Yöntem makalesi

Steril Perikarditin Fare Modelinde Atriyal Elektrofizyolojik ve Kalsiyum Tutma Anormalliklerinin Optik Haritalanması

DOI:

10.3791/69767

⸱

27 Ocak 2026

 ,  ,  , 
1Department of Cardiology, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, 2Research Center of Ion Channelopathy, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, 3Institute of Cardiology, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, 4Key Lab for Biological Targeted Therapy of Education Ministry, 5Hubei Provincial Engineering Research Center of Immunological Diagnosis and Therapy for Cardiovascular Diseases, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, 6Department of Cardiology, Xuzhou Central Hospital, 7Institute of Cardiovascular Diseases & Department of Cardiology, Sichuan Provincial People's Hospital, School of Medicine, University of Electronic Science and Technology of China

* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu protokol, fare steril perikardit kalplerinde voltaj ve kalsiyum geçişlerinin çift optik haritalanmasını açıklayarak ameliyat sonrası atriyal fibrilasyonun altında yatan iltihap kaynaklı atriyal remodelasyonu değerlendirir.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Postoperatif atriyal fibrilasyon (POAF), kalp cerrahisi sonrası sıkça ortaya çıkar ve atriyal iltihap ile yeniden şekillendirme ile ilişkilidir. Steril perikardit (SP) modeli, bu durumu sıçanlarda yeniden üretir ve iltihap kaynaklı atriyal elektrofizyolojiyi araştırmak için değerli bir platform sağlar. Bu protokol, SP indüksiyonundan sonra Langendorff perfüzyonlu fare kalplerinin hazırlanmasını ve transmembran voltajı ile kalsiyum geçişlerini kaydetmek için eşzamanlı çift optik eşlemenin kullanımını tanımlar. Kalpler, gerilime duyarlı RH237 boya ve kalsiyum göstergesi Rhod-2 ile boyanırken, hareketli artefaktları en aza indirmek için blebbistatin ile kasılılık bastırılır. Yüksek hızlı görüntüleme, kontrollü pace protokolleri sırasında atriyal aksiyon potansiyellerinin ve kalsiyum dinamiklerinin mekansal ve zamansal haritalanmasını sağlar. Nicel parametreler arasında aksiyon potansiyeli süresi, iletme hızı, kalsiyum geçici süresi, zirveye ulaşma süresi ve alternan büyüklüğü bulunur. Bu yöntem, inflamatuar stres altında atriyal iletkenlik heterojenliği, elektro-kalsiyum bağlanması ve aritmi hassasiyetinin hassas değerlendirilmesini sağlar. Bu görselleştirilmiş yaklaşım, POAF mekanizmalarını incelemek ve atriyal yeniden modellemeyi hedefleyen farmakolojik veya genetik müdahaleleri test etmek için tekrarlanabilir ve çok yönlü bir platform sağlar.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Postoperatif atriyal fibrilasyon (POAF), kardiyotorasik cerrahi sonrası yaygın bir komplikasyondur ve genellikle ameliyattan sonraki 2-4 gün içinde zirveye ulaşan geçici atriyal fibrilasyon (AF) ataklarıyla karakterize edilir. POAF genellikle kendi kendine sınırlıdır, ancak inme riskinin artması, hastanede daha uzun kalış süreleri ve sağlık masraflarının yükselmesiyleilişkilidir 1. Atriyal miyokarddaki inflamatuar stres, patogenezine önemli katkılardan biriolarak kabul edilir 2.

Steril perikardit (SP) modeli, POAF 3,4'ü incelemek için iyi kurulmuş bir küçük hayvan modelidir. Bu modelde, epikardiyal talk uygulaması, ameliyat sonrası değişiklikleri taklit eden lokal perikardiyal iltihaplanmaya neden olur. Bu modeli kullanan önceki çalışmalar, yapısal yeniden modellenme, değişen boşluk birleşim ekspresyonu ve aritmojenez 5,6,7'ye yatkın kalsiyum işleme anormallikleri göstermiştir. Ancak, geleneksel elektrofizyolojik teknikler sınırlı uzaylı-zamansal bilgi sağlar ve bu da iletken heterojenliği ile elektro-kalsiyum bağlanma dinamiklerini sağlam atriyal yüzey boyunca yakalamayı zorlaştırır.

Optik haritalama, transmembran voltajı ve kalsiyum geçişlerinin (CaT) atriyal yüzey boyunca eşzamanlı yüksek çözünürlüklü görüntülemesini sağlar; böylece atriyal iletkenlik, repolarizasyon ve kalsiyum sinyalinin hassasgörselleştirilmesini sağlar 8. Bu protokolde, Langendorff perfüzelenmiş SP sıçan kalplerinde çift optik eşlemeyi tanımlıyoruz. Bu yaklaşım, kontrollü pacing protokolleri altında iletken hızını, aksiyon potansiyeli süresini (APD), CaT özelliklerini ve alternanların nicelendirilmesini sağlar. İltihaplı bir atriyal preparatına elektriksel ve kalsiyum işleme değerlendirmesini entegre ederek, yöntem POAF'ın mekaniksel temelini incelemek ve hedefe yönelik terapötik müdahaleleri test etmek için güçlü bir araç sağlar.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Tüm hayvan prosedürleri, Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onay ID'si [2024]IACUC Numarası 4241 ile onaylanmış ve kurumsal ile ulusal yönergelere uygun olarak gerçekleştirilmiştir. Çalışma boyunca, hayvan refahı yönergelerine sıkı sıkıya uyulmuş ve insancıl son noktalar net tanımlanmıştır: Sürekli halsizlik, ani kilo kaybı, %20'nin üzerinde bir nefes sıkıntısı, normal yeme veya içememe veya ameliyat sonrası ciddi komplikasyonlar gösteren fareler, acıyı en aza indirmek için %5 oksijen akışı olan izofluran aşırı dozu kullanılarak hemen ötenazi uygulanmıştır.

1. Çözelti ve reaktiflerin hazırlanması

  1. Modifiye Tyrode çözeltisi (mM cinsinden) hazırlanın: 128.2 NaCl, 4.7 KCl, 1.3 CaCl2, 1.05 MgCl2, 1.19 NaH2PO4, 20NaHCO 3, 11.1 Glikoz. %95 O2/5%CO2 ile köpükle kabarıştırın, pH 7.38-7.42 arasında ayarlayın ve sıcaklığı 37 ± 1 °C'ye ısıtın.
  2. Blebbistatin: DMSO'da (5 mg/mL) çözünür, -20°C'de saklanır, ışık korumalıdır. Son konsantrasyonda 10 μM'de kullanın.
  3. RH237 (gerilim duyarlı boya): DMSO'da (2 mg/mL) çözünür, −20 °C'de saklanır, ışık korumalıdır. Son konsantrasyonda 2 μM'de kullanın.
  4. Rhod-2 (kalsiyum göstergesi): DMSO'da çözünür (1 mg/mL); −20 °C'de, ışık korumalı şekilde depolayın. Son konsantrasyonda 0.89 μM kullanın.
  5. Pluronik F-127 (Yüzey Aktikan): DMSO'da %20 çözelti (ticari olarak mevcut reaktifler).
  6. Sodyum pentobarbital (%1): Anestezi için 10 mL tuzlu sunda 0,1 g çözünür (40 mg/kg, i.p.).
    NOT: Boyaları ve DMSO stoklarını uygun PPE ile kullanın; blebbistatin ve boyaları ışıktan koruyun. Biyogüvenlik ve kimyasal güvenlik kurallarına uyun.

2. Ekipman

  1. Langendorff sistemi sıcaklık kontrolü (37 ± 1 °C), rezervuar, baloncuk kolonu ve peristaltik pompa (akış 10-12 mL/dakika) ile donatılmıştır.
  2. Görüntüleme: Yüksek hızlı CMOS kamera (≥ 1 kHz kare hızı; ≥ 80 × 80 piksel görüş alanı atriyum için), LED uyarılma kaynağı (530 ± 25 nm), dikroik ışın ayırıcı (~630 nm), emisyon filtreleri (Rhod-2 ~590 nm; RH237 >700 nm), ayarlanabilir diyaframa açıklığına sahip lens, titreşim izolasyonuna sahip optik masa. Uyarılma Işık Kaynağı: Maksimum akımı 5 A olan LED lazer, maksimum 2.2 W gücüne sahip yeşil ışık.
  3. Uyarım: Sabit voltajlı stimulyatör, bipolar pace elektrotları.
  4. Fizyoloji: Batırılabilir EKG elektrotları; termistör probu; ventriküler ışık kirliliğini azaltmak için siyah arka plan altı (kauçuk); ince cerrahi aletler; Fareler için ventilatör. Detaylı envanter, Materyaller Tablosu'nda mevcuttur.

3. Sıçanlarda steril perikarditin (SP) indüksiyonu

  1. Erkek Sprague-Dawley farelerini (200-220 g) %1 sodyum pentobarbital (40 mg/kg, i.p.) ile anestezi edin. Anestezi derinliğini (pedal refleksinin kaybı) doğrulayın.
  2. Sıçan, doğrudan görselleştirme altında polietilen veya metal kanül kullanarak entübe edin. Tüpü dikkatlice trakeyaya doğru ilerlet, karinanın hemen üzerinde konumlandırın ve yer değiştirmeyi önlemek için sabitleyin. 2 mL/100 g gelgit hacmine ayarlanmış bir ventilatöre bağlanın, dakikada 55 nefes, I:E = 1:1. Simetrik göğüs genleşmesi ve stabil solunum gözlemleyerek etkili havalandırmayı doğrulayın.
    NOT: Bronş entübasyonu veya kazara ekstübasyonu önlemek için derin veya sığ yerleştirmelerden kaçının.
  3. Cerrahi alanı hazırlayın. Küçük bir parasternal torakotomi (göğsü yakınındaki 2. interkostal boşluk) yapılsın. Kalbi nazikçe açığa çıkar.
  4. Her iki atriyanı görselleştirmek için timusu kaldırın. Perikardımı dikkatlice atrial yüzeylerin üzerine ince forsepsle açın.
  5. Sol ve sağ atriyal yüzeylere ince bir spatula kullanarak steril talk uygulayın (talk pudrası dozu: 50 mg/100 g fare vücut ağırlığı). Büyük damarlara/ventriküllere dökülmesin. Talk göçünü sınırlamak için timusu atriumların üzerine değiştirin.
  6. Göğüs kaslarını interkostal cerrahi kesiyi kapatacak şekilde yeniden konumlandırın. %0,5 povidon-iyot ile dezenfekte edildikten sonra, kas ve cilt dikilir ve göğüs boşluğu kapatılır ve ameliyattan sonra penisilin (160.000 U/100 g, i.p.) uygulanır.
  7. Sahte: Perikardiyotomi veya talk uygulaması olmadan torakotomi yapılıyor.
    NOT: İnce, uniform bir talk tabakasını sadece atriyal epikardyuma uygulayın; Aşırı talk veya ventriküler kontaminasyon ölümleri artırır ve atriyal spesifik okumaları karıştırabilir. Önceki çalışmalar, farelerde aseptik perikardit cerrahisinin belirgin fibroz ve yüksek inflamatuar faktörlere (IL-6, IL-1β ve TGF-β1 3,9) sahip şiddetli atriyal miyokardite yol açtığını doğrulamıştır.

4. Kalp izolasyonu ve Langendorff perfüzyonu

  1. Ameliyattan sonraki 3. günde, burun konusuyla sıçanları izofluran (%2-3) ile anestezi edin ve koroner dolaşımı engelleyebilecek ve Langendorff perfüzyonu tehlikeye atabilecek intravasküler pıhtı oluşumunu önlemek için sistemik heparin (250 U/Kg, i.p.) uygulanır. Bu zaman noktası, AF indüklenebilirliğinin SP3'ten 3-4 gün sonra zirve noktasına ulaştığına dair önceki in vivo bulgularımıza dayanarak seçildi; bu da akut, iltihap kaynaklı aritmojenik fazın yakalanmasını sağlarken, boya yüklenmesi ve optik kayıtlara müdahale eden sonraki yapışmalardan kaçındı.
    NOT: Başlamadan önce taze hazırlayın; gaz ve sıcaklık dengelendirin. Optikleri hizalayın ve filtreleri/dichroic'i doğrulayın. Satın alma yazılımını (1-2 kHz, pozlama 1 ms) yapılandırın ve floresan kartla kalibrasyon yapın.
  2. Toraks boşluğunu açığa çıkarmak için hızlı bir median torakotomi yapın. Kalbi aort arkının bir kısmıyla birlikte blok halinde çıkarın ve hemen buz gibi soğuk, oksijenli Tyrode çözeltisine daldırarak metabolizmayı durdurun ve doku canlılığını koruyun. Çevredeki bağ dokusunu dikkatlice disseksiye ederek kanülasyon için 0,5 mm aort uzunluğu korun. Aortayı 4-0 ipek dikişlerle Langendorff kanülüne sabitleyin; böylece hava geçirmez bir mühür sağlanır ve kateterin alt kenarı atriumun üst sınırıyla hizalanır. Oksijenli Tyrode'larla retrograd perfüzyona 10-12 mL/dakika sabit akış hızında başlayacak ve perfüzyon sıcaklığı 37 ± 1 °C arasında korunacaktır. Tekrarlanabilirlik için, sıçan aort kanülü spesifikasyonları şöyledir: dış çap: 1,4 mm; iç çapı: 1,0 mm; toplam uzunluk: 3-4 cm; Yerleşme derinliği: aort köküne yaklaşık 0,5-1,0 cm; uç şekli: hafifçe daralmış; Malzeme: paslanmaz çelik veya kör metal borular. Kanül, bükülmeden perfüzyon basınçlarına (genellikle 60-80 mmHg) dayanacak kadar sert olmalı ve uç koroner ostia'yı engellememelidir.
  3. Kalp üzerinde anında reperfüzyon etkileri için gözlemleyin. Başarılı perfüzyon, koroner damar damarlarından kalan kanın hızlı ve hızlı yıkanması, tekdüze pembe miyokard renginin geri kazanılması ve spontan ritmik kasılmaların yeniden başlamasıyla gösterilir. Daha fazla deney için minimal miyokard ödemi ve sabit bir kalp atış hızı (genellikle 300-400 bpm) gereklidir. Aynı anda kalbin elektrokardiyogramını kaydedin. Optik eşleme protokollerini başlatmadan önce kalbin sürekli perfüzyon altında en az 20 dakika dengelenmesine izin verin.

5. Hareket bastırma ve havalandırma

  1. Perfüziyata blebbistatin ekleyin (son 10 μM). Kasılmalar geçene kadar ~10 dakika perfüze olun.
  2. Mitral kapak üzerinden akciğer ven üzerinden sol ventriküle hipotansif bir kateter yerleştirerek ventrikülü dekompresyon haline getirerek intrakaviter basıncı düşürürken atriyal morfolojisi ve sinyal bütünlüğü korunur. Tekrarlanabilirlik için kateter özellikleri şunlardır: dış çap: 1,4 mm; iç çapı: 1,0 mm; toplam uzunluk: 1,5 cm; kalbe girme derinliği: 1,0 cm. Atriyaj geometrisini ve sinyalleri korumak için atriaları açmayın.

6. Boya yüklemesi

  1. Kalp perfüzyonu: Kalp durmasından sonra, kalp oda sıcaklığında sabit 10-12 mL/dakika akış hızında perfüzyona geçirilir.
  2. Kalsiyum göstergesi boyama: Rhod-2 (nihai konsantrasyon 0,89 μM) ve 20 μL %20 Pluronik F-127 eklenerek 100 mL perfüzyon çözeltisi alın. Bu çözeltiyle kalbi yaklaşık 30 dakika perfüze edin, ta ki atriumlar ve ventriküller eşit kırmızı floresans gösterene kadar.
  3. Voltaja duyarlı boya boyama: 100 mL perfüzyon çözeltisine RH237 (son konsantrasyon 2 μM) ekleyin. Kalbi ~5 dakika perfüze edin, ta ki atriumlar ve ventriküller pembe görünene kadar.
  4. Yeniden ısıtma ve yıkama: Kalp orijinal perfüzyon sistemine geri aktarılır. Fizyolojik sıcaklığa ısıtın ve emilmemiş boyayı yıkamak için 5-10 dakika perfüze yapın.
    NOT: Zayıf CaT sinyalleri genellikle yetersiz Rhod-2 yüklemesini yansıtır; Yüklemeyi 10-15 dakika uzatın ve Pluronic'in taze olduğunu doğrulayın. Hareket devam ederse, blebbistatin gücünü ve ışık korumasını doğrulayın.

7. Görüntüleme geometrisi ve sinyal izolasyonu

  1. Kalbi 37 °C'lik görüntüleme banyosuna yerleştirin. Sol atriumu (LA) kameraya doğru yönlendirin. Birincil ve ikincil LED ışık kaynaklarını LA'ya hizalayın.
  2. Kaymayı önlemek için kalbi destekle; Atriumu nazikçe açın ve akupunktur iğneleriyle sabitleyin, böylece en iyi görselleştirme sağlanır. Ventrikülleri siyah kauçuk örtülerle kaplayın, böylece ventriküler ışık kirliliğini en aza indirin.
  3. Bipolar pace elektrotlarını sağ atriuma (RA) yerleştirin. Büyük P-dalgası yakalamak için EKG elektrotlarını atrialara yakın yerleştirin.

8. Edinim ve tempo protokolleri

  1. Eşleme yazılımını (OMapRecord4.0 yazılımı) başlatın. Kare hızını 1-2 kHz olarak ayarlayın; LED yükünü 3-4 A'ya ayarla; görüş alanı tüm LA'yı kapsayacak. Her iki kanalda doygunluğu önlemek için kazanç/pozlama ayarlar. Kamera kazancı ve pozlamayı optimize ederek doygunluğu önleyin ve sinyal-gürültü oranını en üst düzeye çıkarın. Görüntüleme parametreleri: pozlama 1 ms; maksimum kamera frekansı 30 kHz; örnekleme hızı 12,5 kHz; çözünürlük 2048 × 2048 piksel; 3.5 kHz'e kadar kare hızı; mekansal çözünürlük 70 μm. Bu ayarlar, yüksek kaliteli AP ve CaT kayıtlarını sağlar.
  2. S1S1 temposu (baz): 7 Hz'de RA hızı (darbe genişliği 2-4 ms; iki kez diyastolik eşik). APD/CaT süresi (CaD), zirve süresi ve iletim hızı için ≥ 5 saniyelik film edinin.
  3. S1S2 protokolü (refraktörlük/AF): 7 Hz'de 30 S1 vuruşu ver, ardından tek bir S2; S1-S2 aralığını 140 ms'den 10/5/1 ms'ten refraktörlüğe düşürür. Kayıt CaT iyileşmesi (A2/A1), etkili refrakter dönemi (ERP), AF indüklenebilirliği/süresi.
  4. Artışlı tempo (alternanlar): RA hızını 1-2 Hz adımlarla 8'den 18 Hz'e çıkarın. Ca-ALT, APD-ALT ve DIS-ALT'ı nicelendirmek için her oranda ≥ 5 saniye kaydedin. Eşzamanlı çift kanallı filmleri ve senkronize EKG/stim izlerini analiz için sakla.
    NOT: Tempo boyunca sabit sıcaklık ve perfüzyon korun; Hipotermi iletkenliği azaltır ve alternans artefaktlarını abarttırır.

9. Veri işleme ve niceliklendirme

  1. OMapScope 4.0 yazılımı kullanarak optik sinyalleri analiz edin. Gürültüyü azaltmak ve sinyal morfolojisini korumak için her pikselin komşularıyla ortalaması alınarak 3×3 Gauss uzamsal filtresi uygulandı. Aktivasyon süreleri, yukarı vuruş sırasında maksimum dF/dt noktası olarak tanımlanır; iletim hızı, en erken ve en son aktivasyon noktaları arasındaki doğrusal mesafenin ilgili aktivasyon zaman farkına bölünmesiyle hesaplanır. APD70/90 , aksiyon potansiyelinin maksimum dF/dT'sinden AP genliğinin %70 veya %90 repolarizasyonuna kadar olan zaman olarak tanımlanmıştır. CaD70/90 , kalsiyum geçişinin (Ca²⁺) zirvesinden %70 veya %90 çürümeye kadar olan zaman olarak tanımlanmıştır. Alternanlar şu şekilde nicele alındı: Ca-ALT, 1 eksi küçük ve daha büyük ortalama CaT genliğinin oranı, APD-ALT uzun ve kısa APD80 değerleri arasındaki fark olarak, DIS-ALT ise nodal çizgilerle ayrılmış mekânsal faz dışı alternanlar olarak hesaplandı. RyR geri kazanma oranı, iki ardışık CaT zirvesinin (daha küçük/daha büyük) oranı olarak hesaplandı.

10. Kritik parametreler ve kabul kriterleri

  1. Perfüzyon: 10-12 mL/d, 37 ± 1 °C; stabil sinüs veya tempolu ritim; LA iyi perfüzyon.
  2. SNR: Her iki kanal için ≥ 3 Upstroke dF/F frekansları; Satın alma penceresinde minimum foto ağartma.
  3. Hareket: Blebbistatin sonrası önemsiz kalıntı hareket; çerçeveler arasında kararlı görüntü kaydı.
  4. Sıcaklık: Sürekli izleme; Banyo < alma sırasında 36 °C veya > 38 °C olan veri setleri hariç tutulur.

11. İstatistiksel Analizler

  1. Tüm istatistiksel analizler GraphPad Prism 9 kullanılarak gerçekleştirildi. Veriler ortalama ± SEM olarak sunulur. Veri dağılımının normalliği Shapiro-Wilk testi kullanılarak değerlendirildi. Normal dağılıma sahip veriler için, iki grup arasındaki farklar eşleşmemiş iki kuyruklu Öğrenci t testi kullanılarak analiz edildi; normal dağılım olmayan veriler için Mann-Whitney U testi uygulandı. Kategorik değişkenler χ2 testi kullanılarak analiz edildi. P < 0.05 istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

AF İndüklenebilirlik
Ektopik aktivite ve yeniden giriş, POAF başlatılması ve sürdürülmesine katkıda bulunan temelmekanizmalardır 2, Yeniden giriş dalga boyu (λ) ERP ve iletken hızının (CV) çarpımıyla belirlenir, yani λ = ERP × CV. Sham-operasiyonlu kalplerde, S1S2 pace aritmi olmadan stabil atriyal yanıtlar ortaya çıkardı (Şekil 2A). Buna karşılık, SP ile tedavi edilen kalpler sıklıkla anormal yanıtlar göstermiştir; bunlar arasında atriyal ektopi (...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu protokol, SP (POAF) iltihabı odaklı bir model olan izole sıçan kalplerinde AP ve CaT'ların çift optik haritalanmasını tanımlar. Vm ve Ca2+ sinyallerinin sağlam atriyal yüzey boyunca programlanabilir hızlama altında eşzamanlı yüksek çözünürlüklü kaydı, APD, zirveye kadar zaman, iletken hızı, repolarizasyonun mekansal heterojenliği, CaD, CaT genliği, CaT zirveye kadar olan CaT süresi ve bölgesel Ca işleme değişkenliği değerlendirmesini sağlar. Ayrıca APD-ALT, Ca-ALT ve DIS-AL...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarların açıklamak zorunda kalacak bir çıkar çatışması yoktur.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimi Vakfı (No. 82470328, 82170326to Y.D.; No. 82300350 J.L.'ye). Optik haritalama konusundaki üstün destekleri için Dr. Guoliang Hao ve Dr. Gongxin Wang'a (Henan Tıp Bilimleri Akademisi, Zhengzhou, Çin Elektrofizyoloji Enstitüsü) teşekkürlerimizi sunarız.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
BlebbistatinAbcamAB120425
CaCl2Sigma-Aldrich10043-52-4
CMOS kameraMappingLabOMS-PCIE-2002
EKG sistemiChengdu TechmanBL-420F
FE32 -MetreMettler Toledo30254108
Filtreler/dikroik aynalarMappingLabRH237 >700 nm;
CaT 590 nm
GlikozSigma-Aldrich921-60-8
Imgae banyosuMappingLabYok
KClSigma-Aldrich7447-40-7
Langendorff perfüzyon sistemiRadnoti / ÖzelYok
LED kaynağı (530 & plusmn; 25 nm)MappingLabYok
MgCl2Sigma-Aldrich7786-30-3
NaClSigma-Aldrich7647-14-5
NaH2PO4Sigma-Aldrich10049-21-5
NaHCO3Sigma-Aldrich144-55-8
OMapRecord4.0 yazılımıMappingLabYok
OMapScope4.0 yazılımıMappingLabYok
Peristaltik pompaCole-ParmerMasterflex® L/S®
Plüronik F-127InvitrogenP3000MP
RH237 (voltaj boyası)Termo Balıkçı / InvitrogenS1109
Rhod-2 (Ca göstergesi)Termo Balıkçı / InvitrogenR1245MP
Küçük Hayvan VentilatörleriYUYANBIOV-100
Sodyum pentobarbitalSigma-AldrichP3761
Sprague-Dawley fareleri (200– 220 g, erkek)Yerel sertifikalı satıcıYok
Steril talk tozuSigma-AldrichT1586
UyarıcıMappingLabLEDC-2002
Su banyosu (sıcaklık kontrollü)Ningbo XinzhiSC-15

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Gaudino, M., et al. Postoperative atrial fibrillation: From mechanisms to treatment. Eur Heart J. 44 (12), 1020-1039 (2023).
  2. Dobrev, D., Aguilar, M., Heijman, J., Guichard, J. B., Nattel, S. Postoperative atrial fibrillation: Mechanisms, manifestations and management. Nat Rev Cardiol. 16 (7), 417-436 (2019).
  3. Fu, X. X., et al. Interleukin-17A contributes to the development of postoperative atrial fibrillation by regulating inflammation and fibrosis in rats with sterile pericarditis. Int J Mol Med. 36 (1), 83-92 (2015).
  4. Liao, J., et al. TRPV4 blockade suppresses atrial fibrillation in sterile pericarditis rats. JCI Insight. 5 (23), e137528(2020).
  5. Huang, Z., et al. Signal transducer and activator of transcription 3/microRNA-21 feedback loop contributes to atrial fibrillation by promoting atrial fibrosis in a rat sterile pericarditis model. Circ Arrhythm Electrophysiol. 9 (7), e003396(2016).
  6. Liao, J., et al. Oral administration of TRPV4 inhibitor improves atrial calcium handling abnormalities in sterile pericarditis rats. Sheng Li Xue Bao. 74 (2), 188-200 (2022).
  7. Rossman, E. I., et al. The gap junction modifier GAP-134 improves conduction and reduces atrial fibrillation/flutter in the canine sterile pericarditis model. J Pharmacol Exp Ther. 329 (3), 1127-1133 (2009).
  8. Baines, O., et al. Optical mapping and optogenetics in cardiac electrophysiology research and therapy: A state-of-the-art review. Europace. 26 (2), euae017(2024).
  9. Wu, Q., et al. Colchicine prevents atrial fibrillation promotion by inhibiting IL1βinduced IL6 release and atrial fibrosis in the rat sterile pericarditis model. Biomed Pharmacother. 129, 110384(2020).
  10. Qu, Z., Weiss, J. N. Cardiac alternans: From bedside to bench and back. Circ Res. 132 (1), 127-149 (2023).
  11. Wang, L., et al. Optical mapping of sarcoplasmic reticulum Ca2+ in the intact heart: Ryanodine receptor refractoriness during alternans and fibrillation. Circ Res. 114 (9), 1410-1421 (2014).
  12. Liu, T., et al. Altered calcium handling produces reentrypromoting action potential alternans in atrial fibrillationremodeled hearts. JCI Insight. 5 (8), e133754(2020).
  13. Liao, J., et al. Interleukin6mediated Ca2+ handling abnormalities contribute to atrial fibrillation in sterile pericarditis rats. Front Immunol. 12, 758157(2021).
  14. Baines, O., et al. Optical mapping and optogenetics in cardiac electrophysiology research and therapy: A stateoftheart review. Europace. 26 (2), euae017(2024).
  15. Kanaporis, G., Blatter, L. A. Alternans in atria: Mechanisms and clinical relevance. Medicina (Kaunas). 53 (3), 139-149 (2017).
  16. Boukens, B. J., Efimov, I. R. A century of optocardiography. IEEE Rev Biomed Eng. 7, 115-125 (2014).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Atriyal ElektrofizyolojiLangendorff Perf zyonuift Optik HaritalamaVoltaj Duyarl BoyaKalsiyum ndikat rAksiyon Potansiyeli S resiAritmiye Yatk nl k
Video yakında

İlgili makaleler