Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.

Yöntem makalesi

Sıcak iskemi / reperfüzyon hasarının bir sıçan akciğer transplantasyon modeli: sonuçları iyileştirmek için optimizasyonlar

3K görüntülenme

⸱

DOI:

10.3791/62445

⸱

28 Ekim 2021

 ,  ,  ,  ,  ,  , 

Bu makalede

Özet

Burada, sonuçları iyileştirmeye hizmet eden bir sıçan akciğer nakli modeline optimizasyonlar sunuyoruz. Vücut ağırlığına göre manşetler için bir boyut kılavuzu, 4. interkostal boşluğu belirlemek için bir ölçüm stratejisi ve yara kapatma ve BAL (bronkoalveoler lavaj) sıvı ve doku toplama yöntemleri sunuyoruz.

Özet

Sıçan akciğer nakli ile ilgili deneyimlerimizden, iyileştirilmesi gereken birkaç alan bulduk. Pulmoner ven (PV), pulmoner arter (PA) veya bronş (Br) için uygun manşet boyutlarını seçme yöntemlerine ilişkin mevcut literatürdeki bilgiler çeşitlidir, bu nedenle sıçan akciğer transplantasyonu sırasında uygun manşet boyutunun belirlenmesi deneme yanılma egzersizi haline getirilmiştir. Kelepçeleme tekniğini, damarın veya bronşun boyutuna uygun en küçük etkili manşeti kullanacak şekilde standartlaştırarak, transplantasyon prosedürünü daha güvenli, daha hızlı ve daha başarılı hale getirebiliriz. PV, PA ve Br'nin çapları sıçanın vücut ağırlığı ile ilişkili olduğundan, ağırlığa dayalı bir kılavuz kullanarak uygun bir boyut seçmek için bir strateji sunuyoruz. Akciğer hacmi vücut ağırlığı ile de ilişkili olduğundan, sıcak iskemi sırasında donör akciğer enflasyonu için uygun hava hacmini seçerken ve bronkoalveoler lavaj (BAL) sıvı toplanması sırasında aşılanacak uygun PBS hacmi için bu ilişkinin de göz önünde bulundurulmasını öneririz. Ayrıca 4. interkostal boşluk diseksiyonu, yara kapatma ve hem doğal hem de transplante loblardan örnek toplama yöntemlerini de tanımladık.

Giriş

Otuz yılı aşkın bir süredir, araştırmacılar sıçan akciğer nakli modellerini değiştirmekte ve geliştirmektedir, böylece üretilen veriler daha tutarlı ve gerçek klinik durumu daha yansıtmaktadır. Laboratuvarımızın bu modeli uyguladığı dönemde, dört iyileştirme alanı belirledik: anastomozlar için kelepçeleme teknikleri, alıcının 4. interkostal boşluğunun tanımlanması, alıcının prosedürü sırasında akciğer şişirmesi ve yara kapanması ve analiz için örneklerin toplanması.

Anastomozlar için kelepçeleme tekniği modifikasyonları, donör akciğerin 1,2,3,4,5,6 işlem süresini kısaltarak ve anastomoz prosedürünü mikroce....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Erkek Sprague-Dawley sıçanları (180-270 g vücut ağırlığı) ticari olarak satın alındı (örneğin, Envigo) ve Ohio State Üniversitesi Hayvan Tesisi'nde patojensiz koşullar altında barındırıldı. Tüm prosedürler, NIH ve Ulusal Araştırma Konseyi'nin Laboratuvar Hayvanlarının İnsancıl Bakımı ve Kullanımı Kılavuzu'na göre ve Ohio State Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi'nin (IACUC Protokolü # 2012A00000135-R2) onayıyla insancıl bir şekilde gerçekleştirilmiştir.

1. İlk kurulum

  1. Cerrahi cihazları ayarlayın.
    NOT: Bu hayatta kalma dışı bir ameliyattır. Sağkalım ameliyatı yapılacaksa, steril aletler ve bariyer önlemleri....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Pulmoner ödemi ölçmek için ıslak-kuru ağırlık oranı hesaplandı. Donörün doğal lobu, nakledilen lob ve alıcının doğal lobu protokolde açıklandığı gibi toplandı ve ıslak ağırlık için hemen tartıldı, 48 saat boyunca 60 ° C'de kurutuldu ve daha sonra kuru ağırlık için tekrar tartıldı. Islak-kuru ağırlık oranının artması, pulmoner ödemin göstergesi olacaktır. Sonuçlarımız, nakledilen lobun ıslak-kuru ağırlık oranında donörün veya alıcının doğal lobuna kıyasla anlamlı bir artış olduğunu göstermekte.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Bu yazıda, prosedürü optimize etmek için bir sıçan akciğer nakli protokolünde birkaç kritik adımda müdahale ettik. Sıçan akciğer transplantasyonu için çeşitli kelepçeleme teknikleri bildirilmiş olsa da 1,2,3,4,5,6,7,8,9,15, mikrocerrahlar için işlem hala öznel ve zor olabilir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

BAW, YGL ve JLK, Ulusal Sağlık Enstitüleri (NIH) hibesi R01HL143000 ile desteklenmektedir. BAW, Savunma Bakanlığı (DOD) hibesi W81XWH1810787 ile desteklenmektedir. SMB, NIH hibesi R01DK123475 aracılığıyla desteklenir. JM, NIH hibeleri AR061385, AR070752, DK106394 ve AG056919'un yanı sıra DOD hibesi W81XWH-18-1-0787 tarafından desteklenmektedir.

Teşekkürler

Hiç kimse.

....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
12 Gauge anjiyo-kateterBD382277
14 Gauge anjiyo-kateterB. Braun4251717-02
16 Gauge anjiyo-kateterB. Braun4252586-02
18 Gauge anjiyo-kateterB. Braun4251679-02
20 Gauge anjiyo-kateterB. Braun4252527-02
4-0 ipek sütürCerrahi Uzmanlıklar A.Ş.SP116
6-0 naylon sütürAD CerrahiS-N618R13
7-0 naylon sütürAD CerrahiS-N718SP13
8-0 naylon sütürAD CerrahiXXS-N807T6
Betadine SpreyAvrio Health LPUPC
MakasıVWRMSPP-023326
Castroviejo mikro diseksiyon yaylı makasRoboz Cerrahi Alet CoRS-5668
Dumont #5 - İnce ForsepsGüzel Bilim Araçları11254-20
ElektrokoterMacanMV-7A
Endotrakeal entübasyon kitiKent ScientificETI-MSE
ForsepsGüzel Bilim Araçları11027-12
Halsted-sivrisinek kanama durdurucuRoboz Cerrahi Alet CoRS-7112
HeparinFresnius Tıbbi BakımC504701
İnsülin şırıngaYaşam TeknolojileriB328446
İzofluranPiramal Kritik BakımNDC 66794-017-25
İzopropil Alkol ÇubuklarıBD326895
KetaminHikma İlaç PLCNDC 0413-9505-10
Dieffenbach Bulldog KelepçeDünyası Hassas AletlerWPI14117
İğne tutucu / Forseps, KavisliMicrinsMI1542
İğne tutucu / Forseps, DüzMicrinsMI1540
Perfadex Plus (Organ Koruma Solüsyonu)XVIVO Perfusion ABREF # 19950
PhysioSuiteKent BilimselPS-MSTAT-RTSpO2 ve kalp atışını kontrol etmek için kullanılır
RetraktörRoboz Cerrahi Alet CoRS-6560
SalinPP Pharmaceuticals LLCNDC 63323-186-10
MakasGüzel Bilim Araçları14090-11
SomnoSuite Küçük Hayvan Anestezi SistemiKent ScientificSS-MVG-Modülü
Steril  Pamuklu Gazlı Bez PedFisherbrand22-415-469
Cerrahi MikroskopLeicaM500-N w / OHS
Şırınga 5 mLBD309646
Vannas-Tübingen Yaylı MakasGüzel Bilim Araçları15008-08
KsilazinKorn İlaç A.ŞNDC 59399-110-20
Yaşargil KelepçeAesculap, IncFT351TBronşları kelepçelemek için kullanılır
Yaşargil KelepçeAesculap, IncFT261THilum
Yaşargil Kelepçe AplikatörüAesculap, IncFT484T
367618160039 . kelepçelemek için kullanılır

Kaynaklar

  1. Mizuta, T., Kawaguchi, A., Nakahara, K., Kawashima, Y. Simplified rat lung transplantation using a cuff technique. Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 97 (4), 578-581 (1989).
  2. Zhai, W., et al. Simplified rat lung tr....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Daha fazla makale keşfet

Kafleme TekniğiPulmoner ArterPulmoner VenBronkoalveoler Lavajİnterkostal Aralık DiseksiyonuAkciğer Ödemi ÖlçümüCerrahi Mikroskop