Bu protokol, fare steril perikardit kalplerinde voltaj ve kalsiyum geçişlerinin çift optik haritalanmasını açıklayarak ameliyat sonrası atriyal fibrilasyonun altında yatan iltihap kaynaklı atriyal remodelasyonu değerlendirir.
Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliğiniz gereklidir. Giriş yapın veya ücretsiz denemenizi bugün başlatın.
Yöntem makalesi
* These authors contributed equally
Bu protokol, fare steril perikardit kalplerinde voltaj ve kalsiyum geçişlerinin çift optik haritalanmasını açıklayarak ameliyat sonrası atriyal fibrilasyonun altında yatan iltihap kaynaklı atriyal remodelasyonu değerlendirir.
Postoperatif atriyal fibrilasyon (POAF), kalp cerrahisi sonrası sıkça ortaya çıkar ve atriyal iltihap ile yeniden şekillendirme ile ilişkilidir. Steril perikardit (SP) modeli, bu durumu sıçanlarda yeniden üretir ve iltihap kaynaklı atriyal elektrofizyolojiyi araştırmak için değerli bir platform sağlar. Bu protokol, SP indüksiyonundan sonra Langendorff perfüzyonlu fare kalplerinin hazırlanmasını ve transmembran voltajı ile kalsiyum geçişlerini kaydetmek için eşzamanlı çift optik eşlemenin kullanımını tanımlar. Kalpler, gerilime duyarlı RH237 boya ve kalsiyum göstergesi Rhod-2 ile boyanırken, hareketli artefaktları en aza indirmek için blebbistatin ile kasılılık bastırılır. Yüksek hızlı görüntüleme, kontrollü pace protokolleri sırasında atriyal aksiyon potansiyellerinin ve kalsiyum dinamiklerinin mekansal ve zamansal haritalanmasını sağlar. Nicel parametreler arasında aksiyon potansiyeli süresi, iletme hızı, kalsiyum geçici süresi, zirveye ulaşma süresi ve alternan büyüklüğü bulunur. Bu yöntem, inflamatuar stres altında atriyal iletkenlik heterojenliği, elektro-kalsiyum bağlanması ve aritmi hassasiyetinin hassas değerlendirilmesini sağlar. Bu görselleştirilmiş yaklaşım, POAF mekanizmalarını incelemek ve atriyal yeniden modellemeyi hedefleyen farmakolojik veya genetik müdahaleleri test etmek için tekrarlanabilir ve çok yönlü bir platform sağlar.
Postoperatif atriyal fibrilasyon (POAF), kardiyotorasik cerrahi sonrası yaygın bir komplikasyondur ve genellikle ameliyattan sonraki 2-4 gün içinde zirveye ulaşan geçici atriyal fibrilasyon (AF) ataklarıyla karakterize edilir. POAF genellikle kendi kendine sınırlıdır, ancak inme riskinin artması, hastanede daha uzun kalış süreleri ve sağlık masraflarının yükselmesiyleilişkilidir 1. Atriyal miyokarddaki inflamatuar stres, patogenezine önemli katkılardan biriolarak kabul edilir 2.
Steril perikardit (SP) modeli, POAF 3,4'ü
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Tüm hayvan prosedürleri, Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onay ID'si [2024]IACUC Numarası 4241 ile onaylanmış ve kurumsal ile ulusal yönergelere uygun olarak gerçekleştirilmiştir. Çalışma boyunca, hayvan refahı yönergelerine sıkı sıkıya uyulmuş ve insancıl son noktalar net tanımlanmıştır: Sürekli halsizlik, ani kilo kaybı, %20'nin üzerinde bir nefes sıkıntısı, normal yeme veya içememe veya ameliyat sonrası ciddi komplikasyonlar gösteren fareler, acıyı en aza indirmek için %5 oksijen akışı olan izofluran aşırı dozu kullanılarak hemen ötenazi uygulanmıştır.
1. Çözelti ve re....
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
AF İndüklenebilirlik
Ektopik aktivite ve yeniden giriş, POAF başlatılması ve sürdürülmesine katkıda bulunan temelmekanizmalardır 2, Yeniden giriş dalga boyu (λ) ERP ve iletken hızının (CV) çarpımıyla belirlenir, yani λ = ERP × CV. Sham-operasiyonlu kalplerde, S1S2 pace aritmi olmadan stabil atriyal yanıtlar ortaya çıkardı (Şekil 2A). Buna karşılık, SP ile tedavi edilen kalpler sıklıkla anormal yanıtlar göstermiştir; bunlar arasında atriyal ektopi (.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu protokol, SP (POAF) iltihabı odaklı bir model olan izole sıçan kalplerinde AP ve CaT'ların çift optik haritalanmasını tanımlar. Vm ve Ca2+ sinyallerinin sağlam atriyal yüzey boyunca programlanabilir hızlama altında eşzamanlı yüksek çözünürlüklü kaydı, APD, zirveye kadar zaman, iletken hızı, repolarizasyonun mekansal heterojenliği, CaD, CaT genliği, CaT zirveye kadar olan CaT süresi ve bölgesel Ca işleme değişkenliği değerlendirmesini sağlar. Ayrıca APD-ALT, Ca-ALT ve DIS-AL.......
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Yazarların açıklamak zorunda kalacak bir çıkar çatışması yoktur.
Bu çalışma, Çin Ulusal Doğa Bilimi Vakfı (No. 82470328, 82170326to Y.D.; No. 82300350 J.L.'ye). Optik haritalama konusundaki üstün destekleri için Dr. Guoliang Hao ve Dr. Gongxin Wang'a (Henan Tıp Bilimleri Akademisi, Zhengzhou, Çin Elektrofizyoloji Enstitüsü) teşekkürlerimizi sunarız.
....Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
| Ad | Şirket | Katalog numarası | Yorumlar |
|---|---|---|---|
| Blebbistatin | Abcam | AB120425 | |
| CaCl2 | Sigma-Aldrich | 10043-52-4 | |
| CMOS kamera | MappingLab | OMS-PCIE-2002 | |
| EKG sistemi | Chengdu Techman | BL-420F | |
| FE32 -Metre | Mettler Toledo | 30254108 | |
| Filtreler/dikroik aynalar | MappingLab | RH237 >700 nm; CaT 590 nm | |
| Glikoz | Sigma-Aldrich | 921-60-8 | |
| Imgae banyosu | MappingLab | Yok | |
| KCl | Sigma-Aldrich | 7447-40-7 | |
| Langendorff perfüzyon sistemi | Radnoti / Özel | Yok | |
| LED kaynağı (530 & plusmn; 25 nm) | MappingLab | Yok | |
| MgCl2 | Sigma-Aldrich | 7786-30-3 | |
| NaCl | Sigma-Aldrich | 7647-14-5 | |
| NaH2PO4 | Sigma-Aldrich | 10049-21-5 | |
| NaHCO3 | Sigma-Aldrich | 144-55-8 | |
| OMapRecord4.0 yazılımı | MappingLab | Yok | |
| OMapScope4.0 yazılımı | MappingLab | Yok | |
| Peristaltik pompa | Cole-Parmer | Masterflex® L/S® | |
| Plüronik F-127 | Invitrogen | P3000MP | |
| RH237 (voltaj boyası) | Termo Balıkçı / Invitrogen | S1109 | |
| Rhod-2 (Ca göstergesi) | Termo Balıkçı / Invitrogen | R1245MP | |
| Küçük Hayvan Ventilatörleri | YUYANBIO | V-100 | |
| Sodyum pentobarbital | Sigma-Aldrich | P3761 | |
| Sprague-Dawley fareleri (200– 220 g, erkek) | Yerel sertifikalı satıcı | Yok | |
| Steril talk tozu | Sigma-Aldrich | T1586 | |
| Uyarıcı | MappingLab | LEDC-2002 | |
| Su banyosu (sıcaklık kontrollü) | Ningbo Xinzhi | SC-15 |
Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.
Bu makale yayımlandı
Video yakında