Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Ortotopik Pankreas Kanseri Fare Modeli Dinamik Kontrast Geliştirilmiş Manyetik Rezonans Görüntüleme

15.1K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/52641

⸱

18 Nisan 2015

 ,  ,  ,  ,  , 

Bu makalede

Özet

Bu protokolün amacı, farelerde ortotopik pankreas tümörü ksenogreftleri için dinamik kontrastlı manyetik rezonans görüntüleme (DCE-MRG) uygulamaktır. DCE-MRG, hedef dokudaki mikrovasküler sistemi analiz etmek için invaziv olmayan bir yöntemdir ve yeni bir tedaviyi takiben bir tümörde vasküler yanıtı değerlendirmek için yararlıdır.

Özet

Dinamik kontrastlı manyetik rezonans görüntüleme (DCE-MRG), abdominal bölgede ciddi solunum hareketi artefaktı nedeniyle ortotopik pankreatik tümör ksenogreftleri için sınırlı olarak kullanılmıştır. Ortotopik tümör modelleri, deri altı modellere göre avantajlar sunar, çünkü bunlar kan akışını, neovaskülarizasyonu ve tümör hücresi invazyonunu etkileyen birincil tümör mikro çevresini yansıtabilir. Yakın zamanda, görüntüleme sırasında göğüs bölgesinden hareket transferini önlemek için tümörleri ortogonal olarak bükülmüş bir plastik levha ile sabitleyerek fare modellerinde ortotopik pankreas tümörü ksenogreftlerinin DCE-MRG protokolünü oluşturduk. Bu tahtanın basıncı karın bölgesinde lokalize olmuştur ve hayvanlarda solunum güçlüğüne neden olmamıştır. Bu makale, küçük hayvanlar ve tümör ksenogreftlerinin DCE-MRG'si kullanılarak ortotopik pankreas tümörü modellemesinin ayrıntılı prosedürünü göstermektedir. DCE-MRG'de farmakokinetik parametrelerin kantitifikasyon yöntemi de tanıtılmaktadır. Bu makalede açıklanan prosedür, araştırmacıların ortotopik gastrointestinal kanser fare modelleri için DCE-MRG uygulamalarına yardımcı olacaktır.

Giriş

Bu yöntemin genel amacı farelerde ortotopik pankreas tümörü xenografts için dinamik kontrastlı manyetik rezonans görüntüleme (DCE-MRI) uygulamaktır. DCE MR enjeksiyonundan sonra belli bir süre boyunca MR kontrast değişiklik izlenerek veya hedeflenen bir dokuda mikrovaskuleterini değerlendirmek için invazif olmayan bir yöntemdir. DCE-MRI habis tümörler teşhis etmek ve çeşitli terapiler 1-4 tümör yanıtı değerlendirmek için kullanılmıştır. Kantitatif DCE-MRG yüksek tekrarlanabilirlik 5 sunmuştur. Bir hedef dokuda bir MR kontrast maddenin farmakokinetik parametrelerini ölçmek için, kontrast madde önce elde edilen farklı zaman noktalarında, T1 harita....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Tüm işlemler Birmingham Alabama Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından kabul edildi.

1. Ortotopik Pankreas Tümör Fare Modelleme

  1. Dulbecco tadil edilmiş Eagle ortamı (DMEM) içinde kültür standart insan pankreatik kanser hücre çizgileri% 10 cenin sığır serumu ile takviye edilmiştir. % 5 CO2 ile nemli bir atmosferde 37 ° C 'de, tüm kültür muhafaza edin.
  2. 8-10 haftalık dişi şiddetli kombine immunodefisiyan fareler kullanın. 12 saat ışık ve 12 saat karanlık çevrimi oda sıcaklığında (21 ± 2 ° C) ve% 60 nemde bir hayvan kafesleri yerleştirin.
  3. Ameliyat boyunca oksijen (/ dk 2 L....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Insan pankreas tümörü hücreleri, fare pankreası bir katı tümör oluşturma başarılı bir şekilde büyür. 1, (A), tümör hücre solüsyonu enjekte edilir bir normal pankreas, ve (B) fotoğraflarını göstermektedir ortotopik pankreas tümörü xenograft taşıyan bir temsili fare (MIA PaCa-2 ). Tümör yanında dalak, karın sol üst kadranda yer almaktadır. Hücre implantasyon sonrası çapı 7 mm - tümörler 5 büyümek için 4 hafta - Genellikle 2 sürer.

Hareket artefakt belli bir bü.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Bu immunodefisiyan fareler, fare abdominal tümörlerin DCE MRG ve kinetik parametrelerinin ölçümü ile ortotopik pankreas tümörü modelleme ayrıntılı olacak şekilde kullanılır. Pankreas kuyruk içine bir iğne takarken ortotopik pankreas tümörü modellemede, dikkatli olunmalıdır. Eğer başarılı olursa, hücreler, küçük bir kabarcık oluşturma pankreas başı transfer edilecek. Bir dik bükülmüş plastik kurulu uygularken, tümör kurulu üst ucunun altında bulunduğunu doğrulamak için kritik öneme sahiptir. Pankreas tümörü diyaframa yak.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların beyan edecekleri herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

Teşekkürler

Yazarlar, ortotopik pankreas kanseri fare modellemesine yardımcı olduğu için Jeffrey Sellers'a teşekkür eder. Bu çalışma, UAB Radyoloji Bölümü'nden Araştırma Girişimi Pilot Ödülleri ve NIH hibeleri 2P30CA013148 ve P50CA101955 ile desteklenmiştir.

....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
DMEMInvitrogen11965-118
Fetal sığır serumuHarlan LaboratuvarlarıBT-9501
BetadinePurdue ürünleri67618-153-01
5-0 Prolene sütürlerEthicon8720H
9.4T MR tarayıcıBruker Biospin CorporationBioSpec 94/20 USR
GadoteridolBracco Diagnostics IncNDC 0270-1111-03
Mikro-polietilen tüpStratejik Uygulamalar, Inc#PE-10-25
30 G künt uçlu iğneStratejik Uygulamalar, Inc89134-194
İzleme ve geçit sistemiSA instruments, IncModel 1030Bu, küçük hayvanların solunum derecesini ve vücut sıcaklığını aynı anda ölçmek için MR uyumlu bir sistemdir.
Şırınga pompasıYeni Era Pompa Sistemleri A.Ş.NE-1600
Serisi

Kaynaklar

  1. Ergul, N., et al. Assessment of multifocality and axillary nodal involvement in early-stage breast cancer patients using 18F-FDG PET/CT compared to contrast-enhanced and diffusion-weighted magnetic resonance imaging and sentinel node biopsy. Acta Radiol. , (2014).
  2. Park, J. J., et al.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

Dinamik Kontrastla Güçlendirilmiş MRGTümör XenogreftiDCE-MRI KantifikasyonuFarmakokinetik ParametrelerSolunum Hareket ArtifaktıDik Açılı Bükülmüş TahtaYüzey Bobini YerleşimiTümör Boyutu İzleme