Yöntem makalesi

Pankreas Kanserinin Bir Fare Modelinde Tümör İnfiltre Eden Lenfositlerin Flow Sitometri Tabanlı İzolasyonu ve Terapötik Değerlendirmesi

DOI:

10.3791/67413

⸱

17 Ocak 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Pancreatic Cancer, National Clinical Research Center for Cancer, Tianjin's Clinical Research Center for Cancer, Tianjin Key Laboratory of Digestive Cancer, Key Laboratory of Cancer Prevention and Therapy, Tianjin Medical University Cancer Institute and Hospital, 2Department of Immunology and Biotherapy, National Clinical Research Center for Cancer, Tianjin's Clinical Research Center for Cancer, Key Laboratory of Cancer Immunology and Biotherapy, Key Laboratory of Cancer Prevention and Therapy, Tianjin Medical University Cancer Institute and Hospital, 3Research Core Facility, School of Basic Medical Sciences, Tianjin Medical University, 4Department of Public Laboratory, National Clinical Research Center for Cancer, Key Laboratory of Cancer Prevention and Therapy of Tianjin, Tianjin's Clinical Research Center for Cancer, Tianjin Medical University Cancer Institute and Hospital

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Evlat edinen hücre transferi için farelerden alınan tümör infiltre lenfositleri (TIL'ler) akış sitometrisi yoluyla kullanmak için bir yöntem tanımladık. Bu protokol, sinjeneik pankreas kanseri fare modelinde tümörlere karşı TIL'lerin spesifik sitotoksisitesini doğrulamayı ve pankreas kanseri için evlat edinen hücre tedavilerinin geliştirilmesine ilişkin içgörüler sağlamayı amaçlamaktadır.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Pankreas kanseri, kasvetli prognozu ve sınırlı tedavi seçenekleri olan agresif bir malignitedir. Bir hastanın tümör infiltre eden lenfositler (TIL'ler) gibi kendi bağışıklık hücrelerinin yeniden infüze edilmeden önce izole edilmesini ve aktive edilmesini içeren evlat edinici hücre tedavisi, umut verici bir deneysel yaklaşımı temsil eder. Bununla birlikte, klinik öncesi pankreas kanseri modellerinde evlat edinen hücre transferi için teknikler iyi bilinmemiştir. Burada, sinjeneik pankreas kanseri fare modelinden alınan TIL'leri kullanarak evlat edinen hücre tedavisi için ayrıntılı bir protokol açıklıyoruz. Prosedür, bağışıklık hücresi akışını başlatmak için floresan etiketli raportör farelere canlı veya ışınlanmış fare pankreas kanseri hücrelerinin implante edilmesini, daha sonra akış sitometrisi yoluyla lenfositlerin primer tümörlerden izole edilmesini, tümör-reaktif T hücrelerinin ex vivo olarak sıralanmasını ve / veya aktive edilmesini ve genişletilmesini içerir ve bu aktive edilmiş T hücrelerini intraperitoneal olarak tümör taşıyan farelere evlat edinerek transfer etmeyi ve ardından interlökin-2 uygulamasını içerir. Biyolüminesan tümör görüntüleme, ortotopik tümör büyümesinin ve tedaviye yanıtın, özellikle tümöre özgü sitotoksik etkilerin değerlendirilmesinin uzunlamasına izlenmesine olanak tanır. Bu yaklaşım, pankreas kanseri hastaları için evlat edinen hücre transfer tedavilerinin geliştirilmesinde yer alan lojistiği özetlemektedir. Sonuçlar, ilgisiz lenfosit kontrollerine kıyasla adoptif olarak transfer edilen tümör-reaktif T hücrelerinin antitümör etkinliğinin arttığını göstermektedir. Bu çok yönlü metodoloji, pankreas kanserinde evlat edinen immünoterapinin in vivo çalışmasının yanı sıra hücre işleme parametrelerinin ve kombinasyon tedavi rejimlerinin optimizasyonunu sağlar.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Pankreas kanseri immünoterapisi, esas olarak fare modellerinde devam eden klinik öncesi keşif ve doğrulama ile başlangıç aşamalarındadır1. Pankreas kanseri için mevcut tedaviler arasında cerrahi, kemoterapi, radyoterapi ve hedefe yönelik tedaviler yer almaktadır. Ne yazık ki, bu yöntemler genellikle tümör lezyonlarını tamamen ortadan kaldırmakta başarısız olur, bu da nüks ve ilerlemeye yol açar. Geleneksel tedaviler tümör hücrelerine odaklanır, ancak genellikle hem tümör hücrelerini hem de tümör infiltre eden lenfositler (TIL'ler), fibroblastlar ve hücre dışı matriks2'den oluşan ilişkili stroma'yı içeren tümör mikroçevresini (TME) göz ardı eder. TIL'ler, sitotoksik T hücreleri, yardımcı T hücreleri, düzenleyici T hücreleri, B hücreleri, NK hücreleri, makrofajlar ve miyeloid türevi baskılayıcı hücreler dahil olmak üzere TME içindeki bağışıklık hücreleridir3. Bu hücreler, tümör büyümesini ve terapötik sonuçları etkileyen bağışıklık tepkilerine katılır4.

Evlat edinici hücre tedavisi (ACT), bir hastanın bağışıklık hücrelerinin toplanmasını, bunların in vitro olarak değiştirilmesini ve genişletilmesini ve daha sonra tümör hücrelerini hedeflemek ve öldürmek için yeniden yerleştirilmesini içerir. Bir ACT türü olan TIL tedavisi, melanom, akciğer kanseri ve rahim ağzı kanseri dahil olmak üzere çeşitli kanserleri tedavi etmek için araştırılmaktadır. Bu işlem, lenfositlerin tümörden izole edilmesini, in vitro olarak IL-2 ile kültürlenmesini ve genellikle kemoterapi veya radyoterapi5 ile lenfodeplesyondan sonra hastaya yeniden infüze edilmesini içerir.

Rosenberg'in 1986 çalışması, farelerde6 TIL'lerin etkinliğini gösterdiğinden, evlat edinen hücre transferi immünoterapisi bir araştırma noktası haline geldi ve kanser tedavisinde umut vaat etti 7,8,9,10. Farelerden TIL'leri çıkarmayı, akış sitometrisi yoluyla spesifik T hücreleri için sıralamayı ve evlat edinme transferi yoluyla tümör öldürme etkilerini doğrulamayı amaçlıyoruz.

Bu protokolde, evlat edinen hücre transferi için akış sitometrisi yoluyla farelerden alınan TIL'leri kullanmak için bir yöntem açıklıyoruz. Amaç, sinjeneik pankreas kanseri fare modelinde tümörlere karşı TIL'lerin spesifik sitotoksisitesini doğrulamak ve pankreas kanseri için evlat edinen hücre tedavilerinin geliştirilmesine ilişkin içgörüler sağlamaktır. Bu yöntem, bağışıklık hücresi akışını başlatmak için floresan etiketli raportör farelere canlı veya ışınlanmış fare pankreas kanseri hücrelerinin implante edilmesini, akış sitometrisi sıralaması yoluyla lenfositlerin birincil tümörlerden izole edilmesini veya tümör-reaktif T hücrelerinin ex vivo olarak aktive edilmesini ve genişletilmesini ve bu aktive edilmiş T hücrelerinin tümör taşıyan farelere evlat edinilerek aktarılmasını içerir. İnterlökin-2 ve biyolüminesan tümör görüntülemenin müteakip uygulanması, ortotopik tümör büyümesinin ve tedaviye yanıtın, özellikle tümöre özgü sitotoksik etkilerin değerlendirilmesinin uzunlamasına izlenmesine izin verir. Bu yaklaşım, pankreas kanseri hastaları için evlat edinen hücre transfer tedavilerinin geliştirilmesinde yer alan lojistiği özetlemektedir. Sonuçlar, ilgisiz lenfosit kontrollerine kıyasla adoptif olarak transfer edilen tümör-reaktif T hücrelerinin antitümör etkinliğinin arttığını göstermektedir. Bu çok yönlü metodoloji, pankreas kanserinde evlat edinen immünoterapinin in vivo çalışmasının yanı sıra hücre işleme parametrelerinin ve kombinasyon tedavi rejimlerinin optimizasyonunu sağlar.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Fare kolonisi, ilgili tüm USDA, HHS ve NIH düzenlemelerine ve standartlarına bağlı kalarak AAALAC International tarafından akredite edilmiş bir tesiste barındırılmaktadır. Tianjin Tıp Üniversitesi Kanser Enstitüsü ve Hastanesi Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi, suş seçimi gerekçesi, deney grubu atamaları ve hayvan sayıları ve randomizasyon için istatistiksel gerekçelendirme dahil olmak üzere tüm hayvan prosedürlerini gözden geçirdi ve onayladı.

1. Tümör İndüksiyonu

  1. Farelerde ortotopik pankreas tümörlerini indüklemek için KPC-Luc hücre hattı11'i kullanın.
  2. KPC-Luc hücrelerini tripsinleyerek, PBS ile iki kez yıkayarak ve %30'luk bir bazal membran matrisi (BMM) ile PBS'de 1 x 106 hücre / mL konsantrasyonda yeniden süspanse ederek bir hücre süspansiyonu hazırlayın.
  3. Fareyi %4'lük bir indüksiyon dozunda izofluran ile uyuşturun ve ardından %2'lik bir idame dozuna geçin. Gerektiğinde bir ısıtma yastığı ve monitör kullanarak termal destek sağlayın. Kuruluğu önlemek için her iki göze de oftalmik merhem sürün.
  4. Hem iyot bazlı bir ovma hem de alkol kullanarak cerrahi alanı dairesel hareketlerle birkaç kez dezenfekte edin. Ameliyattan önce analjezi olarak deri altı 5 mg / kg carprofen enjeksiyonu uygulayın. Steril bir neşter bıçağı kullanarak, pankreası ortaya çıkarmak için farenin sol kaburgasının altında küçük bir sol karın kesisi (0,5-1 cm) yapın.
  5. Fare dalağını tutmak ve fare pankreasını açığa çıkarmak için forseps kullanın, hücreleri karıştırın ve fare başına 50.000 hücre ile farenin pankreasına enjekte edin. 50 μL hücre süspansiyonunu 29 G'lik bir iğne kullanarak doğrudan pankreasa enjekte edin.
  6. Fare pankreasını geri getirin ve peritonu ve cildi dikişlerle sırayla dikin.
  7. Farenin tamamen uyanana kadar ılık bir ped üzerinde iyileşmesine izin verin. Ameliyattan sonra 3 gün boyunca her gün analjezi olarak deri altına 5 mg / kg carprofen uygulayın.
  8. Tümör büyümesini izlemek için enjeksiyondan 7 gün sonra canlı görüntüleme yapın.
    NOT: Tedaviler bu aşamada uygulanabilir.
    1. Fareye intraperitoneal olarak D-Luciferin potasyum tuzu enjekte edin (PBS'de 150 μg / mL, fare başına 60 μL).
    2. İzofluran anestezisini takiben, fareyi biyolüminesans tespiti için in vivo görüntüleme sistemine yerleştirin. Görüntülemeden sonra, fareyi sistemden çıkarın ve anesteziden doğal olarak kurtulmasına izin verin.

2. Tümörleri hasat edin

  1. Donör fareleri bir CO2 odası kullanarak ötenazi yapın. Tüm vücudu% 75 etanol ile sterilize edin.
  2. Fareyi steril bir başlık içine yerleştirin. Karın boşluğunu açmak için steril makas ve forseps kullanın.
  3. Tümörleri çıkarın ve buz üzerinde PBS'ye yerleştirin. Tümör boyutunu sürmeli bir kumpas ile ölçün ve (π x uzunluk × genişlik × genişlik)/6 formülünü kullanarak tümör hacmini hesaplayın.

3. Tümör sindirimi

  1. RPMI 1640'ta 0.125 mg / ml kollajenaz, 0.125 mg / ml Dispas II ve 10 ug / ml DNaz I'i 1x konsantrasyon olarak yaparak sindirim çözeltisini hazırlayın. 12 oyuklu bir plakada oyuk başına 1-2 mL sindirim çözeltisi ekleyin.
  2. Steril makas kullanarak tümörleri küçük parçalar halinde doğrayın. Tümör parçalarını 37 ° C'de 30 dakika boyunca 70 rpm'de çalkalayarak sindirin.

4. Hücre toplama

  1. 2-4 mL% 10 fetal sığır serumu ekleyerek sindirimi sonlandırın. Tüm hücreleri bir toplama tüpüne aktarın.
  2. Kalan hücreleri toplamak için kuyuları PBS ile iki kez yıkayın. Hücre süspansiyonunu 40 μm veya 70 μm'lik bir hücre süzgecinden süzün.
  3. Hücreleri 4 ° C'de 5 dakika boyunca 400 x g'da santrifüjleme ile toplayın. Akış sitometrisi boyaması için hücreleri% 5 BSA'da yeniden süspanse edin.

5. Akış sitometrisi hazırlığı

  1. Tümör taşımayan farelerden dalak veya periferik kan mononükleer hücrelerini (PBMC'ler) kontrol olarak hazırlayın.
    NOT: İsteğe bağlı: Tümör taşıyan farelerden elde edilen PBMC'ler de kontrol olarak kullanılabilir.
  2. Hücreleri Fc blokerleri (milyon hücre başına <1 μg) ve akış antikorları (1:100 seyreltmede CD3-APC, CD45-APC / Fire750) ile boyayın.
  3. Karanlıkta buz üzerinde 30 dakika kuluçkaya yatırın. Soğuk PBS ile iki kez yıkayın ve hücreleri PBS'de% 1 BSA'da yeniden süspanse edin.

6. Hücre sıralama

  1. Bir akış sitometresi kullanarak CD45 + CD3 + hücrelerini sıralayın. FSC-A ve SSC-A'ya (P1) dayalı canlı hücreleri geçit edin. Ardından, FSC-A ve FSC-H'ye (P2) dayalı olarak P1'den tek hücreleri kapılayın.
  2. Son olarak, CD45 ve CD3 kapısını kullanarak CD45 + CD3 + 'yı P2'den ayırın ve bunları toplama tüplerine toplayın. Sıralama sırasında hücre canlılığının uygun şekilde yeniden askıya alınmasını ve korunmasını sağlayın.

7. Transfer için hücre hazırlığı

  1. Sıralanmış hücreleri 400 ° C'de 5 dakika boyunca 4 x g'da santrifüjleyin. Fare serumundaki hücreleri 1 x 106 hücre / mL'lik bir son konsantrasyonda yeniden süspanse edin. Hücreleri buz üzerinde tutun.
    NOT: Ex vivo kültür veya sıralanan hücrelerin aktivasyonu gerçekleştirilebilir.

8. Evlat edinen transfer

  1. Transfer gününden 7 gün önce alıcı fare için tümör indüksiyonu gerçekleştirin.
  2. 29 G x 1/2 "insülin şırıngası kullanarak fare başına 2 x 105 hücreyi intraperitoneal olarak alıcı farelere enjekte edin. IL-2'yi (fare başına 50 IU) art arda üç gün boyunca intraperitoneal olarak uygulayın.

9. Tümör izleme

  1. Tümör büyümesini değerlendirmek için transferden sonraki 4. ve 7. günlerde canlı görüntüleme yapın ve adım 1.8'de açıklanan aynı prosedürle haftalık olarak ek canlı görüntüleme yapın.
  2. Alıcı farelerin hayatta kalmasını takip edin. Deneyin sonunda, fareyi yukarıda anlatıldığı gibi ötenazi yapın. Tümörleri çıkarmak için oftalmik makas ve forseps kullanın ve ardından tümör boyutunun hızlı bir şekilde ölçülmesi için bunları buz üzerinde PBS'ye yerleştirin ve gerektiğinde sonraki deneylere devam edebilirsiniz.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Alıcı fareler, TIL transferinin etkinliğini kapsamlı bir şekilde değerlendirmek için yedi gruba ayrılır: (a) Salin kontrolü (boş kontrol): Temel olarak hizmet etmek için salin enjeksiyonları alan fareler. (b) Sadece IL-2 (boş kontrol): Tek başına sitokinin herhangi bir etkisini hesaba katmak için IL-2 enjeksiyonları alan fareler. (c) Tedavi edilen donör farelerle aynı tek tedavi (pozitif kontrol): Doğrudan tedavi ile TIL transferini karşılaştırmak için donör farelerle aynı tedaviyi alan f...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Pankreas kanseri için potansiyel İmmünoterapi, evlat edinen immünoterapi, bağışıklık kontrol noktası inhibitörleri ve tümör aşılarını içeren tümör hücrelerini hedeflemek ve ortadan kaldırmak için bağışıklık sistemini artırabilir12. TIL tedavisi, tümörlerden lenfositleri çıkarır ve genişletir, bunlar daha sonra hastalara yeniden infüze edilir. Diğer evlat edinici hücre tedavileriyle karşılaştırıldığında, TIL tedavisi çeşitli TCR klonalitesine, üstün tümör hedef bul...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarlar herhangi bir çıkar çatışması olmadığını beyan etmişlerdir. Yazarlar, dil düzenlemesi için ChatGPT ve Claude-3 kullanırken, ChatGPT veya Claude-3 tarafından oluşturulan kelime ve cümleleri makaleye dahil etmeden önce dikkatlice gözden geçirdiler ve doğruladılar.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu araştırma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (NSFC) hibeleri, 82272767 numaralı hibe ve YM'ye 82072691 tarafından finanse edilmiştir. Yazarlar, tartışmaları ve işbirlikleri için ekip üyelerine teşekkür eder.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Biyolüminesan görüntüleme sistemiPerkinElmerIVIS Spektrumu Tümörbüyümesini izlemek için
Sığır Serumu Albümin VSolarbioA8020Hücre yeniden süspansiyonu için
Hücre süzgeci (40 & mu; m veya 70 μ m)JetCSS013040Hücre süspansiyonlarını filtrelemek için
SantrifüjEppendorf5810RHücre toplama ve hazırlama için
CO2 odasıTianjin LiliangN/AFarelere ötenazi yapmak için
KollajenazSigma-AldrichC5138Sindirim çözeltisi
CD3-APC antikoruiçin Biolegend100236Akış sitometrisi için boyama
CD45-APC / Fire750 antikoruBiolegend100154Akış sitometrisi boyama
için C57BL / 6 albino farelerJackson Laboratuvarı58Donör ve alıcı fareler
Dispase IIGibco17105-041Sindirim çözeltisi için
DNase ISparkJadeAC1711Sindirim çözeltisi için
D-Luciferin potasyum tuzuBeyotimeST198-10gCanlı görüntüleme için
Etanol (% 75)N / A Sterilizasyon
için Fc blokerleriBD Biosciences553142Akış sitometrisi boyama için
Fetal Sığır SerumuGibcoA5669701Hücre kültürü için
Akış sitometresiBD BiosciencesFACSAria IIIHücre sınıflandırması için
IL-2 (İnterlökin-2)PeproTech200-02Uygulama için transfer sonrası
IsofluranShandong AnteN/ANarkotizm için
KPC-Luc hücre hattıPI laboratuvarı tarafından oluşturulanN/AOrtotopik pankreas tümörlerini indüklemek için
Matrigel MatrixCorning356234Ortotopik implantasyon için
PBS (Fosfat Tamponlu Salin)ServicebioG4207-500MLHücreleri yıkamak ve yeniden süspanse etmek için
RPMI 1640 ortaGibco11875093Sindirim solüsyonu hazırlamak için
Steril başlıkESCON/ASteril tümör ekstraksiyonu ve işleme için
Steril makas ve forsepsN/A Tümörekstraksiyonu için Sütür
(4-0, PGA emilebilir sütür)Jinhuan MedicalR413Yara kapatma için
ŞırıngaJiangxi Fenglin1 mL 0.45 > 16RWLBEnjeksiyon için
Doku kültürü plakası 12 kuyuluJetTCP001012Tümör sindirimi için

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Ma, Y., et al. Combination of PD-1 inhibitor and OX40 agonist induces tumor rejection and immune memory in mouse models of pancreatic cancer. Gastroenterology. 159 (1), 306-319.e12 (2020).
  2. Pitt, J. M., et al. Targeting the tumor microenvironment: Removing obstruction to anticancer immune responses and immunotherapy. Ann Oncol. 27 (8), 1482-1492 (2016).
  3. Zhang, Y., Zhang, Z. The history and advances in cancer immunotherapy: Understanding the characteristics of tumor-infiltrating immune cells and their therapeutic implications. Cell Mol Immunol. 17 (8), 807-821 (2020).
  4. Tay, C., Tanaka, A., Sakaguchi, S. Tumor-infiltrating regulatory t cells as targets of cancer immunotherapy. Cancer Cell. 41 (3), 450-465 (2023).
  5. Betof Warner, A., et al. Expert consensus guidelines on management and best practices for tumor-infiltrating lymphocyte cell therapy. J Immunother Cancer. 2 (2), e008735(2024).
  6. Rosenberg, S. A., Spiess, P., Lafreniere, R. A new approach to the adoptive immunotherapy of cancer with tumor-infiltrating lymphocytes. Science. 233 (4770), 1318-1321 (1986).
  7. Leidner, R., et al. Neoantigen t-cell receptor gene therapy in pancreatic cancer. N Engl J Med. 386 (22), 2112-2119 (2022).
  8. Lowery, F. J., et al. Molecular signatures of antitumor neoantigen-reactive t cells from metastatic human cancers. Science (New York, N.Y.). 375 (6583), 877-884 (2022).
  9. Rosenberg, S. A., Parkhurst, M. R., Robbins, P. F. Adoptive cell transfer immunotherapy for patients with solid epithelial cancers. Cancer Cell. 41 (4), 646-648 (2023).
  10. Yossef, R., et al. Phenotypic signatures of circulating neoantigen-reactive cd8+ t cells in patients with metastatic cancers. Cancer Cell. 41 (12), 2154-2165.e5 (2023).
  11. Ma, Y., Hwang, R. F., Logsdon, C. D., Ullrich, S. E. Dynamic mast cell-stromal cell interactions promote growth of pancreatic cancer. Cancer Res. 73 (13), 3927-3937 (2013).
  12. Mahadevan, K. K., et al. Type I conventional dendritic cells facilitate immunotherapy in pancreatic cancer. Science. 384 (6703), eadh4567(2024).
  13. Mullard, A. FDA approves first tumour-infiltrating lymphocyte (til) therapy, bolstering hopes for cell therapies in solid cancers. Nat Rev Drug Discov. 23 (4), 238(2024).
  14. Morotti, M., et al. PGE2 inhibits til expansion by disrupting IL-2 signalling and mitochondrial function. Nature. 629 (8011), 426-434 (2024).
  15. Chupp, D. P., et al. A humanized mouse that mounts mature class-switched, hypermutated and neutralizing antibody responses. Nat Immunol. 25 (8), 1489-1506 (2024).
  16. Stress response in tumor-infiltrating T cells is linked to immunotherapy resistance. Nat Med. 29 (6), 1336-1337 (2023).
  17. Wang, A. Z., et al. Glioblastoma-infiltrating CD8+ T cells are predominantly a clonally expanded GZMK+ effector population. Cancer Discov. 14 (6), 1106-1131 (2024).
  18. Chen, Y., et al. A transformable supramolecular bispecific cell engager for augmenting natural killer and t cell-based cancer immunotherapy. Adv Mater. 36 (3), e2306736(2024).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Tumor Infiltrating LymphocytesFlow CytometryAdoptive Cell TherapyPancreatic Cancer ModelTIL IsolationTumor Reactive T CellsBioluminescent ImagingCell SortingInterleukin 2 AdministrationOrthotopic Tumor

İlgili makaleler