Ортотопическая малого трансплантации кишечника у крыс

Общей целью этой процедуры является проведение ортотопической трансплантации кишечника крысе. Это достигается путем предварительного забора тонкой кишки у животного-донора. Вторым этапом процедуры является так называемая подготовка кишечного трансплантата перед трансплантацией.

Третьим этапом процедуры является приживление путем выполнения артериального и венозного анастомоза с последующей реперфузией трансплантата. Заключительным этапом процедуры является восстановление энтеральной непрерывности путем завершения кишечного анастомоза по принципу «конец в конец» из-за стомы геогена и илеостомы соответственно. В конечном счете, могут быть получены результаты, которые показывают долгосрочную выживаемость генетически трансплантированных животных благодаря отличной функции трансплантата и достаточному усвоению питательных веществ при пероральном приеме в аллергенных комбинациях.

Тем не менее, различные аспекты острого и хронического кишечного отторжения могут быть изучены. Этот метод может помочь ответить на ключевые вопросы в области трансплантации кишечника, такие как механизмы острого и хронического отторжения, которые могут привести к отторжению трансплантата и ухудшить клинический исход. Визуальная демонстрация этого метода имеет решающее значение.

Важнейшие шаги трудно освоить, в основном из-за небольшого размера сосуда и необходимости использовать быструю и точную микрохирургическую технику Чтобы свести к минимуму время теплой ишемии Перед операцией на донорской крысе соблюдайте ее натощак со свободным доступом к воде и раствору глюкозы в течение 24 часов. После обезболивания животного 2%-ной изофторной ингаляцией. Проверьте наличие седативного эффекта, выполнив операцию на пальце ноги.

Ущипнуть, побрить живот и трижды продезинфицировать кожу с помощью препарата для кожи. Затем выполняют срединный разрез после подкожного введения анальгетика с помощью скальпеля. Выполните срединный разрез под операционным микроскопом.

Оберните тонкую кишку марлей, пропитанной солевым раствором, и поместите ее на левую сторону живота с помощью стерильного тампона и тампона. Аккуратно отделите физиологические спайки между поджелудочной железой и восходящей ободочной кишкой с помощью микроов, если это необходимо, используя семь нулевых шелков, как восемь, и разделите илеоцекальные и правые средние коликовые сосуды после распространения восходящей ободочной кишки на правую сторону верхней брыжеечной вены или SMV семью нулевыми связками, как восемь, и разделите правые и средние сосуды колик с помощью противомоскитного зажима, удерживаемого на месте с помощью гипсовой сцены, сформированной в форму. Втяните живот вверх так, чтобы весь SMV был выпрямлен и обнажен

Далее перевязывают и разделяют панкреатические двенадцатиперстные вены, идущие от СМВ. Затем переверните трансплантат на правую сторону брюшной полости так, чтобы трансплантат оставался на правой стороне брюшной полости, рыхлая соединительная ткань, включая все лимфатические сосуды между SMV и брюшной полостью, становится доступным алтарь. Используйте шелк семи зеро, чтобы перевязать ткань и разделить ее, чтобы избежать послеоперационного лимфатического оттока от кишечного трансплантата.

Альтерация соединительной ткани разделяется лигатом и разделяется правой почечной артерией. Системная гепаринизация крысы с использованием 200 единиц гепарина внутривенно через вену полового члена. Переложите краевые артерии и разделите тонкую кишку от соединения duino deju и терминального отдела подвздошной кишки.

Перетяжите аорту проксимально к началу СМА, пересеките воротную вену в месте слияния с селезеночной веной. Забор трансплантата с его сосудистой ножкой, состоящей из СМА с аортальным сегментом. Использование внутривенного катетера 20 калибра на шприце объемом 10 миллилитров через аортальный канал.

Перфузируют привой с помощью трех миллилитров охлажденного раствора Висконсинского университета или uw. Затем с помощью шприца объемом 50 миллилитров орошите просвет кишечника с конца AL 30 миллилитрами холодного цетина и раствором во время подготовки реципиента. Храните трансплантат в холодном растворе UW перед операцией на крысе-реципиенте.

Содержите его натощак со свободным доступом к воде раствором глюкозы в течение 24 часов после обезболивания животного 2%-ным изофтором. Назначают карпрофен для интраоперационной анальгезии. Побрейте живот и продезинфицируйте кожу три раза с помощью препарата для кожи.

Затем выполните срединный разрез. Оберните кишечник реципиента в обычные GRE, пропитанные солевым раствором, и положите его на грудь реципиента. Используйте стерильные мазки и тампоны, чтобы тупо открыть забрюшинное пространство и обнажить брюшную аорту и нижнюю полую вену чуть ниже почечных сосудов, вплоть до уровня подвздошных сосудов, чтобы избежать потери крови.

Малые поясничные и спинальные притоки из аорты и полой вены с микрососудами. Клипы. Перекрестный зажим аорты и НПВ ниже левых почечных сосудов, проксимально и выше бифуркации подвздошной кости. Затем дистально надрежьте переднюю стенку обоих сосудов и промойте оставшуюся кровь.

Переместите трансплантат в поле, чтобы выполнить анастомоз конец в конец между сегментом аорты трансплантата и инфраренальной аортой реципиента. С помощью непрерывного шва пролина на 10 нуля. Поместите трансплантат в правую часть живота и выполните швы на задней стенке артериального анастомоза и завяжите нижнюю стенку шва.

Затем переверните трансплантат на левую сторону живота, чтобы обнажить переднюю стенку анастомоза, при этом трансплантат все еще находится на левой стороне живота. Начните анастомоз кабеля портера с наложения нижнего шва. Затем с помощью 10 нулевого пролина выполните анастомоз конец в конец между воротной веной трансплантата и реципиентами НПВ.

Затем с внешней стороны закрепите стежки на передней стенке, когда все швы будут на месте. Снимите дистальные зажимы, а затем верхние. Используйте прямое нажатие ватными палочками, чтобы остановить кровотечение из анастомоза.

Проверить трансплантат на равномерную и быструю реперфузию после перевязки брыжеечных сосудов, резецировать всю тонкую кишку реципиента, сохранив два-три сантиметра проксимального отдела тощей кишки и один сантиметр дистального отдела подвздошной кишки с помощью примерно 16 непрерывных швов с шестью нулями монокрила. Восстановите энтеральную непрерывность с помощью проксимального и дистального отдела кишечных ананов конца в конец. Орошайте брюшную полость обычным физиологическим раствором до чистоты.

Введите два миллилитра физиологического раствора внутрибрюшинно для восполнения жидкости. Затем используйте три нулевых викрила для мышечного слоя, плюс непрерывный кожный шов, чтобы закрыть живот после операции. Для быстрого выздоровления поместите крысу под тепловую лампу.

Поддерживайте животное натощак с доступом к воде и раствору глюкозы и вводите подкожные инъекции физиологического раствора и глюкозы каждые восемь часов в течение первых 24 часов на второй день, возобновите их прием ратель и воду ad libitum после процедуры трансплантации. Общий вид, состояние шерсти и слизистых должны быть нормальными после первого дня после операции. Уровень активности должен вернуться к предоперационному состоянию.

Тем не менее, апатичное или ненормальное поведение предполагает ранние хирургические осложнения. На этом рисунке показан средний послеоперационный вес после ортотопической трансплантации тонкой кишки. После первоначальной потери до 20% массы тела, крысы начнут снова набирать вес примерно на 6-8 день после операции и достигнут около 90% своего дооперационного веса, как правило, к 14-му дню после операции.

При попытке провести эту процедуру важно сосредоточиться на минимальной кровопотере и короткой теплой ишемии. Время быть успешным После его разработки. Этот метод проложил путь исследователям в области трансплантации кишечника к изучению острого и хронического отторжения на модели грызунов.