Abstract
Begiftigt materialen oppervlak met cell-hechtende eigenschappen is een gemeenschappelijke strategie in biomaterialen onderzoek en tissue engineering. Dit is vooral interessant voor reeds goedgekeurde polymeren die een langdurige toepassing in de geneeskunde omdat deze materialen zijn goed gekarakteriseerd en wetgeving die samenhangen met de introductie van nieuw gesynthetiseerde polymeren kunnen worden vermeden. Polytetrafluorethyleen (PTFE) is een van de meest gebruikte materialen voor het vervaardigen van vasculaire enten, maar mist de polymere cel adhesiebevorderende kenmerken. Endothelialisatie, dwz dat volledige dekking van de enten binnenoppervlak met een confluente laag van endotheelcellen beschouwd essentieel voor de optimale prestaties, vooral door het beperken trombogeniciteit van de kunstmatige interface.
Deze studie onderzoekt de groei van endotheliale cellen op peptide-gemodificeerde PTFE en vergelijkt deze resultaten met die verkregen met ongemodificeerde substraat. Koppeling met deendotheelcel lijm peptide Arg-Glu-Asp-Val (REDV) wordt uitgevoerd via activatie van de fluorin polymeer met het reagens natriumnaftalenide, gevolgd door achtereenvolgende conjugatie stappen. Celkweek wordt bewerkstelligd middels humane navelstreng endotheelcellen (HUVEC) en uitstekende celgroei on-peptide geïmmobiliseerd materiaal wordt aangetoond gedurende een periode van twee weken.
Introduction
Verschillende polymeren gebruikt in de geneeskunde die zijn goedgekeurd voor enige tijd niet verbeterde biocompatibiliteit, dat wil zeggen, gebrek aan cel-kleverigheid, inductie van fibrotische inkapseling en trombogeniciteit vertonen, om een paar te noemen. Interacties tussen het biomateriaal en het biologische systeem voornamelijk plaatsvindt aan het oppervlak van het implantaat. Dientengevolge is onderzoek gericht op oppervlaktemodificatie teneinde passende eigenschappen te creëren voor een gewenste toepassing terwijl de bulk van het materiaal beïnvloed. Polytetrafluorethyleen (PTFE) als een fysiologisch inert polymeer wordt gebruikt in vele medische gebieden zoals hernia chirurgisch gaas 1, medische poorten 2 en, belangrijker, vasculaire transplantaten 3.
Vooral in bloed contact situaties de hydrofobe aard van PTFE zorgt onspecifieke adsorptie van plasmacomponenten en bijgevolg bloedplaatjesadhesie, vaak resulterend in thrombotic gebeurtenissen en occlusie van het implantaat 4. Bovendien PTFE, zoals de meeste polymeren, ondersteunt celadhesie en dekking die zou een wenselijke eigenschap voor de vorming van een gunstig laag van endotheelcellen (EC) op de binnenzijde (luminaal) oppervlak van het vasculaire transplantaat 5 induceren. Een biomimetische endotheel wordt verwacht dat veel van de functies van de natuurlijke equivalent, met name de antitrombogene eigenschappen 6 voldoen. Een algemene biomimetische modificatie strategie is gebaseerd op het concept van uitsluitend begiftigt het materiaal cel-kleverigheid terwijl de materialen bulkeigenschappen onaangetast. Bovendien kunnen bloedplaatjesadhesie worden verminderd door reeds adhesie (aangroeiwerende) kenmerken 7. Verschillende peptiden - meestal afgeleid van eiwitten van de extracellulaire matrix - beschreven die sterk verbeteren celadhesie door binding aan cellulaire receptoren, die behoren tot de klasse van integrinen 8. het zijnst bekend voorbeeld in dit verband is het peptide Arg-Gly-Asp (RGD) die samenwerkt met de meeste celtypen. Andere aminozuursequenties worden herkend door integrinen exclusief tot expressie op specifieke cellen. Bijvoorbeeld, Arg-Glu-Asp-Val (REDV) en Tyr-Ile-Gly-Ser-Arg (YIGSR) gevonden te binden aan EC aan een specifieke wijze 9. Covalente immobilisatie van dergelijke peptiden heeft op een overvloed aan inherent niet-zelfklevende materialen waaronder metalen en polymeren 10,11 uitgevoerd.
Poreus PTFE, nauwkeuriger geëxpandeerd PTFE (ePTFE) - samen met polyethyleentereftalaat (PET) - is de belangrijkste grondstof voor de productie van vasculaire transplantaten 12. Vastgesteld fysische technieken voor geschikte behandelingen, zoals plasma modificatie 13 of fotochemische methoden 14 worden bemoeilijkt doordat poreuze en / of buisvormige structuren zijn niet gemakkelijk te behandelen in de poriën of het lumen resp. natchemischeop PTFE is een moeilijke taak, omdat de zeer inerte aard van het fluorin bevattend polymeer dat de meeste chemische aanvallen 15 weerstaat.
In dit artikel beschrijven we een relatief gemakkelijke werkwijze voor covalente modificatie strategie. Aangepast van een procedure om PTFE bondable te maken, werden functionele groepen die zijn gemaakt op de materialen oppervlak die dienen als ankerpunten voor verdere vervoeging van biologisch actieve moleculen.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
1. Bereiding van natriumnaftalenide activeren Solution en Oppervlakte Activering
Opmerking: Voer reacties in een goed geventileerde zuurkast. Volg de algemene regels voor het omgaan met licht ontvlambare oplosmiddelen en corrosieve metalen zoals metallisch natrium. Naftaleen heeft een zeer onaangename geur (mottenballen), zelfs in zeer kleine hoeveelheden! Tenzij anders aangegeven reacties worden uitgevoerd bij kamertemperatuur. Natriumazide is zeer giftig! THF (99,9%, zie Lijst van Materials) werd opgeslagen meer dan ongeveer 20% (in volume) moleculaire zeef. Distilleren THF met een merkbare watergehalte over natrium. De vorming van natriumnaftalenide treedt niet op als kleine hoeveelheden water aanwezig zijn.
- Aan een oplossing van 1,4 g (10,9 mmol) naftaleen in 20 ml tetrahydrofuran (THF, gedroogd op 3 A moleculaire zeef), voeg 0,25 g (10,9 mmol) natriummetaal in een 100 ml glazen fles schroefdop uitgerust met een PTFE- beklede magnetische roerstaaf.
Opmerking: Dissolutie kan sterk worden verbeterd door het snijden van het natrium in kleine stukjes en bescheiden verwarmen (35-40 ° C). De uiteindelijke oplossing heeft een donkere, ietwat groenachtige kleur en kunnen onder strikt droge omstandigheden worden bewaard. - Pons PTFE schijven met een diameter van 12 mm van 0,5 mm dik folie materiaal. Mark de ene kant (bijvoorbeeld met behulp van een brief stempel punch) en schoon met iso-propanol.
- Incubeer PTFE-monsters afzonderlijk in de activerende oplossing (stap 1.1) voor 1-2 min met behulp van een tang. Opmerking: De kleurverandering van wit tot donkerbruin geeft aan een succesvolle behandeling.
- Vervolgens tweemaal met THF en spoel na met iso-propanol.
Opmerking: De naphthalenide oplossing is uitgeput wanneer de kleur verandert in een waterige lichtbruin. Ongebruikte naphthalenide oplossing (eventueel metallisch natrium) worden ontleed door langzaam toevoegen iso-propanol voorafgaand aan verwijdering. - Oxideren behandelde monsters in waterstofperoxide (30%) bevattende 20% (w / v) trichloorazijnzuur gedurende 3 uur. Wassenmet water en droog. Het oppervlak heeft nu een lichte bruinachtig uiterlijk. Opmerking: Activering en oxidatie resulteert in een drastisch toegenomen bevochtigbaarheid van het oppervlak. Deze bevinding werd in detail onderzocht eerder 14.
- Behandel geoxideerd schijven met 50% (v / v) hexamethyleendiisocyanaat (HMDI) in droog THF gedurende 2 uur, spoel met THF en laten drogen.
- Hydrolyseren isocyanaat lager monsters in water gedurende 2-3 uur en droog. Opmerking: De uiteindelijke aminogefunctionaliseerde PTFE oppervlak is veel stabieler dan de isocyanaat-dragende monsters en is compatibel met vele standaard verknopingsmiddelen voor verdere koppeling.
2. Peptide Immobilisatie
- Bereid een oplossing van 20% (v / v) diethyleenglycol diglycidyl ether (di-epoxide) in 50 mM carbonaatbuffer, pH 9.
- Plaats de geamineerd schijven met de gemarkeerde zijde naar boven individueel in een 24 well plaat en voeg 1,5 ml van het epoxide oplossing. Zorgen voor een volledige dekking van de monsters. Incubeer gedurende 2 uur en was tweemalen met water en eenmaal met carbonaatbuffer.
- Voeg 50 ul van een 0,5 mg / ml peptide (bijvoorbeeld REDV) in 50 mM carbonaatbuffer, pH 9 met 0,01% NaN3, onderaan naar individuele putjes van een nieuwe plaat met 24 putjes en plaats voorzichtig het epoxy-gefunctionaliseerde schijven ondersteboven -down (dwz gemarkeerde zijde naar beneden) op de daling van het peptide-oplossing. Zorg ervoor dat de ruimte tussen de bodem van de put en de PTFE schijf volledig bevochtigd door capillaire werking.
- Incubeer in een vochtige ruimte (bijvoorbeeld elke lasbare kunststof doos met een strakke sluitdeksel) met bevochtigde atmosfeer (door nat tissuepapier op de bodem) gedurende ten minste 3 uur of overnacht.
Opmerking: ondanks de REDV motief kan worden geacht goed gekarakteriseerd, gecodeerde of omgekeerde aminozuursequentie kan worden opgenomen als extra negatieve controle. - Was drie keer met water en steriliseer in 50% isopropanol / water gedurende 30 min. Voorafgaand aan het zaaien, rins cele de monsters in steriele fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS).
3. Cel zaaien
- Grow HUVECs met behulp van standaard celcultuur procedures 17,18.
- Plaats de peptide-geconjugeerde monsters met gemodificeerde naar boven in een 24 well platen. Gebruik onbehandelde PTFE-schijven als een controle.
- Zaad 5 x 10 4 HUVEC in 2 ml medium per putje en incubeer gedurende 4 uur bij 37 ° C en 5% CO2 in een incubator.
- Verwijder de schijven, spoel zorgvuldig losse cellen te verwijderen en over te dragen aan een nieuwe plaat met 24 putjes. Voeg 2 ml vers medium en incubeer gedurende de gewenste periode (bijvoorbeeld, 24 uur, 1 w, enz.). Verander medium om de twee dagen.
- Bereid een voorraadoplossing van 1 mg / ml calceïne-AM in dimethylsulfoxide (DMSO).
- Na kweken van de cellen te verwijderen het medium, wassen met PBS en voeg PBS dat 1 ui / ml calceïne-AM kleuring (bijvoorbeeld 1 pi van een voorraadoplossing per ml PBS). Schud voorzichtig en incubate bij 37 ° C gedurende 45 minuten in het donker.
- Was met PBS en onmiddellijk micrografische op een fluorescentiemicroscoop uitgerust met standaard FITC filters (Ex 488 nm, Em 515 nm). Gebruik 100-voudige vergroting. Voer drievoud van ongemodificeerde evenals behandelde monsters.
- Behulp ImageJ software bepaalt het gebied gekoloniseerd door de cellen. U kunt ook handmatig tellen van de cellen of gebruik ImageJ. Beide methoden zullen soortgelijke informatie over de aanhechting en groei van cellen op de respectievelijke oppervlakken geven.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
De resultaten van de cruciale chemische reactiestappen werden gevolgd met IR-spectroscopie (figuur 1). De eerste activering met natriumnaftalenide genereert dubbele bindingen - en in mindere mate - OH-functionaliteiten. Het signaal dat C = C bindingen verdwijnen bij oxidatie, waardoor een oppervlak dat bijna uitsluitend hydroxylgroepen. Analyse van de verdere standaard vervoeging stappen worden hier niet weergegeven. De kleur verandert door activatie en oxidatie in overeenstemming met de verwachte chemie die wordt gebruikt: geconjugeerde dubbele binding systemen verwacht bruinachtig en het verlies resultaten in helderder (figuur 2). Bovendien, het mogelijke resultaat van activatie en oxidatie op het oppervlak morfologie werd onderzocht met behulp van scanning elektronenmicroscopie. Vrijwel geen nadelig effect van de behandeling werd waargenomen (Figuur 2).
figuren 3 en 4 tonen de resultaten van REDV-immobilisatie op endotheliale celgroei. Overwegende dat vrijwel geen celadhesie en proliferatie gebeurt op onbehandeld materiaal de wijziging sterk voorstander kolonisatie gedurende een periode van twee weken. Geïllustreerd voor een klinische toepassing (dat wil zeggen, vasculaire transplantaten), werd de modificatie identiek uitgevoerd op origineel materiaal uit een commercieel verkrijgbaar graft van geëxpandeerd PTFE met een soortgelijke resultaten over een periode van een week (Figuur 5).
Figuur 1. IR spectroscopie van PTFE. Behandeling van pristine PTFE (A) leidt tot de vorming van dubbele bindingen en een zekere mate van hydroxylgroepen (B). Vervolgens C = C bindingen worden verminderd door de oxidatie (C Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 2. Optische verschijning van kale oppervlak geactiveerde PTFE. (A) Overwegende behandelde PTFE (links) verschijnt wit, de activering via natriumnaftalenide heeft een donkere bruine kleur (midden) die enigszins wordt opgelicht bij oxidatie (rechts). Onbehandelde (B) en geoxideerd PTFE (C) monsters werden bovendien onderzocht met scanning elektronenmicroscopie (vergroting: 2,000X). Schijven zijn 12 mm in diameter. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 3. endotheliale celculturen op ongerept en-peptide gemodificeerd PTFE. Onbehandelde monsters niet gekoloniseerd door ECs (A, C, E na 24 uur, 1 en 2 w w respectievelijk) dat hechting en groei op-peptide gemodificeerd materiaal sterk verbeterd (B, D en F na 24 uur, 1 en 2 w w respectievelijk). Schaal bar:. 100 pm, vergroting 100X Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 4. Kwantificering van mobiele dekking door ImageJ analyse. Celgroei op bare PTFE (A, C,E) en REDV geconjugeerd polymeer oppervlakken (B, D, F), uitgedrukt in procent bereik van het totale gebied. Geïmmobiliseerd peptide maakt duidelijk initiële adhesie (B) en ondersteunt de kolonisatie over een periode van 2 weken (D, F). Drievoudige bepalingen, gemiddelde ± standaarddeviatie). Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 5. Endotheelcellen gekweekt gedurende 1 week geëxpandeerd PTFE. De structuur van de ePTFE wordt gegeven met Scanning Electron Microscopy (A). De verkregen op poreuze materiaal resultaten zijn in overeenstemming met die verkregen voor vlakke PTFE monster. In tegenstelling tot de weinige cellen gevondenop bare materiaal (B) het gemodificeerde oppervlak (C) een uitstekend substraat voor celgroei. Schaal bars zijn 100 micrometer voor A, B en C respectievelijk. Klik hier om een grotere versie van deze figuur te bekijken.
Figuur 6. Schematische weergave van de chemische modificatie van PTFE gebruik natte chemie. Dubbele bindingen die door Na-naphthalenide behandeling geoxideerd waardoor OH-functionaliteiten. Een hydroxyl-reactieve isocyanaat wordt vervolgens geïmmobiliseerd en gehydrolyseerd om een amine. Tenslotte wordt de bifunctionele diepoxide wordt toegepast op de REDV peptide conjugaat met de N-eindstandige aminogroep. Klik hier om vIEW een grotere versie van deze figuur.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
De gedetailleerde beschrijving van oppervlaktemodificatie protocol PTFE bestaat uit opeenvolgende stappen beginnen met de verwijdering van fluor uit het polymeerskelet zoals weergegeven in figuur 6. Hierdoor wordt een laag gevormd die een overvloedige hoeveelheid geconjugeerde koolstof-koolstof dubbele bindingen bevat in overeenstemming met de donkere bruine kleur die ontwikkeld op naphthalenide behandeling. Standard oxidatie met zure waterstofperoxide levert een gehydroxyleerd oppervlak vergezeld van verhelderende om een lichtbruine, weerspiegelt dit het verlies van dubbele bindingen. Deze werkwijze wordt duidelijk uit IR spectroscopie.
Om algemener toepasbaar functionaliteit te bereiken, werden de aanhangende OH-groepen omgezet in amino-functionaliteiten door eenvoudige behandeling met een diisocyanaat en daaropvolgende hydrolyse van de NCO-groepen tot primaire amines. Dit is gunstig, omdat amine-dragend materiaal kan worden opgeslagen gedurende langere tijd terwijl de highly reactief isocyanaat gevoelig voor de aanwezigheid van luchtvochtigheid.
Zorg moet worden genomen bij het vermijden van zelfs sporen hoeveelheden water in de eerste activeringsstap en de behandeling HMDI omdat zowel natriumnaftalenide en het isocyanaat zijn zeer gevoelig voor hydrolyse. In tegenstelling tot standaard procedures waarbij het monster volledig wordt ondergedompeld in de oplossing, dit protocol vereist slechts kleine hoeveelheden van het reagens. Daarom is deze methode bespaart veel van de dure peptide.
Amine-draagoppervlakken zijn ideaal uitgangspunten voor het koppelen van verschillende biomoleculen. Het diëpoxide gebruikt in dit werk interessant in verschillende opzichten: het is relatief goedkoop, hydrofiele, sterk reactief zijn ten opzichte aminen en niet-gereageerde epoxiden worden gehydrolyseerd in een waterige omgeving in "fysiologisch inert" diolen. Homobifunctionele verknopingsmiddelen geschikte reagentia waar slechts één reactieve groep aanwezig is on het peptide te immobiliseren. Dit geldt REDV die slechts één primaire aminogroep aan het N-terminale (dit geldt ook voor de gebruikte sequentie RGDS). Voor peptiden die lysine residuen (met een zijketen aminen) het resultaat van de conjugatie dubbelzinnig, wat betekent dat een goede koppeling niet optreedt op een bepaalde manier. In dit geval wordt een aanpak vanuit heterobifunctionele verknopingsmiddelen (bijvoorbeeld amine en thiol-reactief) en cysteïne (N- of C-terminale) peptiden die nuttig 18.
De resultaten van de peptide immobilisatie qua celhechting eenduidig (figuren 3 en 4). Overwegende dat vrijwel geen cellen hechten op blote PTFE, REDV-modificatie maakt het materiaal een uitstekende cel-lijm substraat. Aanvulling op de bovengenoemde protocol voorbereidende werkzaamheden tonen dat deze techniek ook toepasbaar op poreuze (geëxpandeerd) PTFE met vergelijkbare resultaten (Figuur 5 13, plasmapolymerisatie 19) maken oppervlak, dit protocol verschaft een richtlijn voor de covalente modificatie van PTFE door gebruik gemakkelijk verkrijgbare chemicaliën en laboratoriumprocedures en door het vermijden van zeer geavanceerde apparatuur. Plasma methodes zoals reactieve plasma (O 2, NH3, enz.) En plasmapolymerisatie niet van toepassing in poreuze constructen of buis omdat reactieve species (bijvoorbeeld radicalen) niet in staat om deze structuren te penetreren vanwege inactivering bij contact met de materialen oppervlak. Bijvoorbeeld klein kaliber vasculaire transplantaten (diameter <5 mm) kan niet op deze wijze worden behandeld. In tegenstelling hiermee, via natchemische, is er geen beperking met betrekking tot de vorm van de inrichting. Zo doordat de vorming van een endothEliel laag op de luminale zijde van een ePTFE vasculair transplantaat, trombogeniciteit en lange termijn openheid kan worden verbeterd. Daarnaast wordt een cel hechtoppervlak voor chirurgische hernia mazen zou leiden tot een betere weefselintegratie.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| PTFE foil 0.5 mm | Cadillac Plastic | n/a | |
| REDV peptide | Genecust | n/a | custom synthesis >95% purity |
| iso-propanol | Sigma Aldrich | 34965 | |
| tetrahydrofurane (THF) | Sigma Aldrich | 401757 | |
| dimethylsulfoxide | Sigma Aldrich | D8418 | |
| molecular sieve 3 Å | Sigma Aldrich | 208574 | |
| sodium metal | Sigma Aldrich | 483745 | |
| phosphate buffered saline (PBS) | Sigma Aldrich | D8537 | |
| naphthalene | Sigma Aldrich | 147141 | |
| hydrogen peroxide 30% | Sigma Aldrich | 95321 | |
| trichloroacetic acid | Sigma Aldrich | T6399 | |
| diethylene glycol diglycidyl ether | Sigma Aldrich | 17741 | |
| hexamethylene diisocyanate (HMDI) | Sigma Aldrich | 52650 | |
| Calcein-AM | Sigma Aldrich | 56496 | |
| sodium bicarbonate | Sigma Aldrich | S6014 | |
| sodium azide | Sigma Aldrich | 71290 | |
| 24 well plates | Greiner-Bio-One | 662 160 | |
| ATR-FTIR spectrophotometer Nicolet Magna-IR 850 | Nicolet | n/a | |
| fluorescence microscope Olympus X-70 | Olympus | n/a | |
| humbilical vein endothelial cells (HUVECs) | Lonza | n/a | |
| ePTFE vascular graft | Gore | n/a |
References
- Doctor, H. G. Evaluation of various prosthetic materials and newer meshes for hernia repairs. J. Minim. Access Surg. 2, 110-116 (2006).
- Zaghal, A., et al. Update on totally implantable venous access devices. Surg. Oncol. 21, 207-215 (2012).
- Niu, G., Sapoznik, E., Soker, S.
- Wang, M. -J., Tsai, W. -B. Biomaterials in Blood-Contacting Devices: Complications and Solutions. , Nova Science Publishers. 1 ed (2010).
- de Mel, A., Jell, G., Stevens, M. M., Seifalian, A. M. Biofunctionalization of biomaterials for accelerated in situ endothelialization: a review. Biomacromolecules. 9, 2969-2979 (2008).
- Zdrahala, R. J. Small caliber vascular grafts. Part I: state of the art. J. Biomat. Appl. 10, 309-329 (1996).
- Cleary, M. A., et al. Vascular tissue engineering: the next generation. Trends Mol. Med. 18, 394-404 (2012).
- Ruoslahti, E. RGD and other recognition sequences for integrins. Annu. Rev. Dev. Bi. 12, 697-715 (1996).
- Lei, Y., Remy, M., Labrugere, C., Durrieu, M. C. Peptide immobilization on polyethylene terephthalate surfaces to study specific endothelial cell adhesion, spreading and migration. J. Mat. Sci. Mater. M. 23, 2761-2772 (2012).
- Gabriel, M., et al. Covalent RGD Modification of the Inner Pore Surface of Polycaprolactone Scaffolds. J. Biomat. Sci.. Polym. E. 23, 941-953 (2012).
- Ceylan, H., Tekinay, A. B., Guler, M. O. Selective adhesion and growth of vascular endothelial cells on bioactive peptide nanofiber functionalized stainless steel surface. Biomaterials. 32, 8797-8805 (2011).
- Chlupac, J., Filova, E., Bacakova, L. Blood vessel replacement: 50 years of development and tissue engineering paradigms in vascular surgery. Physiol. Res. / Academia Scientiarum Bohemoslovaca. 58, Suppl 2 119-139 (2009).
- Wise, S. G., Waterhouse, A., Kondyurin, A., Bilek, M. M., Weiss, A. S.
- Mikulikova, R., et al. Cell microarrays on photochemically modified polytetrafluoroethylene. Biomaterials. 26, 5572-5580 (2005).
- Gabriel, M., Dahm, M., Vahl, C. F. Wet-chemical approach for the cell-adhesive modification of polytetrafluoroethylene. Biomed. Mater. 6, 035007 (2011).
- Gabriel, M., van Nieuw Amerongen, G. P., Van Hinsbergh, V. W., Amerongen, A. V., Zentner, A. Direct grafting of RGD-motif-containing peptide on the surface of polycaprolactone films. J. Biomat. Sci.. Polym. E. 17, 567-577 (2006).
- Larsen, C. C., Kligman, F., Kottke-Marchant, K., Marchant, R. E. The effect of RGD fluorosurfactant polymer modification of ePTFE on endothelial cell adhesion, growth, and function. Biomaterials. 27, 4846-4855 (2006).
- Gabriel, M., Nazmi, K., Veerman, E. C., Nieuw Amerongen, A. V., Zentner, A. Preparation of LL-37-grafted titanium surfaces with bactericidal activity. Bioconjugate Chem. 17, 548-550 (2006).
- Lotz, A., Heller, M., Brieger, J., Gabriel, M., Förch, R. Derivatization of Plasma Polymerized Thin Films and Attachment of Biomolecules to Influence HUVEC-Cell Adhesion. Plasma Process Polym. 9, 10-16 (2012).
