Name: Fare Shear stres İndüklenmiş Ateroskleroz Tetikleme Karotis Kol İmplantasyonu (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-01-13T12:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 51 s
Description: Keşfedin, farelerde karotis arter etrafına polyether ketone manşet yerleştirerek ateroskleroz oluşumunu tetikleme yöntemini. Bu model, kesişme stresi etkilerini ve plak gelişimini incelemek için kullanılır.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışmada, Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG), proje GZ PI 771/1-1 kısmen desteklenen; SFB 656 &quot;Kardiyovasküler Moleküler Görüntüleme,&quot; Münster, Almanya (projeleri C6, Z2, B3 ve PM3); AB NoE &quot;Tanı Moleküler Görüntüleme-Dimi &quot;(WP 11.1 ve 11.2). Çalışmada ayrıca İngiliz Kalp Vakfı, İngiltere tarafından finanse edildi.

1. Kayma gerilmesi değiştirici hazırlanması (manşet) <ol><li> Kayma gerilmesi değiştirici iki boyuna yarı yarıya bir koni şeklinde lümen ile bir silindir oluşur. Yarım kabukları, plastik döküm yöntemi ile üretilen termoplastik polyetherketone yapılır. Hala runner bağlıyken döküm elemanları gönderildi. Bu nedenle, yarım kabukları kullanmadan önce kesilmiş olması. 300 mikron (downstream sonunda en düşük iç çapı) - Her dökme 150 mikron arasında değişen farklı boyutlarda yarısı kabukları içerir. </li><li> Manşet hazırlık, cerrahi mikroskop altında yapılmalıdır. </li><li> Künt forseps ile manşet yarım kabuk tutun ve hafifçe keskin bir neşter kullanılarak dökme kesti. Bu prosedür, daha fazla işlenmek üzere yarım kabuk öncüleri yol açacaktır. </li><li> Yarım kabuk habercisi hatta kaygan olmayan bir plaka üzerine yerleştirin; rem için künt forseps ile düzeltin ve önceden yapılmış kesi boyunca tam kesmekkapalı uç Ove. Bu kullanıma hazır manşet yarım kabuk verecektir. </li><li> Mikroskop altında yarım kabukları Kontrol ve kalan tüm keskin kenarları hafifçe kaldırın. Konik iç lümen, memba ve mansap implante manşet içinde kayma gerilmesi farklı kalitelerde indüklemesi için gerekli. Iç lümen dik çalışan yarım kabukları dış yüzeyinde oluk sonunda fonksiyonel manşet oluşturmak üzere bir araya yarısı kabukları sopalarla parçacığı için bir yol gösterici olarak hizmet vermektedir. </li><li> % 70 etanol içinde, boyutuna göre sınıflandırılır manşet yarısında kabukları, saklayın. </li></ol> 2. Sağ karotis arter çevresinde manşet implantasyon <ol><li> ApoE knockout farelerde yaşı 10 hafta civarında ve en az 20 gram ağırlıkta olmalıdır. Plak gelişimi yüksek kolesterol diyet altında incelenmiştir, bu tür bir batı tipi diyet başlangıç ​​olmalı, 4 hafta önce manşet implantasyonu tavsiye edilir. </li><li> Tüm cerrahi prosedüren azından yarı steril koşullar altında yapılan bir cerrahi önlük, maske ve kapak ve steril eldiven giyin. 30 saniye boyunca bir boncuk enstrüman sterilizatör aletleri sterilize ve steril bir opak levha üzerine yerleştirin. Dikkat edin! Aletleri kullanmadan önce soğumaya var! </li><li> Tamamen anestezi kadar% 3 izofluran ile dolu bir anestezi indüksiyonu odasında fare yerleştirin. Ayak tutam tepki ile anestezi derinliği olun. Alternatif olarak, anestezi, Ketamin (80 mg / kg) ve Xylazine (10 mg / kg) veya IACUC tarafından onaylanmış alternatif anestezikler intraperitoneal (ip) enjeksiyonu ile yapılabilir. Ip enjeksiyon yatar pozisyonda fare tuşunu basılı tutun ve karın sol alt kadranda anestezik enjekte edilir. </li><li> Yatar pozisyonda, ısıtılmış bir cerrahi plaka üzerinde fare yerleştirin. Göz merhem (örneğin Bepanthen göz ve burun losyon) ile nemlendirin kuru çalışan gözleri önlemek için. Plaka ön ve arka pençeleri ve bant onları aşağı yayıldı. Izofluran anestezi, narkotik gaz akışı (% 2 isoflurane), küçük bir kemirgen maske yolu ile temin edilecek varsa. </li><li> Uygulayarak ya da tüy dökücü ajan (örneğin Pilca Med) ya da ince bir elektrikli tıraş makinesi (örneğin, Wella Contura) kullanarak Mandibula ve sternum arasında saç çıkarın. Tıraş cildi tahriş önlemek için dikkatli olmak zorundadır. Tüm saç ve tüy dökücü ajan çıkarılana kadar, tüy dökücü bir ajan kullanılarak, saç nüfuz için 1-2 dakika sonra, hafifçe ovalayın. </li><li> (Her büyüklüğünün iki) farklı boyutlarda ve birbirine 6-0 ipek sütür 2.5 cm uzunluğunda bir parça karotis oklüzyonu yerinde yarım kabukları önceden hazırlanmış hazır manşet yarım kabukları var. </li><li> Betadine liberal miktarı ile çalışma alanı dezenfekte edin. Sternum (manubrium) üstten başlayarak 4-5mm medial insizyon ile cilt ve boyun altta yatan fasya açmak için keskin küçük bir makas kullanın. </li><li> Açılış, genişletinkenara sağ parotis bezi hift ve cerrahi dağıtıcısı takın. Titreşimli sağ karotis tespit edebilmek kadar açık açık, sadece sağ sternomastoideus kas sağ omohyoid kas geçen trakea (cerrahlar görünümü), sol, derin teşrih. </li><li> Çok ince, açılı ya da eğri forseps (örneğin Dumont # 5 / 45) kullanarak, çevresindeki bağ dokusu hafifçe kaldırarak sağ karotis arter disseke. Karotis boyunca doğrudan çalışan beyaz, tel nesne - - vagus siniri karotis Ayrı geminin tamamen açığa çıkarmak için bu adımı gerekli olduğu. Dikkatli olun ne karotis yakın bağlantı da sol internal juguler ven, vagus siniri ne de bir şube zarar vermek. </li><li> Doğru manşet boyutu seçmek için, manşet yarısında kabukları iç çapı maruz karotis çapı karşılaştırın: manşet lümen en büyük genişlik karotis dış çapı karşılamak gerekir. </li> Şimdi, dikkatle, karotis altında forseps ucu koymak forseps açmak, iplik, karotis altında 6-0 ipek sütür parça ve bir döngü oluşturur. Karotis altında ve döngü karotis yerinde bir manşet yarım kabuk arasında. En büyük daralması yan downstream olmak zorundadır. <li> Karotis üstünde döngü içinde ikinci manşet yarısı kabuğu koyun. </li><li> Sütür forseps ve düğüm iplik kullanarak dikiş döngü hafifçe sıkın. Bunu yaparak işleyen bir kayma gerilmesi değiştirici oluşur. Hassas montaj için manşet manşet dış yüzeyinde dikiş preformed oluk içinde tam olarak çalışıp çalışmadığını gereklidir. </li><li> Sağ parotis bezi yaklaşık orijinal konumuna geri hareket ettirin ve 6-0 prolen sütür küçük bir miktar kullanarak ya da alternatif olarak, yara klipler kullanabilirsiniz cilt yakın. </li><li> Subkutan profilaktik ağrı tedavisi ve yer sağlamak için 5 mg / kg Carprofen (örneğin Rimadyl) bir tek doz enjekte edilirfare ısınma odasında iyileşene kadar. Normalde, bu Ketamin / Xylazine anestezi kullanılarak 30-60 dakika sürer. Izofluran inhalasyon anestezi iyileşme dönemi kullanırken, önemli ölçüde daha kısadır (10-20 dakika). </li><li> Bizim tecrübelerimize göre, hayvanlar, deneyimli bir cerrah tarafından yapılan müdahale ile yeniden manşet implantasyon sonrası ilk 24 saat içinde normal stressiz faaliyet. Hayvan bile bir gün ameliyat sonrası sıkıntı gibi görünen Ancak, analjezik tedavi tekrarlayın ve veteriner kadrosu ile danışın. </li></ol> 3. Manşet ve karotis arterler Explanting <ol><li> Histolojik analiz için karotid arterler gözlem süresi sonunda hasat olmak zorunda. Eksplantasyonu başlamadan önce, hayvan IACUC kurallarına göre öldürülmüş olması gerekir. </li><li> Manşet yarım kabukları yeniden kullanım için tasarlanmıştır, dikkatlice, plastik unsurları, dis tüm doku parçaları ve bağlantı dikiş kaldırmakkarotis arterler secting, yıkayın ve yarım kabukları% 70 alkol solüsyonu saklamak. Bir manşet implantasyonu birkaç hafta sonra bir damar duvarları zarar görmemesi için dikkatli manşet incelemek için bağ dokusu yapışıklıklar gömülü olduğunu akılda tutmak gerekir. </li><li> Alternatif olarak, manşet eksplante ve karotis arter ile birlikte gömülü. Manşet plastik malzemeden parafin gömmek için kullanılan normal fiksasyon çözümleri ve çözücülere dayanıklıdır. Ayrıca, gömülü numuneleri, normal bıçaklarla donatılmış bir normal mikrotom kullanılarak kesilebilir. </li></ol> 4. Temsilcisi Sonuçlar Manşet, her zaman bir hayvan iki karotis arterler (Şekil 1A, 1B) yaklaşık bir konulmalıdır karşı taraf bir kontrol olarak hizmet vermektedir. Manşet (Şekil 1B), iki yarım kabukları görüntü sunan iç lümen konik şekli görünür. Bu konik es için gerekli olanfarklı akış dinamikleri ile üç bölge tablishing. Doppler ölçümleri 11 ve karşılık gelen akım hızları, faz-kontrast hız MR 12 dayalı hesaplanan cast tarafından oluşturulan tipik kayma stres modelleri Şekil 2'de verilmiştir . Manşet ApoE knockout farelerde implante bir batı tipi diyetle beslenen, değişen akış dinamikleri kışkırtmak makası strese bağlı aterosklerotik plak birikimi (Şekil 3): Memba konik daralma düşük laminar shear stress aterosklerotik plakların daha büyük gelişme yol açar merkezi lümen yakın lipid çekirdek tarafından karakterize yatkın fenotipe, sadece ince bir fibröz kapağı (Şekil 3A1) tarafından kapalı. Manşet konik iç lümen akış hızında bir artışa neden olur. Neredeyse hiçbir plak birikimi bu alanda görülmektedir. Doğrudan hemen vortekslerini ve salınım flo bir alanda arter sonuçları genişletilmesi darboğaz site mansapw parametreleri, daha istikrarlı bir fenotip (medya daha yakın lokalize yani daha az lipid çekirdeği) daha uzun plak gelişimine neden olur. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/3308/3308fig1.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 1"> Şekil 1. kayma gerilmesi değiştirici - montaj ve yerleştirme (A) implante manşet şematik çizim:. Manşet sağ karotis arter (RCCA) etrafına yerleştirilir (LCCA = sol karotis arter) karşı taraf kontrol olarak hizmet vermektedir . (B), bir fare, in vivo MR anjiyografi: maksimum yoğunluk projeksiyonu üç boyutlu zaman-cast (beyaz ok) tarafından uyarılan konik bir daralma uçuş MR anjiyografi (Ayrıntılar için: 12 görmek için) görülebilir. (H = kafa, F = ayaklar, R = sağ, L = sol). Iç lümen ve manşet yarısında kabuğu dış yüzeyi üzerinde sağ üst köşesinde bir makroskopik görünümü verilir. Montaj yapıldığında, iki yarım kabuk değiştiren bir konik silindir formutanımlanmış bir şekilde geminin içinde akış dinamiği. Doğru uyum sağlamak için, manşet (sarı ok) dış yüzeyinde bir oluk bağlama sütür için bir yol gösterici olarak hizmet vermektedir. <img alt="Şekil 2" src="/files/ftp_upload/3308/3308fig2.jpg" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="Şekil 2"> Şekil 2 farklı akış dinamikleri ve kayma gerilmesi Bölgeleri tanımlanmış bir şekilde daralmış karotis arter manşet değiştirir akım dinamiği ve daha sonra kayma gerilmesi implantasyonu. Üst şematik çizimde farklı akış özellikleri belirtilir ve kayma gerilmesi için yerel yaklaşık değerler (Doppler ölçümleri 11 dayalı verilmektedir). Aşağıda, tek bir hayvan için implante manşet MRG upstream tarafından ölçülen boyun kesitsel T1-ağırlıklı MRG (Ayrıntılar için: 12 görmek için faz-kontrast hız görüntüleme) karşılık gelen akım hızları gösterilmektedir. Şekil 3. Kayma gerilmesi ApoE knockout farelerde plak gelişimini tetiklediği sol üst köşesinde açılan boyun makroskopik görünümü gösterir ve kayma gerilmesi implantasyonu 8 hafta sonra, yüksek yağ (Batı tipi) diyet altında bir ApoE nakavt fare karotis arterler açık sağ karotis arter (RCCA) etrafında değiştirici. Manşet yukarı damar (*) opak beyaz bölgenin kapsamlı aterosklerotik plak birikimi bir site için karşılık gelir. Sarı ok, iki manşet yarıları bir araya getiren iş parçacığı gösterir. Buna karşın, plak birikimi hiçbir belirti ortak sol koroner arter (LCCA) vardır. (A) - (C) Temsilcisi Sayın manşet implantasyonu 8 hafta sonra batı tipi diyet altında bir ApoE nakavt fare sağ karotis arter kesitleri boyandı. Şematik çizimde (noktalı çizgiler) karşılık gelen uçaklar nereye verire bölümleri bulunmaktaydı. (A) manşet ateroskleroz Memba büyük plak birikimine yol açar. Kısmen merkezi lümen (detay A1) yakın bulunmaktadır büyük lipid çekirdek (kırmızı oklar), bu plakların savunmasız karakterini karakterize eder. (B) (C) manşet doğrudan akış aşağı salınımlı akış, daha istikrarlı bir türü (yani az ya da hiç lipid çekirdek) plak gelişim orta yol ise manşet darboğaz düzlemine neredeyse hiç plak gelişimi, açıktır. (C1, C2 = manşet yarım kabukları, p = plaklar, yıldız = damar lümeni)

<ol><li>Chiu, J. J., Chien, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+disturbed+flow+on+vascular+endothelium%3A+pathophysiological+basis+and+clinical+perspectives%5BTitle%5D)+AND+%22Physiol.+Rev%22%5BJournal%5D)">Effects of disturbed flow on vascular endothelium: pathophysiological basis and clinical perspectives.</a> Physiol. Rev. 91, 327-387 (2011).</li>
<li>Cunningham, K. S., Gotlieb, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+shear+stress+in+the+pathogenesis+of+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Lab.+Invest%22%5BJournal%5D)">The role of shear stress in the pathogenesis of atherosclerosis.</a> Lab. Invest. 85, 9-23 (2005).</li>
<li>Ali, F., Zakkar, M., Karu, K., Lidington, E. A., Hamdulay, S. S., Boyle, J. J., Zloh, M., Bauer, A., Haskard, D. O., Evans, P. C., Mason, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+the+cytoprotective+enzyme+heme+oxygenase-1+by+statins+is+enhanced+in+vascular+endothelium+exposed+to+laminar+shear+stress+and+impaired+by+disturbed+flow%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Biol.+Chem%22%5BJournal%5D)">Induction of the cytoprotective enzyme heme oxygenase-1 by statins is enhanced in vascular endothelium exposed to laminar shear stress and impaired by disturbed flow.</a> J. Biol. Chem. 284, 18882-18892 (2009).</li>
<li>Hastings, N. E., Simmers, M. B., McDonald, O. G., Wamhoff, B. R., Blackman, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atherosclerosis-prone+hemodynamics+differentially+regulates+endothelial+and+smooth+muscle+cell+phenotypes+and+promotes+pro-inflammatory+priming%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Cell.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Atherosclerosis-prone hemodynamics differentially regulates endothelial and smooth muscle cell phenotypes and promotes pro-inflammatory priming.</a> Am. J. Physiol. Cell. Physiol. 293, C1824-C1833 (2007).</li>
<li>Zheng, J., Abendschein, D. R., Okamoto, R. J., Yang, D., McCommis, K. S., Misselwitz, B., Gropler, R. J., Tang, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MRI-based+biomechanical+imaging%3A+initial+study+on+early+plaque+progression+and+vessel+remodeling%5BTitle%5D)+AND+%22Magn.+Reson.+Imaging%22%5BJournal%5D)">MRI-based biomechanical imaging: initial study on early plaque progression and vessel remodeling.</a> Magn. Reson. Imaging. 27, 1309-1318 (2009).</li>
<li>Stone, P. H., Coskun, A. U., Kinlay, S., Clark, M. E., Sonka, M., Wahle, A., Ilegbusi, O. J., Yeghiazarians, Y., Popma, J. J., Orav, J., Kuntz, R. E., Feldman, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+endothelial+shear+stress+on+the+progression+of+coronary+artery+disease%2C+vascular+remodeling%2C+and+in-stent+restenosis+in+humans%3A+in+vivo+6-month+follow-up+study%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Effect of endothelial shear stress on the progression of coronary artery disease, vascular remodeling, and in-stent restenosis in humans: in vivo 6-month follow-up study.</a> Circulation. 108, 438-444 (2003).</li>
<li>Pedersen, E. M., Oyre, S., Agerbaek, M., Kristensen, I. B., Ringgaard, S., Boesiger, P., Paaske, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distribution+of+early+atherosclerotic+lesions+in+the+human+abdominal+aorta+correlates+with+wall+shear+stresses+measured+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Eur.+J.+Vasc.+Endovasc.+Surg%22%5BJournal%5D)">Distribution of early atherosclerotic lesions in the human abdominal aorta correlates with wall shear stresses measured in vivo.</a> Eur. J. Vasc. Endovasc. Surg. 18, 328-333 (1999).</li>
<li>Buchanan, J. R., Kleinstreuer, C., Truskey, G. A., Lei, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Relation+between+non-uniform+hemodynamics+and+sites+of+altered+permeability+and+lesion+growth+at+the+rabbit+aorto-celiac+junction%5BTitle%5D)+AND+%22Atherosclerosis%22%5BJournal%5D)">Relation between non-uniform hemodynamics and sites of altered permeability and lesion growth at the rabbit aorto-celiac junction.</a> Atherosclerosis. 143, 27-40 (1999).</li>
<li>Nam, D., Ni, C. W., Rezvan, A., Suo, J., Budzyn, K., Llanos, A., Harrison, D., Giddens, D., Jo, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Partial+carotid+ligation+is+a+model+of+acutely+induced+disturbed+flow%2C+leading+to+rapid+endothelial+dysfunction+and+atherosclerosis%5BTitle%5D)+AND+%22Am.+J.+Physiol.+Heart.+Circ.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Partial carotid ligation is a model of acutely induced disturbed flow, leading to rapid endothelial dysfunction and atherosclerosis.</a> Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 297, 1535-1543 (2009).</li>
<li>Cheng, C., van Haperen, R., de Waard, M., van Damme, L. C., Tempel, D., Hanemaaijer, L., van Cappellen, G. W., Bos, J., Slager, C. J., Duncker, D. J., van der Steen, A. F., de Crom, R., Krams, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Shear+stress+affects+the+intracellular+distribution+of+eNOS%3A+direct+demonstration+by+a+novel+in+vivo+technique%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Shear stress affects the intracellular distribution of eNOS: direct demonstration by a novel in vivo technique.</a> Blood. 106, 3691-3698 (2005).</li>
<li>Cheng, C., Tempel, D., van Haperen, R., van der Baan, A., Grosveld, F., Daemen, M. J., Krams, R., de Crom, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atherosclerotic+lesion+size+and+vulnerability+are+determined+by+patterns+of+fluid+shear+stress%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation%22%5BJournal%5D)">Atherosclerotic lesion size and vulnerability are determined by patterns of fluid shear stress.</a> Circulation. 113, 2744-2753 (2006).</li>
<li>van Bochove, G. S., Straathof, R., Krams, R., Nicolay, K., Strijkers, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((MRI-determined+carotid+artery+flow+velocities+and+wall+shear+stress+in+a+mouse+model+of+vulnerable+and+stable+atherosclerotic+plaque%5BTitle%5D)+AND+%22MAGMA%22%5BJournal%5D)">MRI-determined carotid artery flow velocities and wall shear stress in a mouse model of vulnerable and stable atherosclerotic plaque.</a> MAGMA. 23, 77-84 (2010).</li>
<li>Cuhlmann, S., Van der Heiden, K., Saliba, D., Tremoleda, J. L., Khalil, M., Zakkar, M., Chaudhury, H., Luong, L. A., Mason, J. C., Udalova, I., Gsell, W., Jones, H., Haskard, D. O., Krams, R., Evans, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disturbed+Blood+Flow+Induces+RelA+Expression+via+c-Jun+N-Terminal+Kinase+1%3A+A+Novel+Mode+of+NF-%7Bkappa%7DB+Regulation+That+Promotes+Arterial+Inflammation%5BTitle%5D)+AND+%22Circ.+Res%22%5BJournal%5D)">Disturbed Blood Flow Induces RelA Expression via c-Jun N-Terminal Kinase 1: A Novel Mode of NF-{kappa}B Regulation That Promotes Arterial Inflammation.</a> Circ. Res. 108, Forthcoming (2011).</li>
</ol>

Yazarlar ifşa etmek başka bir şey var.

Deneysel varyasyonu en aza indirmek için, bu hemen hemen aynı yaştaki hayvanlar ve aynı diyet geçmişi ile çalışmak tavsiye edilir. Geçenlerde yayımlanan bir araştırma, yabani-tip farelerden uygulanan kayma gerilmesi değiştirici değişen akım dinamiği 13 ile indüklenen endotel disfonksiyonu ve erken inflamatuar yanıtlar araştırma için iyi bir model olabileceğini gösteriyor . Ancak, aterosklerotik plak gelişimi transgenik hiperlipidemik fare modelleri, soruşturma için gerekli olan (örneğin ApoE nakavt fare). Her...

<table border="1"><tbody><tr><td> Isim </td><td> Şirket </td><td> Yorumlar </td></tr><tr><td> Kesme gerilmesi değiştirici (polyetherketone) </td><td> Promolding BV <a href="http://promolding.nl">http://promolding.nl</a> </td><td> Hala runner bağlıyken atmalarını gönderilir. Böylece, tek öğeleri kullanmadan önce kesilmiş olması. </td></tr></tbody></table>

fare shear stres İndüklenmiş ateroskleroz tetikleme karotis kol İmplantasyonu

Implantation of a Carotid Cuff for Triggering Shear-stress Induced Atherosclerosis in Mice

Bu yaygın vasküler kayma gerilmesi değişiklikler, endotel hücreleri inflamatuar genlerin ifadesi tetikleyebilir ve böylece (1 ve 2 gözden) ateroskleroz neden kabul edilir . Shear stresin rolü kapsamlı in vitro kültür endotel hücreleri 1,3,4 akış dinamiklerinin etkisini araştıran ve büyük hayvanlar ve insanlar 1,5,6,7,8 in vivo olarak çalışılmıştır. Ancak, plak gelişimi üzerinde kayma gerilmesi etkisi sistematik soruşturma sağlayan yüksek tekrarlanabilir küçük hayvan modellerinde nadirdir. Son zamanlarda, Nam ve ark. 9, karotis arter dallarının ligasyonu, düşük ve salınımlı akış bir bölge oluşturur, bir fare modelini tanıttı. Bu model, endotel disfonksiyonu ve hiperlipidemik farelerde aterosklerotik lezyonların hızlı oluşumu neden olsa da, gözlenen inflamatuvar yanıt, en azından kısmen bir sonucu o olduğunu dışlanmış değildirf endotel ve / veya ligasyonu nedeniyle damar hasarı. Bu sınırlamalar önlemek için, kayma gerilmesi değiştirerek manşet olan koni biçimli iç lümen, 10 karotis arter içinde yüksek, düşük ve salınımlı shear stresin tanımlanmış bölgeleri oluşturmak üzere seçildi hesaplanır akışkanlar dinamiği üzerine geliştirilmiştir . Apolipoprotein E (Apo E) knockout farelerde bu modeli uygulayarak, yüksek kolesterol, batı tipi diyetle beslenen, vasküler lezyonlar manşet memba ve mansap gelişir. Onların fenotip in vivo Manyetik Rezonans Görüntüleme (MRG) 12 tarafından onaylandıktan sonra bölgesel akış dinamikleri 11 ile ilişkilidir: Düşük ve laminar shear stres yukarı manşet daha yatkın fenotipe geniş plaklar oluşmasına neden olur ise salınım kayma stres mansap manşet istikrarlı aterosklerotik lezyonların 11 neden olur. Yüksek kayma gerilmesi ve manşet içinde yüksek laminar flow bu bölgelerde,genellikle herhangi bir aterosklerotik plakların görülmektedir. Sonuç olarak, kayma gerilmesi değiştirerek manşet prosedürü ApoE eksikliği olan farelerde fenotipik farklı aterosklerotik lezyon üretmek için güvenilir bir cerrahi yaklaşımdır.

Bu yazıda daraltıcı manşet fare karotis arter ateroskleroz ikna etmek için tasarlanmıştır. Implante manşet farklı inflamatuvar fenotip aterosklerotik lezyon gelişimi tetikleyen yüksek, düşük ve salınımlı shear stresin iyi tanımlanmış bölgeler oluşturur, kendi iç lümen konik şekli nedeniyle.

Fare Shear stres İndüklenmiş Ateroskleroz Tetikleme Karotis Kol İmplantasyonu

Vasküler shear stresindeki (makaslama gerilmesi) değişimlerin, endotelyal hücrelerde inflamatuar genlerin ekspresyonunu tetiklediği ve böylece ...'yı indüklediği yaygın olarak kabul edilmektedir.

Bu prosedürün genel amacı, bir ateroskleroz fare modelinde iki ortak karotis arterden birinin etrafına bir kayma gerilmesi modifiyeri implant etmektir. Bu işlem, öncelikle kayma gerilmesi modifiyerinin iki boylamsal yarısının polieter keton kalıptan kesilip çıkarılmasıyla gerçekleştirilir. Ardından, deneysel farenin boyun bölgesi açılır ve iki ortak karotis arterden biri ortaya çıkarılır.Ardından, iki manşon yarım kabuğu iki ortak karotis arteri etrafına yerleştirilir ve fonksiyonel manşonun konik iç lümenini oluşturmak için cerrahi bir iplik kullanılarak yarım kabuklar birbirine bağlanır. Son olarak, hayvanın boynu kapatılır. Nihayetinde, değişmiş akış parametreleri ve sonuç olarak manşonun üst ve alt kısmında aterosklerotik plakların oluşumuna neden olan kayma gerilmesini gösteren sonuçlar elde edilebilir.Bu yöntem, aterosklerotik plakların oluşumuna dair bilgi sağlayabilse de, endotelyal disfonksiyon ve vasküler inflamasyonla ilgili diğer sorular için de uygulanabilir. Kayma gerilmesi değiştiricisi, koni şeklinde bir lümene sahip bir silindirin iki boylamsal yarısından oluşur.Yarım kabuklar termoplastik polieter ketonla yapılmıştır ve her bir kalıp, 150 µm ile 300 µm arasında değişen farklı boyutlarda yarım kabuklar içerir. Cerrahi mikroskop altında çalışan kayma gerilmesi modifikatörünü hazırlamak için, manşet yarım kabuğunu küt uçlu pensle tutun ve onu kalıptan nazikçe kesip çıkarmak için keskin bir skalpel kullanın. Yarım kabuk öncülünü düz ve kaygan olmayan bir plaka üzerine yerleştirin.Küt uçlu pensle sabitleyin ve önceden oluşturulmuş kesi boyunca tam olarak kesin. Kapalı ucu çıkarmak için kalan keskin kenarları nazikçe temizleyin. Manşon yarım kabuklarını boyutlarına göre sınıflandırarak %70 etanol içinde saklayın.Manşet implantasyon prosedürü için; en az 20 gram ağırlığında, 10 haftalık APOE nakavt fareler ile başlayın. Cerrahi önlük, maske, bone ve steril eldiven giyin.Enstrümanları bir boncuklu enstrüman sterilizatöründe 30 saniye boyunca sterilize edin ve steril opak bir örtü üzerine yerleştirin. Fareyi %3 isofloran ile anesteziye alın ve bir ayak parmağı sıkıştırma testi yaparak anestezinin derinliğini kontrol edin. Mandibula ile sternum arasındaki tüyleri, ya bir tüy dökücü ajan uygulayarak ya da ince bir elektrikli tıraş makinesi kullanarak temizleyin.Fareyi ısıtılmış bir cerrahi plaka üzerine sırtüstü pozisyonda yerleştirin. Ardından gözlerin kurumasını önlemek için gözlere merhem uygulayın. İsofluran kullanılıyorsa, kemirgeni bir maske içine yerleştirin ve %2 isofluran uygulayın.Zemini ve arka patileri bantlayın ve yüz maskesini sabitleyin. Önceden hazırlanmış manşeti, farklı boyutlardaki yarım kabukları ve karotis tıkanıklığı bölgesinde yarım kabukları birbirine bağlamak için 2,5 cm uzunluğunda bir parça 6-0 ipek süturu hazır bulundurun. Karotis arterinin belirlenen pozisyonda diseksiyonunu gösteren adımlar doku manipülasyonunu en aza indirmeye yardımcı olduğundan, bu yöntemin görsel gösterimi kritik öneme sahiptir.Ayrıca, manşetin uç kısmının doğru yerleştirilmesinin, tekrarlanabilir sonuçlar elde etmek için en önemli adım olduğunu belirtmek isterim. Bunu sağlamak için, implantasyon bölgesi olarak kesin bir anatomik konum belirledik. Ek olarak, manşetin doğru şekilde yerleştirilmesi, birbirine bağlayan diş için kılavuz görevi gören manşetin dış yüzeyindeki bir oluk, yarım kabuklar tarafından kolaylaştırılmaktadır.Cildi bol miktarda Betadine ile dezenfekte edin. Sternumun üst kısmından başlayarak dört ila beş milimetrelik medial bir insizyonla cildi ve boynun altındaki fasyayı açmak için küçük, keskin makaslar kullanın, açıklığı genişletin, sağ parotis bezini kenara kaydırın ve cerrahi alanı açığa çıkarmak için ekspanderler yerleştirin. Ardından, atımlı sağ ortak karotis arterini bulmak için, sağ sternokleidomastoid kasın sağ omohioid kası kestiği noktada, trakeanın hemen solunda içe doğru künt diseksiyon yapın.Çok ince açılı veya kavisli pensler kullanarak, çevreleyen bağ dokusunu nazikçe temizleyip sağ ortak karotis arteri diseke edin. Karotis arteri, arter boyunca doğrudan uzanan beyaz ipliksi yapı olan vagus sinirinden ayırın.Bu adım damarı tamamen açığa çıkarmak için gerekli olduğundan, vagus sinirine veya karotise yakın bağlantısı olan sağ internal juguler venin bir dalına zarar vermemeye dikkat edin. Doğru manşet boyutunu seçmek için, açığa çıkarılan karotis arterin çapını manşetin iç çapıyla karşılaştırın; yarım kabuklarda, manşet lümeninin en geniş kısmı karotisin dış çapıyla eşleşmelidir. Ardından, pensetin ucunu dikkatlice karotis arterin altına yerleştirin.Forsepsi açın. 6-0 ipek sütür parçasını arterin altından geçirin ve halka ile karotis bölgesi arasında bir döngü oluşturun; bir manşon yarım kabuğu karotisinin altına yerleştirin, en geniş daralma olan taraf akış yönünde olmalıdır. İkinci manşonu, döngünün içindeki yarım kabuk şeklinde karotis arterinin üzerine yerleştirin.Sütür halkasını nazikçe sıkın ve ipi sabitleyin. Bu işlemle, işlevsel makaslama gerilimi modifikasyonu oluşturulmuş olur. Manşetin hassas bir şekilde oturması için, sütürün manşetin dış yüzeyindeki önceden oluşturulmuş kanal içerisinde tam olarak yer alması esastır.Arterin konik daralması artık net bir şekilde görülmelidir. Manşet her zaman hayvanın iki ortak karotid arterinden birinin çevresine yerleştirilmeli ve karşı taraf kontrol olarak kullanılmalıdır. Burada, iç lümenin konik şekli görülmektedir.Bu konik şekil, farklı akış dinamiklerine sahip üç bölgenin oluşturulması için gereklidir. Sağ parotis bezini orijinal konumuna geri getirin. Cildi, az miktarda 6-0 prolin sütürleri veya yara klipsleri kullanarak yaklaştırın ve kapatın.Profilaktik ağrı tedavisi sağlamak için kilogram başına beş miligram carprofen tek doz şeklinde deri altına enjekte edin ve fare iyileşene kadar bir ısıtma odasına yerleştirin. Hayvan ertesi gün stres yaşıyorsa, ikinci bir analjezik doz uygulayın. Doppler ölçümlerinden hesaplanan ve faz kontrast hızına dayalı karşılık gelen akış hızlarıyla birlikte, döküm tarafından indüklenen tipik kayma gerilimi modelleri.Batı tipi diyetle beslenen P OE nakavt farelere manşetin implante edildiği durumlardaki MR Görüntülemeler burada gösterilmektedir. Değişen akış dinamikleri, konik darlığın yukarısında kayma stresine bağlı aterosklerotik plak birikimine neden olur. Düşük laminar kayma stresi, merkezi lümene yakın lipid çekirdekleri ile karakterize olan ve yalnızca ince bir fibröz kapla örtülü, daha kırılgan fenotipli aterosklerotik plakların yoğun gelişimine yol açar.Kafın konik iç lümeni, akış hızında bir artışa yol açar. Darboğaz bölgesinin hemen aşağısındaki bu alanda neredeyse hiç plak birikimi gözlemlenmez. Arterin hemen ardından genişlemesi; girdapların ve osilatuar akış parametrelerinin olduğu bir alan oluşturarak, daha stabil bir fenotipte ve daha az yayılmış bir plak gelişimine neden olur.Bu videoyu izledikten sonra, bir farenin ortak karotis arterinin etrafına kayma gerilmesi düzenleyicinin nasıl doğru şekilde yerleştirileceği konusunda iyi bir anlayışa sahip olmalısınız.

implantation-carotid-cuff-for-triggering-shear-stress-induced

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Bu fare karotis arter intraplak neo-vaskülarizasyon (dört hafta) ile rahatsız akış koşulları ve sonraki ateroskleroz gelişimi (iki hafta) neden olan bir kısmi karotis ligasyonu cerrahi, açıklamaktadır. Ayrıca, yüksek saflıkta endotel RNA, RNA izolasyonu, karotis intima yeni bir yöntem açıklanmaktadır.

Kısmi ligasyon Fare Karotis Arter Disturbed Akış Kaynaklı Ateroskleroz ve Karotis Endotel RNA İzolasyonu Basit Bir Yöntem Bir Model

Fare karotis arter stent implantasyonu bir modeli açıklanmıştır. Diğer benzer yöntemlerle karşılaştırıldığında, bu işlem için uygun bir yol farklı ilaç salınımlı stent ve restenoz moleküler mekanizmaları için damar duvarı tepki olarak çalışma imkanı sunan, çok hızlı, basit ve erişilebilir.

Restenoz Çalışmaları Karotis Arter Stent İmplantasyonu bir murin Modeli

Bu video kemirgen arterlerde intimal plak iki kalkınma modelleri gösterir ve miyointimal hiperplazi ve ateroskleroz farklılıkları vurgulamaktadır.

Farelerde Ateroskleroz Karşı miyointimal hiperplazide uyaran: İki Geçerli Modellerinin An Introduction

Restenozun inhibisyonu için terapötik bileşiklerin perivasküler verilmesi için bir model test sistemi olarak hizmet etmek üzere neointimal hiperplaziyi indüklemek için farelerin femoral arterinde tel yaralanması oluşturan bir cerrahi tekniği tanımlıyoruz.

Bir Perivasküler Drug Delivery Patch İmplantasyonunda ile Femoral Arter Tel Yaralanma sıçan Modeli

Bu çalışmada farelerde hızlandırılmış ateroskleroz indüksiyonu için invaziv bir prosedür açıklanmaktadır. Elektrik veya kriyo kaynaklı yaralanma yöntemi ile karşılaştırıldığında, mekanik kaynaklı yaralanma revaskülarizasyon tedavileri sonrası restenoz insan durumunu taklit eder ve ilgili moleküler mekanizmaların çalışması için idealdir.

Farelerde Hızlandırılmış Ateroskleroz Indüksiyonu: "Tel-Yaralanma" Modeli

entübasyon ile bir vantilatör kullanımını ortadan kaldırırken Minimal invaziv enine aort daralma (MTAC) normal enine aort daralma (TAC) temellerini korur. Özellikle translasyonel çalışmalarda sol ventrikül aşırı, yüksek verimli çalışmalar için oldukça aranan bir yöntem olduğu kanıtlanmıştır.

Farelerde Minimal İnvaziv Enine Aort Konstrüksiyon

Asimetrik bilateral ortak karotis arter stenozunun iğne yöntemi, vasküler kognitif bozukluk ve demans için bir fare modeli oluşturmak için önerilmiştir. Daha önce kurulmuş modellere kıyasla daha uzun vadeli sonuçlarla sonuçlanır ve canlı MRG ile uyumludur. Prosedürü gösteren görsel temsil, ameliyatta ustalaşmak için rehberlik sağlar.

İğne Kılavuzluğunda Asimetrik Bilateral Ortak Karotis Arter Darlığına Dayalı Vasküler Kognitif Bozukluk ve Demans için Bir Fare Modeli

Bu protokol, tek bir cerrahi operasyonla bir murin modelinde karotis anevrizmalarının indüklenmesi için standart bir cerrahi yöntemi tanımlamaktadır.

Karotis Anevrizması Oluşumunun Bir Murin Modeli

Burada, doku mühendisliği yapılmış bir vasküler greftin manşet tekniği kullanılarak fare karotis arterine implantasyonu için bir protokol sunulmakta ve vasküler doku rejenerasyon mekanizmalarının araştırılması için uygun bir hayvan modeli sağlanmaktadır.

Fare Karotis Arterine Manşet Tekniği ile Doku Mühendisliği Yapılmış Vasküler Greft İmplantasyonu

Biz, ayrıntılı 2-boyutlu plak biyoloji intravasküler moleküler görüntüleme için yeni bir yakın-kızılötesi floresan (NIRF)...

İnflamatuar Plak Kızılötesi Floresans (NIRF) İntravasküler Moleküler Görüntüleme, Multimodal Yaklaşım civarında in vivo Ateroskleroz Görüntüleme

Keşfedin, farelerde karotis arter etrafına polyether ketone manşet yerleştirerek ateroskleroz oluşumunu tetikleme yöntemini. Bu model, kesişme stresi etkilerini ve plak gelişimini incelemek için kullanılır.

Fare Shear stres İndüklenmiş Ateroskleroz Tetikleme Karotis Kol İmplantasyonu

Daha fazla video keşfet