January 5th, 2012
Tana, nidificazione e accaparramento sono specie tipiche attività che i topi prontamente eseguire in laboratorio. Questo articolo descrive come possono essere facilmente ed economicamente valutati. Questi protocolli sono estremamente sensibili alla pressione del mouse, lesioni cerebrali e malattie. Costituiscono altresì un "arricchimento ambientale" per i topi, e incarnano l'aspetto "raffinatezza" del "3 R" 18.
Lo scopo di questa procedura è quello di caratterizzare i comportamenti tipici delle specie nei topi. Innanzitutto, il comportamento di scavo viene studiato riempiendo un tubo di materiale e misurando quanto viene rimosso dall'animale. I nidi vengono collocati nella gabbia e la completezza del nido viene quantificata come misura del comportamento di nidificazione.
Il comportamento di accumulo viene esaminato posizionando un topo in una scatola con accesso a un tunnel pieno di pellet di cibo e misurando quanto l'animale recupera dal tunnel. I risultati di questa serie di test mostrano se i topi svolgono le loro attività della vita quotidiana. Normalmente, le implicazioni di questa tecnica possono estendersi verso la ricerca di trattamenti per la demenza perché comportamenti funzionalmente simili sono compromessi sia in un topo che nell'uomo la specie.
I comportamenti tipici del topo possono essere paragonati alle attività della vita quotidiana degli esseri umani. E i primi effetti del morbo di Alzheimer sono quelli di inibire lo svolgimento delle normali attività della vita quotidiana, come preparare la colazione, allacciare i lacci delle scarpe, pianificare un pasto, fare shopping. E con i nostri topi modello di Alzheimer, abbiamo scoperto che i comportamenti tipici della specie sono molto inibiti.
Quindi qui abbiamo un modello diretto, un modello omologo quasi tra le attività della vita quotidiana come si vede nei pazienti con Alzheimer a casa e in clinica, e l'inibizione delle specie. Comportamenti tipici nel mouse Costruisci un tubo di plastica, 68 millimetri di diametro e 20 centimetri di lunghezza. Sigillare un'estremità con un tappo di 12 millimetri di MDF.
Successivamente praticare, due fori, a un centimetro dall'estremità aperta del tubo di scavo con un angolo di 90 gradi. Inserire una vite a macchina lunga cinque centimetri in ogni foro e serrarla in posizione. Il tubo dovrebbe ora essere sollevato di circa tre centimetri dal pavimento.
Da un lato, riempi la tana con 200 grammi di pellet di cibo e mettila nella gabbia di casa per l'abitazione durante la notte. Se i topi sono alloggiati in gruppi, l'assuefazione sarà più rapida e completa grazie all'effetto di facilitazione sociale. Tuttavia, i test di base su topi alloggiati individualmente dovrebbero ancora essere eseguiti.
Successivamente, anche le sostanze non alimentari possono essere utilizzate per misurare il comportamento di scavo. Alcuni esempi includono palle di argilla, scandole di piselli e sabbia. Dopo che gli animali si sono abituati, posizionare una tana completa nella gabbia di prova intorno alle 16:00 per eseguire un test di base.
Si consiglia di eseguire due test di base, a distanza di 48 ore. Due ore dopo. Misurare il peso del materiale rimasto nella tana svuotando il contenuto in un contenitore tarato.
Rimetti il materiale non preso in prestito nel tubo e rimettilo nella gabbia di casa la mattina successiva. Rimuovere la provetta e pesare il materiale rimanente per il test. Ripetere questa procedura almeno 48 ore dopo l'ultima misurazione di base.
I topi C 57 neri a sei in genere scavano circa 70 grammi nelle prime due ore e quasi 200 grammi durante la notte. I topi con lesione ippocampale spesso scavano meno di cinque grammi. La malattia del pione inibisce lo scavo, così come il lipopolisaccaride.
La somministrazione di scavare può rilevare la malattia del pione da 10 a 12 settimane dopo l'iniezione di omogenato cerebrale malato, mentre i segni clinici compaiono solo a 22 settimane. È stato dimostrato che il prestito è sensibile alle differenze di deformazione e al knockout delle subunità dei canali ionici del potassio. Per misurare il comportamento di nidificazione, allestire gabbie individuali e coprire il pavimento con materiale da lettiera di 0,5 centimetri.
Metti in profondità un quadrato di cinque centimetri di ovatta di cotone pressato chiamato nido acceso in ogni gabbia. Posiziona un topo in ogni gabbia di nidificazione circa un'ora prima della fase di buio e valuta i risultati. La mattina dopo.
Pesa la quantità di nido non strappato acceso e valuta il nido su una scala a cinque punti. Un punteggio di uno viene assegnato quando il nido acceso è in gran parte intatto e un cinque viene assegnato a un nido quasi perfetto con più del 90% del nido acceso strappato. Sia i maschi che le femmine fanno il nido in quanto il loro scopo è la termoregolazione oltre ad essere associati alla riproduzione.
I punteggi del nido di sei topi neri C 57 per maschi e femmine sono nello stesso intervallo. Sebbene non abbiamo fatto un confronto controllato in un singolo, la maggior parte dei topi neri C 57 ha ottenuto un punteggio da quattro a cinque sulla costruzione del nido. Ma quando l'ippocampo è lesionato, il punteggio mediano sarebbe il secondo round.
È improbabile che venga superato un punteggio di tre. Per misurare il comportamento di accumulo, prepara la scatola che fungerà da base inserendo una bottiglia d'acqua e praticando un foro sul lato in cui si attaccherà il tubo di accumulo. Realizzare un tubo di accumulo arrotolando una rete metallica di 45 centimetri attorno a un tubo di 40 millimetri di diametro.
Fissalo con clip a brugola o torsioni per cavi. Quindi spingerlo su un tubo nero di 10 centimetri di lunghezza di 40 millimetri. Quindi, collegare il tubo di accumulo alla scatola preparata in precedenza e bloccare l'estremità prossimale con un tappo di legno rimovibile.
Prepara la scatola di casa con un tunnel di cartone e la lettiera sporca della gabbia domestica. Assicurarsi che l'accesso al tubo di accumulo sia impedito. Metti il mouse nella scatola all'inizio della giornata per abituarsi in seguito, rimuovi il tubo di accumulo e riempi l'estremità distale con una miscela di pellet di cibo grandi e piccoli, per un totale di 100 grammi.
Poco prima dell'inizio della fase oscura. Rimuovere il tappo di legno per consentire al mouse di accedere al tubo di accumulo la mattina successiva. Ancora una volta, il tempismo non è fondamentale.
Raccogli e pesa i pellet di cibo che sono stati accumulati nella scatola della base di casa. Utilizzo di sei topi neri femmina C 57. La quantità media accumulata sarebbe di circa 50-70 grammi.
Le lesioni dell'ippocampo sopprimono fortemente l'accumulo, mentre le lesioni della corteccia prefrontale hanno solo un effetto debole. Dopo aver visto questo video, dovresti avere una buona comprensione di come valutare i comportamenti tipici delle specie nella massa.
Questo articolo delinea metodi per valutare i comportamenti tipici delle specie nei topi, inclusi scavare tane, costruire nidi e accumulare cibo. Questi comportamenti sono sensibili a vari fattori come la linea genetica del topo e le lesioni cerebrali, e servono come forma di arricchimento ambientale.