Biyomimetik boncuklar kullanılarak bakteri-konak hücre etkileşimlerinin değerlendirilmesi
JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 4:06 dk. • August 29th, 2025
Bir memeli epitel hücre kültürü içeren çok kuyulu bir plaka alın.
Test kuyucuklarına, bakteriyel yüzey proteinlerine bağlı polimer boncuklarla birlikte bir bakteriyel patojen ekleyin.
Kontrol kuyucuklarına, bakteriyel yüzey proteinleri içermeyen patojen ve boncukları ekleyin. Kuluçkaya yatmak.
Test kuyularında, boncuklar bakteri yüzeyini taklit eder ve epitel hücre zarı fosfatidik aside bağlanmak için patojenle rekabet ederek bakteri bağlanmasını azaltır.
Kontrol kuyularında boncuklar bakteri bağlanmasını etkilemez.
Ortamı çıkarın ve bağlanmamış bileşenleri ortadan kaldırmak için tamponla yıkayın.
Hücreleri parçalamak için iyonik olmayan bir deterjanla inkübe edin, zara bağlı bakteri ve boncukları serbest bırakın.
Homojen bir süspansiyon oluşturmak için lizatı pipetleyin ve homojenatı tampon kullanarak seri olarak seyreltin.
Seyreltmeleri agar plakalarına aktarın, koloni oluşumuna izin vermek için inkübe edin ve kolonileri sayın.
Test plakası, kontrollerden daha az koloni sergiler ve bu da bakteri-konak etkileşimlerinin azaldığını gösterir.
Bakteri kültürlerini katkı maddesi olmadan renksiz DMEM'e seyrelterek enfeksiyon ortamı hazırlayın.
37 santigrat dereceye kadar önceden ısıtılm
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin