באמצעות גישה המינים השוואתי לחקירת לנוירוביולוגיה התגובות של אבי האב

המטרה הכוללת של הליך זה היא להשתמש בגישה השוואתית של מינים. כדי ללמוד עוד על אזורי המוח והנוירוכימיקלים שקשורים להתנהגות אבהית, הצעד הראשון הוא לזהות שני מינים קרובים ששונים באופן משמעותי בביטוי ההתנהגות המעניינת. לאחר מכן, שני המינים מורשים לקיים אינטראקציה עם גורים ולצפות בהתנהגות בתוך התגובה ההורית.

אקוגרמה אתית. התנהגויות אלה מצולמות בווידיאו לניתוח נוסף. השלב הבא בהליך הוא איסוף דגימות מוח וניתוח שלהן לנוכחות רקמה חיסונית וזופרסין באזור המטרה.

לאחר מכן משתמשים בתוכנת הדמיה מוחית כדי לקבוע הבדלים ספציפיים למינים באזורי מוח ממוקדים. בסופו של דבר, ניתן להשיג תוצאות המראות הבדלים הקשורים למינים בתגובות האבהיות ובתגובה החיסונית של וזופרסין באזורים ספציפיים במוח. היתרון העיקרי בשימוש בגישת המינים ההשוואתיים בניגוד לשיטות קיימות אחרות, כגון מינים שעברו מניפולציה פרמקולוגית או מהונדסים גנטית, הוא שהיא מאפשרת לך לנצל הבדלים המתרחשים באופן טבעי בין מינים קרובים בניגוד לשימוש בהתנהגויות מלאכותיות יותר.

חשבתי ששיטה זו יכולה לספק תובנה לגבי התנהגויות אבהיות. ניתן ליישם אותו גם על התנהגויות אחרות כגון תוקפנות, התנהגות מינית או טיפוח לפני הבדיקה. עכברים משני מינים קרובים מופרדים לקבוצות בדיקה של אבות ביולוגיים, בתולות ללא ניסיון בהורות ובתולות עם חשיפה מוגבלת לגורים.

ראשית, הכינו את הכלוב ואת מערכת הקלטת הווידאו. לאחר מכן, הניחו גור באמצע הכלוב. לאחר שהכל מוכן, הכניסו את דואר הבדיקה לכלוב עם הגור והקליטו התנהגות במשך חמש דקות.

אם נצפות תגובות אגרסיביות, הסר מיד את הגור. עכבר הצבי הקליפורני מטפח את הגורים בדיוק כפי שהאימהות כורעות מעליהם כך שייראה כאילו הגורים יונקים. לעומת זאת, עכבר הצבי המצוי מגלה עניין מועט בגורים ולעתים קרובות ינסה לברוח או לתקוף אותם.

כל הקבוצות נחשפות גם לעכבר צעצוע כדי להבטיח שהאינטראקציות החברתיות הנצפות הן ספציפיות לגור ולא תגובה כללית. לאחר תקופת התצפית, הכינו את גיליונות ניקוד ההתנהגות. אם יותר ממשקיף אחד יקלע את קלטות הווידאו.

חשוב לבסס אמינות בין מעריכים. רוגרמת ההתנהגות האבהית שמופיעה כאן משמשת לציון התנהגויות. דוגמאות כוללות כריעה מעל הגורים, טיפוח הגורים או הפגנת התנהגויות חרדה כגון תגובות מתיחות.

ניתן להשתמש בתוכנת ריצוף מיקרו כדי לחשוף את הדקויות בין התנהגויות מסוימות. כאן, נתונים מעכברי קקוס שאנו נחשפים לריח טורף משמשים כדוגמה. ראשית, שלב את ההתנהגות למצבים בינאריים טיפוח IE לעומת טיפוח שאינו G, ולאחר מכן צור סדרת זמן.

לבסוף, חשב את מידת התנודה. באמצעות נוסחה שנקבעה מראש, ניתן לפספס התנהגויות חשובות רבות. באמצעות טכניקות תצפית נפוצות, עדיף לצלם את ההתנהגויות כך שניתן יהיה לצפות בתגובות בהילוך איטי.

לצפייה מדויקת יותר, תוכנה מיוחדת מאפשרת לחוקרים לנתח רצפי מיקרו של התנהגויות, ולספק נתונים שהיו מתפספסים עם היי אנושי בזמן אמת. שיטה זו יכולה לעזור לענות על שאלות מפתח בתחום מדעי המוח ההתנהגותיים, כגון אילו מערכות נוירוכימיות מתווכות התנהגויות ספציפיות שנצפו בבעלי חיים לאחר חשיפה לגורים. השתמש בפרוטוקול זלוף סטנדרטי כדי לבודד את המוח ולהקפיא אותו לפני חתך המוח במצב חיתוך עד לזיהוי ציוני דרך ספציפיים.

אטלס מוח עכבר סטנדרטי משמש לאיתור הגרעין הפרה-חדרי בהיפותלמוס, אזור הידוע כעשיר בתאים, המייצר את הנוירופפטיד וזופרסין או VP. לאחר שמגיעים לזוג גרעין החדר, קח קטעים של 30 מיקרון לניתוח נוסף. הנח בזהירות את חלקי המוח לצלחות מלאות היטב עם מי מלח עם פוספט או PBS תחילה. שטפו את חלקי המוח עם PB S3 עד חמש פעמים והניחו את הצלחות על נדנדה למשך 10 דקות לאחר הוספת PBS טרי.

לאחר מכן, הוסיפו תמיסה המכילה את תמיסת הנוגדנים העיקרית לצלחות ואחסנו אותן בארבע מעלות צלזיוס למשך הלילה עם נדנוד למחרת. שוטפים את הפרוסות לפני הוספת הנוגדן המשני. השאירו את הדגימות להתנדנד למשך שעה בטמפרטורת החדר לאחר שטיפה אחרונה, חשפו את פרוסות המוח לתמיסת קומפלקס ביוטין של עדן, המסייעת בהדמיה של התאים החיוביים הנוירוכימיים.

השלב האחרון בהליך ההדמיה הוא להוסיף בזהירות DAB לאחר חשיפה ל-DAB. שלח את פרוסות המוח לסדרת שטיפות אחרונה. הניחו אותם בזהירות על שקופיות מיקרוסקופ תת-קרקעיות והניחו להם להתייבש למשך הלילה.

לאחר הייבוש, נקה את המגלשות דרך סדרה של מים מזוקקים ואלכוהול שטיפות לאחר הכביסה טבלו את הפרוסה בתמיסת הדרים. לבסוף מרחו פתקי כיסוי ואחסנו את השקופיות בקופסה לשמירה. ישנן שיטות רבות לתהליך האימונוכימיה.

המפתח להצלחה הוא ליצור פרוטוקול ברור ולפעול לפיו. השקופיות מוכנות כעת לניתוח באמצעות תוכנת כימות נוירולוגית מיוחדת. הנה. תוכנת ביו-קוואנט משמשת לכימות התאים והסיבים החיוביים של וזופרסין בגרעין הפרה-חדרי של העכבר. המוח.

השתמש באפשרות המדידה כדי לזהות את תחום העניין הספציפי ולקבוע את שדה הראייה לכימות עצבי. כאן, נראים גופי התאים והסיבים מדכאי ה-VA המוכתמים כהה. השתמש בתכונת סף האור של התוכנה כדי לקבוע את הכמות הכוללת של רקמה מוכתמת חיובית באזור מסוים.

סף זה אומר לנו כמה רקמה חיובית של וזופרסין קיימת. כפי שניתן לראות כאן, זכרי הקליפורניקוס בילו זמן רב יותר בטיפוח ובכריעה מעל הגורים, שני סימני היכר של תגובות אבהיות בהשוואה למין דומה. ניתוח מיקרו-ריצוף מגלה כי עכברי קליפורניה מצד האב מציגים פחות הפרעות ברצף הטיפוח שלהם בהשוואה לבעלי חיים בתולים.

כאשר נחשפו לריח טורף כדי לקבוע אם משתנים נוירוביולוגיים חשובים בתגובות האבהיות, כמות הרקמה החיובית של וזופרסין כומתה עבור מספר אזורי מוח רלוונטיים. כפי שניתן לראות כאן, לחיות הקליפורניקוס האבהיות יש יותר רקמה חיסונית חיובית בכמה מאזורי המוח הללו. לסיכום, גישת המינים ההשוואתית מאפשרת לך לזהות מערכות נוירוביולוגיות מרכזיות הקשורות להתנהגות מסוימת של עניין.

עם זאת, אופי הנתונים הוא מתאם, ולכן חשוב להוסיף טכניקות מתודולוגיות נוספות כדי לאשר עוד יותר את תפקידה של המערכת הנוירוביולוגית ואת ההתנהגות המעניינת.