Bu protokol, retrograd retina ganglion hücreleri ve sonradan retina ganglion hücre hayatta kalma ve apoptosis analiz etmek için bir optik sinir ezilme yaralanması yapmak nasıl etiket gösterir. Bu glokom da dahil olmak üzere optik nöropati farklı türleri için deneysel bir hastalık modeli.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Retina Ganglion Hücre Survival Eğitim Bir Optik Sinir Crush Yaralanma murin Modeli
Bu makalede
Özet
Özet
Optik sinir yaralanması ardından, geri dönüşü olmayan görme kaybı sonuçları retina ganglion hücrelerinin (RGCs), bir yavaş yavaş ölüm, aksonal dejenerasyona yol açabilir. Insan, bu tür hastalıkları örnekler travmatik optik nöropati ve glokom, optik sinir dejenerasyonu içerir. Bu, görme kaybı ve körlük önde gelen optik sinir başı tipik değişimler, progresif optik sinir dejenerasyonu, retina ganglion hücrelerinin kaybı, kontrolsüz, ile karakterizedir.
Optik sinir ezmek (ONC) yaralanma fare modeli Travmatik optik nöropati için önemli bir deneysel hastalık modeli, bu model glokom, vb optik sinir kademeli retina ganglion hücrelerinin apoptozise neden ezilme yaralanması. Bu hastalık modeli nöronal ölüm ve hayatta kalma, terapötik önlemler geliştirilmesi için gerekli olan genel süreçler ve mekanizmalar çalışma kullanılabilir. Buna ek olarak, farmakolojik ve moleküler yaklaşımlar bu modelde farklı tip optik nöropati tedavisinde potansiyel terapötik reaktifler belirlemek ve test etmek için kullanılır.
Burada, 1 gün retina ganglion hücrelerinin Temel retrograd etiketleme (RGCs), (II) 4 gün Optik sinir ezilme yaralanması, (III) retinae Hasat ve gün hayatta kalma RGC analiz (I) tarafından adım adım gösteri 11 ve (IV) Temsilcisi sonucu.
Protokol
Kullanılan tüm ekipmanların ve reaktifler sterildir. Hayvan Bakım tarafından onaylanmış ve tüm hayvan deneyleri (hayvan çalışması protokol NEI-570) NEI / NIH Komitesi (ACUC) kullanın ve NIH kurallar ve düzenlemelere göre yapılmıştır.
1. Gün 1 Retina Ganglion Hücreleri At Temel Retrograd Etiketleme (RGCs)
Bu prosedürün amacı, optik sinir ezilme yaralanması üç gün önce farelerin üstün colliculus bir sinir tracer boya enjekte edilerek retrograd retina ganglion hücrelerinin etiket. Boya retrograd retina ganglion hücrelerinin tarafından ele alınan ve yaşam RGCs (Şekil 1) için bir belirteç sağlar olacak. Bu yaklaşım, ....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
Optik sinir ezilme yaralanması fare modeli RGC ölüm ve hayatta kalma sürecini incelemek için yararlıdır. Bu model aynı zamanda sık sık farklı reaktifler ve genlerin RGC apoptoz ve sağkalım üzerine etkilerini araştırmak amacıyla kullanılır. Bu modelin bir diğer avantajı da minimal varyasyonları ile yüksek derecede tekrarlanabilirlik olmasıdır.
Ancak bu model birkaç adım, özel bakım gereklidir. İlk olarak, optik sinir ezilme yaralanması yaparken, oftalmik arter ve bu nedenle sonraki retinal is.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Çıkar çatışması ilan etti.
Teşekkürler
Bizim araştırma NIH, Ulusal Göz Enstitüsü İntramural Araştırma Programı tarafından desteklenmektedir.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Stereotaksik aparat | ASI Instruments | SAS-4100 | |
| Diseksiyon mikroskobu | World Precision Instruments, Inc. | PZMIV-BS | |
| Neşter sapı | Fine Science Tools | 10003-12 | |
| Neşter uçları #15 | Fine Science Tools | 10015-00 | |
| Mikro matkap | Fine Science Tools | 18000-17 | |
| Sütur iğnesi | Fine Science Tools | 12050-03 | |
| Yaylı makas | Fine Science Tools | 16144-13 | |
| Dumont #5 pens | Fine Science Tools | 11252-50 | |
| Hamilton şırıngası | Hamilton Co | 88400 | |
| Gazlı bezler | Office Depot | 674889 | |
| Florokrom | Sigma-Aldrich | 39286 | |
| Alkol | Sigma-Aldrich | 459844 | 70% |
| H2O2 | Sigma-Aldrich | H3410 | 3% |
Kaynaklar
- Yoles, E. GM1 reduces injury-induced metabolic deficits and degeneration in the rat optic nerve. Investigative ophthalmology & visual science. 33, 3586-3591 (1992).
- Fisher, J. Vaccination for neuroprotecti....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
