אנו מתארים שיטה למדידת אנרגיה מחייב, כפי שבא לידי ביטוי מתח הפנים רקמות, בין תאים בתוך הרקמה, כמו אגרגטים 3D. הבדלים מתח הפנים רקמות הוכחו לתאם עם הפולשנות של ריאות, שרירים, גידולים במוח, הם הגורמים הבסיסיים של כינון יחסים מרחביים בין סוגי תאים שונים.
מדידה קפדנית של אנרגיית אינטר ניתן לבצע רק באמצעות שיטות מעוגנת בעקרונות תרמודינמיים של מערכות בשיווי משקל. פיתחנו משטח רקמה tensiometry (TST) במיוחד כדי למדוד את האנרגיה משטח ללא אינטראקציה בין תאים. המושגים הבסיסיים biophysical TST תוארו בעבר 1,2 פרט. השיטה מבוססת על התצפית כי תאי מלוכדת הדדית, אם נשמרת רועד תרבות, באופן ספונטני להרכיב לתוך אשכולות. במשך הזמן, אשכולות אלו עגול עד טופס התחומים. התנהגות זו עיגול למעלה מחקה את התנהגות המאפיינת מערכות נוזלי. אנרגיית אינטר נמדדת על ידי דחיסת אגרגטים כדורית בין לוחות מקבילים tensiometer אישית מעוצבת משטח רקמה. משוואה מתמטית אותה משמש כדי למדוד את מתח הפנים של טיפת נוזל המשמש למדידת מתח הפנים של רקמות כמו אגרגטים 3D כדורית. המקבילה הסלולרית של מתח פני הנוזל הוא אנרגיית אינטר, או באופן כללי יותר, cohesivity רקמות. מחקרים קודמים מהמעבדה שלנו הראו כי פני השטח רקמות מתח (1) מנבא כיצד שתי קבוצות של תאים עובריים יהיה אינטראקציה זה עם זה 1-5, (2) יכול מאוד להשפיע על היכולת של רקמות לתקשר עם biomaterials 6, (3) יכול לשנות לא רק באמצעות מניפולציה ישירה של לכידות cadherin מבוססי אינטר 7, אלא גם על ידי מניפולציה של מולקולות ECM מפתח כגון FN 8-11 ו 4) בקורלציה עם פוטנציאל פולשני של סרטן הריאות 12, fibrosarcoma 13, 14 ו – גידול במוח הגידול בערמונית שורות תאים 15. במאמר זה נתאר את מנגנון בפירוט את הצעדים הנדרשים כדי ליצור spheroids, כדי לטעון את spheroids החדרה tensiometer, ליזום דחיסה המצרפי, לנתח ולאמת את פני השטח רקמות מדידות המתח שנוצר.
מדידת הלכידות המצרפי על ידי TST היא פשוטה יחסית. יש, עם זאת, שלבים עיקריים שיש שולט על מנת להפיק נתונים TST שמיש; 1) אגרגטים חייב להיות "בריא". זה יכול להיות נשלט על ידי הקפדה היווצרות המצרפי מתחילה בתאים בנקודת המפגש אופטימלי לפני ניתוק. גודל זמן מצטבר ובתרבות חייב גם …
The authors have nothing to disclose.