сделайте разрез живота по средней линии и вручную втяните кишечник вправо. Аккуратно вручную отведите кишечник в сторону, используя неопудренные перчатки. Поместите кишечник на кусок марли, смоченный солевым раствором, чтобы он оставался влажным.
Очень осторожно отделите брюшную аорту от окружающих тканей с помощью тупого рассечения пинцетом. Рассеките пинцетом сегмент аорты между почечной артерией и разветвлением от полой вены. Закрепите все мелкие ветви этого сегмента с помощью монофиламентного одинарного шва 11-0.
Перед удалением аорты введите в нижнюю полую вену 0,5 миллилитра физиологического раствора, содержащего 50 единиц гепарина. Дайте донорскому животному провести обескровливание до того, как сегмент аорты будет удален. Полностью промойте привой солевым раствором и после этого сразу же поместите его в емкость с ледяным солевым раствором.
Чтобы подготовить реципиента, обезболите животное через маску для лица, удалите шерсть и продезинфицируйте, как указано выше, и сделайте разрез по средней линии от мечевидной кости до таза с помощью скальпеля. Втяните брюшные стенки с помощью ретракторов. Оберните кишечник марлей, смоченной в солевом растворе, и очень аккуратно переместите их вправо от животного.
Рассеките свободную инфраренальную аорту между почечными артериями проксимально и разветвление дистально с помощью пинцета. Закрепите все мелкие ветви этого сегмента с помощью монофиламентного одинарного шва 11-0. Зажмите проксимальную и дистальную части аорты с помощью одинарного шелкового шва 6-0.
Разделите аорту посередине между зажимами и орошите концы порезов гепаринизированным солевым раствором, чтобы промыть просвет. Поместите трансплантат в ортопническое положение. Выполняют анастомоз в рукавной технике с наложением швов с использованием мононити 11-0.
При этом методе конец подающего сосуда помещается в приемный сосуд. Поместите конец инфраренальной аорты реципиента в проксимальный конец донорской аорты. Выполняйте дистальный анастомоз таким же образом.
Поместите дистальный конец донорской аорты в дистальный конец аорты реципиента. Позаботьтесь о том, чтобы избежать перекрута аорты, обеспечив идеальное выравнивание донорской и реципиентной аорты. Момент снятия зажима является очень важным этапом процедуры и должен быть выполнен очень аккуратно.
Убедившись, что анастомоз в порядке, отпустите зажимы. Сначала осторожно отпустите дистальный зажим, а затем проксимальный зажим. Таким образом, создается низкое давление, чтобы удерживать стенки вместе, прежде чем сторона высокого давления будет освобождена.
Трансплантат немедленно перфузируется и просматривается пульс. Аккуратно удалите остатки шелка. Поместите содержимое брюшной полости обратно в брюшную полость и закройте рану с помощью проточного шва полигликолевой кислоты 3-0.
Введите бупренорфин в дозе 0,05 мг на килограмм мыши перед окончанием анестезии. Мы представляем примеры снимков вскрытия трансплантата через шесть недель после трансплантации и его ультразвукового трехмерного и B-режима. На снимках показана проходимость трансплантата.
Размеры просвета трансплантата не изменяются. Кроме того, мы не обнаружили стеноза или аневризматических образований. Существенных поражений в трансплантированных аортах при гистологическом и иммуногистохимическом окрашивании мы не наблюдали.
Ядра окрашивали с помощью DAPI. В заключение следует отметить, что этот очень быстрый метод анастомоза может быть использован для изучения сосудистых заболеваний у генетически модифицированных мышей.
Обзор
В данной статье представлена ортотопическая модель аортального трансплантата с использованием манжетной техники у мышей, которая позволяет осуществлять быструю анастомоз. Этот метод может быть использован в исследованиях сосудистых заболеваний.
Основные компоненты исследования
Область науки
- Сосудистай хирургиия
- Техники трансплантации
- Мышьй модели заболеваний
Предпосылки
- Ортотопическая аортальная трансплантация необходима для исследования сосудистых заболеваний.
- Манжетная техника предлагает быстрый метод анастомоза.
- Мышьй модели широко используются в биомедицинских исследованиях.
- Понимание патентности сосудисто-тканевых протезов важно для улучшения хирургических результатов.
Цель исследования
- Разработать метод быстрой анастомозации для аортальной трансплантации.
- Оценить жизнеспособность протеза после трансплантации.
- Предоставить модель для исследования сосудистых заболеваний у генетически модифицированных мышей.
Использованные методы
- Доноровская аорта забирается и готовится в стерильных условиях.
- Получающие мышей наркотизированы и подготовлены к операции.
- Анастомоз проводится с использованием манжетной техники с тонкими швами.
- Постоперационная оценка включает ультразвуковое исследование и гистологический анализ.
Основные результаты
- Протез показал патентность через шесть недель после трансплантации.
- Незначительных изменений размеров просвета не наблюдалось.
- Гистологический анализ не выявил стеноза или аневризматических образований.
- Иммуногистохимическая окраска не показала значительных поражений в трансплантированных аортах.
Выводы
- Метод быстрой анастомозации эффективен для аортальной трансплантации.
- Эта модель может способствовать исследованиям сосудистых заболеваний.
- Будущие исследования могут использовать эту технику для дальнейших исследований.
