deri altı klinik öncesi modelde hasta kaynaklı tümörler kullanarak yeni tedavilerin, öngörü biyomarker keşif ve ilaca dirençli yolların etkinliğini incelemek için mükemmel bir yoldur. Bu model, ilaç geliştirme sürecinde, klinik araştırma önce birçok yeni anti-kanser terapisi kaderini belirlemede önemlidir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
Bir Klinik öncesi Hasta Türetilmiş Tümör Roman Anti-Kanser Tedaviler Soruşturma Xenograftlarında Modeli Geliştirilmesi ve Bakımı
Bu makalede
Özet
Özet
Hasta kaynaklı tümör ksenogreft (PDTX) modelleri, insan denemelerinden önce anti-kanser ilaç geliştirmeyi kolaylaştırmada gerekli bir platform sağlar. İnsan tümör parçaları, bir tümör bankası oluşturmak için atimik çıplak farelere (bağışıklığı baskılanmış, T hücresi eksik) deri altından enjekte edilir ve daha sonra bu tümörleri hastalardan korumak için farklı nesil farelere geçirilir. Daha da önemlisi, orijinal tümörün hücresel heterojenliği, ilaç etkinliği çalışmalarının (tek ajan ve kombinasyon), biyobelirteç analizinin, dirençli yolakların ve kanser kök hücre biyolojisinin değerlendirilmesi için klinik olarak daha ilgili bir model sağlayan bu modelde yakından taklit edilmektedir. PDTX modelinin bazı sınırlamaları arasında farelerde ilk nesilden sonra insan stromasının fare stroması ile yer değiştirmesi, tümörlerin deri altı enjeksiyonlarına bağlı metastaz üzerindeki tedavi etkilerinin araştırılamaması ve immün sistemi baskılanmış farelerin kullanımına bağlı immünoterapilerin değerlendirilmemesi yer almaktadır. Bununla birlikte, bu sınırlamalarla bile, PDTX modeli ilaç keşif sürecinde güçlü bir klinik öncesi platform sağlar.
Giriş
Kolorektal kanser (KRK) Amerika Birleşik Devletleri'nde kanser ölümlerinin önemli bir katkıda bulunmaktadır. 2015 yılında, 49.700 ölüm 1 ile ÇHS tahmini 132.700 yeni vaka vardı. lokalize hastalığı olan hastalarda prognoz mükemmel olmasına rağmen, ilerlemiş hastalığı olan hastalarda yeni tedavilerin geliştirilmesinde bu önemli bir öncelik haline kötü sonuçlar var. bakım kemoterapötik rejimleri ve bu hastalığa karşı konuşlandırılmış yeni biyolojik standart olmasına rağmen, genel sağkalım sadece bir artan bir artış olmuştur. Buna göre, bu hastalıkta tümör büyümesini kolaylaştırmak katılan sürücü yollarının anlaşılmasında önemli bir çaba var. Kanser Genom ....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Protokol
Etik Beyanı: Hasta kaynaklı kolorektal adenokarsinom tümör örnekleri Colorado Çoklu Kurumsal Değerlendirme Kurulu (08-0439) tarafından onaylanmış bir protokol uyarınca Colorado Üniversitesi Hastanesi hastaları rıza elde edilmiştir. Tüm hayvan çalışmaları Colorado Denver Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi Üniversitesi tarafından onaylanan hayvan protokol çerçevesinde gerçekleştirildi (IACUC, Protokol # 51412 (06) 1E ve 96813 (04) 1E).
1. Alma ve Hasta Kan hazırlanması
- 1 toplayın - 2 sodyum sitrat içeren bir kan / hücre ayırma tüp kan ml (plazma, lenfosit ve monosit bandı, yoğunluk gradyan sıvı, jel bariyer, ve eritrosi....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Sonuçlar
CRC PDTX Modelleri ve TCGA Ortak Mutasyonlarının Benzerlikler
Biz CRC PDTX bankada ortak mutasyonlar (KRAS, NRAS, BRAF, PIK3CA, APC, CTNNB1 ve TP53) yüzdesi CRC hasta popülasyonunda görülen mutasyon sıklığı temsilcisi olup olmadığını araştırdık. Şekil 2A (TCGA) ve B (CRC PDTX Bankası) 'de gösterildiği gibi, bu genlerdeki mutasyonların sıklığı TCGA (n = 276 hasta) .......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tartışma
PDTX ilaç keşif platformu yeni bileşiklerin klinik etkinliğini öngörmede güvenilmez diğer preklinik modellerin eksiklikleri gelişmiş bir model sunuyor. Önemli olarak, bu modelde, tümörler, biyolojik olarak kararlı, metastatik potansiyelini korumak ve kuşaktan içindeki ilaç tepki gösterirler. Bu modelde, hastanın türevli tümörler, atimik çıplak farelere enjekte geçişli ve daha sonra tedavi değerlendirmesinde kullanılır. içeren başarılı bir PDTX banka için birkaç kritik adımlar vardır: 1) uyumlu bir klinik ekip / rıza has.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Açıklamalar
Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yoktur.
Teşekkürler
Bu çalışma 1R01CA152303-01 hibesi ile desteklenmiştir.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Malzemeler
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| RPMI veya DMEM | Corning | 10-040-CV | |
| Penisilin-Streptomisin | Corning | 30-002-CI | |
| Esansiyel Olmayan Amino Asitler | Corning | 25-025-CI | |
| Fetal Sığır | Serumu Corning | 35-010-CV | -4 ve derece içinde çözülme; C, ardından 30 ° C'de 60 dakika etkinleştirin; C su banyosu |
| CPT kan tüpü | BD vacutainer | 362761 | |
| Mikrosantrifüj tüpü | Surelock | A-7002 | |
| Fosfat Tamponlu Salin | Corning | 21-040-CV | |
| Cyroking | C0732901 | ||
| Plastik tümör kesme kabı | Trueline | TR4001 | |
| Makas | Roboz | RS-5881 | |
| Forseps | Roboz | RS-5135 | |
| Matrigel (jelatinimsi protein karışımı) | Corning | 354234 | -20 veya -80 °C'de saklayın; C, daha sonra buz üzerinde çözdürün, RT% |
| 10 Formalin bardaklarında | Protokol | 032-059 | |
| Sıvı Azot Dewar Depolama | Termolin | CY50900 | |
| Taşınabilir sıvı nitrojen dewar | Nalgene | 4150-2000 | |
| Dimetil Sülfoksit | Fischer | 67-68-5 | |
| Dondurma kabı: Bay Frosty | Nalgene | 5100-0001 | |
| İzopropil Alkol Decon | 64-17-5 | ||
| Trokarlar | Amerika'nın Yenilikçi Araştırması | MP-182 | |
| Anestezi makinesi | Patterson Veteriner | ||
| Anestezi kutusu | Patterson Veteriner | ||
| İzofluran | Veteriner bir | 1038005 | |
| F-Hava Kabı | Bickford Omnicon | 80120 | |
| Meloxicam | Vet one | 5182-90C | |
| Kaliperler | Fowler | 54-100-167 | |
| Tartı | Ohaus | Scout Pro SP601 |
Kaynaklar
- Siegel, R. L., Miller, K. D., Jemal, A. Cancer statistics. 2015. CA Cancer J Clin. 65 (1), 5-29 (2015).
- Comprehensive molecular characterization of human colon and rectal cancer. Nature. 487 (7407), 330-337 (2012).
- Arcaroli, J. J., et al.
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yeniden basım ve izinler
