Elektrofizyolojik Motor Ünite Sayısı Tahmini (MUNE) Fare Arka ayağın KASLARDAKİ bileşik kas aksiyon potansiyeli (BKAP) Ölçme

Aşağıdaki deneyin genel amacı, faredeki triseps Siri kaslarını in vivo olarak innerve eden fonksiyonel motor birimlerin sayısını tahmin etmektir. Bu, önce triseps Siri kaslarından gelen maksimum cmap genliğinin ölçülmesiyle elde edilir. İkinci adım olarak, 10 alt maksimal artımlı yanıt elde edilir, bunlar daha sonra ortalama tek motor birim aksiyon potansiyeli genliğini vermek için ortalamadır.

Daha sonra, cmap genliği ortalama SUP genliğine bölünür. Muni'yi hesaplamak için sonuçlar, triseps sury hin ekstremite kaslarını innerve eden fonksiyonel motor ünitelerin sayısının in vivo bir tahminini sağlar. Elektrofizyolojik motor birim sayısı tahmin tekniği veya muni, periferik sinir sistemi bozuklukları veya yaralanmaları için klinik öncesi tedavileri araştırmak için kullanılabilir.

Bu yöntem için ilk olarak Delta yedi fare spinal müsküler atrofi modelini incelerken aklımıza geldi. Bu modelde ciddi bir fenotip ile karşımıza çıkıyor ve bu nedenle yenidoğan fareyi incelemek zorunda kaldık. Bu nedenle, bu teknik hem yenidoğan farelerde hem de yetişkin farelerde kullanılabilir.

Bu yöntemin görsel gösterimi, fonksiyonel motor birimlerin sayısının doğru bir şekilde tahmin edilmesini sağlamak için tekrarlanabilir artımlı yanıtlar elde etmek için kritik öneme sahiptir. Bu tekniğin, artımlı kuvvet ölçümlerine dayananlar gibi diğer muni ölçüm yöntemlerine ve farelere göre temel avantajı, bu tekniğin minimal invaziv olması ve zaman içinde tekrarlanabilmesidir. Motor nöron hastalığı ve periferik sinir hasarı modellerinde motor ünite bütünlüğünün klinik olarak ilgili, güvenilir ve tekrarlanan değerlendirmelerini yapma yeteneği, bu modellerin translasyon potansiyelini arttırır ve motor ünite bakımı ve sağlığının belirleyicileri hakkındaki anlayışımızı artırır.

Cmap ve muni kayıtları yapmak için, aktif halka elektrodu, anestezi uygulanmış bir farenin gastro kası olan arka bacağın proksimal kısmının üzerine gelecek şekilde cilde yerleştirin. Ardından, empedansı azaltmak için referans halka elektrodunu ayağın orta metatarsal kısmı üzerindeki cilde yerleştirin, elektrot cilt temasını en üst düzeye çıkarmak için cildi ve halka elektrotların altındaki artık kılları jel ile kaplayın. Elektrot jelinin aşırı uygulanmasından kaçının, çünkü bu, elektrotlar arasında bir elektrik köprüsüne neden olabilir ve siyatik sinirin uyarılması için doğru kaydı önleyebilir.

Proksimal arka bacakta katot olarak yalıtılmış 28 gauge monopolar bir iğne yerleştirin. Siyatik sinire veya başka bir yapıya zarar verebileceğinden, uyarıcı elektrotları siyatik sinire aşırı yakın veya iki derin yerleştirmekten kaçının. Başka bir yalıtılmış 28 gauge monopolar iğneyi anot olarak, daha proksimal olarak sakrumun üzerindeki deri altı dokuya yerleştirin Bundan sonra, kontralateral arka bacak veya kuyruğa toprak elektrodu olarak tek kullanımlık bir yüzey elektrodu yerleştirin.

Bu prosedürde, siyatik siniri 0.1 milisaniyelik kare dalga darbeleri ile uyararak siyatik cmap yanıtlarını elde edin. Süre. Yanıtın genliği artık artmayana kadar bir ila 10 miliamper arasında artan uyaran yoğunluğuna sahip cmap yanıtları elde edin. Süper maksimal stimülasyonu sağlamak için, stimülasyonu, maksimal bir yanıt ve ek bir yanıt elde etmek için kullanılan uyaran yoğunluğunun yaklaşık% 120'sine yükseltin.

Cmap boyutunda daha fazla artış olmazsa, bu yanıtı maksimum cmap olarak kaydedin. Ardından, taban çizgisinden zirveye ve tepeden tepeye cmap genliklerini milivolt cinsinden kaydedin. Ortalama SUP boyutunu belirlemek için, minimum ya hep ya hiç yanıtlarını elde etmek için yoğunluğu 0.03 miliamperlik artışlarla artırırken alt maksimal stimülasyonu sağlayarak artımlı stimülasyon tekniğini kullanın.

0.21 miliamper ile 0.70 miliamper arasındaki uyaran yoğunluğu ile ilk yanıt oluşmazsa, uyarıcı katot pozisyonunu proksimal uyluktaki siyatik sinirin pozisyonundan daha yakın veya daha uzağa ayarlayın. Burada gösterilen ilk artımlı yanıtı alın. Artımlı yanıtın negatif tepe noktasının gecikme süresinin, daha önce elde edilen maksimum cmap yanıtının negatif tepe noktasıyla kabaca hizalandığından emin olun.

Gerçek zamanlı olarak üç tutarlı artımlı yanıtı gözlemleyerek yanıtın kararlı ve fraksiyonasyon olmadan olduğundan emin olun ve genliğin en az 25 mikrovolt olduğundan emin olun. Ardından, gerçek zamanlı olarak üç artımlı yanıtı süper uygulayarak artışın kararlı ve fraksiyonlama olmadan olduğundan emin olarak ikinci artımlı olanı elde edin. İkinci artış görsel olarak farklı olmalı ve önceki yanıttan en az 25 mikrovolt daha büyük olmalıdır.

Ardından, artışın kararlı olduğundan ve fraksiyonasyon olmadığından emin olarak üçüncü artımlı yanıtı elde edin. Daha önce gösterilen ikinci artımlı yanıta benzer şekilde, üçüncü artış görsel olarak farklı olmalı ve ikinci yanıttan en az 25 mikrovolt genlik daha büyük olmalıdır. Toplam 10 artımlı yanıt kaydedilene kadar bu şekilde artımlı yanıtlar almaya devam edin.

Her bir artımlı yanıtın genliğinin, tüm 10 artışın toplamının üçte birinden daha küçük olduğundan emin olmak için artışları değerlendirin. Ardından, ortalama SUP genliğini vermek için 10 artımlı değeri kullanın. 10 artımlı yanıt için hesaplanan değerler gösterilir.

Ortalama SUP boyutu, 10 artışın ortalaması alınarak veya son artışın 10'a bölünmesiyle belirlenir. Ardından, maksimum tepeden tepeye cmap genliğini ortalama SM genliğine bölerek muni'yi hesaplayın. Bu tekniklerin bir uygulamasını göstermek için, siyatik sinir ezilmesinin motor ünite fonksiyonu üzerindeki etkisini araştırdık.

Bu şekilde, yetişkin bir kontrol faresi ile siyatik sinir ezilmesini 11 hafta sonra yetişkin bir faredeki yanıtlar karşılaştırılmıştır: kayıtlar arasında duyarlılık açısından fark yoktur. Siyatik sinir ezilmesini takiben, kontrol faresindeki 278 fonksiyonel motor ünitesinin normal bulgusu ile karşılaştırıldığında, muni tahmini 50 fonksiyonel motor ünitesinde ciddi şekilde azalır. Buna karşılık, ezilmiş hayvandaki cmap genliği, teminat filizlenmesine bağlı olarak kontrole kıyasla sadece hafif bir azalma gösterir.

Bu videoyu izledikten sonra, farenin arka uzuvlarında, kaslarında ve vivo'da motor birim sayısı tahmininin nasıl gerçekleştirileceğini iyi anlamış olmalısınız. Bir kez ustalaştıktan sonra, bu teknik uygun şekilde yapılırsa genellikle 20 dakikadan daha kısa sürede yapılabilir. Protokolün bu görsel gösteriminin, laboratuvarlar arası güvenilirliğin artmasına ve laboratuvardaki keşiflerin klinikte etkili tedavilere etkili bir şekilde çevrilmesine yol açacağına inandığımız bu önemli tekniğin yaygın olarak benimsenmesine yol açacağını umuyoruz.