Fareler Ikincil motor korteks bilateral lokal saha potansiyel kayıt ile Yarımküre lateralizasyon değerlendirilmesi

Bu teknik, hemisfer lateralizasyonu için bölgelerarası elektrofizyolojinin bazı temel özelliklerini gözden geçirmek için kullanılabilir, ayrıca bağlantı, yönlülük ve bağlantı. Elektrofizyolojik ölçüm hayvanlarda, nöronal aktivitelerde hassas ve etkili bir değerlendirme yöntemidir. Bu protokol, elektrik sinyallerinin senkronizasyonuna uyum sağlamak için daha iyi bir yol sağlar.

Alzheimer hastalığı patogenezolası değişmiş beyin lateralizasyonu altta yatan mekanizmanın anlaşılması, Alzheimer tedavisi için potansiyel biyobelirteçler içine yeni anlayışlar sağlayabilir. Ameliyattan önce, forseps ile bir kuyruk veya parmak sıkışması yaparak farenin anestezi derinliğini onaylayın. Ardından fareyi stereotaksik aygıta yerleştirin ve kafasını düzeltin.

Onları nemli tutmak için her iki göze merhem uygulayın. Sonra, kafa tıraş ve bölgeyi sterilize. Tıraş lı alanın ortasında, 12 ila 15 milimetrelik küçük bir kesi yapın.

Forceps kullanarak, kafa derisini yavaşça orta hattan çekin. Daha sonra, yavaşça deri ayrı ve artık doku kaldırın. Hidrojen peroksit kaplı pamuk tomurcukları kullanarak kafatasıtemiz.

Stereo mikroskop altında, kafatasının hem sol hem de sağ taraflarında, bir ila 1,5 milimetre lik yarıçaptan oluşan iki küçük delik açarak, kayıt mikroelektrotlarının M2 bölgelerine yerleştirilebilmesine izin verin. Dikkatle bir tungsten iğne ile dura mater çıkarın. Daha sonra, mekanik mikromanipülörler kullanarak, 60 derecelik bir açıyla deliklere 0,5 molar sodyum klorür dolu iki ayrı kayıt mikroelektrotları yerleştirin.

LFP kaydı için, sol ve sağ cam elektrotları yavaşça M2 koordinatlarına indirin. Kalite kontrol için, diferansiyel amplifikatör kullanarak her elektrotun direncini test edin. Daha sonra, kayıt işlemini 0,1 hertz yüksek geçiş ve 1000 hertz düşük geçiş, 1000 kez amplifikasyon ile ayarlayın.

Fare anestezi altında saniyede iki nefeste eşit nefes alınarak, en az 60 saniye boyunca, kararlı durumda sayısallaştırılmış ham LFP verilerini toplayın. Kayıt tan sonra, yavaşça beyinden elektrotlar yükseltmek. Analiz yazılımıyla verileri kaydedin ve çevrimdışı analiz edin.

Çapraz korelasyon çözümlemesi gerçekleştirmek için, analiz yazılımında, analize tıklayın, sonra dalga formu korelasyonve verileri içe aktarın. Ardından, bir dalga formu kanal sinyalini ilk kanal, diğerini de referans olarak atayın. Genişliği iki olarak ayarlayın ve bir olarak ofset.

Daha sonra, başlangıç saatini ve bitiş saatini seçerek her iki LLP'nin süresini 100 saniyeye ayarlayın. Ardından, çapraz korelasyon çözümlemesi yapmak için işlem düğmesine basın. Dosyayı tıklatın, dışa aktarın ve ardından metin biçiminde ortaya çıkan açılır tabloya karşılık gelen çapraz korelasyon sonuçlarını kaydedin.

Daha sonra, sıfır artı ve eksi 01 saniye aralıklı zaman gecikmelerinde korelasyon değerlerini kaldırın ve çapraz korelasyon verilerinin geri kalanıyla ilgilenin. Tutarlılık çözümlemesi gerçekleştirmek için, analiz yazılımındaki verileri çalıştırın. Ardından, iki LFP sinyallerini birinci ve ikinci dalga formu kanalları olarak düzenleyin ve blok boyut değerini 4096 olarak ayarlayın.

Blok boyutu, gerçek dönüşüm için ilk kullanılan veri noktalarının sayısı anlamına gelir. Blok boyutu ne kadar büyükse, frekans çözünürlüğü de o kadar iyi. Her iki kanaldaki sinyallerin zaman doğruluğunun aynı dönem olarak ayarlandığından emin olmak için noktalı çizgileri el ile taşıyın.

Alanı yüklemek ve tutarlılık çözümlemesi yapmak için alan ekle düğmesine basın. Daha sonra dosyayı tıklatın ve metin biçiminde ortaya çıkan açılır grafik karşılık gelen tutarlılık sonuçlarını kaydetmek için olarak kaydedin. Erken Alzheimer hastalığı patolojisinin hemisfer lateralizasyon kapasitesini bozup bozmadığını görmek için APP/PS1 farelerin ve yabani tip kontrollerin sol ve sağ M2'sinde hücre dışı LF'ler kaydedildi ve çapraz korelasyonları analiz edildi.

Yabani tip farelerde sonuçlar, pozitif zaman gecikmelerinde sol ve sağ LF'ler arasındaki ortalama korelasyonun negatif zaman gecikmelerinden önemli ölçüde farklı olduğunu ve yabani tip kontrollerin M2 alanlarında hemisferik asimetrilerin varlığını gösterdiğini göstermiştir. Buna karşılık, APP/PS1 farelerinin sol ve sağ LF'leri zaman etki alanında daha yüksek senkronize olduğunu göstererek, sol ve sağ M2 arasında asimetrinin azaldığını düşündürmektedir. Gama salınımları daha sonra LPS'lerden filtrelendi ve gama frekans aralığındaki elektrik sinyallerinin benzerliğini ölçmek için bir tutarlılık analizi yapıldı. Sonuç, APP/PS1 farelerinde sol ve sağ M2 arasındaki gama tutarlılığının yabani tip farelerdekinden önemli ölçüde daha yüksek olduğunu, bu da daha yüksek bir senkronizasyon olduğunu ve dolayısıyla APP/PS1 farelerinde sol ve sağ M2 arasındaki yanalizasyonun azaldığını göstermiştir.

Üretan toksik ve kanserojendir, bu yüzden lütfen her zaman dikkatli olun ve onu kullanırken güvenlik yönetmeliklerine uyun. Kararlı LF'lerin kaydedilmesini sağlamak için anestezinin derinliğini saatlik olarak test etmek çok önemlidir. Kayıt ve analiz süreci diğer beyin yollarına uygulanabilir, özellikle serbestçe hareket eden hayvanlarda çok kanallı kayıt için sistemleri olmayan laboratuvarlar için.