13 Haziran 2025
Protokol, farelerde diz hiperaljezisinin nasıl ölçüleceğini açıklar. Akut diz ağrısının fare modellerinde ve osteoartrit (OA) modellerinde örnekler gösteriyoruz.
Eklem ağrısının altında yatan mekanizmaları daha iyi anlamak için ilerleyici deneysel diz osteoartritli farelerde translasyonal olarak ilgili ağrı testleri geliştirdik. Osteoartritli insanlarda da ağrı basıncı eşikleri düşmüştür. Yöntem sağlam ve tekrarlanabilirdir ve sistematik veya eklem içi uygulanan yeni bileşiklerin potansiyel analogik etkilerini test etmek için orta verimlilikte yaklaşım sunar.
İlerleyici deneysel OA ile ilişkili kaygıyı incelemekle ilgileniyorum. Kaygının OA ağrısı ile korelasyonunu incelemek ve altta yatan mekanizmaları keşfetmeyi mümkün kılmak için testler geliştiriyoruz. Başlamak için, PAM cihazından bilgisayara bir kablo bağlayın. Cihazdan ikinci kabloyu kuvvet dönüştürücüsüne bağlayın.
Şimdi, bilgisayarı aç ve PAM yazılımını başlat. Yazılımda maksimum basınç değerini 450 gram olarak ayarlayın. Sonra, fareleri test odasında 15-30 dakika bekleyin, ta ki alışıp sakinleşene kadar.
Farenin sakin ve hareketsiz olduğunu kontrol edin. Eğer değilse, onu kafese geri götürün ve testi birkaç gün erteleyin. Fareyi sol elinizle tutun, sırtını sıkıca tutun ve kuyruğu dördüncü ve beşinci parmaklarıyla sıkıca tutun.
Sağ elin işaret parmağını dönüştürücünün bagajından geçirin ve dönüştürücüyle parmağınızı şeffaf bir plastik torbaya yerleştirin. Şimdi, sağ başparmak ve orta parmakla sağ bacağı tutun. Orta parmakla patiyi sol elin thenarına nazikçe sabitleyin.
Testin başında dizin yaklaşık 90 derece fleksiyonda olduğundan emin olun. Sonra, sağ başparmakla dizin yan tarafına ve işaret parmağıyla dönüştürücünün medial tarafına dokunun. Dizinize yavaşça basınç uygulayın, ardından saniyede 30 gram hızında artan kuvvet uygulayın.
Basıncı saniyede 450 grama ulaşana veya fare ses çıkarma, kas seğirmesi, vücut kıpırdatma veya bıyık hareketi gibi ağrıyla ilgili davranışlar gösterene kadar sürekli artırmaya devam edin. Eşik geçildikten sonra, parmağı dönüştürücüyle geri çekin. Ekranda gösterilen basıncı kaydedin.
Farelerde intraartiküler olarak uygulanan Pam3CSK4, doz bağımlı şekilde diz hiperaljezisine yol açtı; enjeksiyondan dört saat sonra zirveye ulaştı ve 24 saat sonra başlangıç seviyesine geri döndü. Dört saatlik zirvede intraartiküler lidokain enjeksiyonu, Pam3CSK4 kaynaklı diz hiperaljezisini 30 dakika içinde tersine çevirdi. DMM ameliyatı, ameliyattan iki hafta sonra belirgin bir diz hiperaljezisine neden oldu ve 16. haftaya kadar yavaş yavaş iyileşti.
Sahte ameliyat edilen farelerde ameliyattan sonra belirgin bir diz hiperaljezi gelişti, ancak diz hiperaljezi daha hızlı iyileşti. DMM ameliyatından dört hafta sonra intraartiküler lidokain enjeksiyonu, diz hiperaljezisinin 30 dakika içinde anında tersine dönmesine ve etkisinin dört saat azalmasına yol açtı.
Tam transkripti görüntüleyin ve binlerce bilimsel videoya erişin
Bu çalışma, fare modellerinde diz hiperaljesisini ölçmek için bir protokol sunar ve özellikle akut diz ağrısı ve osteoartrit (OA) üzerine odaklanır. Geliştirilen yöntemler, eklem ağrısının temelindeki mekanizmalar hakkında bilgiler sağlar ve yeni bileşiklerin test edilmesine olanak tanır.
Quantitative assessment of knee hyperalgesia in mice using pressure application measurement (PAM) enables robust evaluation of peripheral sensitization and pain-related behaviors in preclinical arthritis models. This standardized assay supports predictive confidence in pain mechanism studies and pharmacological intervention testing, directly informing early-stage analgesic discovery and target validation. Its reproducibility and sensitivity to drug effects position it as a critical tool for portfolio triage and translational alignment in pain and osteoarthritis research.
The PAM-based knee hyperalgesia assay integrates into the discovery-to-preclinical continuum, supporting both early mechanistic studies and downstream compound evaluation.