Name: Kan-beyin bariyer bozulması arasında Rat Modeli Nörovasküler Therapeutics Hedefli izin ver için (Video) | JoVE Journal
Uploaded: 2012-11-30T12:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 43 s
Description: Öğrenin kan-beyin bariyerini mannitol infüzyonu ile bozma yöntemini. Bu teknik, sıçan modelinde nörovasküler tedaviler için ilaç teslimatını iyileştirmeye yardımcı olur.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Bu çalışma JB Marshall Vakfı tarafından desteklenmiştir.

1. Prosedür için Hayvan ve Ekipmanları hazırlayın <ol><li> Cerrahi başlamadan önce, cerrahi alan ve hayvan hazırlamak. PE50 boru 12 bir ucunu &quot;içine bir 23-gauge künt iğne sokarak karotis kateter olun. Kateterin ucunu bir yaklaşık 45 ° eğim kesin. Prosedür öncesi ekipman sterilize edin. Saç kaput, cerrahi maske takın ve steril eldiven. </li><li> Cerrahi uygulanır yüzeyi üzerinde bir ısıtma pedi yerleştirin. Bunu etkinleştirin ve ısınmasını bekleyin. Emici bir tezgah pad ile örtünüz. </li><li> Eğer kristaller kalmadan çözüm% 25 mannitol olduğunu doğrulayın. Kristaller varsa, 80 ° C sıcak su banyosunda flakon yerleştirerek ve periyodik çalkalayarak çözeriz. </li><li> Hayvanın kütle kaydedin. </li><li> 0.8 mg / 0,1 ml / dak &#39;lık bir hızla kg / dak dağıtımı için bir propofol seyreltme edin. </li><li> 3 dakika için indüksiyon kutu içinde sıçan yerleştirin. Ayarlar:% 5 izofluran, 2 L / dkvantilatör debi. </li><li> Bir tek kullanımlık havlu üstüne, boyun ve hem iç uyluk tıraş. </li></ol> 2. Sıçan Entübe <ol><li> 3 dakika için indüksiyon kutu içinde hayvan yerleştirin. </li><li> IV kateter ile endotrakeal tüp hazırlayın. Bu boyut ve sıçan suşu için, biz bir 18 ga kateter kullanın. Tüp zarar vermeden yeterli hava akımına izin vermek için yeterince büyük, ancak trakea içine sığacak kadar küçük olmalıdır. Plastik kateterin iğne çekin ve dikkatlice iğne yaklaşık bölünürler. Sivri ucundan 1 cm. Bunted iğne kalemi olacaktır. Iğne geri kateter içine koyun. </li><li> Açılı yüzey üzerinde dişlerin sıçan asın. </li><li> Hayvanın boynuna karşı doğrudan bir ışık Shine ve onun kulakları arasındaki dizilmiş. </li><li> Küçük bir spatula yaklaşık yerleştirin. Orofarinks içine 3 cm. Yavaşça ağzından dilini dışarı çekerken yukarı doğru kaldırın. </li><li> Trakeanın açılması gözünüzde canlandırın. Sen se olacakea küçük bir delik, her nefes ile yakın açın ve. </li><li> Yavaşça deliğe kateter yerleştirin. Bazen plastik trakea kıkırdak girebilirsiniz hissedebilirsiniz. Trakea duyarlıdır. Kateter zorlamayın. </li><li> 1 L / dk ve 60 bpm ve% 2 izofluran için ventilatör ayarlayın. </li><li> Çalışma yüzeyine ventilatör ve teyp tüp kateter bağlayın. </li><li> Hayvan ayak tutam yaparak anestezi olduğunu doğrulayın. </li></ol> 3. Propofol IV Anestezi Kurmak <ol><li> Çalışma yüzeyine dört bacaklarda ve kuyruk taping sıçan sabitleyin. </li><li> Traş boyun ve klorheksidin sabun ile kasık siteleri üç kez fırçalayın. Klorheksidin üç kez durulama ile Sonra fırçalayın. </li><li> IV uzatma seti için propofol şırınga takın. Infüzyon pompası üzerinde şırınga takın. </li><li> Traş uyluk deri yoluyla kesmek bir neşter, kullanma. Kasın kesilmesi kaçının. </li><li> Kuvveti ile kesi açps femoral ven görselleştirmek için. </li><li> Damar açığa arter üzerinde doku dışarı doğru çekin. </li><li> Damar içine 26 ga monoject veteriner IV kateter yerleştirin. Iğne ven duvarı delen, Ne zaman itmek kolay hale hissedeceksiniz. Iğne çekin ve damar içine kateter itin. </li><li> 0,1 ml / dk propofol infüzyonu başlatın. </li><li> 3-5 dk propofol infüzyonu başlayarak ve daha sonra,% 50 O2 ve% 50 N2 O karışımı ile anestezi gaz geçiş izofluran kapatın. </li></ol> 4. Ortak Karotid Arter Bifurkasyon Açığa <ol><li> Bistüri ile boyun orta hat kesi olun. </li><li> Makas veya bistüri ile iki büyük tükrük bezlerinin arasındaki kesin. </li><li> Karotis arter açığa orta hat için lateral doku uzakta teşrih. Doku katmanları açmak için forseps kullanın. Sen forseps ile sunduğunuz parçalarını çıkartın ve minimall olmak belirlemek için makas kullanabiliry damar. Gazlı bez, pamuk bezlerden ve koter Gerekirse kanama kontrol edin. </li><li> Ağır kanama, orta olduysa 3 ml serum fizyolojik ip enjekte. </li><li> Karotis doku çekmeye Retraktörler kullanın. Çatallanma bulun. </li><li> Çatallanma hemen distalinde oksipital arter Açığa. Forseps arasına Dağlamak ve elektrokoter ile ayırın. </li><li> Tam karotid bifurkasyon ve mümkün olduğunca ECA kadar maruz forseps kullanın. </li><li> Oksipital arterin distal ECA kapalı dallanma üstün tiroid arter Açığa. Forseps arasına Dağlamak ve elektrokoter ile ayırın. </li></ol> 5. Eksternal Karotis Arter kateterizasyonu <ol><li> ECA altında 4/0 ipek 2 uzunlukları yerleştirin. </li><li> Sizin hemostatla sütür 1 uzunluğu tut ve (sıçan ayakları doğru) geri kaudal ECA çekin. </li><li> Mümkün w gibi diğer dikiş atın ve (sıçan ağzına doğru) kraniyale kadar kravatITH bir cerrahın düğüm. Bu ECA feda kalıcı bir bağ oluşturur. </li><li> İlk hemostat (kaudal gerilim uygulayarak bir) çıkartın ve diğer sütür (ECA etrafında düğümlü olanı) kapmak ve hemostatla kraniyale nazik gerilim uygulamayın. </li><li> Gevşek başka bir cerrahın düğüm (güvenli değil - ancak bağlı bırakın) çatallanma ve kalıcı bağ proksimal distal. </li><li> 1% arter dinlenmek için lidokain ile yıkayınız. </li><li> Heparinize salin ile kateteri doldurun. </li><li> Mümkün olduğunca yakın bifürkasyonun geçici damar klip yerleştirin. Kateterizasyon için uzay maksimize etmek için bir açıyla Sıra damar klip. Klibi doğru gevşek düğüm kaydırın. </li><li> Microscissors kullanarak bağ sadece proksimal ECA küçük bir arteriyotomi (kesim) olun. Klip ve bitişik harf güvenli olup olmadığını hiç kanama olmamalıdır. </li><li> ECA duvarları kontrol forseps kullanarak, damar içine kateter eğimli sonuna beslemek. </li&gt; <li> Gevşek dikiş düğüm ile kateter sabitleyin. Kateter etrafında arter bağla. </li><li> Klipsini çıkarın ve pamuklu bir bezle temizleyin. </li><li> Çatallanma distalinde yaklaşık 1 mm kateter ilerletin. Damar immobilize sağlamak için düğüm proksimalinde forseps ile arter tutun. </li></ol> 6. Mannitol yönetme <ol><li> Herhangi biri hava kabarcıkları yaratmadan 8 &quot;IV uzatma grubu ve mannitol içeren bir 6 ml şırınga Dolgu 37 inkübatör içinde bu depolayın ° C. Not: çalışma hızla mannitol - bu kolayca oda sıcaklığında çözeltiden çökelebilir olacaktır.. </li><li> BBBD görselleştirmek için, Evans mavisi boya yönetmek olabilir ve bariyer kesintiye uğramış olan beyin bölgeleri girmek izlemek. Bunu yapmak için, propofol infüzyonu için bacakta üzerinde yeni bir IV sitesi üzerinden hayvan% 2 Evans Mavisi, 2 ml / kg verir. </li><li> Filtre ve hava bub kaldırmak için mannitol ile doldurun 5 mikron ayarlanmış uzatma takınbles. Sonra, hava kabarcıkları oluşturarak olmadan musluğunu bu ekleyin. </li><li> 0.09 25 ml / sn sn mannitol Yönet. ICA proksimalinde yapılan bir noktada karotis içinde akışı ile dengeye ulaşmak için mannitol için izleyin. Bu sıçan kalp hızı ile pulse görünmelidir. Mannitol basitçe kalp aşağı doğru akar Eğer sıçan kan basıncı üstesinden geldiler. Bu hayatı tehdit eden komplikasyonlara ve yoksul BBBD neden olabilir. </li></ol>

<ol><li>Abbott, N. J., Patabendige, A. A. K., Dolman, D. E. M., Yusof, S. R., Begley, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structure+and+function+of+the+blood-brain+barrier%5BTitle%5D)+AND+%22Neurobiology+of+disease%22%5BJournal%5D)">Structure and function of the blood-brain barrier.</a> Neurobiology of disease. 37, 13-25 (2010).</li>
<li>Smith, Q. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Blood-Brain+Barrier%5BTitle%5D)+AND+%22%22%5BJournal%5D)">The Blood-Brain Barrier.</a> 89, 193-208 (2003).</li>
<li>Kroll, R. A., Neuwelt, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Outwitting+the+blood-brain+barrier+for+therapeutic+purposes%3A+osmotic+opening+and+other+means%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Outwitting the blood-brain barrier for therapeutic purposes: osmotic opening and other means.</a> Neurosurgery. 42, 1083(1998).</li>
<li>Kroll, R. A., Pagel, M. A., Muldoon, L. L., Roman-Goldstein, S., Neuwelt, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Increasing+volume+of+distribution+to+the+brain+with+interstitial+infusion%3A+dose%2C+rather+than+convection%2C+might+be+the+most+important+factor%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Increasing volume of distribution to the brain with interstitial infusion: dose, rather than convection, might be the most important factor.</a> Neurosurgery. 38, 746-754 (1996).</li>
<li>Butt, A. M., Jones, H. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+histamine+and+antagonists+on+electrical+resistance+across+the+blood-brain+barrier+in+rat+brain-surface+microvessels%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+research%22%5BJournal%5D)">Effect of histamine and antagonists on electrical resistance across the blood-brain barrier in rat brain-surface microvessels.</a> Brain research. 569, 100-105 (1992).</li>
<li>Inamura, T., Black, K. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bradykinin+selectively+opens+blood-tumor+barrier+in+experimental+brain+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+%26+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Bradykinin selectively opens blood-tumor barrier in experimental brain tumors.</a> Journal of Cerebral Blood Flow & Metabolism. 14, 862-870 (1994).</li>
<li>Matsukado, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+tumor+uptake+of+carboplatin+and+survival+in+glioma-bearing+rats+by+intracarotid+infusion+of+bradykinin+analog%2C+RMP-7%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Enhanced tumor uptake of carboplatin and survival in glioma-bearing rats by intracarotid infusion of bradykinin analog, RMP-7.</a> Neurosurgery. 39, 125(1996).</li>
<li>Kroll, R. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+drug+delivery+to+intracerebral+tumor+and+surrounding+brain+in+a+rodent+model%3A+a+comparison+of+osmotic+versus+bradykinin+modification+of+the+blood-brain+and%2For+blood-tumor+barriers%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Improving drug delivery to intracerebral tumor and surrounding brain in a rodent model: a comparison of osmotic versus bradykinin modification of the blood-brain and/or blood-tumor barriers.</a> Neurosurgery. 43, 879(1998).</li>
<li>Kinoshita, M., McDannold, N., Jolesz, F. A., Hynynen, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Noninvasive+localized+delivery+of+Herceptin+to+the+mouse+brain+by+MRI-guided+focused+ultrasound-induced+blood-brain+barrier+disruption%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Noninvasive localized delivery of Herceptin to the mouse brain by MRI-guided focused ultrasound-induced blood-brain barrier disruption.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 103, 11719-11723 (2006).</li>
<li>Neuwelt, E. A., Dahlborg, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chemotherapy+administered+in+conjunction+with+osmotic+blood-brain+barrier+modification+in+patients+with+brain+metastases%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+neuro-oncology%22%5BJournal%5D)">Chemotherapy administered in conjunction with osmotic blood-brain barrier modification in patients with brain metastases.</a> Journal of neuro-oncology. 4, 195-207 (1987).</li>
<li>Doolittle, N. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Safety+and+efficacy+of+a+multicenter+study+using+intraarterial+chemotherapy+in+conjunction+with+osmotic+opening+of+the+blood-brain+barrier+for+the+treatment+of+patients+with+malignant+brain+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer%22%5BJournal%5D)">Safety and efficacy of a multicenter study using intraarterial chemotherapy in conjunction with osmotic opening of the blood-brain barrier for the treatment of patients with malignant brain tumors.</a> Cancer. 88, 637-647 (2000).</li>
<li>Guillaume, D. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intra-arterial+chemotherapy+with+osmotic+blood-brain+barrier+disruption+for+aggressive+oligodendroglial+tumors%3A+results+of+a+phase+I+study%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Intra-arterial chemotherapy with osmotic blood-brain barrier disruption for aggressive oligodendroglial tumors: results of a phase I study.</a> Neurosurgery. 66, 48(2010).</li>
<li>Remsen, L. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+influence+of+anesthetic+choice%2C+PaCO2%2C+and+other+factors+on+osmotic+blood-brain+barrier+disruption+in+rats+with+brain+tumor+xenografts%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesia+%26+Analgesia%22%5BJournal%5D)">The influence of anesthetic choice, PaCO2, and other factors on osmotic blood-brain barrier disruption in rats with brain tumor xenografts.</a> Anesthesia & Analgesia. 88, 559-559 (1999).</li>
<li>Nilaver, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Delivery+of+herpesvirus+and+adenovirus+to+nude+rat+intracerebral+tumors+after+osmotic+blood-brain+barrier+disruption%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences%22%5BJournal%5D)">Delivery of herpesvirus and adenovirus to nude rat intracerebral tumors after osmotic blood-brain barrier disruption.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 92, 9829(1995).</li>
<li>Fortin, D., McCormick, C. I., Remsen, L. G., Nixon, R., Neuwelt, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Unexpected+neurotoxicity+of+etoposide+phosphate+administered+in+combination+with+other+chemotherapeutic+agents+after+blood-brain+barrier+modification+to+enhance+delivery%2C+using+propofol+for+general+anesthesia%2C+in+a+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Unexpected neurotoxicity of etoposide phosphate administered in combination with other chemotherapeutic agents after blood-brain barrier modification to enhance delivery, using propofol for general anesthesia, in a rat model.</a> Neurosurgery. 47, 199(2000).</li>
<li>Neuwelt, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Primary+CNS+lymphoma+treated+with+osmotic+blood-brain+barrier+disruption%3A+prolonged+survival+and+preservation+of+cognitive+function%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+clinical+oncology%22%5BJournal%5D)">Primary CNS lymphoma treated with osmotic blood-brain barrier disruption: prolonged survival and preservation of cognitive function.</a> Journal of clinical oncology. 9, 1580(1991).</li>
<li>Remsen, L. G., Trail, P. A., Hellström, I., Hellström, K. E., Neuwelt, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+delivery+improves+the+efficacy+of+a+tumor-specific+doxorubicin+immunoconjugate+in+a+human+brain+tumor+xenograft+model%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">Enhanced delivery improves the efficacy of a tumor-specific doxorubicin immunoconjugate in a human brain tumor xenograft model.</a> Neurosurgery. 46, 704(2000).</li>
<li>Neuwelt, E. A., Pagel, M. A., Kraemer, D. F., Peterson, D. R., Muldoon, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bone+marrow+chemoprotection+without+compromise+of+chemotherapy+efficacy+in+a+rat+brain+tumor+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Pharmacology+and+Experimental+Therapeutics%22%5BJournal%5D)">Bone marrow chemoprotection without compromise of chemotherapy efficacy in a rat brain tumor model.</a> Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 309, 594-599 (2004).</li>
</ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

BBBD etkililiğini maksimize birkaç anlamı vardır. Bu cut-down aşamasında kanamayı en aza indirmek için önemlidir. Kan basıncı ve kalp hızı önemli kanama etkilenebilir ve bu faktörlerin BBBD 13 derecede etkilediği bilinmektedir. Kanama gibi üstün tiroid ve bölünmesi gerekir oksipital arterler gibi büyük gemiler, Arter için sütürler kullanılarak azaltılabilir. Ayrıca, elektrokoter gemiler bölmek ve zengin bir kan dolaşımı alanları incelemek için kullanılabilir. Özellikle karotis kateter - Bu hayvan içine yerleş...

<table border="1"><tbody><tr><td> Malzeme Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td><td> Yorumlamak </td></tr><tr><td> Long Evans sıçan </td><td> Harlan Laboratuvarlar </td><td></td><td> 210-250 g, erkek </td></tr><tr><td> PE 50 Borular </td><td> Beckton-Dickinson </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 18 çap x 2.5 &quot;IV kateter </td><td> Terumo </td><td></td><td> ET tüpü için </td></tr><tr><td> 30 &quot;IV uzantılı setleri </td><td> Abbott </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 26 göstergesi veteriner IV kateter </td><td> Monoject </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Evans mavisi boyasının </td><td> Sigma </td><td> E2129 </td><td></td></tr><tr><td> Iki kutuplu </td><td> Codman </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Filtre, 5 mikron </td><td> Braun </td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

kan-beyin bariyer bozulması arasında rat modeli nörovasküler therapeutics hedefli izin ver için

Rat Model of Blood-brain Barrier Disruption to Allow Targeted Neurovascular Therapeutics

Bazal membran ve astrosit uç ayakları ile birlikte sıkı kavşaklar ile endotel hücreleri kan-beyin bariyerini 1 forma serebral kan damarları çevreleyen. Bariyer seçici kan ve büyüklüğüne ve yüküne dayalı beyin arasında geçmesini molekülleri dışlar. Bu fonksiyon, nörolojik bozukluklar için tedavilerin sunulmasını engelleyebilir. Kemoterapötik ilaçlar arasında bir sayı, örneğin, etkili bir şekilde tümör hücrelerini 2 ulaşmak için, kan-beyin bariyerini değildir. Bu nedenle, kan-beyin bariyerinin ötesine ilaçların ulaştırılması, iyileştirilmesi bir ilgi alanıdır. Beyin için ilaçların ulaştırılması arttırmak için en yaygın yöntem doğrudan doğruya beyin infüzyon ve kan-beyin bariyeri bozulma 3 vardır. Tedavilerin beyine doğrudan intraserebral infüzyon olduğunu garanti eder, ancak bu yöntem ilacın 4 dağıtmak için sınırlı bir yeteneği vardır. Kan-beyin bariyeri bozulması (BBBD) alDolaşım sistemi doğrudan akış alçak ilaçların beyin içine ve böylece daha etkili dağınık tümör hücrelerine ulaşır. Bariyer kesintileri üç yöntem ozmotik bariyer kesintileri, farmakolojik bariyer kesintileri ve kabarcık ile odaklanmış ultrason içerir. Neuwelt öncülük Ozmotik bozulması, onların sıkı kavşaklar küçültmek ve bozmaya neden kan-beyin bariyerinin hücre dehydrates% 25 mannitol hipertonik bir solüsyon kullanılır. Bariyer bozulması, aynı zamanda, histamin 5 ve 6 bradikinin gibi vazoaktif bileşikleri ile farmasötik olarak gerçekleştirilebilir. Ancak bu metot, özellikle beyin tümörü bariyer 7 için seçicidir. Buna ek olarak, RMP-7, bradikinin peptid analog,% 25 mannitol 8 ile ozmotik BBBD ile kafa kafaya göre aşağı olarak tespit edilmiştir. Başka bir yöntem, mikro-kabarcık ultrason kontrast ajanları ile birlikte odaklanmış ultrason (FUS), aynı zamanda gösterilmiştirgeri dönüşümlü olarak kan-beyin bariyerini 9 açmak için kullanılır. FUS karşılaştırıldığında olsa da,% 25 mannitol bu translasyonel araştırma 10-12 için kanıtlanmış bir araçtır yapar insan hastalarda güvenliği uzun bir geçmişi vardır. BBBD gerçekleştirmek için, manitol doğrudan doğruya beyin arteryel dolaşım içine yüksek bir oranda teslim edilmelidir. İnsanlarda, endovasküler bir kateter hızlı, direkt akım sağlanabilir beyin yönlendirilmektedir. Bu protokol modelleri insan mümkün olduğunca yakından BBBD. Bir cut-down karotis arter bifurkasyon takiben, bir kateter ECA içine retrograd eklenir ve internal karotis arter (ICA) dolaşıma doğrudan mannitol teslim etmek için kullanılır. Propofol ve N2 O anestezi bariyer bozulma 13 etkinliğini maksimize etmek için yetenekleri için kullanılır. Düzgün çalıştırılırsa, bu prosedür güvenli, etkili ve reversibl kan-beyin bariyeri ve doğaçlama açmak için yeteneği vare genellikle beyin 8,13,14 ulaşmaz ilaçların ulaştırılması.

<img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/50019/50019fig1.jpg" /> Şekil 1. Evans mavisi boya ekstravazasyon yoluyla kan-beyin bariyerini bozulma görselleştirme. Evans mavisi boya albümin bağlanır ve fizyolojik koşullar altında beyin damar dışına olmayan bir pigmenttir. Beynin bir yan üzerinde, kan-beyin bariyerinin kesintisi olmayan hemisfer kesilmiş değişmeden kalırken, Evans mavisi hemisfer kesilmiş mavi girmek ve leke olanak verir. Bu nedenle, kan-beyin bari...

Kan-beyin bariyeri bozulması, beyin bazı ilaçların ulaştırılması, yardımcı olur. Mannitol fiziksel bariyer düzenini bozacak içi arterially kan damarları çevreleyen daralır hücreleri teslim.

Kan-beyin bariyer bozulması arasında Rat Modeli Nörovasküler Therapeutics Hedefli izin ver için

Endothelial cells with tight junctions along with the basement membrane and astrocyte end feet surround cerebral blood vessels to form the blood-brain ...

Bu prosedürün genel amacı kan-beyin bariyerini bozmaktır. Bu, önce hayvanın bir endotrakeal hava yolu ile IV anesteziye yerleştirilmesiyle gerçekleştirilir. Daha sonra, ortak karotis arterin çatallanması ortaya çıkar.Daha sonra dış karotis artere bir kateter yerleştirilir. Son olarak, mannitol uygulanır. Sonuç olarak, Evan'ın Mavi Boyasının ekstravazasyonu yoluyla kan-beyin bariyeri bozulmasını gösteren sonuçlar elde edilebilir.Bu tekniğin mevcut intra arteriyel tedavi yöntemlerine göre en büyük avantajı, fizyolojik koşullar altında normalde kan-beyin bariyerini geçmeyen ilaçların beyne girmesine izin vermesidir. Bunun sinirbilim alanında etkileri vardır, çünkü kan-beyin bariyerini geçme yeteneği zayıf olan yeni tedavileri test etmemize izin verir. Bu tekniğin etkileri nöro-onkolojiye kadar uzanır, çünkü birçok kemoterapötik ajan kan-beyin bariyerini geçemez.Bu yöntem bize yeni onkoloji hakkında fikir verse de, kan beyin bariyeri geçirgenliği zayıf olan ilaçlarla tedavi edilen diğer nörolojik bozukluklar hakkında da bize bilgi sağlayabilir. Bu yöntemin görsel gösteriminin, araştırmacıların ve hayvan cerrahisine aşina olanların bu tekniği laboratuvarlarında kullanmalarına izin vereceğini umuyoruz. Başlamak için,% 25 mannitol çözeltisi hazırlayın ve kristal olmadığını doğrulayın.Kristaller varsa, şişeyi 80 santigrat derece su banyosuna yerleştirerek çözün ve çalkalayın. Hayvanın kütlesini periyodik olarak kaydedin ve dakikada 0.1 mililitre hızında verilecek iki adet 12 cc propofol şırıngası hazırlayın. Hayvanı bir indüksiyon odasında uyuşturduktan sonra, tek kullanımlık bir havluya koyun ve boynunu ve iç uyluklarını tıraş edin.Hayvanı üç dakika boyunca indüksiyon odasına geri koyun. Sıçanı entübe etmek için entübasyona hazırlanmak için, IV kateterli bir endotrakeal tüp hazırlayarak başlayın. Tüp, yeterli hava akışına izin verecek kadar büyük, ancak trakeaya zarar vermeden sığacak kadar küçük olmalıdır.Bir kalem yapmak için, iğneyi plastik kateterden dışarı çekin ve iğneyi dikkatlice kırın. Keskin ucundan yaklaşık bir santimetre uzakta, iğneyi katetere geri koyun. Daha sonra, fareyi dişlerinden açılı bir yüzeye asın, kulakları arasında sıralanan hayvanın boynuna doğrudan bir ışık tutun.Ardından, orofarenks içine küçük bir spatula yerleştirin. Yaklaşık üç santimetre. Dili nazikçe ağızdan çekerken yukarı doğru kaldırın.Trakeanın açılmasını açılıp kapanan küçük bir delik olarak hayal edin. Her nefeste, kateteri nazikçe deliğe sokun, hassas trakeanın kıkırdağına zorlamamaya dikkat edin. Ventilatörü dakikada bir litreye ve 60 BPM'ye ayarlayın ve ardından flor oranını %2'ye getirinArdından kateteri ventilatöre bağlayın ve tüpü çalışma yüzeyine bantlayın.Bir ayak parmağını kıstırarak hayvanın uyuşturulduğunu doğrulayın. Kuyruktaki dört uzvu da çalışma yüzeyine bantlayarak rotayı sabitleyin. Tıraşlı boyun ve kasık bölgelerini üç kez klorheksidin sabunu ile ovalayın.Sonra klorheksidin ile ovalayın. Üç kez durulayın. Bir IV uzatma setine bir propofol şırıngası takın ve şırıngayı infüzyon pompasına monte edin.Daha sonra, bir neşter kullanarak kası kesmeden traşlı uyluğun derisini kesin. Daha sonra kesiği açmak ve femoral veni bulmak için forseps kullanın ve damarı ortaya çıkarmak için dokuyu arter üzerinden çekin. Damar içine 26 G mono eject veteriner IV kateteri yerleştirin.İğne damarın duvarını deldiğinde, itmek daha kolay hale gelecektir. İğneyi geri çekin ve kateteri üç ila beş dakika içinde kabın içine itin. Propofol infüzyonuna başladıktan sonra, anestezi gazını %50 O2 ve %50 N iki O karışımına geçirin ve flor izini kapatın.Ortak karotis arterin çatallanmasını ortaya çıkarmak için, boyunda orta hat kesisi yapmak için bir neşter bıçağı kullanarak başlayın. Trakea üzerindeki sternal hyoid kaslara ulaşmak için orta hat boyunca yüzeysel fasiyayı kesin. Forseps veya makasla sıçan karotis üçgenini oluşturan sternal hyoid, di gastrik ve sternal mastoid olmak üzere üç kastan oluşan bir grubu görselleştirmek için dokuyu yanal olarak hareket ettirin.Karotis arteri ortaya çıkarmak için karotis üçgeninin kasları arasındaki fasyayı ayırın. Gazlı bez ve pamuklu çubuklarla birlikte küçük damarları bölmek için bipolar koter kullanın Kanamayı kontrol etmek için, kasları forseps ile ayırmak için ekartörler kullanın. Dokuyu karotisten uzaklaştırın ve çatallanmayı bulun.Oksipital arteri çatallanmanın hemen distalinde açığa çıkarın. Forseps arasında koterize edin ve forseps ile ayırmak için bir elektrokoter kullanın. Karotis bifurkasyonunu ve mümkün olduğunca dış karotis arter veya ECA'yı tamamen açığa çıkarın.ECA'nın distalinden oksipital artere dallanan superior tiroid arterini açığa çıkarın. Forseps arasında koterize edin ve ECA'yı kateterize etmek için ayırın. Altına dört oh ipekten iki uzunluk yerleştirin.Bir hemostat kullanın ve bir uzunlukta sütür alın ve diğer sütürle ECA geri çekilmesini sağlayın. Cerrahın düğümü ile mümkün olduğunca kraniyal, çatallanmanın distalinde ve kalıcı ligatürde proksimalde bağlayın. Arteri gevşetmek için başka bir cerrahın düğümünü gevşek bir şekilde bağlayın.% 1 lidokain ile sulayın, kateteri heparinize tuzlu su ile doldurun. Ardından, çatallanmaya mümkün olduğunca yakın bir açıyla geçici bir damar klipsi yerleştirin. Ardından gevşek düğümü mikro makas kullanarak klipse doğru kaydırın.ECA'da ligatun hemen yakınında küçük bir kesi yapın. Klips ve bağ sağlamsa, forseps kullanılarak kanama olmamalıdır. ECA duvarlarını kontrol etmek için, kateterin eğimli ucunu gevşek cerrah düğümü ile damarın içine besleyin.Kateteri sabitleyin. Arteri kateterin etrafına bağlayın, ardından klipsi çıkarın ve alanı temizlemek için pamuklu çubuk kullanın. Kateteri çatallanmanın yaklaşık bir milimetre distalinde ilerletin.Damarın hareketsiz hale geldiğinden emin olmak için arteri düğüme yakın tutmak için forseps kullanın. Mannitol uygulamak için. Sekiz inçlik bir IV uzatma setini ve altı mililitrelik bir şırıngayı herhangi bir hava kabarcığı oluşturmadan mannitol ile doldurun.Kan-beyin bariyeri bozulmasını görselleştirmek için 37 santigrat derecede saklayın veya BBBD, propofol infüzyonuna karşı bacakta yeni bir IV bölgesi aracılığıyla kilogram başına iki miligram% 2 Evans Blue uygulayın. Uzatma setini beş mikronluk bir filtreye takın ve hava kabarcıklarını gidermek için minol ile doldurun. Ardından kabarcıklar oluşturmadan durdurma musluğuna takın.Mannitol'ü saniyede 0.09 mililitre olarak uygulayın 25 saniye boyunca, mannitolün iç karotis arterine hemen yakın bir noktada ortak karotisteki akışla dengeye ulaşmasını izleyin, sıçanın kalp atış hızı ile nabız atıyor gibi görünmelidir. Mannitolün kalbe doğru akmadığından emin olun, bu da akışın farenin kan basıncının üstesinden geldiğini ve ciddi komplikasyonlara neden olabileceğini gösterir. Beynin bir tarafındaki kan-beyin bariyerinin bozulması, Evan'ın mavisinin bozulmuş yarım küreye girmesine ve maviye boyamasına izin verirken, rahatsız edici olmayan yarım küre değişmeden kalır.Burada gösterilen, kan-beyin bariyeri bozulması veya BBBD olmayan bir beyin örneğidir ve burada ozmotik BBBD'den sonra maviye boyanmış bir beyin örneği, sağ hemisferin lekelendiğine ve Willis çemberindeki kan akışının karışmasının bir sonucu olarak medial longitudinal fissürün yakınındaki sol hemisfere bir miktar mavi girildiğine dikkat edin. Bu teknik, araştırmacıların bir sıçan modelinde kan-beyin bariyerini geçmeyen tedavileri keşfetmelerinin yolunu açıyor. Bu videoyu izledikten sonra, karotis arteri kateterize ederek ve doğrudan beyne bir manitol solüsyonu enjekte ederek bulanık beyin bariyerini bozabilmelisiniz.

rat-model-blood-brain-barrier-disruption-to-allow-targeted

Research

JoVE Journal

Medicine

Tıp

Kan-beyin bariyeri (KBB) ve Mikro-aracılı odaklanmış ultrason bozulması beyinde non-invaziv hedeflenen ilaç dağıtımı için umut verici bir...

Sıçan Modelinde Transkraniyal Odaklanmış Ultrason kullanarak Kan-beyin bariyeri MRG eşliğinde bozulması

Bu videoda, kan-beyin tümörü bariyerini taklit eden bir in vitro model oluşturmak için kapsamlı bir protokol açıklıyoruz. Model, beyin tümörlerinin tedavisi için terapötik ajanların verilmesini anlama sözü veriyor.

Kan-beyin tümör bariyeri veya BBTB modeli: Terapötiklerin tümöre verilmesini değerlendirmek için kan-beyin bariyeri veya BBB modelinin bir uyarlaması

Kan-beyin bariyeri (KBB) insan modellerinin oluşturulması BBB yetmezliği ile ilişkili beyin koşulları araştırma yararlanabilir. Burada gözenekli zarın karşı tarafında insan astrosit ve beyin endotel hücreleri coculturing izin veren bir temas BBB modelinin hazırlanması için geliştirilmiş bir tekniği açıklar.

Yöntem kan-beyin bariyerini bir insan hücre tabanlı bir İletişim Modelinin Hazırlanması için Geliştirilmiş

Bu çalışmanın amacı, singeneik fare endotelial hücreler ve astrositlerin ortak-kültür içeren bir in vitro modelinin BBB tekrarlanabilirliğini doğrulamak için oldu. Endotel hücre tek yüksek Teer ve düşük LY geçirgenliği sundu. Belirli TJ proteinlerin ekspresyonu, enflamasyon ve taşıyıcı ve reseptörlerin işlevselliğine fonksiyonel tepkileri değerlendirildi.

Ayarlama-up bir<em&gt; In Vitro</emSıçan Kan-beyin bariyerinin&gt; Model (BBB): BBB geçirimsizliği ve Reseptör aracılı Ulaştırması Bir Odak

Burada bir fare beyin damar geçirgenliği tahlil mayi enjeksiyon kan - beyin bariyerini disfonksiyon hayvan modelleri için geçerlidir perfüzyon ardından floresan tarayıcıları kullanarak mevcut. Bir hemi-beyin geçirgenliği kantitatif değerlendirilmesi ve diğer izleme görselleştirme/immunostaining için kullanılır. Yordamı 5-6 h 10 fareler için alır.

Vivo kan - beyin bariyerini geçirgenliği tahlil Fluorescently kullanarak farelerde izleyiciler etiketli

Bu yordamı genel amacı fare modelleri iskemik inme kan - beyin bariyerini bozulma vivo içinde değerlendirmesi için son derece tekrarlanabilir bir teknik sağlamaktır.

Kan - beyin bariyerini bozulma iskemik inme, bir fare modeli Vivo içinde değerlendirilmesi

Burada bir içinde cellulo BBB (kan beyin bariyerini) ayarını açıklayan bir iletişim kuralı mevcut-Minibrain polyester geçirgen membran kültür taşıma biomolecules veya enfeksiyöz ajanlar arasında bir insan BBB değerlendirmek için sistem eklemek ve onların komşu beyin hücreleri üzerinde fizyolojik etkisi.

Bariyer geçişleri patojenler veya ilaçlar ve onların etkileşim beyin ile çalışmak için bir insan kan-beyin arabirim modeli

Uyuşturucu merkezi sinir sistemi tümörleri için hedefleme büyük bir sorun olduğunu. Burada kan-beyin tümör-bariyer fare ve/veya insan hücreleri kullanarak bir tüp bebek taklit üretmek ve onların ilgi merkezi sinir sistemi tümörü içinde vivo hedefleme öngörülebilirliği için tartışmak için bir protokol açıklayın.

Tahmin içinde Vivo Payloads bir kan-beyin tümör-engel bir tabak içinde kullanarak teslim

Kan-beyin bariyeri (BBB) sıkı beyin homeostazı düzenleyen bir çok hücreli nörovasküler birimdir. İnsan iPSC'leri ve çip üzerine organ teknolojilerini birleştirerek, hastalık modellemesi ve CNS ilaç penetrite tahminleri için uygun kişiselleştirilmiş bir BBB çipi ürettik. BBB çipinin üretimi ve işletimi için ayrıntılı bir protokol açıklanmıştır.

İnsan iPSC Tabanlı Kan-Beyin Bariyer Chip Üretimi

Bu protokol, in vitro model bir insan kan-beyin bariyeri (BBB) oluşturmak için bir yöntem açıklar. Endotel hücreleri ve perisitler bir kesici uç filtrenin (kan bölmesi) her iki tarafına ekilir ve astrositler alt kuyucuğa (beyin bölmesi) ekilir. Karakterize edilen model, nanopartikül taşıma deneyleri için kullanılmıştır.

İnsan Kan-Beyin Bariyerini Modelleyen Üçlü Kültür Hücre Sistemi

Kan-beyin bariyeri (BBB), istikrarlı ve sağlıklı bir beyin ortamının sürdürülmesinde çok önemli bir role sahiptir. BBB disfonksiyonu birçok nörolojik hastalıkla ilişkilidir. Serebrovasküler patolojiyi, BBB bütünlüğünü ve BBB'nin genetik ve hastalık tarafından nasıl değiştirildiğini araştırmak için BBB'nin 3 boyutlu, kök hücre türevli bir modelini geliştirdik.

Nörolojik Hastalığı Modellemek ve Terapötik Olarak Hedeflemek için İn Vitro Kan-Beyin Bariyerinin Yeniden Yapılandırılması

Öğrenin kan-beyin bariyerini mannitol infüzyonu ile bozma yöntemini. Bu teknik, sıçan modelinde nörovasküler tedaviler için ilaç teslimatını iyileştirmeye yardımcı olur.

Kan-beyin bariyer bozulması arasında Rat Modeli Nörovasküler Therapeutics Hedefli izin ver için

Daha fazla video keşfet