Sıçan Karaciğer Nakli Modelinde Hemodinamik Değişiklikleri Simüle Ederek Organ İskemi-Reperfüzyon Yaralanması

Sıçan karaciğer nakli modelinde hemodinamik değişiklikler simüle ederek organ iskemi-reperfüzyon yaralanması. İskemi-reperfüzyon hasarı karaciğer naklinden sonra sık görülen bir uygulamadır. Ekstrahepatik organ tutulumu olan hastalar hastanede daha uzun süre kalma eğilimindedir, daha fazla harcama eğilimindedir ve daha kötü bir prognoza sahiptir.

Komplikasyonun gelişimi karaciğer naklinin anhepatik fazının uzunluğu ile yakından ilgilidir. Bununla birlikte, karaciğer naklinden sonra iskemi-reperfüzyon yaralanması ile ilgili temel araştırmalar, karaciğer nakli sonrası sağkalım oranının, ekstrahaptik organların yaralanma derecesi ile ters ilişkili olduğunu göstermiştir. Anhaptik fazın tanımına dayanarak, karaciğer transplantasyonundaki hemodinamik değişimi simüle ettik ve bu da ekstrahaptik organların iskemi-reperfüzyon yaralanması ile sonuçlandı.

Bu makalenin, sıçanlarda anhaptik fazın bir hayvan modelinin nasıl inşaılacağına dair ayrıntılı bir açıklama sağlamak, karaciğer naklinden sonra iskemi-reperfüzyon hasarı hakkında temel araştırma yapmaktır. Dr. Yuan Yuan tüm video hayvan operasyonlarından sorumludur. İki oftalmik toparlama, düz ve bükme ve interoküler lens, IOL toparlama, oftalmik makas, bir ila iki retraktör, pamuklu çubuk, 3-0 cerrahi dikiş, iodoform gazlı bez, dikiş iğneleri, Gerektiğinde biyosistemler ve gözlerarası lens, IOL tokaları yuvarlak başlılıklar nedeniyle kan damarlarını ayırmak için kullanılır.

Hayvan anestezi makinesi, susuzlaştırma makinesi, gömme makinesi, patolojik dilimleyici, dondurulmuş makine, doku dilimleyici, hava kurutma fırını, nöral optik mikroskop, tarayıcı, genel anestezi için enfluran, %4 paraformaldehit çözeltisi, anyhidroz etanol, ksilen, yüksek verimli parafin balmumu, hematoksilin-eozin boya çözeltisi, hidroklorik asit, amonyak, slayt, kapak camı, nötr sakız ve ölmekte olan reaktifler ve sarf malzemeleri. Pipetler, santrifüj, otomatik biyokimyasal analizör, alanin amino transferaz, ALT kiti, aspartat, amino transferaz, AST kiti, kreatinin kiti. Tartımdan sonra, sıçanlar bir hayvan anestezi makinesi tarafından izofluran ile uyuşturulur.

Karın dezenfeksiyonunu takiben, antips ve makas kullanarak xiphoid işleminin üç santimetre altında ortanca bir kesi yapın. Karın boşluğunu açın, karaciğeri bir retraktör kullanarak ortaya çıkarın ve hepatogastrik bağı harekete geçirin. Karaciğerin orta lobunun hafifçe çevrilmek ve porta habitis'i açığa çıkarmak için yukarı doğru çevirmek için pamuklu çubuklar kullanın.

Safra kanalını, portal damarı ve hepatik arteri tanımlayın. Pamuk takasları kullanarak ince bağırsağı sol alt karın boşluğuna doğru itin ve alt vena kavasını sağ böbrek damarına taşıyın, portal damarı, hepatik arteri ve alt vena kavayı göz içi lens, IOL, her biri kayma düğümü ile 3-0 ipek iplikle işaretlenmiş tokmaklarla sağ böbrek damarının üzerinde izole edin. Sol ve sağ alt ekstremitenin derisini kesin ve oftalmik dikseps kullanarak femoral damarı ortaya çıkar.

Tüm vücudu heparize etmek için femoral damardan düşük moleküler ağırlıklı heparin 625 IU/ kg'ı yavaşça enjekte edin. Portal damarı, hepatik arteri ve alt vena kavasını 45 dakika süren 3-0 dikiş sayısı ile sağ böbrek damarının üzerinde lige edin. Karın boşluğundaki ince bağırsağı değiştirin ve gazlı bezle örtün.

Bu dönemlerde inhalasyon anestezisi azalır. 45 dakika sonra, portal damarı, hepatik arteri ve sağ böbrek damarının üstündeki alt vena kavayı serbest bırakın. Kas ve cildi katman katman dikin ve inhalasyon anestezisini sonlandırın.

Her dört saatte bir 5 mg/kg'lık deri altı morfin kullanarak ameliyat sonrası analjezi sağlayın Sıçanı uyanana kadar gözlemleyin ve 25 artı veya eksi iki santigrat derece sıcaklık altında beslenin ve 50 artı veya eksi% 10 nem Hayvansal ısıtma lambaları gereklidir. Bu hayvan modelinde sıçanlar rastgele 15 dakika iskemiye göre beş gruba ayrıldı, ben 15 grup, 30 dakika, I 30 grup, 45 dakika, ben 45 grup, 60 dakika, I 60 ve her grupta 10 sıçan ile bir şem grubu. Her grubun sağkalım oranları operasyondan 14 gün sonra gözlendi.

I 15, I 30 ve sham gruplarında tüm sıçanlar hayatta kaldı. Sekizi I 45 grubunda 14 gün hayatta kaldı ve sadece ikisi I 60 grubunda hayatta kaldı. Sonuçlar, sıçanların anhepatik fazı en fazla 45 dakika tolere edebileceğini öne sürdü.

Deney sırasında Biyosistemler, anhepatik fazdan önce ve sonra kalp atış hızı ve kan basıncı, sağ iç karotid arter entübasyonundaki değişiklikleri kaydetmek için kullanıldı. Kalp atış hızı ve ortalama arteriyel basıncın, sıçanların MAP'inin vasküler ligasyondan sonra önemli ölçüde değiştiğini bulduk. Ligasyondan sonra hepatik iskemi, tıkanıklık ve bağırsaklarda ödem, mide varisleri ve splenomegali belirgindi.

80 sıçan rastgele 45 dakika iskemi, T0, altı saat reperfüzyon, T6, 12 saat, T12, 24 saat, T24, 48 saat, T48, 72 saat, T72, yedi gün, T7, 14 günde, T14 dahil olmak üzere sekiz gruba ayrıldı. Sıçanlar kurban edildikten sonra böbrek, pankreas, ince bağırsak, kalp ve akciğer dokuları alındı ve HE ile lekelendi. Kalp dışında patolojik skorlar sırasıyla referanslara göre verilmiştir.

Sonuçlar, ekstrahepatik organların maksimum yaralanma süresinin değiştiğini gösterdi. Pankreas için ameliyattan 6 ila 24 saat sonra ve akciğerler için 24 ila 48 saatti. Bağırsak sistemi ve böbrek 45 dakikalık iskemiden sonra en ağır şekilde yaralandı.

Ameliyattan 24 saat sonra bağırsak mukozasının belirgin bir anormalliği yoktu ve böbrekler 48 saat sonra iyileşti. Kalbe gelince, reperfüzyondan sonra zamanın geçmesiyle birlikte, ameliyattan 24 ila 48 saat sonra dokuda lokal miyokard hücre narkozu, hücre parçalanması ve çözünmesi, inflamatuar hücre infiltişi ve lokal vazodilasyon ve tıkanıklık bulundu. Serum toplandı ve otomatik biyokimyasal analizör tarafından ALT, AST, kreatinin ve amilaz düzeyleri saptandı.

Tüm göstergeler patolojik değişikliklerin aksine 24 ila 48 saat arasında zirve yaptı. Ameliyattan 48 saat sonra seviyeler temelde normal olmasına rağmen patolojik hasar hala devam ediyordu. Özetlemek gerekirse, sıçanlardaki model mikrocerrahi olmadan basit ve kullanımı daha kolaydır ve hepatik iskemi sonrası ekstrahepatik organların iskemi reperfüzyon hasarının temel araştırmasına temel bir temel sağlar.