August 14th, 2018
Здесь мы представляем протокол представить модель крыса Центральной усталости, используя измененный метод множественные платформы (MMPM).
Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в построении модели центральной усталости. Например, как вызвать усталость как с физической, так и с психологической точки зрения и как ее оценить. Основное преимущество этого метода заключается в том, что он сочетает психические факторы с модифицированным многоплатформенным методом для лучшего моделирования возникновения центральной усталости.
Впервые мы пришли к этой идее, когда заметили тесную связь между прерывистым недосыпанием и центральной усталостью. Мы пробовали разные часы и дни депривации, чтобы вызвать центральную усталость, и, наконец, обнаружили, что 14 часов в течение 21 дня — это правильная схема. Модель показывает хорошую валидность при центральной усталости, и она может быть использована в будущих исследованиях для изучения основного механизма заболевания.
Начните с создания непрозрачного пластикового резервуара без крышки. Закрепите на дне бака 15 круглых платформ, которые упорядоченно распределите в три ряда и пять столбиков. Оставьте достаточное пространство между каждой платформой, примерно 13 сантиметров между рядами и 10 сантиметров между столбцами.
Установите кран в выпускное отверстие для воды с боковой стороны бака. Наконец, сделайте для танка сетчатый чехол из железной проволоки, на котором будет висеть коробка с едой. Начните с нумерации корней крысиного хвоста маркером.
Взвесьте крыс, исключив очень легких или тяжелых, а остальных случайным образом разделите на модельную и контрольную группы. Аккуратно поместите крыс в чистые клетки и дайте им акклиматизироваться в лаборатории в течение как минимум трех дней. Обеспечьте достаточный запас воды и пищи.
Начните с того, что поставьте бак на ровный сервиз, затем наполните его семью сантиметрами теплой воды, примерно на один сантиметр ниже ровной платформы. Затем положите в коробку с едой дневной запас корма и воды и повесьте ее на крышку. Далее выньте модельную группу крыс из клетки за хвост, и аккуратно посадите их в аквариум.
Запускайте всех крыс в воду, а не на платформы, чтобы мотивировать их боязнь воды. Убедитесь, что у каждой крысы есть платформа для стояния, в то время как крысы контрольной группы остаются в своих исходных клетках с достаточным количеством пищи и воды. Далее накройте бак крышкой и следите за крысами.
Через 14 часов достаньте модельных крыс из аквариума, и высушите их волосы феном. Обратите внимание на крысиные хвосты, если они выцветают. Затем верните крысу в исходную клетку с едой и водой.
Наконец, промойте бак и откройте кран, чтобы выпустить нечистоты. Затем простерилизуйте бак с помощью спрея с 75% этанолом. Результаты испытаний в открытом поле показывают, что по сравнению с контрольной группой у модельных крыс наблюдается значительное снижение как движений при выращивании растений, так и средней скорости произвольной активности.
Тест лабиринта с повышенным уровнем и плюсом показывает, что 21 день моделирования значительно сократил как входы, так и продолжительность в открытой руке по сравнению с контрольной группой, в то время как в закрытой руке наблюдалось увеличение. Исчерпывающий тест по плаванию показал, что продолжительность плавания в модельной группе значительно короче, чем в контрольной группе. Наконец, эти результаты указывают на то, что дофамин в гипоталамусе, а также соотношение дофамина и серотонина значительно снижаются в модельной группе по сравнению с контрольной группой, в то время как содержание серотонина значительно увеличивается.
После просмотра этого видео у вас должно сложиться хорошее представление о том, как построить танк с несколькими платформами и применить его в вашей центральной модели усталости. Это неинвазивная модель, которую легко освоить. Пробуя эту модель, очень важно следить за остальными, так как в первые две недели они довольно агрессивны, и может произойти травма.
Несмотря на то, что эта модель призвана дать представление о центральной усталости, она также может быть применена к другим заболеваниям путем усложнения факторов или корректировки продолжительности модели, таких как усталость при навигации и депрессия.
View the full transcript and gain access to thousands of scientific videos
Это исследование представляет протокол введения модели центрального утомления у крыс, используя модифицированный метод нескольких платформ (MMPM). Подход сочетает ментальные и физические факторы для более точного моделирования центрального утомления, нацеленного на изучение фундаментальных механизмов и эффектов интермиттирующего депривационного сна на модели.
This rat model of central fatigue enables mechanistic de-risking in early discovery by simulating both physical and psychological contributors to fatigue, supporting target validation in CNS disorders. The model provides predictive value through quantifiable behavioral and neurochemical endpoints, aiding in lead identification and portfolio triage for fatigue-related indications.
The method fits within the discovery continuum from hypothesis testing to lead identification, providing a disease-relevant system for CNS target validation.