Abstract
להנחיל חומרי משטח עם מאפייני תא-דבק הוא אסטרטגיה משותפת במחקר ביולוגי והנדסת רקמות. זה מעניין במיוחד עבור פולימרים שכבר אושרו שיש להם שימוש ארוך ברפואה כי חומרים אלה הם גם בעיות מאופיינות ומשפטיות הקשורים עם ההקדמה של פולימרים מסונתזים חדש ניתן להימנע. Polytetrafluoroethylene (PTFE) הוא אחד החומרים מועסקים לעתים קרובות ביותר עבור הייצור של שתלי כלי דם אך הפולימר חסר הידבקות תא בקידום תכונות. Endothelialization, כלומר, כיסוי מלא של שתלי המשטח פנימי בשכבה ומחוברת של בתאי האנדותל נחשב מפתח לביצועים אופטימליים, בעיקר על ידי הקטנת thrombogenicity של הממשק המלאכותי.
מחקר זה בוחן את הצמיחה של תאי האנדותל על PTFE פפטיד שונה ומשווה את התוצאות הללו לאלה שהושגו על מצע ללא שינוי. צימוד עםArg-Glu-Asp-Val פפטיד תא הדבק אנדותל (REDV) מבוצע באמצעות הפעלה של הפולימר המכיל fluorin באמצעות naphthalenide נתרן מגיב, ואחריו צעדי נטייה שלאחר מכן. תרבית תאים מושגת באמצעות אדם טבורי הווריד לתאי אנדותל (HUVECs) וצמיחה הסלולר מעולה על חומר משותק פפטיד מודגם על פני תקופה של שבועות.
Introduction
פולימרים שונים בשימוש ברפואה אשר אושרו במשך זמן מה אינו מציג התאמה ביולוגית משופרת, כלומר, חוסר-דביקות תא, אינדוקציה של אנקפסולציה fibrotic ו thrombogenicity, כדי להזכיר כמה. אינטראקציות בין הביולוגי והמערכת הביולוגית מתרחשות בעיקר על פני השטח של השתל. כתוצאה מכך, מחקר התמקד שינוי פני שטח כדי ליצור מאפיינים מתאימים יישום רצוי תוך השארה בכמויות הגדולות המאפיינים של החומר מעושה. Polytetrafluoroethylene (PTFE) כמו פולימר אינרטי מבחינה פיזיולוגית משמש בתחומים רפואיים רבים כגון רשת 1 כירורגית בקע, יציאות רפואיות 2, והכי חשוב, שתל כלי דם 3.
במיוחד במצבי פניית דם האופי הידרופובי של PTFE גורם ספיחה נוקבת של רכיבי פלזמה וכתוצאה הידבקות טסיות מכך, ופעמים רבות תוצאה היא thrombotiאירועי ג ו חסימה של השתל 4. יתר על כן, PTFE, כמו רוב הפולימרים, אינו תומך הידבקות הסלולר וכיסוי אשר תהיה תכונה רצויה לגרום להיווצרות שכבה שביושר בתאי האנדותל (EC) על הפנימי (לומינל) השטח של השתל וסקולרית 5. האנדותל biomimetic צפוי למלא רב מהפונקציות של המקבילה הטבעית שלה, נכסי antithrombogenic שלה בעיקר 6. אסטרטגית שינוי biomimetic כללית מבוססת על הרעיון של והוריש חומר בלעדי עם-דביקות תא תוך השארת הנכסים חומר תפזורת מעושה. בנוסף, הדבקה טסיות עשוי להיות מופחת על ידי שילוב-דבק אנטי (אנטי עכירות) מייחס 7. פפטידים שונים - שמקורה בעיקר חלבונים של תאי מטריקס - תוארו כי בתוקף לשפר-הידבקות התא באמצעות קשירה לקולטנים הסלולר, השתייכות למעמד של integrins 8. את להיותst-ידוע למשל בעניין זה הוא פפטיד Arg-גלאי-ASP (RGD) כי אינטראקציה עם סוגי תאים ביותר. רצפי החומצות האמיניות אחרים מוכרים על ידי integrins לידי ביטוי אך ורק על תאים ספציפיים. לדוגמה, Arg-Glu-Asp-Val (REDV) ו Tyr-Ile-גלאי-שירו-Arg (YIGSR) נמצאו להיקשר ECS באופן ספציפי 9. קוולנטיים וקיבוע של פפטידים כאלה בוצע על שפע של חומרים שאינם דבקים מטבעו כולל מתכות ופולימרים 10,11.
PTFE נקבובי, ליתר דיוק מורחבת PTFE (ePTFE) - יחד עם terephthalate פוליאתילן (PET) - הוא החומר החשוב ביותר לייצור כלי הדם שתלי 12. טכניקות פיסיות הוקמו עבור טיפולים מתאימים, כגון שינוי הפלזמה 13 או בשיטות פוטו 14, הם הקשו על ידי העובדה כי מבנים נקבוביים / או הצינור שלא ניתן לטפל בקלות בתוך נקבובי או לומן בהתאמה. כימיה רטובהעל PTFE היא משימה קשה בשל אופיו אינרטי מאוד של הפולימר המכילים fluorin שמתנגד התקפות כימיות ביותר 15.
במאמר זה אנו מתארים שיטה קלילה יחסית עבור אסטרטגית שינוי קוולנטי. מעובד מתוך הליך כדי להבהיר bondable PTFE, קבוצות פונקציונליות נוצרו על פני שטח החומרים המשמשים כנקודות עוגנות נטייה נוספת של מולקולות ביולוגיות אקטיביות.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. הכנת נתרן Naphthalenide הפעלת הפתרון והפעלת Surface
הערה: ביצוע תגובות במנדף מאוורר היטב. בצע כללים מקובלים לטיפול ממסים דליקים מאוד ומתכות מאכלות כמו נתרן מתכתי. יש נפטלין ריח מאוד לא נעים (נפטלין), אפילו בכמויות קטנות מאוד! אם לא צוין אחרת תגובות מבוצעות בטמפרטורת חדר. נתרן יזיד הוא רעיל ביותר! THF (99.9%, רואים רשימה של חומרים) אוחסן על כ 20% (לפי נפח) מסננת מולקולרית. זקק THF עם תכולת מים בולט מעל נתרן. ההיווצרות של נתרן naphthalenide אינה מתרחשת אם כמויות זעירות של מים נוכחות.
- כדי פתרון של 1.4 גר '(10.9 mmol) של נפטלין ב 20 מ"ל tetrahydrofuran (THF, מיובשים במשך 3 מסננת מולקולרית), להוסיף 0.25 גר' (10.9 mmol) מתכת נתרן בתוך בקבוק זכוכית בורג הכתיר 100 מ"ל מצויד PTFE- בר בחישה מגנטי מצופה.
הערה: Dissolution יכול להיות מאוד משופר על ידי חיתוך נתרן לחתיכות קטנות וחימום צנוע (35 - 40 מעלות צלזיוס). הפתרון הסופי יש צבע כהה, ירקרק מעט ועשוי להיות מאוחסן בתנאים יבשים לחלוטין. - אגרוף החוצה דיסקים PTFE בקוטר 12 מ"מ 0.5 מ"מ חומר רדיד עבה. מארק צד אחד (למשל, באמצעות מכתב חותם אגרוף) ונקי עם iso-propanol.
- דגירה בנפרד-דגימות PTFE בפתרון ההפעלה (שלב 1.1) עבור 1 - באמצעות מלקחי 2 דקות. הערה: שינוי הצבע לבן עד חום כהה מצביע טיפול מוצלח.
- בהמשך ולשטוף פעמיים עם THF ולאחר מכן עם-propanol iso.
הערה: פתרון naphthalenide הוא מותש כאשר משנה את צבעו כדי חום בהיר דומע. פתרון naphthalenide בשימוש (ואולי המכיל נתרן מתכתי) צריך להיות מפורק על ידי הוספה לאט iso-propanol לפני הסילוק. - לחמצן דגימות מטופלים מי חמצן (30%) המכילים 20% (w / v) חומצת trichloroacetic עבור 3 שעות. לִשְׁטוֹףעם מים ויבשים. המשטח עכשיו יש מראה חום קל. הערה: הפעלה ותוצאת חמצון בתוך יכולת רטיבות מוגברת מאוד של פני השטח. ממצא זה נבדק בפירוט 14 בעבר.
- פנקו את הדיסקים חמצון עם 50% (v / v) diisocyanate hexamethylene (HMDI) ב THF יבש עבור שעה 2, לשטוף עם THF ולהשאיר לייבוש.
- Hydrolyze דגימות נושאות isocyanate במים למשך 2 - 3 שעות ויבשות. הערה: משטח PTFE הסופי פונקציונלי אמין הוא הרבה יותר יציבה מאשר דגימות נושאות isocyanate והוא תואם crosslinkers הסטנדרטי רב עבור צימוד נוסף.
2. קיבוע פפטיד
- הכן תמיסה של 20% (v / v) אתר די אתילן גליקול diglycidyl (diepoxide) ב 50 מ"מ חיץ קרבונט, pH 9.
- מניחים את הדיסקים aminated עם הצד המסומן בנפרד לתוך צלחת 24 היטב ומוסיפים 1.5 מ"ל של הפתרון epoxide. להבטיח כיסוי מלא של הדגימות. דגירה עבור שעה 2 ולשטוף שניפעמים עם מים ופעם עם חיץ קרבונט.
- הוסף 50 μl של פפטיד 0.5 מ"ג / מ"ל (למשל, REDV) ב 50 מ"מ חיץ קרבונט, pH 9 המכיל 0.01% 3 נאן, אל החלק התחתון של בארות בודדים של צלחת טרי 24 היטב בזהירות במקום הפוך דיסקים פונקציונליות אפוקסי -down (כלומר, מסומן בצד למטה) על ירידה של הפתרון פפטיד. ודא כי הרווח בין תחתית הבאר ודיסק PTFE הוא רטוב לחלוטין בשל פעולת נימים.
- דגירה בתא רטוב (למשל, כל קופסת פלסטיק סגר עם מכסה הסגירה חזק) עם אווירה humidified (על ידי הצבת נייר טישו רטוב על הקרקעית) במשך 3 שעות לפחות או לילה.
הערה: אם כי מוטיב REDV יכול להיחשב היטב מאופיין, רצף חומצות האמיניות מקושקש או להפוך עשוי להיכלל כפקד שלילי נוסף. - לשטוף שלוש פעמים עם מים לעקר ב 50% iso-propanol / מים 30 דקות לפחות. לפני תא זריעה, rinsדואר הדגימות בופר פוספט סטרילית (PBS).
3. זריעת תאים
- לגדול HUVECs באמצעות נהלי תרבית תאים סטנדרטיים 17,18.
- מניח את הדגימות מצומדות-פפטיד עם הצד השונה עד בתוך 24 צלחות היטב. להשתמש בתקליטורי PTFE מטופל כביקורת.
- זרע 5 X 10 4 HUVECs במדיום 2 מ"ל לכל היטב דגירה במשך 4 שעות ב 37 מעלות צלזיוס, 5% CO 2 באינקובטור.
- הסר את הדיסקים, לשטוף בזהירות כדי להסיר תאים פנויים ולהעביר לצלחת גם 24 טרי. הוסף 2 מ"ל של מדיום חדש דגירה לתקופה הרצויה (למשל, 24 שעות, 1 w, וכו '). שנה בינונית כל יומיים.
- הכן פתרון המניות של 1 מ"ג / מ"ל Calcein-AM ב sulfoxide דימתיל (DMSO).
- לאחר גידול התאים להסיר את המדיום, לשטוף עם PBS ולהוסיף PBS המכיל 1 μl / מ"ל כתם Calcein-AM (למשל, 1 μl של פתרון המניות לכל PBS מ"ל). בעדינות להתסיס incubatדואר ב 37 מעלות צלזיוס למשך 45 דקות בחושך.
- לשטוף עם PBS ומיד לקחת micrographs על מיקרוסקופ פלואורסצנטי מצויד מסננים FITC סטנדרטי (ננומטר 488 Ex, ננומטר Em 515). השתמש בהגדלה של פי 100. בצע triplicates מ ללא שינוי כמו גם דגימות מטופל.
- באמצעות תוכנת ImageJ לקבוע את האזור מאוכלס על ידי התאים. לחלופין לספור את התאים באופן ידני או להשתמש ImageJ. שני השיטות תיתנה מידע דומה על התקשרות הצמיחה של תאים על פני השטח בהתאמה.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
התוצאות של צעדי תגובה הכימיים המכריע נוטרו ידי ספקטרוסקופיה IR (איור 1). ההפעלה הראשונית עם נתרן naphthalenide יוצרת קשרים כפולים - ובמידה קטין - OH-פונקציות. האות המציינת C = אג"ח ג להיעלם בסיום חמצון, מניב משטח ועליו כמעט באופן בלעדי הידרוקסיל-קבוצות. ניתוח של פעולות נטיית תקן נוספות אינו מוצג כאן. שינויי הצבעים עקב הפעלה וחמצון עולים בקנה אחד עם הכימיה הצפויה המשמש: מערכות מליטות כפולות מצומדות צפויים להיות חום ותוצאות האובדן שלה התבהרות (איור 2). בנוסף, להערכת סיכויי ההפעלה וחמצון על מורפולוגיה משטח נחקר באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים סורק. כמעט שום השפעה מזיקה של הטיפול נצפתה (איור 2).
ogether.within-page = "1"> דמוי 3 ו -4 מציגים את תוצאת REDV-קיבוע על צמיחת תאי אנדותל. בעוד כמעט ללא הידבקות תא ושגשוגם מתרחשים על חומר מטופל השינוי מאוד תומך קולוניזציה על פני תקופה של שבועות. שהודגם עבור יישום קליני (כלומר, שתל כלי דם), השינוי נעשה באופן זהה על חומר מקורי מתוך שתל זמין מסחרי מחומרי טפלון מורחבים עם תוצאות דומות על פני תקופה של שבוע אחד (איור 5).
ספקטרוסקופיה IR איור 1. של PTFE. טיפול PTFE וטהור (א) תוצאות ביצירת קשרים כפולים ובמידה מסוימת של פונקציות הידרוקסי (B). בהמשך C = אג"ח ג מופחתים עקב חמצון (C ng>). נא ללחוץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
המראה אופטי איור 2. של PTFE מופעל חשופי שטח. (א) הואיל PTFE מטופל (משמאל) נראה לבן, הפעיל באמצעות נתרן naphthalenide מניב צבע חום כהה (באמצע) אשר שפר מעט על חמצון (מימין). ללא טיפול (B) מחומצן PTFE (C) דגימות נחקרו גם באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים סורק (הגדלה: 2,000X). דיסקים הם 12 מ"מ קוטר. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
> 
תרבית תאי איור 3. האנדותל על PTFE והטהור פפטיד שונה. דגימות אורגניות נמצאת לא נשבו על ידי ECS (A, C, E לאחר 24 שעות, 1 w ו -2 w בהתאמה) ואילו הדבקה וצמיחה על חומר שונה פפטיד הוא משפרים (B, D ו- F לאחר 24 שעות, 1 w ו -2 w בהתאמה). סרגל קנה מידה:. 100 מיקרומטר, הגדלה 100X אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
איור 4. כימות של כיסוי התא על ידי ניתוח ImageJ. הצמיחה סלולארית על PTFE חשוף (A, C,E) ועל משטחים פולימריים מצומדות REDV (B, D, F) מבוטא כיסוי אחוז השטח הכולל. פפטיד המשותקת מאפשרת הדבקה ראשונית בבירור (B) ותומכת קולוניזציה על פני תקופה של 2 בשבוע (D, F). בשלושה עותקים קביעות, ממוצע ± סטיית תקן). נא ללחוץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
איור 5. תאי האנדותל גדלו במשך שבוע 1 על PTFE המורחבת. המבנה של ePTFE מוצג באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים סורק (א). התוצאות שהתקבלו על חומר נקבובי הן בהתאם לאלו שהושגו עבור דגימת PTFE שטוחה. בניגוד כמה תאים הנמצאיםעל חומר חשוף (ב) לפני השטח השונה (C) מספק מצע מצוין צמיחת תאים. ברי סולם הם 100 מיקרומטר עבור A, B ו- C בהתאמה. אנא לחץ כאן כדי לצפות בגרסה גדולה יותר של דמות זו.
איור 6. ייצוג סכמטי של השינוי הכימי של PTFE באמצעות-כימיה רטובה. קשרים כפולים שנוצרו על ידי טיפול Na-naphthalenide הם מתחמצנים וכתוצאה מכך OH-פונקציות. Diisocyanate תגובתי-הידרוקסיל הוא משותק אז הידרוליזה אל אמין. לבסוף diepoxide bifunctional מוחל להטות הפפטיד REDV באמצעות קבוצת אמינו N-terminal. נא ללחוץ כאן נiew גרסה גדולה יותר של דמות זו.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
התיאור המפורט של פרוטוקול שינוי פני השטח של PTFE מורכב צעדים רצופים החל חיסול פלואור מן השדרה פולימר כמתואר באיור 6. כתוצאה מכך, שכבה נוצר המכיל כמות בשפע של קשרים כפולים פחמן-פחמן מצומדות בהתאם לצבע החום הכהה שהתפתח על טיפול naphthalenide. חמצון רגיל עם מי חמצן חומצי מניב משטח hydroxylated מלווה התבהרות חום חיוור, זו משקפת את ההפסד של קשרים כפולים. תהליך זה בא לידי ביטוי באופן ברור על ידי ספקטרוסקופיה IR.
על מנת להשיג פונקציונליות החלימו באורח כללי יותר, את קבוצות OH התליון הוסבו פונקציות-אמינו על ידי טיפול פשוט עם diisocyanate הידרוליזה הבאה של moieties-הקצונה אמינה ראשוני. זה הוא חיובי, כי חומר נושאות אמינות ניתן לאחסן לתקופות ממושכות ואילו הגדולhly isocyanate תגובתי רגיש עצם הנוכחות של לחות באוויר.
יש להקפיד על הימנעות אפילו כמויות זעירות של מים בשלב ההפעלה הראשונית והטיפול HMDI כי הן naphthalenide נתרן ואת isocyanate רגישים מאוד הידרוליזה. בניגוד נהלים קבועים שבהם המדגם הוא שקוע לחלוטין בפתרון, בפרוטוקול הנוכחי מחייב רק כמויות קטנות של מגיב. לכן שיטה זו חוסכת הרבה הפפטיד היקר.
משטחים אמינים נושאות הם נקודות מוצא אידיאליות עבור הצימוד של ביומולקולות רבה. Diepoxide המועסקים בעבודה זו מעניין בכמה לגבי: זה יחסית זול, הידרופילי, מאוד תגובתי לעבר אמינים ואפוקסים הלא הגיבו הם הידרוליזה בסביבה מימית לתוך diols "אינרטי מבחינה פיזיולוגית". crosslinkers Homobifunctional הם ריאגנטים מתאימים שבו רק קבוצה תגובתי אחד היא נוכחית on הפפטיד כדי להיות משותק. זה חל על REDV המכיל רק אחד אמינו-קבוצה עיקרית אחת על N-terminal (זה אותו דבר עבור rgds רצף בשימוש תדיר). עבור פפטידים המכילים שאריות ליזין (עם אמיני שרשרת צד) התוצאה של הנטייה היא מעורפלת, כלומר צימוד נכון אינו מתרחש באופן מוגדר. במקרה זה, אסטרטגיה באמצעות crosslinkers heterobifunctional (למשל, amine- ו תיאול-reactive) ו ציסטאין (N- או C- מסוף) המכיל פפטידים הוא 18 מועיל.
התוצאות של חוסר תנועה פפטיד מבחינת הידבקות התא הוא חד משמעי (איורים 3 ו -4). בעוד כמעט ללא תאים לדבוק על PTFE החשוף, REDV-שינוי הופך את החומר מצע מצוין תא-דבק. משלים את העבודה מפורטת למעלה מעיד על הפרוטוקול ראשוני כי טכניקה זו היא גם החלימה על PTFE הנקבובי (מורחב) עם תוצאות דומות (איור 5 13, פילמור הפלזמה 19), פרוטוקול זה מספק קו מנחה לגבי השינוי קוולנטי של PTFE ידי העסקת כימיקלים זמינים ונהלי מעבדה ועל ידי הימנעות ציוד מתוחכם. מתודולוגיות פלזמה כגון פלזמה תגובתי (O 2, 3 NH, וכו ') פילמור פלזמה אינן ישימות בתוך מבנים נקבוביים או צינורות כי מינים תגובתי (למשל, רדיקלים) אינם מסוגלים לחדור למבנים אלה בשל איון במגע עם חומרים משטח. לדוגמה קטן שתל כלי דם קליבר (קוטר <5 מ"מ) לא ניתן לטפל בדרך זו. לעומת זאת, באמצעות כימיה רטובה, אין מגבלה לגבי הצורה של המכשיר. בדרך זו, בכך שהיא מאפשרת היווצרות של endothשכבת elial בצד luminal של שתל וסקולרית ePTFE, thrombogenicity ואת patency לטווח ארוך ניתן לשפר. בנוסף, משטח דבק תא עבור משתלב בקע כירורגית אמור לגרום אינטגרצית רקמה טובה יותר.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| PTFE foil 0.5 mm | Cadillac Plastic | n/a | |
| REDV peptide | Genecust | n/a | custom synthesis >95% purity |
| iso-propanol | Sigma Aldrich | 34965 | |
| tetrahydrofurane (THF) | Sigma Aldrich | 401757 | |
| dimethylsulfoxide | Sigma Aldrich | D8418 | |
| molecular sieve 3 Å | Sigma Aldrich | 208574 | |
| sodium metal | Sigma Aldrich | 483745 | |
| phosphate buffered saline (PBS) | Sigma Aldrich | D8537 | |
| naphthalene | Sigma Aldrich | 147141 | |
| hydrogen peroxide 30% | Sigma Aldrich | 95321 | |
| trichloroacetic acid | Sigma Aldrich | T6399 | |
| diethylene glycol diglycidyl ether | Sigma Aldrich | 17741 | |
| hexamethylene diisocyanate (HMDI) | Sigma Aldrich | 52650 | |
| Calcein-AM | Sigma Aldrich | 56496 | |
| sodium bicarbonate | Sigma Aldrich | S6014 | |
| sodium azide | Sigma Aldrich | 71290 | |
| 24 well plates | Greiner-Bio-One | 662 160 | |
| ATR-FTIR spectrophotometer Nicolet Magna-IR 850 | Nicolet | n/a | |
| fluorescence microscope Olympus X-70 | Olympus | n/a | |
| humbilical vein endothelial cells (HUVECs) | Lonza | n/a | |
| ePTFE vascular graft | Gore | n/a |
References
- Doctor, H. G. Evaluation of various prosthetic materials and newer meshes for hernia repairs. J. Minim. Access Surg. 2, 110-116 (2006).
- Zaghal, A., et al. Update on totally implantable venous access devices. Surg. Oncol. 21, 207-215 (2012).
- Niu, G., Sapoznik, E., Soker, S.
- Wang, M. -J., Tsai, W. -B. Biomaterials in Blood-Contacting Devices: Complications and Solutions. , Nova Science Publishers. 1 ed (2010).
- de Mel, A., Jell, G., Stevens, M. M., Seifalian, A. M. Biofunctionalization of biomaterials for accelerated in situ endothelialization: a review. Biomacromolecules. 9, 2969-2979 (2008).
- Zdrahala, R. J. Small caliber vascular grafts. Part I: state of the art. J. Biomat. Appl. 10, 309-329 (1996).
- Cleary, M. A., et al. Vascular tissue engineering: the next generation. Trends Mol. Med. 18, 394-404 (2012).
- Ruoslahti, E. RGD and other recognition sequences for integrins. Annu. Rev. Dev. Bi. 12, 697-715 (1996).
- Lei, Y., Remy, M., Labrugere, C., Durrieu, M. C. Peptide immobilization on polyethylene terephthalate surfaces to study specific endothelial cell adhesion, spreading and migration. J. Mat. Sci. Mater. M. 23, 2761-2772 (2012).
- Gabriel, M., et al. Covalent RGD Modification of the Inner Pore Surface of Polycaprolactone Scaffolds. J. Biomat. Sci.. Polym. E. 23, 941-953 (2012).
- Ceylan, H., Tekinay, A. B., Guler, M. O. Selective adhesion and growth of vascular endothelial cells on bioactive peptide nanofiber functionalized stainless steel surface. Biomaterials. 32, 8797-8805 (2011).
- Chlupac, J., Filova, E., Bacakova, L. Blood vessel replacement: 50 years of development and tissue engineering paradigms in vascular surgery. Physiol. Res. / Academia Scientiarum Bohemoslovaca. 58, Suppl 2 119-139 (2009).
- Wise, S. G., Waterhouse, A., Kondyurin, A., Bilek, M. M., Weiss, A. S.
- Mikulikova, R., et al. Cell microarrays on photochemically modified polytetrafluoroethylene. Biomaterials. 26, 5572-5580 (2005).
- Gabriel, M., Dahm, M., Vahl, C. F. Wet-chemical approach for the cell-adhesive modification of polytetrafluoroethylene. Biomed. Mater. 6, 035007 (2011).
- Gabriel, M., van Nieuw Amerongen, G. P., Van Hinsbergh, V. W., Amerongen, A. V., Zentner, A. Direct grafting of RGD-motif-containing peptide on the surface of polycaprolactone films. J. Biomat. Sci.. Polym. E. 17, 567-577 (2006).
- Larsen, C. C., Kligman, F., Kottke-Marchant, K., Marchant, R. E. The effect of RGD fluorosurfactant polymer modification of ePTFE on endothelial cell adhesion, growth, and function. Biomaterials. 27, 4846-4855 (2006).
- Gabriel, M., Nazmi, K., Veerman, E. C., Nieuw Amerongen, A. V., Zentner, A. Preparation of LL-37-grafted titanium surfaces with bactericidal activity. Bioconjugate Chem. 17, 548-550 (2006).
- Lotz, A., Heller, M., Brieger, J., Gabriel, M., Förch, R. Derivatization of Plasma Polymerized Thin Films and Attachment of Biomolecules to Influence HUVEC-Cell Adhesion. Plasma Process Polym. 9, 10-16 (2012).
