JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 2:59 dk. • August 31st, 2026
In vitro yetiştirilmiş bir patates bitkisi alın.
Ardından, transfer DNA'sı (T-DNA) içeren bir bitki patojeni olan rekombinant Agrobacterium kullanın.
T-DNA, belirli bitki mikroRNA'larını hapsetmek için kodlamayan bir RNA kodlayacak şekilde tasarlanmış, tam uzunlukta bir patates virüsü X genomu taşımaktadır.
Yaprakları bakterilerle infiltre edin ve gövdeyi bakterilerle kaplanmış bir kürdanla çizin.
İnokülasyon bölgesinde, bakteriler T-DNA'yı keser ve bunu tek zincirli bir DNA olarak bitki hücrelerine aktarır.
Konak mekanizmasını kullanarak T-DNA, replike olan ve kodlamayan RNA'lar ile viral proteinleri eksprese eden viral genomik RNA üretir.
Kodlamayan RNA, hedef bitki mikroRNA'larına bağlanarak bunların hedef mRNA'larına bağlanmasını engeller ve gelişimsel kusurları tetikler.
Bu sırada, viral genomik RNA'lar, mikroRNA susturmasının bitki genelinde gerçekleşmesini sağlamak için plazmodesmatalar aracılığıyla sistemik olarak yayılan ribonükleoprotein kompleksleri oluşturur.
Ektopik çıkıntılar ve trompet şeklinde yapraklar dahil olmak üzere yaprak anomalileri, susturulan mikroRNA'ların gelişimsel rolünü göstermektedir.
Altı yüz nanometredeki optik yoğunluk 1,0'a ulaştığında, Agrobacterium sıvı
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin