Yöntem makalesi

Dışarıdan Çıkmış Fare Suşuna Dayalı Bir Hayvan Pulpitis Modeli ve Histolojik Analizi

DOI:

10.3791/69786

⸱

27 Şubat 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Operative Dentistry, Dow Dental College, Dow University of Health Sciences, 2Dow Institute of Advanced Biological and Animal Research, Dow University of Health Sciences, 3Department of Pathology, Dow International Medical College, Dow University of Health Sciences, 4Department of Oral Pathology, Dow Dental College, Dow University of Health Sciences, 5Qatar University

* These authors contributed equally

Bu makalede

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Burada, NMRI (Deniz Tıp Araştırma Enstitüsü) farelerinde pulpitis modeli oluşturmak için bir protokol sunuyoruz. Ayrıca, çene geri çekme klipsi yapmak ve hayvan çenesinden histoloji için slaytların hazırlanması adımları açıklanır. Standart bir protokole uyarak metodoloji ve sonuçlardaki farklılıklar önlenebilir.

Özet

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Deniz Tıbbi Araştırma Enstitüsü (NMRI) farelerinin diş pulpu iltihaplanması modeli oluşturdukları için daha önce rapor edilmemiştir. Bu protokolde, NMRI fareleri kullanılarak bir hayvan modeli sunuyoruz ve tekrarlanabilirliği sağlamak için pulpitis modeli için ayrıntılı histolojik prosedürler sunuyoruz. 70 NMRI faresini iki gruba rastgele olarak dahil ettik: Grup A (n=35), burada pulpitis sadece pulpa maruziyetiyle indükleniyordu ve Grup B (n=35), pulp maruziyeti ve ardından Zymosan uygulanıyordu. Sağ maksiller azı dişi dişinin pürse maruz kalmasından sonra, hayvanlar belirlenmiş zaman aralıklarında (0, 6, 9, 12, 24, 48 ve 72 saat) kurban edildi. Maksiller çene, histoloji ve nicel histomorfolojik analiz için elde edilmiştir. Her iki grup için histolojik analizde zamana bağlı kademeli bir iltihaplanma artışı gözlemlenmiştir. Her iki hayvan modeli de 72 saate kadar iltihaplanmanın incelenmesine olanak sağladı. Bu makalede sunulan teknik tekrarlanabilir olup pulpitisin histolojik çalışmasını standartlaştırmaya yardımcı olacaktır.

Giriş

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Çeşitli hayvan modelleri 1,2,3,4 vabzını incelemek için kullanılmıştır. Bunlar arasında, C57BL/6 ve BALB/c tabanlı fare modelleri yalnızca pulpitisaraştırmalarında rapor edilmiştir 5,6,7,8. İkisi de akraba evliliğine sahip ve 7,9 yetiştirme için sıkı şartlara sahiptir. Mevcut protokolde kullanılan NMRI fareleri, evlihevli suşlara göre birçok avantaj sunan dış bir suşturdur. Kurulum ve bakım maliyetleri düşük. Yüksek üreme, daha iyi bağışıklık ve düşük ölüm oranı kolonide daha erken ve daha yüksek değişime yolaçar 10. Bu nedenle, lojistik ve finansal olarak daha uygulanabilir11. Ayrıca, sonuçlarımız bu modelde üretilen pulp iltihabının hastalık profilinin, daha önce bildirilen akrabafareleri 5,6,8 modellerine benzer olduğunu göstermektedir. Ayrıca, NMRI fareleri Zymosan tabakasına 72 saate kadar dayanabilir ve gözlemlenebilir bir hastalık profili geliştirir. Bu,pulpitis 12'yi incelemek için diğer akraba suşlarına uygun bir alternatiftir.

Zymosan, Saccharomyces cerevisiae hücre duvarının bir özüdür ve esas olarak kitin, mannanlar, mannoproteinler ve ß-glukanlar13 içerir. Zymosan ve Candida albicans benzer bir hücre duvarı yapısına sahiptir ve C-tipi lektin olan patojen tanıma reseptörü Dectin-14 aracılığıyla konak doğuştan bağışıklık tarafından tespit edilir. Dectin-1 esas olarak dendritik hücreler ve makrofajlar tarafından ifade edilir. Mantar patojenlerinde ß-glukanları tespit eder ve Syk/CARD9 yolunu kullanarak inflamatuararacıların oluşumunu 15 sağlar. Bu nedenle, Zymosan C. albicans'ın pulpa hastalığına maruz kalmasının etkisini incelemek için uygulanabilir biralternatiftir; organizma 16 kullanılmak yerine. Bu, daha önce yayımlanmış sonuçlarımız da desteklemektedir; bu sonuçlar, Zymosan maruz kalan pulpada Dectin-1 transkriptlerinin erken tespitini göstermektedir. Benzer şekilde, CD68+ve makrofajlarını ifade eden Dectin-1 degözlemlenmiştir 12.

Önceki yayınlarda anlatılan histolojik teknikler, acemi araştırmacıların güvenle yeniden üretmesi için genellikle yetersizdir. Sonuç olarak, kapsamlı deneme yanılma çalışmaları gerçekleşir ve histolojik prosedürlerin optimizasyonu sırasında gereksiz hayvan kaybına yol açar. Mevcut protokol, slayt hazırlama tekniğini standartlaştırmakta ve sıçanlarda da başarılışekilde uygulanmıştır 17. Burada, çene geri çekilmesi için tekrarlanabilir bir yöntem, pulpitisin pürse maruz kalmasıyla indüksiyonu, Zymosan kullanılarak pulp iltihabının indüklenmesi ve ardından gelen histolojik analizler dahil olmak üzere tüm temel adımlar ayrıntılı şekilde tanımlanmıştır.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Protokol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Mevcut hayvan çalışması ARRIVE yönergelerine uygun olarak tasarlandı. Dow Sağlık Bilimleri Üniversitesi Hayvan Araştırmaları ve Etik Kurumsal İnceleme Kurulu, bu hayvan çalışmasını onayladı (Mektup no. AR. IRB-06/DUHS/Onay/2016/05). Protokol toplamda 70 NMRI faresini içeriyordu. Hayvanlar, Dow İleri Biyolojik ve Hayvan Araştırmaları Enstitüsü'nün 'Merkezi Hayvan Evi Tesisi'nden temin edilmiştir. Bu protokolün örneklem büyüklüğü önceki birçalışmaya dayanmaktadır 8.

1. Hayvanlar

NOT: Çalışmaya seçilen hayvanlar 26-30 g ağırlığındaydı ve standart kafeslerde şu koşullarda tutuldu: ±21 °C sıcaklık, %±55 bnireli nem ve 12 saat ışık/karanlık oranı, serbest filtrelenmiş su ve standart yem (normal yemek diyeti). Düzenli olarak herhangi bir agresyon, rahatsızlık veya rahatsızlık belirtisi için izleniyordu. Diklofenak sodyum (200 μL deri altı olarak, 25 mg/mL) ağrı veya rahatsızlık durumunda kullanıldı. Herhangi bir deneyden önce iki hafta boyunca uyum sağlamalarına izin verildi. Her biri on hayvan uygun şekilde etiketlenmiş kafeslerde tutuldu. Hayvan tanımlaması için kuyruğuna bir işaret yerleştirildi.

  1. Hayvanları (n=70) rastgele iki gruba ayırın: A Grubu (n=35), B Grubu (n=35).
  2. Grup A'da, pulpiti yalnızca pulpun maruz kalmasıyla indük edin (bkz. adım 4.1.1'den 4.1.9'a kadar).
  3. Grup B hayvanları için, açıkta kalan pulpa üzerine Zymosan çözeltisi uygulanır (bkz. adım 4.2.1'den 4.2.3'e kadar).

2. Zymosan çözeltisi

  1. Aşağıda açıklandığı gibi Zymosan çözeltisi hazırlamak için daha önce yayımlanmış biryöntemi takip edin 18.
  2. Fosfatla tamponlanmış tuzlu salin (PBS) kullanarak 1 mL Zymosan ile 1 mg/mL bir çözelti elde edin.
  3. Çözeltiyi 121 °C'de 15 dakika boyunca otoklavlayın.
  4. Çözeltiyi oda sıcaklığında 1 saat soğutun.
  5. Çözeltiyi 4 °C ve 300 x g sıcaklıkta 10 dakika boyunca santrifüjleyin.
  6. Üst yüzeyi atın ve pelleti buz gibi steril PBS ile yeniden santrifüjle üç kez yıkayın.
  7. Çözeltiyi 4 °C'de saklayıp daha fazla kullanışa kadar.
    NOT: Çözelti 30 gün içinde kullanılmalıdır, ardından atılabilir.

3. Çene geri çekme klipsi

  1. Çene geri çekme klipsi yapmak için 0.7 mm paslanmaz çelik ortodontik tel kullanın.
  2. 100 mm uzunluğunda bir tel alın ve ortasında 5 mm çapında bir halka yapın.
  3. Telin her iki parçasını halkadan 5 mm ve toplamda 15 mm dik açıda, keskin bükülmeler olmadan döndür.
  4. Dönüşten 25 mm mesafede, bir çentik açın ve kalan ucu dışa doğru çevirin. Rehberlik için Şekil 1A'yı kullanın.

4. Hayvan modeli

  1. A Grubu (n = 35)
    1. Hayvanları, 0.1 mL/20 g Ketamin-Ksilazin kokteyli (87.5 mg/kg Ketamin + 12.5 mg/kg Xylazine) intraperitoneal enjeksiyonla anestezi edin.
    2. Tüm işlemler için 10x eğimli uzun kollu bir Stereomikroskop kullanın (Şekil 1B). Eğik kolu hayvanın geri çekilmiş maksiller dişlerini doğrudan görebilecek şekilde yerleştirin. (Şekil 1C)
    3. Klipsi sıkın ve klipsin her iki yanındaki maksiller ve mandibular kesici dişler arasına çentikli kısmı yerleştirin.
    4. Klipsi bıraktıktan sonra, uçlarını yapışkan bantla sabitleyin (Şekil 1C).
    5. Çalışan elinizle hayvanın yanaklarını genişletmek için diş cımbızı kullanın. (Şekil 1D,E).
      NOT: Aşırı baskıdan kaçının. Cımbızdan kaynaklanan yaralanma, hayvanın ölümcül kanamasına ve ölümüne neden olabilir.
    6. Bir #1/4 yuvarlak karbür buruz ve E-tipi yavaş hız el cihazıyla bir elektrikli mikro motorda, sağ maksiller birinci azı dişin ortasında derinliğin yarısına kadar 10x büyütme altında sınıf 1 boşluk elde etmek için kullanın. Şu anda bir gölge de görünebilir (Şekil 1D,E).
    7. Buru yavaş hızlarda nazikçe süpürerek çalıştırın. RPM'yi kontrol etmek için bir elektrik motoru kullanın.
    8. Pulpayı açığa çıkarmak için K-tipi 15 numaralı endodontik dosya kullanın (Şekil 2B).
      NOT: #15 endodontik el aleti kullanımı son derece nazik olmalıdır, aksi takdirde bir furkasyon perforasyonu oluşur ve bu ancak histolojik slaytlar hazırlandığında fark edilir. #1/4 yuvarlak karbid burun çapı 0,25 mm, #15K tipi file ise 0,15 mm genişliğindedir. Bu nedenle, pulpa maruz kalan pozlama boyutu 0,15 mm olacaktır (Şekil 2C).
    9. Açık kalan pulpiyi açık bırakın, vabzın indüksiyonu için
  2. B Grubu (n = 35)
    1. 4.1. adımda verilen tüm adımları aşağıdakileri ekleyerek tekrarlayın.
    2. Mikropipet (0,2-2 μL) kullanarak önceden hazırlanmış 0,2 μL Zymosan çözeltisini açıkta kalan pulpun üzerine yerleştirin.
      NOT: Zymosan çözeltisi dağıtılırken dikkatli olunmalıdır. Çözeltinin istemeden ağız boşluğuna dökülmesi, hayvanın ölümüne yol açabilir. Bu nedenle, dişi örtmek için gazlı bez kullanılır ve fazla Zymosan çözeltisi gazlı bez tarafından emilir (Şekil 2D).
    3. İşlenmiş pulpiyi Zymosan çözeltisi ile indüksiyon için açık bırakın.

5. Numune hazırlama

  1. Her gruptan beş hayvanı 0, 6, 9, 12, 24, 48 ve 72 saatlerde Karbondioksitsoluma ile kurban edin 19.
  2. 7.25 L ötanazi odası kullanın.
  3. Hazneyi CO2 ile önceden şarj etmeyin.
  4. Hayvanları doğrudan odaya yerleştirin.
  5. Dakikada odanın %30 ile %70'i arasında doldurma oranıyla %100CO 2 ekleyin.
  6. CO2'nin akış hızını 5 L/dakika olarak tutun.
  7. CO2'yi ısıtın ve haznedeki havayla karışmasına izin verin.
  8. Hayvanları 23 dakika içinde bilinçsizlik belirtileri için gözlemleyin.
  9. Hayvanların solunum kesilmesini ve gözlerin grileşmesini izleyin.
  10. Solunum kesildikten sonra CO2 akışını en az bir dakika boyunca tutun.
  11. Hayvanları odadan çıkarmadan önce onların ölümünü doğrulayın. Nefes almadığından ve gözlerin solgun göründüğünden emin olun.
  12. Ötenazi sonrası hayvanların kafalarını hemen ayırın.
  13. 0 saat sonra kurban edilen hayvanın sol tarafındaki tedavi edilmemiş birinci çene birinci azı dişi kısmını kontrol olarak kullanın.
  14. Maksiller çeneleri 2 gün boyunca saklamak için uygun şekilde etiketlenmiş 15 mL konik tüplerde %10 tamponlu formalin kullanın.

6. Histoloji

  1. Sabit çeneleri %10 formik asitle 3 gün boyunca kalsifiye edin.
    NOT: Üçüncü günden sonra, cerrahi bir bıçağın çeneyi kesip kesemeyeceğini kontrol edin. Hâlâ yeterince yumuşak değilse, tekrar %10 formik asite batırın ve cerrahi bıçakla kesilebilene kadar her gün kontrol edin.
  2. Çeneni No. 22 bıçakla kesin. Kesiyi oklüzal düzlemle paralel olarak, sagital düzlem boyunca yapın ve bıçağı hemen maksiller azi dişlerinin dadal çıkıntılarının damak tarafında tutun (Şekil 3A).
  3. Tüm dişlerin oklüzyon yüzeyini Hindistan mürekkebi ile işaretleyin.
    NOT: Bu işaretleme, kesitleme sırasında oklüzyon yüzeyi tanımaya yardımcı olur (Şekil 3B).
  4. Kesitli çene, kesilmiş yüzeyi tabana bakacak şekilde kalıbın tabanına yaslayarak, paslanmaz çelik taban bir kalıp kasasına parafin mumuna gömülür.
    NOT: Bu şekilde gömme, kesilen yüzeyin önce mikrotoma girmesini, örnek yönünün doğru olmasını ve Şekil 3E'de gösterildiği gibi sagittal kesitlerin üretilmesini sağlar.
  5. Gömülü çene içeren yerleştirme kaseti temel kalıptan çıkar ve mikrotom içine yerleştir.
  6. 3 μm kalınlığında sagital kesitler yapın ve bunları temiz, yüklü bir mikroskop slaytına yerleştirin (Şekil 3C).
  7. Lekelenmemiş slaytları bileşik mikroskop altında gözlemleyin.
    NOT: Kesilen kesimleri oklüzyon yüzeyinde boşluk görünene kadar gözlemlemeye devam edin. Kesitler, maksiller birinci azı dişinin uzun ekseni boyunca sagital düzlem boyunca doğru şekilde yapılırsa, tüm pulpa alanında bir veya iki kök ve pulp odası görülür (Şekil 3E). Bu noktadan itibaren, pozlama boyutu 0,15 mm olduğu için teorik olarak bir bölümden 50 slayt yapılabilir. (3 μm = 0,003 mm, 0,003 x 50 = 0,15)
  8. Seçilen slaytlar için standart Hematoxylin ve Eosin boyama prosedürleri uygulanın; bir veya iki kök ile tüm pürs odasını gösteren.
  9. Lekelenmiş slaytları bileşik mikroskop altında inceleyin.
  10. Maksimum pulp alanının gözlemlenmesini sağlayacak beş en iyi slayt seçin.

7. İstatistiksel analiz

  1. Standart istatistiksel yazılım kullanarak istatistiksel analiz yapın.
    NOT: Nicel histomorfolojik analiz için, her zaman aralığından gözlemlenen slaytlar, daha önce yayımlanmış bir kritere göre puanlanmıştır (Tablo 1)8. Farklı zaman aralıklarındaki skorları karşılaştırmak için Bonferroni düzeltmesi p=0.0018 ile Kruskal-Wallis H testi kullanıldı. Mann-Whitney U testi, p ≤ 0.05'te Grup A ve B karşılaştırmak için kullanıldı. Tüm karşılaştırmalar standart istatistiksel yazılım kullanılarak gerçekleştirildi.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Sonuçlar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Bu protokolde, NMRI farelerinde diş pulpası iltihabının iki hayvan modeli için ayrıntılı adımlı bir prosedür ve ilgili histolojik yöntemler sunuyoruz. Uygun ekipmanın kullanımı protokolün başarısı için gereklidir. Bu açıdan, 10x eğimli uzun kol stereomikroskop en önemli ekipmandır. Sınıf 1 boşluk hazırlığı, elektrikli mikromotor kullanılarak maksimum hızının yaklaşık üçte biri (35.000 rpm) ile gerçekleştirildi; bu da işlemi yönetilebilir hale getirdi ve sıkıştırılmış hava ihtiyacını orta...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Tartışma

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Mevcut protokol, NMRI farelerinde rapor edilen literatürde ilk kez tip 3 diş yaralanması modelinin (geri dönüşü olmayan pulpitis) geliştirilmesini sunmaktadır. Ayrıca Zymosan kaynaklı pulp iltihabının histolojik analizini detaylandırır ve hayvan çenelerinden histolojik slaytların hazırlanması için tekrarlanabilir bir yöntem sunar.

Bu protokole uygun olarak, NMRI farelerinde tip 3 diş yaralanması modeli üretildi. Daha önceki araştırmalar fareler, tavşanlar ve k...

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Açıklamalar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Yazarların beyan edecek çıkar çatışmaları yoktur.

Teşekkürler

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Çalışma kendi bütçesiyle yapıldı. Yazarlar, Histoloji alanında Dow Sağlık Bilimleri Üniversitesi Histoloji Bölümü'nden Bay Muhammad Adeel'in yardımını takdir etmektedir.

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Malzemeler

Bu makalede kullanılan malzemelerin listesi
AdŞirketKatalog numarasıYorumlar
Temel kalıpHisto-line Laboratuvarları, İtalyaR4166C2:D23Örneği parafine gömmek için
Karbid bur #1/4 yuvarlakOrta Batı, Wichita Falls, Teksas389101
Bileşik mikroskop Motik BA310Motic Inc. Co. Ltd, Hongkonghttps://moticmicroscopes.com/products/ba310e
Diklofenak sodyum 25mg/mLIndus Pharma (DYCLO)https://sahar.ph/product/dyclo-diclofenac-sodium-25-mg-ml-im-iv/200µ L deri altı
E tipi yavaş hızlı el parçası Rose201-M4Foshan, Çinhttps://www.beingfoshan.com/en/h-pd-353.html
Kaset gömülü Histo-line Laboratuvarları, İtalyaR4004
Ötenazi OdasıConductScience, Illinois, ABDCS-EUTH2A7,25 Litre Kapasite, Fare ve Fareler İçin [500g'ye kadar]
Falcon tüpleri 15 mlYuva188271
Formalin Sigma-Aldrich, St. Louis, Missouri, Amerika Birleşik Devletleri158127buffered 
Formik asit BDH Laboratuvar Malzemeleri Poole, İngiltere & nbsp;2842810%
Homojenizer Omni Mikser Homojenizer, Omni International, Georgia ABDhttps://omni-inc.com/high-shear-lab-homogenizers/omni-th-0-2ml-100ml/omni-tissue-homogenizer-th
Hindistan MürekkepSigma-Aldrich, St. Louis, Missouri, Amerika Birleşik Devletleri198285
K tipi numara 15 endodontik dosyaMani, Japonyahttps://www.mani.co.jp/en/product/dental_01.html
Ketamin-Ksilazin kokteyliBrookes Pharma Pvt Ltd / Mylab (Pvt.) Ltd.87,5mg/kg Ketamin + 12,5mg/kg Ksilazin
Mikrotom HM 315 RMicrom, Almanya901100
Mikro-motor Marathon-IIIBT-Marathon, Saeyang Microtech Co., Ltd. Korehttps://www.saeyang.com/theme/basic/sub/product/view.php?it_id=1752202111Maksimum hızın üçte birinde kullanın
Mikropipet 0.2-2 & mikro; L Gilson, Fransahttps://www.gilson.com/default/
pipetman-p2-0-2-2-micro-l-metal
-ejector.html?srsltid=AfmBOoobE
0iSWY_902ZHGZ7AoJ6wzN5PI
0H4V4vkxHQgK1mq7Wg2kkbS		0.2-2 & mikro; L 
Fosfatla tamponlanmış tuzlu sıvı Sigma-Aldrich, St. Louis, Missouri, Amerika Birleşik DevletleriP4417
Sosyal Bilimler için İstatistiksel PaketIBM, Armonk, New YorkSPSS for Mac sürüm 23.0   
Stereomikroskop BMK-3 ledMeiji techno, Japonyahttps://meijitechno.com/product/bmk-3-led-stereo-microscope/
Cerrahi bıçak No. 22Feather Surgical Blade, Feather Safety Razor Co Ltd., Osaka, JaponyaFB. 12
Zymosan ASigma-Aldrich, St. Louis, Missouri, Amerika Birleşik DevletleriKat No Z42501 mL Zymosan'dan 1mg/mL

Kaynaklar

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Haddad, M., Lefranc, G., Aftimos, G. Local application of IGF1 on dental pulp mechanically exposed; in vivo study on rabbit. Bull Group Int Rech Sci Stomatol Odontol. 45 (1), 12-17 (2003).
  2. Huang, J., et al. Dynamic Regulation of Delta-Opioid Receptor in Rat Trigeminal Ganglion Neurons by Lipopolysaccharide-induced Acute Pulpitis. J Endod. 41 (12), 2014-2020 (2015).
  3. Shahravan, A., Ghoddusi, J., Eslami, B., Rategar, A. F. A histopathological study of the pulp of dogs' teeth after induction of experimental pulp inflammation for different periods of time. J Microsc. 237 (2), 119-121 (2010).
  4. Siddiqui, Y. D., et al. Resolvin D2 Induces Resolution of Periapical Inflammation and Promotes Healing of Periapical Lesions in Rat Periapical Periodontitis. Front Immunol. 10, 307(2019).
  5. Mutoh, N., Tani-Ishii, N., Tsukinoki, K., Chieda, K., Watanabe, K. Expression of toll-like receptor 2 and 4 in dental pulp. J Endod. 33 (10), 1183-1186 (2007).
  6. Mutoh, N., Watabe, H., Chieda, K., Tani-Ishii, N. Expression of Toll-like receptor 2 and 4 in inflamed pulp in severe combined immunodeficiency mice. J Endod. 35 (7), 975-980 (2009).
  7. Sasaki, H., et al. Endodontic Infection-induced Inflammation Resembling Osteomyelitis of the Jaws in Toll-like Receptor 2/Interleukin 10 Double-knockout Mice. J Endod. 45 (2), 181-188 (2019).
  8. He, Y., et al. Pulpal Tissue Inflammatory Reactions after Experimental Pulpal Exposure in Mice. J Endod. 43 (1), 90-95 (2017).
  9. Patidar, A., et al. Barley beta-Glucan and Zymosan induce Dectin-1 and Toll-like receptor 2 co-localization and anti-leishmanial immune response in Leishmania donovani-infected BALB/c mice. Scand J Immunol. 92 (6), e12952(2020).
  10. Tuttle, A. H., Philip, V. M., Chesler, E. J., Mogil, J. S. Comparing phenotypic variation between inbred and outbred mice. Nat Methods. 15 (12), 994-996 (2018).
  11. Zhang, W., et al. Genome-Wide Association Mapping of Quantitative Traits in Outbred Mice. G3 Genes|Genomes|Genetics. 2 (2), 167-174 (2012).
  12. Hasan, A., et al. Expression of Toll-like receptor 2, Dectin-1, and Osteopontin in murine model of pulpitis. Clini Oral Investig. 27 (3), 1177-1192 (2023).
  13. Rogers, N. C., et al. Syk-dependent cytokine induction by Dectin-1 reveals a novel pattern recognition pathway for C-type lectins. Immun. 22 (4), 507-517 (2005).
  14. Ruiz-Herrera, J., Elorza, M. V., Valentin, E., Sentandreu, R. Molecular organization of the cell wall of Candida albicans and its relation to pathogenicity. FEMS Yeast Res. 6 (1), 14-29 (2006).
  15. Takeuchi, O., Akira, S. Pattern recognition receptors and inflammation. Cell. 140 (6), 805-820 (2010).
  16. Peters, B. M., Noverr, M. C. Candida albicans-Staphylococcus aureus Polymicrobial Peritonitis Modulates Host Innate Immunity. Infect Immun. 81 (6), 2178-2189 (2013).
  17. Niazi, F. H., et al. Dentin-Pulp Complex Response in Molars of Rats after Occlusal and Cervical Restorations with Conventional Glass Ionomer Cement and Nano-Hydroxyapatite Silica Glass Ionomer Cement. Appl Sci. 13 (5), 3156(2023).
  18. Erdo, F., Torok, K., Aranyi, P., Szekely, J. I. A new assay for antiphlogistic activity: zymosan-induced mouse ear inflammation. Agents Actions. 39 (3-4), 137-142 (1993).
  19. Underwood, W., Raymond, A. AVMA guidelines for the euthanasia of animals. , 2020 edition, (2020).
  20. Bernardino, ÍdM., Farias, ÍdL., Cardoso, A., Xavier, A., Cavalcanti, A. Use of Animal models in Experimental Research in Dentistry in Brazil. Pesqui Bras Odontopediatria Clin Integr. 14 (1), 17-21 (2014).
  21. Alzarea, B. Selection of Animal Models in Dentistry: State of Art Review Article. J Anim Vet Adv. 13 (18), 1080-1085 (2014).
  22. Hasan, A., et al. A novel experimental model to investigate fungal involvement shows expression of Dectin-1 in periapical lesion pathogenesis. J Oral Rehab. 50 (10), 1043-1057 (2023).
  23. Song, M., et al. Development of a Direct Pulp-capping Model for the Evaluation of Pulpal Wound Healing and Reparative Dentin Formation in Mice. J Vis Exp. (119), e54973(2017).
  24. Balto, K., White, R., Mueller, R., Stashenko, P. A mouse model of inflammatory root resorption induced by pulpal infection. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod. 93 (4), 461-468 (2002).
  25. De Rossi, A., Rocha, L. B., Rossi, M. A. Interleukin-10, Intercellular adhesion molecule-1, and chemokine receptor 5, but not interleukin-4, attenuate the development of periapical lesions. J Endod. 34 (1), 31-38 (2008).
  26. da Silva, R. A., Ferreira, P. D., De Rossi, A., Nelson-Filho, P., Silva, L. A. Toll-like receptor 2 knockout mice showed increased periapical lesion size and osteoclast number. J Endod. 38 (6), 803-813 (2012).
  27. Kawashima, N., Stashenko, P. Expression of bone-resorptive and regulatory cytokines in murine periapical inflammation. Arch Oral Biol. 44 (1), 55-66 (1999).
  28. Balto, K., Müller, R., Carrington, D. C., Dobeck, J., Stashenko, P. Quantification of periapical bone destruction in mice by micro-computed tomography. J Dent Res. 79 (1), 35-40 (2000).
  29. Ramirez, I., et al. Is dental pulp inflammation capable of causing central inflammation, behavioral, and sensory alterations? A pre-clinical study. Arch Oral Biol. 177, 106320(2025).
  30. Li, J. G., et al. Melatonin attenuates inflammation of acute pulpitis subjected to dental pulp injury. Am J Transl Res. 7 (1), 66-78 (2015).
  31. Shi, X., Li, Z., He, Y., Jiang, Q., Yang, X. Effect of different dental burs for experimental induction of pulpitis in mice. Arch Oral Biol. 83, 252-257 (2017).
  32. Kim, S., Lee, S., Jung, H. S., Kim, S. Y., Kim, E. Development of a mouse model for pulp-dentin complex regeneration research: a preliminary study. Restor Dent Endod. 44 (2), e20(2019).
  33. Mohaved, S. B., et al. Apical periodontitis-induced mechanical allodynia: A mouse model to study infection-induced chronic pain conditions. Molecular Pain. 16, 1744806919900725(2020).
  34. Chung, M. K., Lee, J., Duraes, G., Ro, J. Y. Lipopolysaccharide-induced pulpitis up-regulates TRPV1 in trigeminal ganglia. J Dent Res. 90 (9), 1103-1107 (2011).
  35. Tang, Y., Yu, C., Li, F., Wang, H., Ye, L. Establishment of a Murine Pulp Exposure Model with a Novel Mouth-Gag for Pulpitis Research. J Vis Exp. (200), (2023).
  36. Xiao, Z., Xu, M., Lan, L., Xu, K., Zhang, Y. R. Activation of the P2X7 receptor in the dental pulp tissue contributes to the pain in rats with acute pulpitis. Mol Pain. 18, 17448069221106844(2022).
  37. Gantner, B. N., Simmons, R. M., Canavera, S. J., Akira, S., Underhill, D. M. Collaborative induction of inflammatory responses by dectin-1 and Toll-like receptor 2. J Exp Med. 197 (9), 1107-1117 (2003).
  38. Monroe, L. L., et al. Zymosan-Induced Peritonitis: Effects on Cardiac Function, Temperature Regulation, Translocation of Bacteria, and Role of Dectin-1. Shock. 46 (6), 723-730 (2016).
  39. Olynych, T. J., Jakeman, D. L., Marshall, J. S. Fungal zymosan induces leukotriene production by human mast cells through a dectin-1-dependent mechanism. J Allergy Clin Immunol. 118 (4), 837-843 (2006).
  40. Rosenzweig, H. L., Clowers, J. S., Nunez, G., Rosenbaum, J. T., Davey, M. P. Dectin-1 and NOD2 mediate cathepsin activation in zymosan-induced arthritis in mice. Inflamm Res. 60 (7), 705-714 (2011).
  41. Chattipakorn, S. C., Sigurdsson, A., Light, A. R., Narhi, M., Maixner, W. Trigeminal c-Fos expression and behavioral responses to pulpal inflammation in ferrets. Pain. 99 (1-2), 61-69 (2002).
  42. Kawanishi, H. N., Kawashima, N., Suzuki, N., Suda, H., Takagi, M. Effects of an inducible nitric oxide synthase inhibitor on experimentally induced rat pulpitis. Eur J Oral Sci. 112 (4), 332-337 (2004).
  43. Kawashima, N., Nakano-Kawanishi, H., Suzuki, N., Takagi, M., Suda, H. Effect of NOS inhibitor on cytokine and COX2 expression in rat pulpitis. J Dent Res. 84 (8), 762-767 (2005).
  44. Li, M., et al. Histology-based profile of inflammatory mediators in experimentally induced pulpitis in a rat model: screening for possible biomarkers. Int Endod J. 54 (8), 1328-1341 (2021).
  45. Rutherford, R. B., Gu, K. Treatment of inflamed ferret dental pulps with recombinant bone morphogenetic protein-7. Eur J Oral Sci. 108 (3), 202-206 (2000).
  46. Renard, E., et al. Immune Cells and Molecular Networks in Experimentally Induced Pulpitis. J Dent Res. 95 (2), 196-205 (2015).
  47. Cleaton-Jones, P., Duggal, M., Parak, R., Williams, S., Setzer, S. Pulpitis induction in baboon primary teeth using carious dentine or Streptococcus mutans. Sadj. 59 (3), 119-122 (2004).
  48. Eba, H., et al. The anti-inflammatory effects of matrix metalloproteinase-3 on irreversible pulpitis of mature erupted teeth. PLoS One. 7 (12), e52523(2012).
  49. Fuks, A. B., Jones, P. C., Michaeli, Y., Bimstein, E. Pulp response to collagen and glutaraldehyde in pulpotomized primary teeth of baboons. Pediatr Dent. 13 (3), 142-150 (1991).
  50. Oliveira, L. A., Barbosa, S. V. The reaction of dental pulp to Escherichia coli lipopolysaccharide and Enterococcus faecalis lipoteichoic acid. Braz J Microbiol. 34 (2), 179-181 (2003).

Erişim kısıtlı. Bu içeriği görüntülemek için lütfen giriş yapın veya deneme sürümünü başlatın.

Yeniden basım ve izinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya şekillerini yeniden kullanmak için izin iste

İzin iste

Etiketler

Pulpite ModeliNMRI FareleriDental Pulpa nflamasyonuPulpa EkspozisyonuZymosan UygulamasMaksiller Molarnflamasyon al masHistomorfolojik Analiz
Video yakında

İlgili makaleler