Yöntem makalesi

Wistar Albino Sıçanlarında Femur Osteotomi Modeli Geliştirme Protokolü

2.9K görüntüleme

DOI:

10.3791/63712

31 Ağustos 2022

Bu makalede

Özet

Burada, Wistar albino sıçanlarının femurunun şaftını iyatrojenik olarak kırmak ve nasır gelişimini takip etmek için bir protokol sunuyoruz. Bu femur osteotomi modeli, araştırmacıların kırık iyileşme sürecini değerlendirmelerine ve bir ilacın kırık iyileşmesini nasıl etkileyebileceğini incelemelerine yardımcı olabilir.

Özet

Kırık iyileşmesi, osteoblastların ve osteoklastların koordineli etkisiyle kemik defektlerinin yenilenmesiyle sonuçlanan fizyolojik bir süreçtir. Osteoanabolik ilaçlar, kırıkların onarımını arttırma potansiyeline sahiptir, ancak yüksek maliyetler veya istenmeyen yan etkiler gibi kısıtlamalara sahiptir. Bir ilacın kemik iyileşme potansiyeli başlangıçta in vitro çalışmalarla belirlenebilir, ancak kavramın nihai kanıtı için in vivo çalışmalara ihtiyaç vardır. Amacımız, araştırmacıların femur şaftının kırılmasını takiben nasır oluşumunun gelişimini anlamalarına yardımcı olabilecek ve potansiyel bir ilacın kemik iyileştirici özelliklere sahip olup olmadığını belirlemeye yardımcı olabilecek bir femur osteotomi kemirgen modeli geliştirmekti. Yetişkin erkek Wistar albino sıçanları, Kurumsal Hayvan Etik Kurulu izninden sonra kullanıldı. Kemirgenler anestezi altına alındı ve aseptik koşullar altında, açık osteotomi kullanılarak femurların şaftlarının ortada üçte birinde tam enine kırıklar oluşturuldu. Kırıklar intramedüller K-teller kullanılarak azaltıldı ve internal olarak sabitlendi ve sekonder kırık iyileşmesinin gerçekleşmesine izin verildi. Ameliyattan sonra 5 gün boyunca intraperitoneal analjezikler ve antibiyotikler verildi. Sıralı haftalık röntgenler nasır oluşumunu değerlendirdi. Sıçanlar radyolojik olarak önceden belirlenmiş zaman noktalarına göre kurban edildi ve kırık nasır gelişimi radyolojik olarak ve immünohistokimya kullanılarak analiz edildi.

Giriş

Kemik, kemik oluşturan hücrelerden, osteoblastlardan ve kemik emici hücrelerden, osteoklastlardan oluşan yoğun bir bağ dokusudur. Kırık iyileşmesi, osteoblastların ve osteoklastların koordineli etkisiyle kemik defektlerinin yenilenmesiyle sonuçlanan fizyolojik bir süreçtir1. Kırık olduğunda, kırık bölgesinde osteoblastik ve osteoklastik aktivite kemik iyileşmesini belirleyen önemli faktörlerden bazılarıdır2. Kırık iyileşmesi normal seyrinden saptığında, gecikmiş bir birleşme, malunion veya birleşmeme ile sonuçlanır. 9 ay boyunca kırığın birleşme başarısızlığı olduğunda, son 3 ay içinde onarımın ilerlemesi olmadan bir kır....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

Hayvan deneyleri, Kurumsal Hayvan Etiği Komitesi (IAEC), AIIMS, Yeni Delhi, Hindistan'dan (286/IAEC-1/2021) etik onay alındıktan sonra yapılmıştır.

1. Preoperatif prosedür

  1. Ev erkek Wistar albino sıçanları, her biri 150-200 g ağırlığında, ayrı ayrı kafeslerde bir Merkezi Hayvan Tesisi'nde (CAF) 6-8 haftalıktır. Bu, birden fazla sıçan kafesleri paylaştığında cerrahi / kırık bölgesi yaralanması olmamasını sağlar.
  2. Sıçanları% 50 ±% 5 bağıl neme sahip nem kontrollü bir ortamda 23 ° C ± 2 ° C sıcaklıkta tutun, 12 saatlik karanlık / açık döngüye maruz bırakın ve gıdaya (standart yarı sentetik diyet) ad libit....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

Bu çalışma Wistar albino sıçanlarında femur osteotomi modeli geliştirmek amacıyla yapılmıştır. Bu model, kemik iyileşmesini ve umut verici bir osteoanabolik ilacın kemik iyileşmesinde osteojenik etkisini değerlendirmek için kullanılabilir. Standart cerrahi önlemler ve protokoller takip edildi. İşlem için steril önlükler, perdeler ve cerrahi ekipmanlar kullanıldı (Şekil 1). Ekipman (Tablo 1) ameliyattan 48 saat önce sterilize edildi. Hayvanların her zaman ağrısız ve enfeksiyo.......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

Bu yöntem, Wistar albino sıçanlarında kırık osteotomi modeli geliştirmek için gereken ayrıntıları açıkça açıklamaktadır. Bu model, umut verici bir osteoanabolik ilacın kırık iyileşmesindeki osteojenik etkisini değerlendirmek ve kemik iyileşmesinin inceliklerini anlamak için kullanılabilir. Bu yöntemin göze çarpan özelliği, basit olması ve çok fazla zamana veya sofistike ekipmana ihtiyaç duymamasıdır. Bu yöntemde, deneyler için kemirgen modeli olarak yetişkin erkek Wistar albino sıçanları seçilmiştir. Cinsiyet hormonları .......

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

Yazarların hiçbirinde çıkar çatışması veya başka finansal açıklamalar bulunmamaktadır.

Teşekkürler

Yazarlar, araştırma finansmanı için Hindistan Hükümeti AYUSH Bakanlığı, Homeopati Araştırmaları Merkez Konseyi'ne (CCRH) teşekkür eder. Yazarlar, Central Animal Facility, AIIMS, New Delhi'nin hayvan deneylerine olan yardımları ve destekleri için ve CMET, AIIMS, Yeni Delhi'nin fotoğraf ve videografideki yardım ve destekleri için teşekkür eder.

....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
AlkolRaman & Weil Pvt. Ltd, Mumbai, Maharashtra, HindistanMFG / MD / 2019/000189Sterillium el dezenfektanı
Arter forseps Nebula cerrahi, Gujarat, HindistanG.105.05S5", düz
Bard-Parker kolu Nebula cerrahi, Gujarat, HindistanG.103.03Boyut numarası 3
Betadine çözeltisiWin-medicare Yeni Delhi, HindistanUP14250000001% 10 w / v Povidone iyot çözeltisi
Kedi pençesi deri ekartörü ve nbsp;Nebula cerrahi, Gujarat, Hindistan908.SKüçük
EDTASisco araştırma laboratuvarları Pvt. Ltd, Maharashtra, Hindistan43272Disodyum tuzu
EosinSigma Aldrich, Merck Life Sciences Pvt Ltd, Mumbai, Maharashtra, Hindistan115935Boyama solüsyonunu hazırlamak için 
Forseps (düz)Nebula cerrahi, Gujarat, Hindistan115.066", düz
Forseps (dişli)Nebula cerrahi, Gujarat, Hindistan117.066", dişli
FormaldehitSisco araştırma laboratuvarları Pvt. Ltd, Maharashtra, Hindistan84439Nötr tamponlu formalini hazırlamak için 
HaematoxylinSigma Aldrich, Merck Life Sciences Pvt Ltd, Mumbai, Maharashtra, Hindistan104302Boyama solüsyonunu hazırlamak için 
ÇekiçBulutsusu cerrahi, Gujarat, Hindistan401.M
Enjeksiyon SefuroksimAkumentis Healthcare Ltd, Thane, Maharashtra, Hindistan48 / UA / SC / P-2013Sefuroksim sodyum IP, 1.5 g / şişe ve nbsp;
Enjeksiyon KetaminBaxter İlaç Hindistan Özel Limited, Gujarat, HindistanG / 28-B / 6Ketamin hidroklorür IP, 50 mg / mL ve nbsp;
Enjeksiyon KsilazinHint İmmünolojik Limited, Haydarabad, Telangana, Hindistan28 / RR / AP / 2009 / F / GKsilazin hidroklorür USP, 20 mg / mL
Enjeksiyon LignokainJackson laboratuvarları Pvt Limited, Pencap, Hindistan  1308-B% 2 Lignokain Hidroklorür IP, 21.3 mg / mL
Enjeksiyon Tramadol ve nbsp;Intas Pharmaceuticals Limited, Ahmedabad, Gujarat, HindistanMB / 07/500Tramadol hidroklorür IP, 50 mg / mL
K-tel ve nbsp;Nebula cerrahi, Gujarat, Hindistan166 (1mm)12 ", çift uçlu
K-tel ve lrm yerleştirmek için mekanik matkap; Bosch, Almanya 06019F70K4GSR 120-LI Profesyonel
Metzenbaum kesme makası Nebula cerrahi, Gujarat, HindistanG.121.06S6 ", düz
İğne tutucuNebula cerrahi, Gujarat, HindistanG.108.066 ", düz
Oftalmik merhem GlaxoSmithKline Pharmaceutical Limited, Bengaluru, Karnataka, HindistanKTK/28a/467/2001Neomisin, Polimiksin B sülfat ve Basitrasin çinko oftalmik merhem USP
Osteotom (keski)Nebula cerrahi, Gujarat, Hindistan1001.S.1010 mm, düz
Periosteal asansör Nebula cerrahi, Gujarat, Hindistan918.10.S10 mm, düz
Pense cum tel kesiciNebula cerrahi, Gujarat, Hindistan604.65
Reynold' s makasNebula cerrahi, Gujarat, HindistanG.110.06S6", düz
Standart yarı sentetik diyet Ashirvad Industries, Chandigarh, HindistanKatalog numarası mevcut değilKullanılan malzemelerde sağlanan ayrıntılı bileşim
Uygulama için betadin tutmak için çelik kapYerel satın almaKatalog numarası mevcut
Otoklavlama aletleri için kapaklı çelik tepsiYerel satın almaKatalog numarası yok
Steril gazlı bezİdeal Sağlık Endüstrileri, Delhi, Hindistan ve nbsp;E(0047)/14/MNB/7951Steril, 5cmx5cm, 12 kat
Destek için steril mermer blokYerel satın almaKatalog numarası mevcut değilYerel olarak üretilmiş; otoklavlanabilir
Şırınga ve iğne (1 mL) Becton Dickinson India Pvt. Ltd., Haryana, HindistanREF 30306026 G x 1/2 (0.45 mm x 13 mm) iğneli 1 mL steril Şırınga
ve iğne (2 mL) Becton Dickinson India Pvt. Ltd., Haryana, HindistanREF 30774924 G x 1 '' (0.55 mm x 25 mm) iğneli 2 mL steril şırınga
Şırınga ve iğne (10 mL) Hindustan Şırıngalar & Tıbbi Cihazlar Ltd. Faridabad, Hindistan 334-B(H)10 mL steril şırınga, 21 G x1,5" (0,80 mm x 38 mm) iğne ile
Cerrahi bıçaklar (boyut no.15)Paramount Surgimed Ltd, Yeni Delhi, Hindistan Medline Industries Inc, IL, ABDREFSteril, Tek kullanımlık
Cerrahi bıçaklar (boyut no.24)Paramount Surgimed Ltd, Yeni Delhi, Medline Industries Inc, IL, ABDREFSteril, Tek kullanımlık
SütürlerHealthium Medtech Pvt Ltd, Bangalore, Karnataka, HindistanSN 33184-0, 16 mm, 3/8 daire kesme iğnesi, monofilament poliamid sütür 
Alüminyum tepside balmumu bloğu Yerel olarak üretilmiştir Katalognumarası mevcut değil30 cm x 30 cm x 4 cm balmumu içeren alüminyum tepsi (hayvanın kaymasını önlemek için)
X-ray cihazıPhilips India Ltd, Gurugram, HaryanaSN19861013Model: Philips Digital Diagnost R 4.2 
değil MDS15115E MDS15124E

Kaynaklar

  1. Wang, T., Zhang, X., Bikle, D. D. Osteogenic differentiation of periosteal cells during fracture healing. Journal of Cellular Physiology. 232 (5), 913-921 (2017).
  2. Fakhry, M., Hamade, E., Badran, B., Buchet, R., Magne, D. Molecular me....

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

K r k yile mesiKemik yile mesiOsteoanabolik la larntramed ller K TeliKallus Olu umuKemik Dekalsifikasyonumm nohistokimyaMikro BT

İlgili makaleler