Name: Rat Beyin gelen Serebral Yüzey damarları ve İlişkili Beyin zarları ve Diseksiyon ve Koroid Pleksus bir Görsel Açıklama (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-11-14T12:00:00.000+00:00
Duration: 12 min 31 s
Description: Öğrenin sıçan beyninde meninks ve ilişkili arteriyel damarların hassas diseksiyon yöntemini. Bu teknik, koryoid pleksus hasadı ve beyin kan akışı araştırmaları için güvenilir bir yaklaşım sunar.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma KKTC / FDA tarafından finanse edildi.

Video gösterilmemiş olmasına rağmen, fareler ilk olarak en az 3 dakika içinde anestezi ile sonuçlanan, pentobarbital, 300 mg / kg &#39;lik bir dozda verilmiş ve ardından dekapitasyon ile öldürüldü. Beyinleri hızla o vardı ama dikkatle kafatası çıkarılır ve 5 dakika buz-soğuk serum fizyolojik içinde soğutulmuş. Bu, önceki MAV (I üst tabaka) korteks yüzeyinden ayrılabilir, böylece MAV kesme için bu kadar süre için beyin soğuması için önemlidir. Beyin sonra buz-soğuk normal salin ya da 0.1 M sodyum fosfat-tamponlu salin pH = 7.4 dolu buz üzerine oturan bir cam petri tabak (1 cm derinlikte) alt kısmına yerleştirilmiştir. Bütün disseksiyon tuzlu batırılır çoğunlukla beyin ile yapılır. 1. Epifiz Bezi çıkarılması <ol><li> Beynin dorsal yüzü yukarı (Petri kabı altına göre) yerleştirin. Epifiz bezi t sadece rostral iki hemisfer arasındaki en kaudal ventral bölgede yer almaktadıro beyincik (pineal girinti), ve hemen altında ya da üstünde colliculi menenjlerin yüzeyinde yer almaktadır. İlk iki küçük bükük ucu forseps kullanarak epifiz bezi çıkarın. Bu korteks gibi pembe renklidir ancak genellikle kan ve beyin çıkartılmasından oluşan rezidüel damarlarda kalıntılarında çevrilidir. </li></ol> 2. MAV çıkarılması <ol><li> &quot;Baş aşağı&quot; üzerine beyin Flip ve vertebral arter, beyinin zarları ve yataktan pons kapsayan küçük arterler ve meninks ayırın. Önbeyin MAV çıkarılması işlemi başlar. Bu diseksiyon sürecinde ventral başlamak önemlidir. Willis daire büyük ana arterler, orta serebral arter (MCA) ve anterior arterler güçlü ve hangi &quot;iskele&quot; olarak hizmet pial daha küçük yüzeyel arter ve arteriyoller sonra membran zarları geri kalanı ile korteks çıkarılabilir. M için Scremin 7 tarafından gözden bakıncevher görsel temsillerini ve serebral vasküler yüzey ayrıntıları. </li><li> Ya hemisfer ile başlayarak, internal karotis noktada sadece posterior posterior komünikan arter sever küçük bükük ucu forseps kullanın. Bu nedenle, ön beyin ve daha fazla ön ve arka arteriyel ağaçlar ayrılması. Kontralateral hemisferde için aynı işlemi tekrarlayın. </li><li> MCA ve forseps ile anterior arter sürükleyici, ventral anterior korteks (piriform, olfaktör tüberkül) kapsayan MAV koku yolu üzerinde ve çevresinde kaldırdı böylece anterior-dorsal yönde yavaşça çekin. Bu kadar ön korteks (singulat ve orbita) kapsayan MAV ve kaldırır. </li><li> Petri kabı 45 90 ° açıyla beyin çevirin. Lateral kortikal bölgeleri (granüler insular, ikincil somatosensoriyel ve işitsel korteks) çevreleyen MAV ve yanal, daha ön bölgelerde MCA ve ilişkili arter kavrayarak korteks kurtulmuş olabilirler ve yavaşça korteks boyunca dorsal çekerek. Gerekirse, forseps uçları diseksiyon sırasında korteks büyük damar kaldırmak ve serbest bırakmak için kullanılabilir. </li><li> Şimdi MAV ve daha posterior lateral alanların çıkarın. (Not, bu MAV soğuk ve nemli kalmasını sağlamak için bu hasat işlemi sırasında diğer bir hemisfer geçmek için en iyisidir. Ayrıca, korteks MAV kurtarmada direnci geçici kontralateral hemisferde bir yarımkürede anahtarı karşılaşılırsa ve daha sonra orijinal yarımkürede geri dönün.) </li><li> Birincil somatosensoriyel çevreleyen MAV en dorsal bölgelerin çıkarılması ve motor korteks, beynin dorsal yüzü yukarı (Petri kabı altına göre) açmak için. Nihayet beyin MAV boşaltmak için sagital sinüs boyunca forseps uçları kullanılır. Avlanan MAV bu kısmı da test ve analiz kadar buz soğuk tuzlu geçici muhafaza veya daha sonra işlenmek için dondurulabilir. Sık sıkkorteksin en arka / kaudal bölgelere (entorinal görsel ve en kaudal işitsel korteks) kapsayan MAV kortekse bağlı kalır. Onun kaldırma retrosplenial korteks ve colliculi kayaçları arasında MAV disseke edilir videoyu daha sonra gösterilir. </li></ol> 3. Koroid Pleksus çıkarılması <ol><li> Beynin dorsal yüzü yukarı yerleştirin ve büyük forseps hemisfer arasındaki orta hat boyunca küçük forseps aşağı doğru itin ve ardından üst içine korteks ve korpus kallozum (bregma itibaren ≈ -3.3 mm) sayesinde delinme uçları kullanan ile yerde tutun hipokampus midline. </li><li> Lateral ventrikül çoğu açığa dorsal hipokampus ve septum uzak kallozum ile korteks çekmek için forseps kullanın. Koroid pleksus bulunan ve uzunluğu çalışan ana arter demarcating dalgalı kırmızı çizgi ile tespit edilebilir. Üçüncü ven ve yan duvarları manivela için forseps iki ucunu kullanaraktricle ve en kaudal ucunu (bregma 8 ≈ -4.3 mm) büyütebilirsiniz. </li><li> Küçük forseps kullanarak, koroid pleksus ücretsiz bu ucunu çekin. Sonra septum ve kaudat / putamen arasındaki çok ön bölgede (en rostral ölçüde, bregma itibaren ≈ +1.6 mm) gidin ve forseps ventrikülün bu bölümü büyütmek ve koroid pleksus ücretsiz çekme ile. İkinci kalan koroid pleksus elde kontralateral hemisferde aynı prosedürü uygulayın. Yine bu doku ya da test ve analiz kadar buz soğuk tuzlu geçici muhafaza veya daha sonra işlenmek için dondurulabilir. </li></ol> 4. Retrosplenial, İşitsel ve Görsel korteks dahil kortekin daha Kaudal Bölgeleri yanı sıra bu Talamus ve Colliculi örten 3. Ventrikülde Kalan MAV çıkarılması <ol><li> Talamus ve colliculi üzerinde MAV açığa her iki yarımkürede gelen tüm hipokampus çıkarın. Ve kaldırmaMAV bu bölümü, korteks üzerinde MAV çıkarılması çok daha zordur. </li><li> Talamus ön kısmını örten ve nazikçe kaudal çekerek büyük damar tutarak MAV ücretsiz bu kısmı çekin. Bu, vasküler üstü collicular ağa bağlı olan ve dorsal hipokampus ve dorsal talamus ağ için kan tedarik edilir. Kaudal arteriyel daire damarlanmanın son bölümlerini ulaşıncaya kadar kaudal ve yavaş yavaş serbest supracollicular ağ uzağa çekin. Bu noktada, daha fazla bakım taneli retrosplenial, birincil işitsel ve görsel korteksleri yüzey üzerinde kalan arka karın MAV ortadan kaldırmak için dikkat edilmelidir. Korteks daha fazla ön kısımları kapsayan MAV bir diğer bölümü ile olduğu gibi, bu doku ya da test ve analiz zamanına kadar buz gibi soğuk tuzlu su içinde geçici olarak muhafaza edilebilir veya daha sonra işlenmek için dondurulur. Bu ikinci bölüm MAV ile hasat edilmiş, kalan arka karın MAV bir kaldırılması gerekirayrı ayrı analiz edilmelidir eğer d korteks kapsayan ilk disseke MAV bölümüne eklendi. </li></ol> 5. Temsilcisi Sonuçlar Diseksiyon doğru olarak yürütülür, sonuçta elde edilen MAV dokulara 45-35 mg toplam ağırlığında iki dokunulmamış varlık içinde olmalıdır. Korteksin en çevreleyen başlangıçta disseke MAV 25 mg ve talamus kapsayan MAV hakkında tartmak gerekir, colliculi ve oksipital kortekste yaklaşık 15 mg tartmak gerekir. Bu damar içinde kan kalıntı renk olarak hafifçe pembemsi olmalıdır. Iki taraflı koroid pleksus hasat edilen her bir tartı 1-2 mg ile iki tam doku numuneleri içinde olmalıdır. Fazla su doku kaybını önlemek için, bu tür lens temizleme kullandığı gibi kağıt mendil kullanarak depolama veya işleme öncesi MAV kaldırılabilir rağmen disseke koroid pleksus gelen aşırı su çıkarmak için iyi bir fikir değildir. Şekil 1 için oluşturulmuş oldu ifadesi profil karşılaştırarak<html> kullanarak kontrol koşulları altında üç bölgede es (striatum, parietal korteks ve MAV) Agilent-014879 Tüm Rat Genom 4x44K 60mer oligonükleotid dizileri (G4131F, Agilent Technologies, Palo Alto, CA; NCBI GEO Katılım # GPL7294; GSE23093 ve de mevcut GSE29733 NCBI GEO depo). 1) striatum parietal korteks göre ve 2) MAV parietal korteks ile kıyaslandığında resimde iki arsa pictorially ifadeyi gösterir. Bu striatum ve parietal korteks çok daha yakından MAV dışında birbirleriyle ilişkili olduğu açıktır. MAV ile koroid pleksus karşılaştıran veriler, gelecekteki bir yayında sunulacaktır. Ancak, MAV ve koroid pleksus ifadeyi profilleri daha yakından striatum ve parietal korteks için olandan birbirleriyle ilişkili olması muhtemeldir. Şekil 2 MAV yılında diferansiyel gen ekspresyonu hipertermi yanıt (EIH) karşı AMPH karşılaştırıldığında gösterir kontrol etmek ve her bir diğer için. içerik &quot;&gt; kontrol hayvanlarının MAV resmi NCBI gen sembolleri ile 11,000 &#39;den fazla genin gen ekspresyonu striatum ve parietal kortekste kaydedilmiş kıyasla edildi. bu genlerin 2000&#39;den fazla MAV içinde bir 2.5 kat veya daha fazla farklı ekspresyonu İki nöronal zengin dokular ile karşılaştırıldığında, 550 gen ifadesinde 10 kat büyük bir fark vardı. Bunlardan biraz fazla 40% (253) 10 kat veya MAV daha azalmış bir ifade ile gen ve ilişkili olduğu nöronal fonksiyonu. 343 genler parietal korteks ve striatum kıyasla MAV bir 10 kat veya daha fazla ifadesi vardı. genlerin Bu liste MAV çok yüksek zenginleştirme ile genleri belirlemek için bir başlangıç ​​noktası olarak kullanılmıştır. Tablo MAV 15 kat ifade büyük olan 1 listeleri genler parietal korteks ve striatum ile karşılaştırıldığında ve fonksiyon açısından bunları sınıflandırır. Bu genlerin çoğu damar sistemi ve / veya bağışıklık sistemi ile ilişkili bulunmuştur. Bu tgenlerin Dosya türleri yaklaşık 5 zenginleştirilmiş olmalıdır - 10 - çünkü artan damar kendisi ve içinde bulunan kan kat. Ancak, hatta bilinen genel vasküler fonksiyonları ile genler için, 15 kat üzerinde bir artış MAV zenginleşme gösterir. Genlerin numaraları edildi çok büyük bir kat değişiklik ile de olmamıştır; 1) hücre dışı matris proteinleri (özellikle damar ile ilgili olmayan), 2) çözünen taşıyıcı ve 3) lipit ve retinoik asit metabolizması. De, birkaç büyüme ve farklılaşma gen veya transkripsiyon faktörleri bulunmuştur gibi. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/4285/4285fig1.jpg" /> Şekil 1. Parietal korteks ve striatum ile MAV yılında Gen Ekspresyonu karşılaştırılması. Parietal korteks ve striatum (üst plot) ve parietal korteks ve MAV (alt çizim) gen ekspresyonu düzeylerinin karşılaştırılması Volkan arsa. Kırmızı semboller önemli ölçüde farklı betwe olan genlerin ifadetr p bölgeler &lt;0.05 ve bölgeler arasında 1.5 kat veya daha fazla diferansiyel ifadesi var. Siyah semboller anlamlı (p&gt; 0.05) bölgeleri arasındaki farklılık genlerin temsil ve 1.5 kat ifadede farklı daha azdır. Pembe semboller p &lt;0.05 düzeyinde ifadesinde 1.5 kat fark daha az, ancak istatistiksel olarak anlamlı farklı olan genleri gösterir. Sarı semboller 1.5 kat veya daha fazla ifadeye sahip genleri tanımlamak ama bu değişim p &lt;0.05 istatistiksel olarak anlamlı değildir. Kısaltmalar AMPH amfetamin EIH çevre kaynaklı hipertermi MAV meninksler ve ilişkili beyin damarlarında Norm normotermik kontrol <img alt="Şekil 2," src="/files/ftp_upload/4285/4285fig2.jpg" /> Şekil 2. Karşılaştırarak hipertermi ve MAV gen ekspresyonu amfetamin Etkileri. Volcano araziler3 saat zaman noktalarında, tuzlu su, EIH veya AMPH sonra MAV gen ekspresyonunun seviyeleri. Kırmızı semboller siyah noktalar / çevrelerde önemli bölgeler arasında farklılık yoktur genleri temsil ederken önemli ölçüde farklı olduğu düşünülen genlerin ifade. Ek istatistiksel analiz kontrolü ve tedaviler arasındaki fark istatistiksel olarak anlamlı aslında vardı hangi ifadeyi doğrulamak için kullanıldı. <table border="1"><tbody><tr><td fo:width="1in"> MAV İfade Beyin Anlatım </td><td fo:width="4.5in"> NCBI Gen Sembolleri </td><td fo:width="1.5in"> Doku Özgünlük veya Dolaylı Görev (ler) </td></tr><tr><td> &gt; 50 kat </td><td> Col8a1 Anxa2 bir, Des, Esm1, Glycam1, Kl bir, Lect1, leptin reseptör, Lum, Myh11, OGN, Tagln, Thbs2, Tnnt2 </td><td> Damarları ve Kalp </td></tr><tr><td> &gt; 50 kat </td><td> Ccl19, Cd74 a, Defb1, Lrrc21, Mgl1, Mrc1, Msln, Pla2g5, Prg4, RT1-Bb, RT1-Da </td><td> Bağışıklık Sistemi </td></tr><tr><td> &gt; 50 kat </td><td> ADH1, Aebp1, Aldh1a2, Gstm2 </td><td> Retinoik Asit ve Lipit İşleme </td></tr><tr><td> &gt; 50 kat </td><td> Cdh1, Col3a1, Col1a2, Colec12, Cpxm2, CPZ, DCN, Emp3, Gpc3, Nupr1, Omd, Pcolce Slamf9, Tmem27, Tspan8 </td><td> Ekstrasellüler Matriks ve hücre-hücre kavşaklar </td></tr><tr><td> &gt; 50 kat </td><td> Aqp1, Asgr1, Kcnj13, Slc5a5, Slc6a13, Slc6a20, Slc22a6, Sned1, Ttr </td><td> İyon ve Katı Homeostazı </td></tr><tr><td> &gt; 50 kat </td><td> Alx3, Cdkn1c, Foxc2, Igfbp2, Ifitm1, Ifitm2, Nkx6-1, Osr1, Prrx2, Sfrp1, Tbx15. Upk1b, Wisp2, Wnt6 </td><td> Geliştirme ve Transkripsiyon Yönetmeliği </td></tr><tr><td> &gt; 50 kat </td><td> Gpha2, Mfap5, Mpzl2 Plac8, Scgb1c1, Sostdc1, Steap1 </td><td> Bilinmeyen &amp; Çeşitli </td></tr><tr><td> 30 ile 50 kat </td&gt; <td> Anxa1 a, Angpt2, C6 bir, GJB2, Ptgis, Thbd, Timp1 </td><td> Damarları ve Kalp </td></tr><tr><td> 30 ile 50 kat </td><td> Casp12, CCl2, CCR1, CD14, Cxcl10, Ifitm3, Klra5, Lgals1, Lgals3, Ms4a4a, Ms4a7, Plscr1, Spp1, Xcl1 </td><td> Bağışıklık Sistemi </td></tr><tr><td> 30 ile 50 kat </td><td> Col6a3, Cpxm1, Efemp1, fmod, MGP, Nid2 </td><td> Ekstrasellüler Matriks ve hücre-hücre kavşaklar </td></tr><tr><td> 30 ile 50 kat </td><td> Cp, Cubn, Gcgr, S100a6, Scn7a, Sct, Slc4a5, Slc16a11, Slco1a5 </td><td> İyon ve Katı homeostazı </td></tr><tr><td> 30 ile 50 kat </td><td> CFD, Ch25h, Crabp2, Rarres2 </td><td> Retinoik Asit ve Lipit İşleme </td></tr><tr><td> 30 ile 50 kat </td><td> BMP6, Casp12, DAB2, Folr1, Igf2, Msx1, Tbx18, Twist1, Wnt5b </td><td> Geliştirme ve Transkripsiyon Yönetmeliği </td></tr><tr><td> 30 ile 50 kat </td><td> Cela3b, Cln6, C1qtnf7, Copz2, Dhrs7c, Gng11, Prss23, Srpx, Vim </td><td> Bilinmeyen &amp; Çeşitli </td></tr><tr><td> 15 30-kat </td><td> Amiral, Angpt1, Angptl2, BGN, Cklf bir, Cnn1, Cox8h, Ctsk, F13a1, Gja5, Klf4, Lox, Lyz, Myl9, Procr, Pros1, RT1-Ba, Serpinb10, Serping1, Serpinf1, Tgm2, Tnmd, Trim63, Txnip a, Vamp5, VTN </td><td> Damarları ve Kalp </td></tr><tr><td> 15 30-kat </td><td> Ada, Bst2, Ccl6, CD40, CD68, Ctsc, Dap, Faim3, Fkbp9, Fxyd5, Fmo1, Glipr1, Ier3, Ifi47, Igsf6, Msc, Nfatc4, RT1-db1, Serpinb1a, Tir4, Tubb6 </td><td> Bağışıklık Sistemi </td></tr><tr><td> 15 30-kat </td><td> Adamtsl4, COL1A1, Crb3, Dpt, Egfl3, FBN1, Fbln1, Fbln5, FN1, Itgb4, Lama2, Lgals3bp, Loxl1, Mfap4, Mmp14, Mmp23, Ppic, Serpinh1, TIMP3 </td><td> Ekstrasellüler Matriks ve hücre-hücre kavşaklar </td></tr><tr><td> 15 30-kat </td><td> Cybrd1, Selenbp1, Slc2a4, Slc9a2, Slc13a3, Slc16a4, Slc22a8, Slc22a18 </td><td> İyon ve Katı homeostazı </td></tr><tr><td> 15 30-kat </td><td> Agpat2, Bdh2, Cyp26b1, Lpar3, Ltb4dh, Olr1, PON3, Rbp1, Rbp4 </td><td> Retinoik Asit ve Lipit İşleme </td></tr><tr><td> 15 30-kat </td><td> Atf3, Dkk4, Eya2, Ifitm7, Ltbp1, Mustn1, Nr2f2, ptrf, Sphk1, Tgfbi, Tcea3 Tcfap2b, Wnt2b, Wnt5a, Zic1 </td><td> Geliştirme ve Transkripsiyon Yönetmeliği </td></tr><tr><td> 15 30-kat </td><td> Adamts12, Adamtsl3, C1r, Crispld2, Crygn, CYP1B1, Dse, Enpep, Enpp2, Epn3, Flna, Fmo3, Gnmt, Gprc5c, Hspb1, Klc3, Krt18, Krt19, MDK, Mesp1, Ms4a6a, Ms4a6b, Ms4a11, net1, Pdlim2, Phactr2, Plp2, Ppp1r3b, Pqlc3, Rin3, Spag11, Sult1a1, Tmem106a, Wfikkn2 </td><td> Bilinmeyen &amp; Çeşitli </td></tr></tbody></table> * Tabloda yer Genler striatum ve pariet hem fazla 15 kat yukarıda ifadesi olmalıdıral korteks ve arka plan seviyelerinin üzerinde 5 kat. Her gen için iki oranları (MHA / veya striatum MAV / parietal korteks) alt gruplandırma için kullanılmıştır. Bir Genler endotel hücrelerinde bulunan ama aynı zamanda büyük olasılıkla bağışıklık yanıtları arabuluculuk önemli bir rol oynarlar. Tablo 1. 15 kat * veya striatum ve parietal korteks kıyasla MAV daha artmış ekspresyonu ile Genler.

<ol><li>Thomas, M., George, N. I., Patterson, T. A., Bowyer, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amphetamine+and+environmentally+induced+hyperthermia+differentially+alter+the+expression+of+genes+regulating+vascular+tone+and+angiogenesis+in+the+meninges+and+associated+vasculature%5BTitle%5D)+AND+%22Synapse%22%5BJournal%5D)">Amphetamine and environmentally induced hyperthermia differentially alter the expression of genes regulating vascular tone and angiogenesis in the meninges and associated vasculature.</a> Synapse. 63, 881-894 (2009).</li>
<li>Thomas, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endoplasmic+reticulum+stress+responses+differ+in+meninges+and+associated+vasculature%2C+striatum%2C+and+parietal+cortex+after+a+neurotoxic+amphetamine+exposure%5BTitle%5D)+AND+%22Synapse%22%5BJournal%5D)">Endoplasmic reticulum stress responses differ in meninges and associated vasculature, striatum, and parietal cortex after a neurotoxic amphetamine exposure.</a> Synapse. 64, 579-593 (2010).</li>
<li>Ek, C. J., Dziegielewska, K. M., Habgood, M. D., Saunders, N. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Barriers+in+the+developing+brain+and+Neurotoxicology%5BTitle%5D)+AND+%22Neurotoxicology%22%5BJournal%5D)">Barriers in the developing brain and Neurotoxicology.</a> Neurotoxicology. , (2012).</li>
<li>Oldfield, B. J. M., Michael, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aOldfield%2C+BJM+%22The+Rat+Nervous+System%22">The Rat Nervous System</a>. Paxinos, G. 2, Academic Press. San Diego. 391(1995).</li>
<li>Johanson, C. E., Stopa, E. G., McMillan, P. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+blood-cerebrospinal+fluid+barrier%3A+structure+and+functional+significance%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol.+Biol%22%5BJournal%5D)">The blood-cerebrospinal fluid barrier: structure and functional significance.</a> Methods Mol. Biol. 686, 101-131 (2011).</li>
<li>Johanson, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multiplicity+of+cerebrospinal+fluid+functions%3A+%3F+challenges+in+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Cerebrospinal+Fluid+Res%22%5BJournal%5D)">Multiplicity of cerebrospinal fluid functions: ? challenges in health and disease.</a> Cerebrospinal Fluid Res. 5, (2008).</li>
<li>Scremin, O. U. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aScremin%2C+OU+%22The+Rat+Nervous+System%22">The Rat Nervous System</a>. Paxinos, G. 2, Academic Press. San Diego. 3(1995).</li>
<li>Paxinos, G., Watson, C. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPaxinos%2C+G+%22The+Rat+Brain+in+Stereotaxic+Coordinates%22">The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates</a>. , Academic Press. San Diego. (1995).</li>
<li>Johnston, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photoperiodic+regulation+of+prolactin+secretion%3A+changes+in+intra-pituitary+signalling+and+lactotroph+heterogeneity%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Photoperiodic regulation of prolactin secretion: changes in intra-pituitary signalling and lactotroph heterogeneity.</a> J. Endocrinol. 180, 351-356 (2004).</li>
<li>Catala, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+function+of+very+long+chain+polyunsaturated+fatty+acids+in+the+pineal+gland%5BTitle%5D)+AND+%22Biochim.+Biophys.+Acta%22%5BJournal%5D)">The function of very long chain polyunsaturated fatty acids in the pineal gland.</a> Biochim. Biophys. Acta. 1801, 95-99 (2010).</li>
<li>Burnstock, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neurogenic+control+of+cerebral+circulation%5BTitle%5D)+AND+%22Cephalalgia%22%5BJournal%5D)">Neurogenic control of cerebral circulation.</a> Cephalalgia. 5, Suppl 2. 25-33 (1985).</li>
<li>Hamel, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Perivascular+nerves+and+the+regulation+of+cerebrovascular+tone%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Appl.+Physiol%22%5BJournal%5D)">Perivascular nerves and the regulation of cerebrovascular tone.</a> J. Appl. Physiol. 100, 1059-1064 (2006).</li>
<li>Johanson, C. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cognitive+function+and+nigrostriatal+markers+in+abstinent+methamphetamine+abusers%5BTitle%5D)+AND+%22Psychopharmacology+%28Berl%29%22%5BJournal%5D)">Cognitive function and nigrostriatal markers in abstinent methamphetamine abusers.</a> Psychopharmacology (Berl). 185, 327-338 (2006).</li>
<li>Johnston, M., Papaiconomou, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebrospinal+Fluid+Transport%3A+a+Lymphatic+Perspective%5BTitle%5D)+AND+%22News+Physiol.+Sci%22%5BJournal%5D)">Cerebrospinal Fluid Transport: a Lymphatic Perspective.</a> News Physiol. Sci. 17, 227-230 (2002).</li>
<li>Johnston, M., Zakharov, A., Koh, L., Armstrong, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Subarachnoid+injection+of+Microfil+reveals+connections+between+cerebrospinal+fluid+and+nasal+lymphatics+in+the+non-human+primate%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropathol.+Appl.+Neurobiol%22%5BJournal%5D)">Subarachnoid injection of Microfil reveals connections between cerebrospinal fluid and nasal lymphatics in the non-human primate.</a> Neuropathol. Appl. Neurobiol. 31, 632-640 (2005).</li>
<li>Johnston, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evidence+of+connections+between+cerebrospinal+fluid+and+nasal+lymphatic+vessels+in+humans%2C+non-human+primates+and+other+mammalian+species%5BTitle%5D)+AND+%22Cerebrospinal+Fluid+Res%22%5BJournal%5D)">Evidence of connections between cerebrospinal fluid and nasal lymphatic vessels in humans, non-human primates and other mammalian species.</a> Cerebrospinal Fluid Res. 1, 2(2004).</li>
<li>Kulik, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Regulation+of+cerebral+vasculature+in+normal+and+ischemic+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Neuropharmacol%22%5BJournal%5D)">Regulation of cerebral vasculature in normal and ischemic brain.</a> Neuropharmacol. 55, 281-288 (2008).</li>
<li>Bowyer, J. F., Ali, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((High+doses+of+methamphetamine+that+cause+disruption+of+the+blood-brain+barrier+in+limbic+regions+produce+extensive+neuronal+degeneration+in+mouse+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22Synapse%22%5BJournal%5D)">High doses of methamphetamine that cause disruption of the blood-brain barrier in limbic regions produce extensive neuronal degeneration in mouse hippocampus.</a> Synapse. 60, 521-532 (2006).</li>
<li>Sharma, H. S., Westman, J., Nyberg, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiology+of+brain+edema+and+cell+changes+following+hyperthermic+brain+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Prog.+Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Pathophysiology of brain edema and cell changes following hyperthermic brain injury.</a> Prog. Brain Res. 115, 351-412 (1998).</li>
<li>Sharma, H. S., Sjoquist, P. O., Ali, S. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Drugs+of+abuse-induced+hyperthermia%2C+blood-brain+barrier+dysfunction+and+neurotoxicity%3A+neuroprotective+effects+of+a+new+antioxidant+compound+H-290%2F51%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">Drugs of abuse-induced hyperthermia, blood-brain barrier dysfunction and neurotoxicity: neuroprotective effects of a new antioxidant compound H-290/51.</a> 13, 1903-1923 (2007).</li>
<li>Ho, E. L., Josephson, S. A., Lee, H. S., Smith, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebrovascular+complications+of+methamphetamine+abuse%5BTitle%5D)+AND+%22Neurocrit.+Care%22%5BJournal%5D)">Cerebrovascular complications of methamphetamine abuse.</a> Neurocrit. Care. 10, 295-305 (2009).</li>
<li>Ohta, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delayed+ischemic+stroke+associated+with+methamphetamine+use%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Emerg.+Med%22%5BJournal%5D)">Delayed ischemic stroke associated with methamphetamine use.</a> J. Emerg. Med. 28, 165-167 (2005).</li>
<li>Brenner, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neuropsychological+and+neuroimaging+findings+in+traumatic+brain+injury+and+post-traumatic+stress+disorder%5BTitle%5D)+AND+%22Dialogues+Clin.+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Neuropsychological and neuroimaging findings in traumatic brain injury and post-traumatic stress disorder.</a> Dialogues Clin. Neurosci. 13, 311-323 (2011).</li>
<li>Case, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Inflicted+traumatic+brain+injury+in+infants+and+young+children%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Pathol%22%5BJournal%5D)">Inflicted traumatic brain injury in infants and young children.</a> Brain Pathol. 18, 571-582 (2008).</li>
<li>Maas, A. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prognostic+value+of+computerized+tomography+scan+characteristics+in+traumatic+brain+injury%3A+results+from+the+IMPACT+study%5BTitle%5D)+AND+%22J.+Neurotrauma%22%5BJournal%5D)">Prognostic value of computerized tomography scan characteristics in traumatic brain injury: results from the IMPACT study.</a> J. Neurotrauma. 24, 303-314 (2007).</li>
</ol>

Biz ifşa etmek başka bir şey var. Burada sunulan çalışma zorunlu Gıda ve İlaç İdaresi görüşlerini temsil olmayabilir.

Teknik MAV yönlerini ve koroid pleksus diseksiyonu Bu, beyin tuzlu su, fosfat tamponlu serum fizyolojik içinde sodyum ya da çoğu zaman &quot;batık&quot; olması MAV ayrılmasının esnasında kritik öneme sahiptir. MAV ve korteks diseksiyonu sırasında kurutmak için izin Bu MAV ve / veya korteks bu kalarak MAV bölümleri kaldırmak için yetersizlik sonucu hasat kortikal doku miktarı artacak kortikal tabaka I. sıkıca yapışmış MAV sonuçlanacaktır. Ayrıca, sabır diseksiyonu sırasında gereklidir. Tek diseksiyonu sırasında bir yarımkürede korteks MAV kaldırarak bazı dirençle karşılaşırsa Yine, diğer yarımkürede geçmek ve direnç karşılaşıldı tarafına daha sonra geri dönün. Bu yöntem mükemmel bazı pratik sürer ve MAV doku devamlılığını hasattan elde edilmeden önce 5 ila 15 &quot;uygulama&quot; diseksiyonu gerektirir. Disseksiyon ve remo başlangıç ​​yöntembeyin tabanında arteriyel çemberde MAV Val destek olarak daha büyük bir damar kullanılarak menenjlerin çıkarılmasına olanak &quot;yapı iskelesi&quot;. Çok başlangıçta kurban sonra MAV damarlarında kan diseksiyonu sırasında fırlayan gerektiğini, MAV ve hasat RNA&#39;nın% 5&#39;inden az kan kökenli olmalıdır. Bu, önceki dekapitasyon ile beyin için kaldırma, histolojik teknikleri kullanılarak, tuzlu 50 ile 70 ml ile perfüze hayvan tarafından hemen hemen tüm kan kaldırmak mümkündür. Ancak, bu daha sonra disseksiyon sırasında MAV dokulara görselleştirmek için çok daha zordur. MAV dokuların &quot;kirlenme&quot; arasında üç büyük olasılıkla kaynak epifiz bezi, kortikal tabaka ben doku ve rezidü koku ampul dokusu vardır ama hazırlık hipofiz bezi dokusu elde etmek de mümkündür. MAV içinde Epifiz kontaminasyon koyu kırmızı renkli bir yuvarlak 1 ila 2 mm çaplı küre içeren MAV tarafından tespit edilir. Birincil işleviEpifiz bezinin MAV normal olarak tamamen farklı olarak kabul edilir. Birincil işlevi sirkadiyen ritim 9 yönlerini düzenleyen melatonin ve lipid öncüllerinin lipoxygenation 10 üretmektir. Lipoksijenaz aktivitesini düzenleyen gen Lox, öncelikle epifiz bezi 10 yetişkin mevcut olduğu düşünülse de, bizim sonuçlarımız da MAV önemli düzeyde sürekli mevcut olduğunu göstermektedir. Bunun içine renk çok solgun bazı 1 ile 2 mm daha yoğun doku olan pembemsi web benzeri MAV dokuda kalan kortikal veya koku ampul kirlenme sonuçlar. Bu, tampon yüzeyine MAV &quot;yüzen&quot;, ve daha sonra iki kesme forseps kullanılarak, ağır kortikal ya da ampul dokuların çıkarılması ile tespit edilebilir. Kortikal tabaka Ben dokusu, hipotalamik doku veya pineal bezden MAV kirlenme varsa, o zaman bazı genleri bir anlamlı olacak&quot;temiz&quot; bir diseksiyon normalde mevcut olandan derecede daha fazla ifade. Epifiz bezi ile MAV kirlenmesi arylalkylamine melatonin sentezi için gerekli olan (Aanat) N-asetiltransferaz, yüksek ekspresyonu neden olur. Pineal kontaminasyon MAV diseksiyonu sırasında oluşursa Maalesef, MAV yılında Lox düzeyleri doğru tespit edilmesi mümkün olmayacaktır. Kortikal dokusu ile MAV kirlenmesi böyle hippocalcin (Hpca), parvalbumin (Pvalb) ve / veya nöronal pentraxin reseptörü (Nptxr) gibi nöron-özgü gen ekspresyonunun neden olur. Hipotalamik doku ile MAV kirlenmesi büyüme hormonu 1 (GH1), proopiomelanocortin (POMC) daha yüksek ifade neden olur. Hasat edilen dokularda biraz kirlenme var olmadığını durumunda, bu genlerin çoğu belirlenmiş ve gen ekspresyon analizi kullanılmamıştır edilebilir. Bu, döner blo bulunan genleri için özellikle önemlidirHala MAV veya koroid pleksus mevcut olabilir od. Hasat MAV ve koroid pleksus gelen gen ifade verileri bilgileri yorum Ilişkili zarları (MHA) ve koroid pleksus ile birlikte beyinsel yüzey (yüzeysel) damar serebral kan akışı ve beyin-omurilik sıvısı (CSF) homeostazı 4,11, 12, 13, 14, 15, 16, 17 için de gereklidir. Dokusu hasat biyokimyasal ve fizyolojik analizi için uygun olan ve MAV gen ekspresyonu analizi ile amfetamin ve 1,2 hipertermi tarafından üretilen zarar karşı duyarlı olduğu gösterilmiştir. Bu sonuçlar aynı zamanda ağır hipertermi ve genel 18,19,20 olarak beyin damarlarını için amfetamin maruz hakkında bilinenlerin ile orantılı bulunmaktadır. İnsan klinik veriler subdural damar amfetamin ve metamfetamin 21,22 ile zarar duyarlı olduğu inancını destekler. Yanı sıra, majör ve minör serebral vasculatures dahil olmak üzerekafa travması 23,24 25 Kafa Travması türleri araştırırken potansiyel yüksek faiz vardır MAV hasat edilir menenjlerin pial tabakası bu ing. MAV üremesi mevcut gen ekspresyon profili pial ve muhtemelen araknoid meningeal membran BOS kompozisyonu düzenlenmesinde beklenenden daha büyük bir rol oynayabileceğini göstermektedir. Gelecekte, mikroskop kesme tekniği kullanmak suretiyle, daha fazla pial ve araknoid membranları daha büyük bir atardamar damar mevcut ve muhtemelen birbirine ayrılabilir şekilde MAV ihtiva eden dokular ayırmak mümkün olabilir. Bu hasat MAV bu 3 bileşenlerin her birinin işlevi daha iyi bir yorumlama sağlayacaktır.

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktif / ekipman Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td><td> Yorumlar (isteğe bağlı) </td></tr><tr><td> Normal Saline (9 gram tuz / 1 Litre H 2 O) </td><td> In-house </td><td></td><td> Diseksiyon tampon </td></tr><tr><td> 0.1 M sodyum fosfat pH 7.4 </td><td> In-house </td><td></td><td> Diseksiyon tampon </td></tr><tr><td> Kemik rongeurs </td><td> Roboz </td><td> RS-8300 </td><td> Kafatası kemik kaldırma </td></tr><tr><td> Forseps-bükülmüş ucu (4 &quot;uzun ve 0.8 mm genişliğinde ucu) </td><td> Roboz </td><td> RS-5135 veya RS-5137 </td><td> Diseksiyon Forseps </td></tr><tr><td> Forseps-düz uçlu (5.5 &quot;uzun) </td><td> Roboz </td><td> RS-8124 veya RS-8104 </td><td> Thumb Giyinme Forseps </td></tr></tbody></table>

rat beyin gelen serebral yüzey damarları ve İlişkili beyin zarları ve diseksiyon ve koroid pleksus bir görsel açıklama

A Visual Description of the Dissection of the Cerebral Surface Vasculature and Associated Meninges and the Choroid Plexus from Rat Brain

Bu video sunumu destekleyen önbeyin fonksiyonu, düzgün beyin içinde ikamet etmeyen, iki en önemli derecede vasküler yapıların hasat yöntemi göstermek için oluşturuldu. Onlar ilişkili meninksler (MAV) ve serebral kan akımı ve beyin omurilik sıvısı (BOS) homeostazı için gerekli olan koroid pleksus ile birlikte serebral yüzeyi (yüzeysel) damar vardır. Hasat edilen doku biyokimyasal ve fizyolojik analizi için uygun olan ve MAV amfetamin ve 1,2 hipertermi tarafından üretilen zarar karşı duyarlı olduğu gösterilmiştir. Kafa travması Kafa Travması türleri araştırırken Yanı sıra, MAV hasat majör ve minör serebral vasculatures potansiyel olarak yüksek ilgi vardır. Bu sunumda disseke MAV pial ve menenjlerin araknoid membran (az dura) ve majör ve minör serebral yüzey damarlar bazı oluşur. Pleksus disseke koroid l bulunduğu yapıdırOldfield ve McKinley 3,4,5,6 tarafından açıklandığı gibi ateral ventriküller. Bu iki dokuları için kullanılan yöntemler de zarları ve büyük serebral yüzey damar yoksun bölgesel kortikal doku hasat kolaylaştırmak, vb alır iki dokuların diseksiyonu gibi striatum, hipotalamus, hipokampus gibi diğer beyin dokuları ile uyumlu 5-10 dakika toplam. Olarak gösterilen ve bu sunum açıklanan disseke MAV ve koroid pleksus için gen ekspresyon düzeyleri, NCBI GEO deposunda GSE23093 (MAV) ve GSE29733 (koroid pleksus) bulunabilir. Bu veri olmuştur ve daha fazla MAV ve koroid pleksus işleyişini anlamak ve nasıl nörotoksik şiddetli hipertermi ve AMPH gibi olayları olumsuz kendi fonksiyonunu etkileyebilir yardım için kullanılıyor.

Bu video sunumu önbeyin işlevini destekleyen en önemli iki derece vasküler yapıların hasat yöntemi gösterir. Onlar ilişkili meninksler (MAV) ve serebral kan akımı ve beyin omurilik sıvısı (BOS) homeostazı için gerekli olan koroid pleksus ile birlikte serebral yüzeyi (yüzeysel) damar vardır.

Rat Beyin gelen Serebral Yüzey damarları ve İlişkili Beyin zarları ve Diseksiyon ve Koroid Pleksus bir Görsel Açıklama

Bu video sunumu, beyin dışında yer alan ve en önemli iki yüksek vaskülarize yapı olan dokuların hasat edilme yöntemini göstermek amacıyla hazırlanmıştır...

Bu prosedürün genel amacı; ön beyin korteksi, orta beyin, talamus ve kallum yüzeylerini örten meningeslerin (beyin zarları) peel ve araknoid kısımlarını ve ilişkili arteriyel vaskülatürü verimli ve hızlı bir şekilde diseke etmek ve ayrıca lateral ventriküllerden koroid pleksusu toplamak suretiyle gerçekleştirmektir. Bu işlem, öncelikle epifiz bezi çıkarılarak ve ön beyne bitişik meningesler ile arteriyel ağlar ayrılarak gerçekleştirilir. İkinci olarak, kortikal yüzeydeki arterler ve arteriyoller, Willis ventral halkasından başlanıp dorsal kortikal yüzeylere doğru ilerlenerek dikkatlice çıkarılır; böylece peel ve kalan araknoid membranların vaskülatüre tutunmuş kalması sağlanırken bitişik kortikal yüzey dokularının toplanması minimuma indirilir.Ardından, lateral ventriküllerin açığa çıkarılarak koroid pleksusun toplanmasına olanak sağlamak için korteks ve komissural lifler, septum ve hipokampustan diseke edilerek ayrılır. Son olarak, talamus ve orta beynin kallus bölgelerini açığa çıkarmak için hipokampus çıkarılır. Daha sonra bu bölgenin üzerinde yer alan meningesler ve ilişkili damar yapısı diseke edilir.Nihayetinde, diseke edilen meninglerin ve ilişkili arteriyel vaskülatürün yanı sıra koroid pleksusun bütünlüğü ve özgüllüğü, bu bölgelerin her birinin gen ekspresyon profilleri karşılaştırılarak belirlenebilir. Bu yöntem, beyin fonksiyonlarını destekleyen vaskülatür ile ilgili araştırmalardaki temel soruların yanıtlanmasına yardımcı olabilir. Bu süreç; kan akımı, BOS fonksiyonu, nörotoksik hasarlar ve beyin travması açısından koroid pleksusun fonksiyonunun meningler ve ilişkili arteriyel vaskülatür ile karşılaştırılmasını, benzerliklerin ve farklılıkların belirlenmesini içerir.Bu protokole başlamak için, ötanazi uygulamasının hemen ardından sıçanlardan çıkarılan beyinleri beş dakika boyunca buz gibi soğuk, normal salin içerisine yerleştirin. Korteks yüzeyinden beyin meningeslerinin ve ilişkili arteriyel vaskülatürün (MAV) ayrılabilmesi için, diseksiyon öncesinde beynin bu süre boyunca soğumasını sağlamak önemlidir. Ardından beyni, buz üzerinde duran bir cam Petri kabının tabanına yerleştirerek üzerine 1 cm buz gibi soğuk normal salin veya pH 7.4'te 0.1 molar sodyum fosfat tamponlu salin ekleyin.Tüm diseksiyon işlemleri, beyin büyük oranda salin içerisinde olacak şekilde gerçekleştirilmelidir. Diseksiyona başlamak için, beyni Petri kabına dorsal yüzü yukarı gelecek şekilde yerleştirin ve iki hemisfer arasında en orta ventral bölgede bulunan pineal bezi konumlandırın. Bu bez, serebellumun hemen rostralinde ve meninglerin hemen altında veya yüzeyinde bulunur.Colli üzerinden ilerleyin. Epifiz bezini iki adet küçük eğik uçlu pens kullanarak çıkarın. Epifiz bezinin korteks gibi pembe renkte olduğunu, ancak genellikle beyin çıkarma işlemi sonrası kalan kan ve damar kalıntılarıyla çevrili olduğunu unutmayın.Ardından, Petri kabındaki beyni ters çevirin. Daha sonra, ponsu örten vertebral arteri, daha küçük arterleri ve meningesleri, ön beynin meningeslerinden ve vaskülatüründen ayırın. Sonrasında, MAV'nin çıkarılması işlemine başlayın.Diseksiyon sürecine ventral kısımdan başlayarak Willis halkasının ana arterleri, orta serebral arterler ve anterior arterlerle başlamak önemlidir. Ardından, herhangi bir hemisferden başlayarak, posterior kommünikan arteri internal karotid birleşiminin hemen posteriorundan kesmek için küçük eğimli uçlu pensler kullanın; böylece ön beynin daha anterior ve posterior arter ağaçlarını birbirinden ayırmış olursunuz. Daha sonra aynı işlemi karşıt hemisfer için tekrarlayın.Şimdi MCA'yı ve anterior arteri forsepsle kavrayarak, ventral anterior korteksi örten MAV'nin olfaktör traktusun üzerinden ve çevresinden kaldırılmasını sağlamak için nazikçe anterior dorsal yönde çekin. Bu işlem, anterior korteksi örten MAV'nin büyük bir kısmını uzaklaştırır. Lateral kortikal bölgeleri çevreleyen MAV'nin daha anterior lateral bölgelerinin korteksten serbest bırakılabilmesi için beyni Petri kabına 45 ila 90 derecelik bir açıyla döndürün, MCA'yı ve ilişkili arterleri kavrayıp korteks boyunca nazikçe dorsal yönde çekin.Gerekirse, diseksiyon sırasında majör arterleri korteksten kaldırmak ve serbest bırakmak için pensetin uçları kullanılabilir. Şimdi, MAV'nin daha posterior lateral bölgelerini çıkarın. MAV'nin soğuk ve nemli kalmasını sağlamak için bu toplama işlemi sırasında bir hemisferden diğerine geçmenin en iyisi olduğunu unutmayın; ayrıca MAV'yi korteksten serbest bırakırken herhangi bir dirençle karşılaşırsanız hemisferleri değiştirin.Son olarak, primer somatosensör ve motor korteksi çevreleyen MAV'nin en dorsal bölgelerini çıkarmak için, bu bölümü beyinden ayırmak üzere beynin dorsal yüzü yukarı bakacak şekilde çevirin ve sagital sinüs boyunca pensetin uçlarını kullanın. Hasat edilen MAV'nin bu kısmı, test ve analiz için gerekli olana kadar geçici olarak buz soğukluğundaki salinde tutulabilir veya daha sonraki işlemler için dondurulabilir. Genellikle korteksin en posterior kodil bölgelerini örten MAV yapışık kalır.Kaldırılma işlemi, bu videonun sonraki bir bölümünde gösterilmektedir. Koroid pleksusu çıkarmak için öncelikle beyni dorsal tarafı yukarı gelecek şekilde konumlandırın ve büyük pens ile sabit tutun. Ardından, küçük pensi hemisferler arasındaki orta hat boyunca aşağı doğru itin ve uçlarını kullanarak korteks ile korpus kallozumdan geçip hippokampusun orta hattının üst kısmına kadar delin.Ardından, lateral ventrikülün büyük bir kısmını açığa çıkarmak için pens yardımıyla callosum ile birlikte korteksi dorsal hipokampus ve septumdan uzaklaştırın. Koroide pleksus, boyunca uzanan ana arteri belirleyen dalgalı kırmızı çizgi aracılığıyla konumlandırılabilir ve tanımlanabilir. Üçüncü ventrikülün lateral duvarlarını aralamak ve en dar ucunu genişletmek için pensin iki ucunu kullanın.Ardından küçük penset kullanarak, koroid pleksusun bu ucunu serbestçe çekin. Sonra, septum ile kaudat putamen bölgesi arasındaki en anterior bölgeyi genişletmek için penseti kullanın ve koroid pleksusu bu uçtan da serbestçe çekin. İkinci kalan koroid pleksusu elde etmek için aynı prosedürü kontralateral hemisferde de uygulayın.Yine, bu doku geçici olarak buzda, soğukta, salinde tutulabilir veya daha sonra işlenmek üzere dondurulabilir. Korteksin en posterior koddle bölgelerini kaplayan geri kalan MAV'yi çıkarmak için, önce her iki hemisferden hipokampüsün tamamını çıkararak talamus ve kollikuli üzerindeki MAV'yi açığa çıkarın. MAV'nin bu kısmının çıkarılmasının, geri kalan MAV'nin korteksten çıkarılmasına göre çok daha kolay olacağını unutmayın.Talamusun anterior kısmının üzerini örten daha büyük damar yapısı kavranıp nazikçe çekildiğinde, bu damar yapısının Supra kokürküler ağ ile bağlantılı olduğu ve dorsal hipokampus ile dorsal talamus ağına kan sağladığı görülür. Nazikçe çekmeye devam edildiğinde nihayet supra ağı serbest kalacak ve kodle arteriyel dairenin son kısımlarına ulaşılabilecektir. Bu aşamada, granular retros lineal primer, auditori ve görsel kortekslerin yüzeyinde kalan herhangi bir MAV'yi çıkarmak için daha fazla dikkat gösterilmelidir.Bu ikinci talamik ve kallozal MAV kesitiyle birlikte toplanan geri kalan tüm posterior ventral kortikal MAV örnekleri, ayrı ayrı analiz edileceklerse çıkarılmalı ve diseke edilen ilk kortikal MAV kesitine eklenmelidir. Ardından, kontrol koşulları altında striatum, paryetal korteks ve MAV bölgeleri arasındaki gen ekspresyon profillerini karşılaştırmak için, Agilent 0 1 4 8 7 9 tüm sıçan genomu, 4x44.060 mer oligonükleotit dizileri kullanılarak gen ekspresyon analizi gerçekleştirilebilir. İşleme, tarama ve ilk veri depolama ile ilgili daha fazla ayrıntı Thomas ve ark. çalışmasında bulunabilir.Diseksiyon doğru şekilde gerçekleştirildiğinde, elde edilen MAV dokuları toplamda yaklaşık 35 ila 45 miligram ağırlığında iki sağlam parça halinde olmalıdır. Başlangıçta diseke edilen ve korteksin büyük bir kısmını çevreleyen MAV yaklaşık 25 miligram, talamus, kallozite ve oksipital korteksi kaplayan kısım ise yaklaşık 15 miligram ağırlığında olmalıdır.Dokular, damarlardaki kalıntı kan nedeniyle hafif pembemsi bir renkte olmalıdır. Hasat edilen bilateral koroid pleksus, burada görüldüğü gibi, her biri bir ila iki miligram ağırlığında iki adet sağlam doku örneği şeklinde olmalıdır. Burada, kontrol koşulları altında striatum, paryetal korteks ve MAV'deki gen ekspresyon profillerinin bir karşılaştırmasını görmekteyiz.Üstteki grafik, striatumdaki ekspresyonu parietal korteks ile karşılaştırmalı olarak göstermektedir. Alttaki grafik ise MAV'deki ekspresyonu parietal korteks ile karşılaştırmalı olarak gösterirken, striatum ve parietal korteksin birbirleriyle MAV'den çok daha yakından ilişkili olduğu görülmektedir. Burada, MAV'deki diferansiyel gen ekspresyonunu kontrol ile karşılaştırıldığında hipertermiye yanıt olarak, kontrol ile karşılaştırıldığında amfetamine yanıt olarak ve hipertermi ile amfetamin arasında görüyoruz.Son olarak, burada MAV'de parietal korteks ve striatuma kıyasla 15 katından fazla ekspresyon gösteren genleri işlevlerine göre karakterize edilmiş şekilde görüyoruz. Bu genlerin çoğu vasküler sistem ve/veya bağışıklık sistemi ile ilişkilidir. Çok yüksek kat değişimleri gösteren diğer genler ise hücre dışı matris proteinleri, solute taşıyıcılar ile lipid ve retinoik asit metabolizmasıyla ilgilidir.Bu prosedür uygulanırken, MAV diseksiyonu sırasında sabırlı olmanın önemli olduğu unutulmamalıdır. Ayrıca, tüm diseksiyon boyunca beynin izotonik salyanda veya fosfat tamponlu salyanda daldırılmış halde tutulması önemlidir. Bunun yanı sıra, deneysel veriler oluşturmak için dokular alınmadan önce, MAV kesit alma işleminin dört veya beş sıçan üzerinde pratik edilerek çalışılması önerilir.

a-visual-description-dissection-cerebral-surface-vasculature

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Sinirbilim

Serebral perfüzyon izleme iskemik inme modelleri doğruluğunu geliştirmek için gösterilmiştir. Teknik zorluklar sıklıkla serebrovasküler araştırma için bu önemli aracının kullanımını sınırlamak. Bu videoda, optimize edilmiş bir sistem sıçanlarda intraluminal orta serebral arter oklüzyonu sırasında tek veya çoklu-site hemodinamik izleme elde etmek gösterilmiştir.

Intraluminar Orta Serebral Arter Tıkanıklığı ve Sıçan Strok Model Serebral Perfüzyon İzleme için Optimize Sistemi

Bir cerrahi yöntem, yeni doğmuş sıçanlarda ventral kafatasını açığa çıkarmak için tarif edilmektedir. Bu yaklaşımı kullanarak bu anestezi yavruların beyin sapı akut elektrofizyoloji ve iki-foton mikroskopi deneylerini gerçekleştirmek için bir kraniotomi açmak mümkündür.

Yenidoğan Kemirgenlerin Ventral Kafatası kranyotomi olun Bir Yöntem

Serebral hemodinamik ve in vivo sıçan beyin dokusunun ışık saçılım özelliklerinin aynı anda değerlendirilmesi, geleneksel bir çok bantlı dağınık yansıtıcılık görüntüleme sistemi kullanılarak araştınlır.

Serebral Hemodinamiğin ve Işık Saçılımının Eşzamanlı Değerlendirilmesi<em&gt; In Vivo</emÇokspektrumlu yaygın reflektans ımaging&#39;i kullanarak&gt; Sıçan Beyin

Bu kağıt ve öğretim videonun amacı ortaya çıkarmak ve daha sonraki makroskopik ve histolojik analiz için uygun bozulmamış bir halde, domuz beyin ve hipofiz bezi otopsi nasıl kaldırılacağı tanımlamaktır.

Histolojik Analiz Domuz MSS Pozlama: Decapitation, Kafatası Açılış İçin El Kitabı ve Beyin Kaldırma

Bu kağıt yüzeysel beyaz madde yolları ortaya çıkarmak için bir lif disseksiyon yöntem etkin kullanımı ve ventrikül Morfoloji, öğrenci anlama yardım etmek için üç boyutlu uzaydaki insan beyni yapılarının periventriküler gösteriyor.

Derin uzay - anatomi Lateral ventrikül insan beyninin ortaya çıkarmak için periventriküler yapıların ortaya çıkararak keşfetmek

Bu makalede, düzleştirilmiş teğet bölümleri memeli cortices elde etmek ve histochemical kullanarak kortikal modülleri ve immunohistokimyasal yöntemleri görselleştirmek için detaylı bir metodoloji.

Görselleştirme düzleştirilmiş memeli Cortices'deki kortikal modülleri

Bu protokol, aynı kemirgen beyin örnekleri kümesinde iskemik beyin hasarının en önemli üç parametresini ölçmenin yeni bir tekniğini açıklar. Sadece bir beyin örneği kullanmak etik ve ekonomik maliyetler açısından oldukça avantajlıdır.

Tek Bir Kemirgen Beyin Örneklerinde İnme Sonrası Serebral Ödem, Enfarktüs Bölgesi ve Kan-Beyin Bariyeri Kırılımının Ölçülmesi

Bu protokol, 3 aylık bir Danimarka Landrace domuzu üzerinde yüksek hızlı bir pnömatik matkap kullanılarak bir kraniektomi yapılmasını açıklar. Erişim frontal kemikten yapılır ve ventral dura mater ve altta yatan serebral hemisferleri ortaya çıkarır. Bu prosedür, domuz beyninin büyük bir bölümüne erişim sağlar.

Yüksek Hızlı Pnömatik Matkap Kraniektomi ile Domuz Beynine Erişim

Vasküler demans ve Alzheimer hastalığı modellemesi için kullanılabilecek serebrovasküler disfonksiyonu araştırmak için bir model olarak farelerde kimyasal olarak indüklenen büyük kan damarı dilatasyonunu gösteriyoruz. Ayrıca, silikon kauçuk bileşiği enjekte ederek ve kan damarı boyutundaki değişiklikleri ölçmek için net bir görsel rehberlik sağlayarak damar sistemini görselleştirmeyi de gösteriyoruz.

Büyük Damar Aracılı Serebrovasküler Disfonksiyonu Modellemek için Farelerde Dolichoectaziyi İndüklemek İçin Görsel Bir Yaklaşım

Burada, sıçanlarda beyin mikrovaskülatürünü görüntülemek için 12.5 μm uzamsal çözünürlüğe ulaşan ultrason lokalizasyon mikroskobu (ULM) için bir protokol açıklıyoruz. Kan akış yönünün ve hızının ayrıntılı olarak görselleştirilmesini sağlayarak serebral dolaşım ve vasküler bozukluklarla ilgili çalışmaları ilerletmek için güçlü bir araç sunar.

Ultrason Lokalizasyon Mikroskobu Kullanılarak Sıçan Beyin Mikrovaskülatürünün İki Boyutlu Süper Çözünürlüklü Görselleştirilmesi

Bu çalışmanın amacı, motor ve mekansal hafıza eksikliklerinin deneysel çalışmalarında uygulanmak üzere sıçanlarda kalıcı, seçici orta beyin arter tıkanması uygulanan kraniektomi uygulanacak tekrarlanabilir bir yöntem oluşturmaktır.

Sıçanlarda Orta Beyin Arterinin Seçici ve Kalıcı Tıkanması: Motor ve Mekansal Hafıza Eksikliklerini İnceleme Deneysel Yaklaşımı

Öğrenin sıçan beyninde meninks ve ilişkili arteriyel damarların hassas diseksiyon yöntemini. Bu teknik, koryoid pleksus hasadı ve beyin kan akışı araştırmaları için güvenilir bir yaklaşım sunar.

Rat Beyin gelen Serebral Yüzey damarları ve İlişkili Beyin zarları ve Diseksiyon ve Koroid Pleksus bir Görsel Açıklama

Daha fazla video keşfet