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Artículo de método

In vitro Digestión de emulsiones en una sola gota a través del intercambio multifásico de fluidos gastrointestinales simulados

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DOI:

10.3791/64158

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18 de noviembre de 2022

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En este artículo

Resumen

Un balance colgante de película de superficie de gota implementado con un intercambio multisubfase, apodado OCTOPUS, permite imitar las condiciones digestivas mediante el intercambio secuencial de subfases de la solución a granel original con fluidos gastrointestinales simulados. La digestión in vitro simulada se monitoriza registrando in situ la tensión interfacial de la capa interfacial digerida.

Resumen

Las emulsiones se utilizan actualmente para encapsular y administrar nutrientes y medicamentos para abordar diferentes afecciones gastrointestinales como la obesidad, la fortificación de nutrientes, las alergias alimentarias y las enfermedades digestivas. La capacidad de una emulsión para proporcionar la funcionalidad deseada, es decir, alcanzar un sitio específico dentro del tracto gastrointestinal, inhibir / retrasar la lipólisis o facilitar la digestibilidad, depende en última instancia de su susceptibilidad a la degradación enzimática en el tracto gastrointestinal. En las emulsiones de aceite en agua, las gotas de lípidos están rodeadas por capas interfaciales, donde los emulsionantes estabilizan la emulsión y protegen el compuesto encapsulado. Lograr una digestibilidad adaptada de las emulsiones depende de su composición inicial, pero también requiere monitorear la evolución de esas capas interfaciales a medida que se someten a diferentes fases de la digestión gastrointestinal. Una balanza de película de superficie de gota colgante implementada con un intercambio multisubfase permite simular la digestión in vitro de emulsiones en una sola gota acuosa sumergida en aceite mediante la aplicación de un modelo de digestión estática personalizado. El tránsito a través del tracto gastrointestinal es imitado por el intercambio de subfases de la solución a granel de gotitas original con medios artificiales, imitando las condiciones fisiológicas de cada compartimento / paso del tracto gastrointestinal. La evolución dinámica de la tensión interfacial se registra in situ a lo largo de toda la digestión gastrointestinal simulada. Las propiedades mecánicas de las interfaces digeridas, como la elasticidad dilatacional interfacial y la viscosidad, se miden después de cada fase de digestión (oral, gástrico, intestino delgado). La composición de cada medio digestivo se puede ajustar para tener en cuenta las particularidades de las afecciones digestivas, incluidas las patologías gastrointestinales y los medios digestivos infantiles. Se identifican los mecanismos interfaciales específicos que afectan la proteólisis y la lipólisis, proporcionando herramientas para modular la digestión mediante la ingeniería interfacial de emulsiones. Los resultados obtenidos pueden manipularse para diseñar matrices de nuevos alimentos con funcionalidades personalizadas como baja alergenicidad, ingesta de energía controlada y disminución de la digestibilidad.

Introducción

Comprender cómo se digiere la grasa, lo que implica la digestión en emulsión, es importante para diseñar racionalmente productos con funcionalidad personalizada1. El sustrato para la digestión de grasas es una emulsión ya que la grasa se emulsiona al consumirla por acción mecánica y mezclándola con biosurfactantes en la boca y el estómago. Además, la mayor parte de la grasa consumida por los humanos ya está emulsionada (como los productos lácteos), y en el caso de los bebés o algunas personas mayores, esta es la única forma de consumo. Por lo tanto, el diseño de productos a base de emulsión con perfiles de digestión específicos es muy important....

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Protocolo

1. Secuencia de limpieza para toda la cristalería utilizada en la experimentación científica de superficies

  1. Frote la cristalería con una solución de limpieza concentrada (consulte la Tabla de materiales) diluida en agua (10%).
  2. Enjuague bien con una secuencia de agua del grifo, propanol, agua destilada y agua ultrapura. Secar en una cabina y almacenar en un gabinete cerrado hasta su uso.

2. Preparación de la muestra

  1. Preparar los medios digestivos artificiales según los protocolos estandarizados INFOGEST 11,20

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Resultados

Esta sección muestra diferentes ejemplos de perfiles de digestión medidos con el pulpo. La apariencia general de las coincidencias del perfil de digestión simulado se muestra en la Figura 4B. La tensión interfacial generalmente se representa contra el tiempo en el perfil de digestión. Las diferentes fases / pasos de digestión considerados están representados en diferentes colores. La primera fase forma la capa inicial y corresponde a la fase de adsorción del emulsionante o proteína/tensioact.......

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Discusión

Este artículo describe un protocolo generalizado para medir la digestión in vitro de capas interfaciales mediante el uso de equipos de gota colgante. El protocolo se puede ajustar a los requisitos específicos del experimento ajustando la composición de los tampones digestivos, que se basan en el protocolo armonizado INFOGEST11,20 para facilitar la comparación con la literatura. Las enzimas digestivas y los biosurfactantes se pueden agregar individualment.......

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Divulgaciones

Los autores declaran que no tienen intereses financieros conocidos en competencia o relaciones personales que podrían haber influido en el trabajo reportado en este documento.

Agradecimientos

Esta investigación ha sido financiada por los proyectos RTI2018-101309-B-C21 y PID2020-631-116615RAI00, financiados por MCIN/AEI/10.13039/501100011033 y por "FEDER Una forma de hacer Europa". Este trabajo fue (parcialmente) apoyado por el Grupo de Biocoloide y Física de Fluidos (ref. PAI-FQM115) de la Universidad de Granada (España).

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Alfa-quimotripsina del páncreas bovinoSigma-AldrichC4129Enzima
Beta-lactoglobulinaSigma-AldrichL0130Emulsfier
Albúmina sérica bovinaSigma-Aldrich9048-46-8Emulsfier
CaCl2Sigma-Aldrich10043-52-4Centrífuga de electrolitos
Kronton instrumentosCentrikon T-124Para separar aceites y resinas
Pectina cítricaSigma-AldrichP9135Co-lipasa emulsionante
DEL PÁNCREAS PORCINOSigmaC3028Enzima
CONTACTOUniversidad de Granada (UGR)https://core.ugr.es/dinaten/, último acceso: 18/07/2022
DINATENUniversidad de Granada (UGR)https://core.ugr.es/dinaten/, último acceso: 18/07/2022
Lipasa gástricaLipolytechRGE15-1GEnzima
Albúmina sérica humanaSigma-Aldrich70024-90-7Emulsionante
INFOGESThttp://www.proteomics.ch/IVD/
Lipasa de páncreas porcino, tipo IISigma-AldrichL33126Enzima
Metasilicato de magnesio resinasFluka1343-88-0Resinas para purificar aceite
Micro 90Productos internacionalesM-9051-04Limpiador
NaClSigma7647-14-5Electrolito
NaH2PO4Scharlau10049-21-5Para preparar tampón
OCTOPUSProducciones Cientí ficas y Té cnicas S.L. (Gó Equipo Pendandt Drop implementado con intercambio de múltiples subfases
Aceite de olivaSigma-Aldrich1514Aceite
pancreático de páncreas porcinoSigmaP7545-25 gEnzima
PepsinaSigma-AldrichP6887Enzima
Pluronic F127SigmaP2443Emulsionante
Pluronic F68SigmaP1300Emulsionante
Desoxicolato de sodioSigmaSales biliares
Glicodeoxicolato de sodioSigmaC9910Sales biliares
Taurocolato de sodioSigma86339Sales biliares
Filtro de jeringaMillex-DPSLGP033R  Filtro de jeringa 0.22 y micro; m tamaño de poro polietersulfona
tripsinaSigma-AldrichT1426Enzima

Referencias

  1. McClements, D. J. The biophysics of digestion: Lipids. Current Opinion in Food Science. 21, 1-6 (2018).
  2. McClements, D. J., Li, Y. Structured emulsion-based delivery systems: Controlling the digestion and release of lipo....

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Reimpresiones y permisos

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