JoVE Deneyler Ansiklopedisi
Mikrobiyoloji
0 görüntülenme • 3:17 dk. • August 31st, 2026
Çoğu hücrenin genomuna entegre edilmiş uyuyan faj DNA'sı taşıdığı lizojenik bir bakterinin gece boyu kültürü alınır.
Taze besiyerine ekleyin ve inkübe edin.
Bazı bakteriler spontan indüksiyona uğrayarak, faj DNA'sının kesilip çıkarıldığı, replike edildiği ve viral proteinlerin üretildiği litik döngüye girerler.
Yeni birleştirilmiş enfektif fajlar, hücre lizisi yoluyla salınır.
Kültür örneklerini belirlenen aralıklarla toplayın.
Canlı, indüklenmemiş lizojenleri saymak için, her örneğin seri dilüsyonlarını bir agar plak üzerine damlatın ve inkübe edin.
Koloni oluşturan birimlerin (CFU) hesaplanması için kolonileri sayın.
İnfektif fajları saymak için, aynı dilüsyonları antibiyotikle önceden ekim yapılmış, antibiyotiğe dirençli indikatör konak hücrelerin bulunduğu bir antibiyotik agar plağına damlatın. Lizojenler antibiyotiğe duyarlı olduğundan, sadece dirençli konaklar büyüyebilir.
Fajlar hücreleri enfekte ederek lizize eder ve net plaklar oluşturur.
Plak oluşum birimlerini (PFU) hesaplamak için plakları sayın. Daha düşük PFU değerleri, daha az spontan indüksiyon olayını gösterir.
CFU ve PFU değerlerini zamana karşı grafiğe aktarın. Bakteriyel büyümenin erken eksponansiyel fazında, PFU değerler
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin