Summary
הפרוטוקול הנוכחי מתאר את כל השלבים החיוניים להשתלת רחם מוצלחת (UTx) בחולדות. מודל החולדות הוכח כמתאים לקידום היישום הקליני של UTx; עם זאת, UTx חולדה הוא הליך מורכב ביותר הדורש הוראות זהירות.
Abstract
השתלת רחם (UTx) היא גישה חדשה לטיפול בנשים עם אי פוריות מוחלטת של גורם הרחם (AUFI). על פי הערכות, 3%-5% מהנשים סובלות מ-AUFI. מנשים אלה נשללה האפשרות להביא ילדים לעולם עד הופעתו של UTx. היישום הקליני של UTx הונע על ידי מחקרים ניסיוניים בבעלי חיים, וה- UTx המוצלח הראשון הושג בחולדות. בהתחשב במאפיינים הפיזיולוגיים, האימונולוגיים, הגנטיים והרבייה שלהן, חולדות הן מערכת מודל מתאימה להשתלות כאלה. בפרט, תקופת ההריון הקצרה שלהם היא יתרון ברור, שכן נקודת הסיום הרגילה של UTx ניסיוני היא הריון מוצלח עם לידת חי. האתגר הגדול ביותר עבור מודלים של חולדות נותר האנטומיה הקטנה, הדורשת מיומנויות מיקרוכירורגיות מתקדמות וניסיון. למרות ש- UTx הוביל להריון במרפאה, ההליך אינו מבוסס ודורש אופטימיזציה ניסיונית מתמשכת. כאן מוצג פרוטוקול מפורט, הכולל פתרון בעיות חיוני עבור UTx חולדה, אשר צפוי להפוך את ההליך כולו לקל יותר להבנה עבור אלה ללא ניסיון בסוג זה של מיקרו-כירורגיה.
Introduction
השתלת רחם (UTx) היא טיפול חדשני לאי פוריות מוחלטת של גורם הרחם (AUFI). AUFI נובע מהיעדרות (מולדת או נרכשת) או מום ברחם ומשפיע על 3%-5% מהנשים בעולם1. סיבות אתיות, משפטיות או דתיות שוללות אימוץ או פונדקאות עבור נשים רבות שיש להן רצון לאימהות אך סובלות מ- AUFI2. עבור נשים אלה, UTx נשאר האפשרות היחידה להקים משפחה משלהם. UTx יושם במרפאה, אם כי בהצלחה מעורבת; ההליך מאתגר מבחינה טכנית ודורש שיפור מתמיד עבור הממסד הקליני שלו.
בשנת 2014, ההשתלה הראשונה של רחם מתורם חי (LD) - וכתוצאה מכך הריון מוצלח - בוצעה על ידי הקבוצה השבדית החלוצית של Brännström3. הלידה הראשונה לאחר UTx מתורם שנפטר (DD) דווחה בשנת 2016 בברזיל4. עד שנת 2021, יותר מ -80 UTxs בוצעו ברחבי העולם, אולם עם שיעור הצלחה של כ -50% ועם שתלים המגיעים מ LD עבור רוב1.
אמנם לא מציל חיים, UTx הוא הליך פופולרי יותר ויותר כדי למלא את הרצונות עבור צאצאים משלו. ככזה, הביקוש לשתלים הולך וגובר, ומציב את תרומת DD במוקד עתידי. עם זאת, תרומת DD מסובכת עקב חשיפות איסכמיות ארוכות יותר (ובמקרה של מוות לבבי, גם חם), מה שמעלה את הסיכון לתפקוד לקוי של השתלודחייה 5,6. טכניקה כירורגית, דרישת התאמת תאימות, ודיכוי חיסוני נלווה נותרו נושאים קריטיים לגבי תוצאות UTx7.
כדי לנהל את הסיכונים הנ"ל במרפאה, יש צורך במודלים מתאימים של בעלי חיים לחקר איסכמיה ודיכוי חיסוני. נקודת הקצה הרלוונטית ביותר מבחינה קלינית עבור מודלים של בעלי חיים נותרה לידה מוצלחת; עד כה, הריונות לאחר UTx ניסיוני הושגו בעכברים, חולדות, כבשים, ארנבות וקופי צינומולגוס8. בעוד שבעלי חיים גדולים יותר מיועדים מראש לרכישה ואופטימיזציה של טכניקות כירורגיות, מכרסמים מגיעים עם היתרון המובהק של תקופות הריון קצרות. לכן, מודלים של מכרסמים עדיפים על שיקולים מעשיים, כלכליים ואתיים9. עם זאת, האתגר העיקרי של UTx בעכברים הוא האנטומיה הקטנה, כאשר הניתוח התובעני מאוד קשור ליכולת השחזור הנמוכה של UTx10. לעומת זאת, חולדות נגישות יותר מבחינה כירורגית ושומרות על היתרונות של זמני הריון קצרים. ככזו, החולדה הפכה למודל המועדף עלUTx 9. Wranning et al. הציגו את מודל החולדות של UTx אורתוטופי בשנת 2008, ובאמצעות מודל זה, לידת החי הראשונה לאחר UTx והזדווגות טבעית דווחה11,12,13. מחקרים מאוחרים יותר תרמו תרומה קריטית ליישום UTx בבני אדם9.
עם זאת, UTx נשאר מאתגר בחולדות, ורק קבוצות מעטות עדיין שלטו בטכניקה כירורגית זו. אחד המכשולים הרלוונטיים להתפשטות UTx של חולדות בקרב החוקרים הוא היעדר תיאור מדויק של השלבים המיקרוכירורגיים הבודדים, המלכודות והמדדים לפתרון בעיות14. פרוטוקול זה נועד לספק מדריך מפורט להליך מיקרוכירורגי מורכב מאוד זה כדי להקל על יישום מודל בעלי חיים זה במחקר עתידי.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
כל הניסויים בבעלי חיים בוצעו בהתאם לתקנות הפדרליות השווייצריות לבעלי חיים ואושרו על ידי המשרד הווטרינרי של ציריך (n° 225/2019), תוך הבטחת טיפול בבני אדם. נקבות חולדות לואיס בתולות (משקל גוף של 170-200 גרם) ונקבות חולדות וירג'ין בראון נורווגיה (170-200 גרם) שימשו כתורמות/מושתלות רחם, ואילו חולדות לואיס זכריות (300-320 גרם) שימשו להזדווגות. גילן של החולדות היה 12-15 חודשים. בעלי החיים התקבלו ממקורות מסחריים (ראו טבלת חומרים) ושוכנו בתנאים מבוקרים ובסביבה מועשרת עם גישה חופשית למים ולמזון סטנדרטי.
1. שאיבת רחם
הערה: לפרטים על הנוהל, עיין בדוחות12,13,15 שפורסמו בעבר.
- יש להשרות הרדמה עם איזופלורן וחמצן בתוך מיכל פרספקס סגור (14 ס"מ x 25 ס"מ x 13 ס"מ) למשך 1-2 דקות (איזופלורן 5% נפח ב-O2).
- מתן buprenorphine תת עורית (0.05 מ"ג / ק"ג) ו bupivacaine (0.5%, 8 מ"ג / ק"ג) תת עורית באזור החתך הבטני המתוכנן 30 דקות לפני הניתוח.
- לגלח את כל עור הבטן של החולדה עם מכונת גילוח חשמלית.
- השתמש בקלטות כדי לשמור על בעל החיים קבוע על צלחת חימום במהלך הניתוח. יש למרוח משחת עיניים על שתי העיניים.
- יש לשמור על הרדמה במהלך ההליך עם איזופלורן 2-4% נפח בחמצן על ידי מתן רציף דרך חרוט אף קטן.
- יש לעקוב אחר עומק ההרדמה לפי פרמטרים קליניים ללא כלים ייעודיים (קצב נשימה של ~70-120/דקה - ירידה איטית של 50% מקובלת במהלך ההרדמה; בדיקת עומק ההרדמה עם צביטת בוהן; צבע הריריות צריך להיות ורוד, לא כחול או אפור)16, ולהתאים את ריכוז האיזופלורן בהתאם.
הערה: אופציונלי: ניטור נשימה תכוף במהלך הניתוח אפשרי בעזרת עוזר. - יש לוודא את עומק ההרדמה על ידי ביצוע צביטת בוהן.
- נקו את עור הבטן בתנועה מעגלית עם שלושה מקלונים מתחלפים של תמיסת חיטוי ו-70% אלכוהול. הניחו לייבוש.
- מניחים וילון סטרילי (ראו טבלת חומרים) עם חלון בטן מעל החיה.
- לבצע laparotomy חציוני.
- פתח את הבטן דרך חתך באורך 6-8 ס"מ בקו האמצע, החל 0.5 ס"מ מתחת לקסיפסטרנום לכיוון ההיפוגסטריום. השתמש אזמל מס '10 עבור חתך העור מספריים קטנים וחדים עבור חתך linea alba. אין לפגוע בכבד או בשלפוחית השתן.
- הוציאו את המעיים מחוץ לחלל הבטן באמצעות צמר גפן, כסו אותם בעדינות בגזה רטובה במי מלח סטריליים, והגנו עליהם בשקית ניילון סטרילית לבידוד טוב יותר.
- הכנס retractors או קליפסים (ראה טבלה של חומרים) בתיקיות דופן הבטן השמאלית והימנית כדי לשמור על שריר הצפק בצד ואת הבטן פתוחה, כדי לקבל גישה אופטימלית ונראות של הרחם וכלי הדם הקשורים. תקן את הקליפים / retractors עם קלטות.
- החל מלוחים שחוממו מראש כדי לשמור על אזור הניתוח ואת המעיים לחים ולמנוע התייבשות של הקרביים.
- קצרו את קרן הרחם הימנית עם חלל הרחם וצוואר הרחם המשותף בתוספת פדיקור כלי דם, כולל הרחם הימני, הפנימי וכלי הדם האיליאק המשותף.
- Ligate (4/0 polyglactin; ראה טבלת חומרים), לצרוב ולנתק את קרן הרחם השמאלית הצמודה להסתעפות מחלל הרחם המשותף.
- הסר עודפי שומן סביב הרחם והנרתיק.
הערה: שמור את השומן סביב מערכת הרחם-כלי הדם. - לנתח את שלפוחית השתן בחיבורה לצוואר הרחם עם צריבה של כל כלי שלפוחית השתן ניקוז והזנה. במהלך הצריבה, לשמור על מרחק מספיק בין צוואר הרחם לבין הנרתיק כדי למנוע צריבה unncecessary על שני מבנים אלה. אחרת, הסיכון לנמק השתל עולה.
הערה: רוב המניפולציות הכירורגיות אמורות להשפיע על שלפוחית השתן. משוך או משוך את שלפוחית השתן באופן קאודלי עם מהדק כלי דם (ראה טבלת חומרים) כדי לקבל תצוגה טובה יותר של excavatio vesicouterina. - לצרוב ולנתק את כלי הרחם היורדים בגובה השופכן דיסטלי ככל האפשר לצוואר הרחם.
הערה: יש לשמור על מיקרו-סירקולציה סביב הנרתיק וצוואר הרחם ככל האפשר במהלך החלוקה. - יש להפריד את החלק הצווארי/נרתיקי של השתל העתידי מהחיבור הרקטלי ומהרצועות הפארא-וגינליות והפארא-צוואריות.
הערה: הימנע מכל צריבה על נרתיק השתל. - בזהירות לנתח את הנרתיק באמצעות diathermy סביב 2-3 מ"מ caudal של צוואר הרחם.
הערה: לא נראה וילי (צוואר הרחם) בתוך לומן הנרתיק. - אתר הן את עורק הרחם והן את הווריד במקורותיהם. Ligate (8/0 polyamide; ראה טבלה של חומרים), לצרוב ולנתק את כלי הדם gluteal ואת כל כלי הדם caudal של כלי הרחם.
הערה: קשירה ישירה של הווריד האיליאק המשותף לווריד הרחם אפשרית בדרך כלל. - על ידי דיסקציה קהה, שחררו את כלי הדם האיליאק המשותפים זה מזה, מהפיצול של אבי העורקים והווריד קאווה עד לחלוקת כלי הרחם.
הערה: ניתן לקבל גישה כירורגית טובה יותר לאזור על ידי הסרת בלוטת לימפה אחת או שתיים סמוכות. - הבלו את קרן הרחם הימנית 3 מ"מ מן החצוצרה, לאחר צריבת הפדיקור הרחם-שחלתי באותה רמה. זה מאפשר אנסטומוזה של קרן הרחם השתל לחלק העליון של קרן הרחם המקבלת.
- מניחים ליגטורות (8/0 פוליאמיד) ישירות סביב העורק האיליאק המשותף הימני ווריד, פרוקסימלי לביפורקציות אבי העורקים והקאוול. יש לבצע חתך קטן (0.5-1 מ"מ) בעורק האיליאק המשותף הימני הסמוך לביפורקציה, ולהחדיר מחט 30 גרם כפופה וקהה או מחט 25 גרם ישרה וקהה לתוך הלומן (לשטיפה). אבטח אותו עם ליגטורה (6/0 פוליאמיד).
הערה: אפשרות נוספת היא אבטחה נוספת עם מהדק בולדוג כדי למנוע תזוזה של המחט ו / או כלי. - יש לנתח את וריד האיליאק המשותף בצורה קאודלית של הרצועה בווריד האיליאק המשותף הימני כדי לאפשר יציאה במהלך השטיפה.
- יש לשטוף את השתל לפי השלבים הבאים.
- יש לשטוף את הרחם ידנית באמצעות מזרקים של 3 מ"ל עם כ-9 מ"ל של תמיסת רינגר קרה (RHX: רינגר בתוספת 50 IU/mL הפרין ו-0.4 מ"ג/מ"ל קסילזין) בקצב זרימה של 6 מ"ל/דקה. יש לשטוף שוב עם 6 מ"ל של תמיסת שימור איברים בתוספת הפרין (50 IU/mL) וקסילזין (0.4 מ"ג/מ"ל) (ראו טבלת חומרים).
הערה: הימנע מלחץ שטיפה גבוה וודא מיקום מחט תקין. - הסר את ההשתלה כאשר רקמת הרחם הפכה חיוורת. חותכים את העורק האיליאק המשותף בצורה קאודלית של הרצועה בהתפצלות של אבי העורקים הבטן.
- יש לשטוף את הרחם ידנית באמצעות מזרקים של 3 מ"ל עם כ-9 מ"ל של תמיסת רינגר קרה (RHX: רינגר בתוספת 50 IU/mL הפרין ו-0.4 מ"ג/מ"ל קסילזין) בקצב זרימה של 6 מ"ל/דקה. יש לשטוף שוב עם 6 מ"ל של תמיסת שימור איברים בתוספת הפרין (50 IU/mL) וקסילזין (0.4 מ"ג/מ"ל) (ראו טבלת חומרים).
- הכניסו את ההשתלה לתמיסת שימור איברים מקוררת (4°C) להכנת שולחן אחורי ואחסון לפני ההשתלה.
- לאחר הסרת השתל, הרדימו את בעל החיים על ידי הפיכת הגדרת האיזופלורן למקסימום ולאחר מכן גרימת דלקת ריאות דו-צדדית ואחריה exsanguination17.
2. השתלת רחם סינגנית
הערה: לפרטים על הנוהל, עיין בדוחות12,13,15 שפורסמו בעבר.
- יש להשרות הרדמה ולהכין את בעל החיים כאמור בשלב 1.1.
- מתן משככי כאבים יעילים (כמתואר בשלב 1.1.1) והפרין במשקל מולקולרי גבוה של 200 IU/kg 30 דקות לפני הניתוח.
- לבצע laparotomy חציוני.
- פתח את הבטן דרך חתך קו אמצע באורך 6-8 ס"מ החל 0.5 ס"מ מתחת לקסיפיסטרנום לכיוון ההיפוגסטריום. השתמש אזמל מס '10 עבור חתך העור מספריים קטנים וחדים עבור חתך linea alba. אין לפגוע בכבד ובשלפוחית השתן.
- העבירו את המעי הדק אל מחוץ לחלל הבטן באמצעות צמר גפן, עטפו אותם בגזה סטרילית ולחה וכסו אותם בשקית ניילון סטרילית לבידוד טוב יותר.
- הכנס retractors או קליפסים בתיקיות דופן הבטן השמאלית והימנית כדי לשמור על שריר הצפק בצד ואת הבטן פתוחה, כדי לקבל גישה אופטימלית ונראות של הרחם וכלי הדם הקשורים. תקן את הקליפים / retractors עם קלטות.
- החל מלוחים שחוממו מראש כדי לשמור על אזור הניתוח ואת המעיים לחים ולמנוע התייבשות של הקרביים.
- לבצע כריתת רחם עם דיסקציה וניוד של השליש העליון של הנרתיק מן פי הטבעת ואת שלפוחית השתן.
- צרוב את כלי הדם סביב הרחם, צוואר הרחם והנרתיק. לחתוך ולהפריד את הרחם מן המבנים הסובבים קרוב לאיבר כדי להגן על microcirculation של הרחם מרושע.
- הסר רקמת שומן מהסביבה.
- לקטוע את הקרן השמאלית על ידי צריבה. בצד ימין, לשמר קטע 7-8 מ"מ של החלק העליון של הרחם עבור אנסטומוזה מאוחרת יותר לשתל הרחם.
- לבצע השתלת רחם.
- לגייס ולהפריד את כלי הדם האיליאק המשותפים הימניים, ממוצא כלי הרחם ועד לביפורקציה של אבי העורקים/קוול.
- מקם את השתל בחלל הבטן. עטפו את השתל בגזה ספוגה בתמיסת שימור איברים קרה.
הערה: השתל צריך להישמר קר במהלך אנסטומוזיס. - הניחו מהדקי כלי דם א-טראומטיים על וריד האיליאק המשותף הימני בכל צד, תוך מסגור אתר האנסטומוזה העתידי.
הערה: הורידו את כמות ההרדמה לאיזופלורן של 1-1.5 וולט כדי להסתגל לירידה הפתאומית בהעמסת הלב המוקדמת וללחץ הדם הנובע מכך. - חותכים חריץ מעט גדול יותר מפתח וריד השתל לתוך וריד האיליאק המשותף.
- מקם את וריד השתל.
- הניחו תפר שהייה אחד (10/0 פוליאמיד; ראו טבלת חומרים) בכל פינה של החריץ בווריד האיליאק המשותף הימני.
הערה: שמור על קשר התפרים בפינה הקאודלית רופף לכוונון טוב יותר ולמניעת השפעות של חוטי ארנק. - יש לשטוף באופן קבוע את אזור האנסטומוזיס עם RHX מקורר במהלך ההליך כדי למנוע פקקת.
- אנסטומוז צד אחד של וריד השתל לווריד המקבל עם שש עד שמונה לולאות של תפר רציף (איור 1).
הערה: התחל עם תפר השהייה הגולגולתי (10/0 פוליאמיד) ותחילה אנסטומוזה את החלק הנכנס של כלי הדם. - אנסטומוס את הצד השני של הכלי באותו אופן, הפעם החל מבחוץ.
- קושרים קשר בתפר השהייה הגולגולתי, ולאחר מכן קשר בתפר השהייה הקאודלי (10/0 פוליאמיד), לאחר סיום האנסטומוזות משני הצדדים.
הערה: הדקו את התפרים הרציפים רק במידה הדרושה כדי למנוע השפעות של חוטי הארנק. - הניחו מהדקי כלי דם א-טראומטיים על העורק האיליאק המשותף הימני בכל צד, תוך מסגור אתר האנסטומוזה העתידי.
- בצע את האנסטומוזה העורקית (ארטריה איליאק משותפת ימנית [RCIA] באמצעות 8-10 לולאות באמצעות תפרים קטועים (10/0 פוליאמיד).
הערה: קל יותר לשלוט בתפרים קטועים מאשר בתפרים רציפים (אופציונלי בטכניקת "פה הדג")18. שטיפה מתמדת של אזור האנסטומוזיס עם RHX מקורר במהלך ההליך מסייעת במניעת פקקת. בעת שימוש בתפרים רציפים, בצע שלב זה המקביל לאנסטומוזה ורידית.
- בצע פרפוזיה של השתל.
- כאשר שני אתרי האנסטומוזה מופיעים כפטנט וכל דימום נעצר, שחררו את מהדקי כלי הדם על כלי הדם של השתל (איור 2).
- בדוק את השתל עבור סימנים של reperfusion, כגון אדמומיות, מילוי של הווריד, או פעימה בעורק השתל.
- חבר את השרוול הנרתיקי של ההשתלה לקמרון הנרתיק של המושתל באמצעות שישה עד שבעה תפרים קטועים תוך לומינליים (6/0 פוליגלקטין).
הערה: התחל עם תפר יחיד במצב השעה 12 תחילה, ומקם את התפרים הבאים במצב 10 ו -1. שני התפרים בעמדות 9 ו -3 צריכים להיות קשורים לאחר התפרים בשורה הראשונה19,20. - Anastomose קרן הרחם השתל מקצה לקצה למקטע הרחם הגולגולתי הנותר של הרחם המקבל באמצעות חמישה עד שבעה תפרים קטועים (7/0 פוליאמיד).
הערה: אין לתפור דרך הלומן.
- סגור את הבטן בתפר רציף. השתמש 4/0 polyglactin לתפירת שכבת השריר, ו 6/0 פוליאמיד או קליפסים פצע כירורגי עבור העור.
- תנו לבעל החיים להתאושש בכלוב מחומם לאחר השלמת ההשתלה. הישארו עם בעל החיים עד שחזר ליכולת השכיבה של עצם החזה, ושמרו על דיור יחיד עד להחלמה המלאה שלו. לספק טיפול משככי כאבים psotopertaive על ידי מתן תת עורי buprenorphine (0.05 מ"ג / ק"ג) ו NSAID מתאים, אבל לא לפני 4-8 שעות לאחר המנה הראשונה של הרדמה. לספק רציף עם buprenorphine באמצעות מי שתייה (1 מ"ג / ק"ג, דרך הפה, 5 מ"ל buprenorphine ב 160 מ"ל מי שתייה (0.3 מ"ג / מ"ל)) במשך שלושה ימים לאחר הניתוח.
- תפר העור מוסר 10-14 ימים לאחר הבדיקה.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
מוצגות תוצאות משתי קבוצות של חולדות. UTx בוצע לפני (קבוצה 1, n = 8) ואחרי (קבוצה 2, n = 8) התאמת פרוטוקול (טבלה 1) כדי להדגים את ההשפעות של השינויים שלנו (אנא עיין בדיון לקבלת הסבר על השינויים שלנו)12,15,21.
התוצאה של UTx חולדה קשורה לשלושה שלבים מרכזיים. השלב הראשון הוא התאוששות מוצלחת מ- UTx. בדרך כלל, הנמענים צריכים להתאושש בתוך 2 הימים הראשונים לאחר הניתוח. השלב השני מתייחס למצב הבריאותי של השתל שבועיים לאחר הניתוח, אשר מחליט על הכללתו בתהליך ההזדווגות (טבלה 2). השלב השלישי כולל הזדווגות ספונטנית ואחריה לידה מוצלחת כעדות לפוריות.
כל בעלי החיים משתי הקבוצות התאוששו ללא אירועים מהניתוח. בשלב השני, ארבעה בעלי חיים הוצאו מקבוצה 1 ושניים מקבוצה 2. ההדרה נבעה מפקקת שתלים וממורסה (n = 4 עבור קבוצה 1, n = 2 עבור קבוצה 2), ואנסטומוזיס רחם-רחם צר/פגום (בנוסף עבור n = 1, קבוצה 1) בבדיקה ברלפרטומיה (טבלה 2). Relaparotomy (לאורך הצלקת של laparotomy המקורי) בוצע עבור כל הנקבות 2 שבועות לאחר ההשתלה, כמו המראה הפיזי של בעלי החיים היה ערך קטן כאינדיקטור לבריאות השתל. בסך הכל, שיעור הישרדות השתל במשך שבועיים היה 50% ו-75% עבור קבוצות 1 ו-2, בהתאמה (טבלה 3).
במהלך שלב 3, ארבע נקבות מקבוצה 1 הותאמו להזדווגות עם זכרי לואיס, כ-9 שבועות לאחר UTx. שתי נקבות הראו סימני הריון (עלייה במשקל הגוף, איור 3; התנהגות קינון); עם זאת, לא נצפתה לידת חי. לאחר שני מחזורי הזדווגות של שלוש נקבות, נמצאו חלקי גוף של גורים (עצם ורקמות) בחולדה אחת (°1). בדיקה היסטולוגית של חלקי רקמות מוכתמים בהמטוקסילין ובאוזין על-ידי פתולוג וטרינרי גילתה שהגורים האלה התפתחו עד ללידה (איורים 4 ואיור 5).
שש נקבות מקבוצה 2 הזדווגו עם זכרי לואיס (ראו איור 6 לשינויים במשקל הגוף). שלוש מתוך שש החולדות (שתיים של לואיס ואחת של בראון נורבגיה) המליטו גורים, בעוד ששתיים נוספות הראו סימני הריון. ההמלטה הראשונה של נקבת חולדת לואיס (# 1) כללה שני גורים (איור 7). זמן קצר לאחר הלידה, נקבת לואיס נכנסה שוב להריון; אולם רק שניים מתוך שלושה גורים שרדו לאחר הלידה (איור 8). הסבר סביר אחד למוות היחיד הוא רצח תינוקות, שכן הוא מתרחש אפילו עם גורים בריאים בתנאים של לחץ לאחר לידה. באופן דומה, נקבת Brown Norway המליטה פעמיים, בכל פעם ארבעה גורים בכל מחזור הזדווגות (איור 9). מספר ההמלטה הגדול ביותר של קבוצה 2 נמסר על ידי נקבת לואיס אחרת , עם שבעה גורים לאחר מחזור ההזדווגות הראשון. כל הגורים ששרדו הציגו התפתחות נורמלית (איור 10).
בסך הכל, התאמת הפרוטוקול הגדילה את הישרדות השתל בשבועיים מ-50% ל-75%. חמש מתוך שש נקבות נכנסו להריון, בהשוואה לשתיים מתוך ארבע מקבוצה 1. כמו כן, שלוש מתוך שש נקבות המליטו גורים חיים לעומת אפס מתוך ארבע נקבות מקבוצה 1. לסיכום, הפרוטוקול המותאם שיפר הן את התוצאות הניתוחיות הישירות והן את שיעור לידות החי המוצלחות לאחר UTx (טבלה 4 ואיור 6).
איור 1: אנסטומוזה של השתל והווריד של הנמען. וריד האיליאק המשותף הימני (RCIV) של השתל מחובר ל- RCIV של המקבל באמצעות אנסטומוזה מקצה לצד (שלב 2.4). RCIA = עורק איליאק משותף ימני לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 2: אנסטומוזה של השתל והעורק המקבל. העורק האיליאק המשותף הימני (RCIA) מחובר ל- RCIA של המקבל באמצעות אנסטומוזה מקצה לצד (שלב 2.4). לאחר פתיחת שני מלחציים כלי הדם (2.5), העורק צריך להיות מחורר במלואו בהיעדר דימום חיצוני. חץ שחור: השתלת RCIA; חץ אדום: השתלת RCIV. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 3: שינויים במשקל הגוף לאחר הזדווגות של נקבות בקבוצה 1. ניטור משקל גוף של ארבע נקבות קבוצה 1 שהציגו שתל שלם לאחר relaparotomy. חיה אחת (°1) עברה המתת חסד במהלך ניתוח קיסרי כדי לבדוק את הרחם. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 4: בדיקה היסטולוגית של הרחם של חולדה מקבוצה 1 עם גורים מתים. חלקי גופות של גורים נמצאו בחולדה °1. בבדיקה התגלה רחם חיוני ומורחב, מה שמרמז על כך שהגורים התפתחו בצורה תקינה אך לא ניתן היה ללדת. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 5: חלקי גוף של גורים בתוך הרחם של חולדה מקבוצה 1 °1. השלב ההתפתחותי של העצמות היה עקבי עם גורים בהריון מלא. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 6: ניטור משקל גוף של שש נקבות מקבוצה 2 שהציגו שתל שלם לאחר רלפרוטומיה. כוכבים ירוקים מציינים אירועי לידה בודדים. מספרי האשטאג מתייחסים לנקבות הבודדות. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 7: לידת החי הראשונה אחרי UTx של חולדה בעקבות פרוטוקול שונה. שתי חולדות שזה עתה נולדו ואמם (ראש ימינה; לואיס נקבה #1, קבוצה 2). אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 8: ההמלטה השנייה לאחר מחזור ההזדווגות השני לאחר UTx של חולדה בעקבות הפרוטוקול שהשתנה. נקבה #1 (קבוצה 2) המליטה שלושה גורים, שניים מהם שרדו. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 9: ההמלטה הראשונה של חולדה נורבגית חומה אחרי UTx בעקבות הפרוטוקול שהשתנה. לאחר מחזור ההזדווגות הראשון, חולדת נורבגיה החומה (#2, קבוצה 2) המליטה ארבעה גורים, ואחריה ארבעה נוספים לאחר מחזור ההזדווגות השני. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 10: התפתחות גורים. כל הגורים ששרדו הראו התפתחות תקינה בגיל 3 שבועות. דוגמה מייצגת אחת מוצגת. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 11: היווצרות פקק נרתיקי לאחר הזדווגות מוצלחת. פקקים לבנים צריכים להיווצר כדי לכסות את הנרתיק לאחר ההפריה כדי למנוע הזדווגות נוספת. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
| בית 1 | בית 2 | UTx סינגני בחולדות | UTx אלוגני בחולדות | |
| לפני השינוי | לאחר שינוי | ראה הערה 12 | ר' הערה 15 | |
| המספר הכולל של בעלי חיים | 8 | 8 | 27 | 14 |
| הישרדות השתל שבועיים | 4/8 (50%) | 6/8 (75%) | 19/27 (70%) | 9/14 (64%) |
| מספר הנקבות המזווגות | 4/4 (100%) | 6/6 (100%) | 17/19 (89%) | 9/9 (100%) |
| הריון לטווח מלא | 1/4 (25%) | 5/6 (83%) | 11/17(65%) | 5/9 (56%) |
| המלטה נמסרה בהצלחה | 0 | 5א/ט> | 1 | 5 |
| המספר הכולל של גורים חיים | 0 | 20ב | 3ג | 25ד |
| הריון עד סוף עם לידת חי | 1 | 1ה | 10 | 2 |
טבלה 1: השוואת תוצאות של פרוטוקול שונה ללא שונה עבור UTx חולדה. א: שני הריונות על ידי אותה חולדה; ב: כולל הגור רוצח התינוקות; ג: חציון; ד: סכום החציון / המסירה; ה: גורים מתים בשלב ספיגה לאחר שלושה מחזורי הזדווגות.
| הגדרות כירורגיות | קבוצה 1 (n = 8) | קבוצה 2 (n = 8) |
| שלב הפרויקט | שלב ראשוני | שלב מאוחר |
| זמן אחסון קר | 2-3 שעות | 2-3 שעות |
| תמיסת שטיפה במהלך אנסטומוזה | RH | RHX |
| אנסטומוזה נרתיקית | 6/0 אתילון | 6/0 ויקריל |
| אנסטומוזה של קרן הרחם | תפר רציף חלקית | תפר קטוע |
| ארטריה אנסטומוזיס | תפר רציף | קטוע ומתמשך |
| מיקרו-וסקולריזציה סביב הנרתיק וצוואר הרחם | צריבה קרוב לרקמת הנרתיק/צוואר הרחם | צריבה בצורה יותר רחוקה |
טבלה 2: הגדרות כירורגיות קבוצה 1 לעומת קבוצה 2.
| קריטריוני אי-הכללה# |
| סימנים של פקקת (במיוחד סביב anastomoses) |
| הדבקה משמעותית |
| רחם מכווץ |
| סימני זיהום |
| נמק השתל |
טבלה 3: קריטריוני אי-הכללה להזדווגות. #Applied ב relaparotomy 2 שבועות לאחר UTx.
| n (קבוצה 1) | n (קבוצה 2) | |
| חיות | 8 | 8 |
| שתל בריא לאחר שבועיים | 4 | 6 |
| זיווג | 4 | 6 |
| הריון לטווח מלא | 1 | 5 |
| המלטה נמסרה בהצלחה | 0 | 5א |
| המספר הכולל של גורים חיים | 0 | 20ב |
| הריון עד סופו, לא לידת חי | 1 | 0 |
טבלה 4: תוצאות קבוצה 1 לעומת קבוצה 2. ת: שני הריונות רצופים באותה חולדה; ב: כולל הגור שנהרג על ידי רצח תינוקות.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
הפרוטוקול המוצג כאן מציע הוראות מפורטות לגישה הניתוחית מאחורי השתלת רחם בחולדות. הפרוטוקול עבר אופטימיזציה כדי להגדיל את הסיכויים ללידות חי לאחר UTx וההזדווגות שלאחר מכן. הפרוטוקול המקורי נלקח מקבוצת Brännström 12,13, בהשראת עבודת העכבר של Akouri et al.10, ושונה בהתבסס על חוויות המחברים בשנים האחרונות. ככאלה, השינויים הונעו על ידי עקומות למידה אמיתיות המשקפות את ההתפתחות מהשתלות כושלות לתוצאות הניתנות לשחזור.
שינויים עיקריים שעשויים להיות מכריעים היו: (1) הוספת קסילזין לתמיסת השטיפה במהלך שאיבת איברים ואנסטומוזה, אשר עוררה התרחבות כלי דם והובילה להפחתת סיכונים טרומבוטיים. (2) שימוש בתפרים קטועים לאנסטומוזה עורקית מקצה לצד. תפרים קטועים לא רק מגבירים את השליטה הכירורגית על הפטנט ונמנעים מהשפעות של חוטי ארנק, אלא גם מאפשרים הרחבה לאחר מכן של האזור האנסטומוטי כדי להגביר את זרימת הדם דרך הרחם הארטרי. (3) יישום תפרים קטועים ובלתי נספגים באנסטומוזה של קרן הרחם עם תפירה רק בתוך שכבת ההיקף; שינוי זה מונע התכווצות של דופן הרחם, אשר עלול לעכב הפריה מאוחרת יותר. (4) שימוש בחומר תפר נספג לאנסטומוזה נרתיקית מפחית את הסיכון להיצרות נרתיקית ובכך מגדיל את הסיכוי ללידות חי. (5) ביצוע כל מניפולציה כירורגית רחוק ככל האפשר מהנרתיק וצוואר הרחם הוא צעד חיוני כדי למנוע הצטלקות בנרתיק ולהגדיל את הסיכויים ללידות חי. (6) קשירה ישירה של וריד ואיליאק משותף ימני במקום קשירת הווריד הנבוב, אבי העורקים הבטני ועורק הווריד האיליאק המשותף השמאלי. קשירה ישירה לווריד הרחם היא, ברוב המקרים, אפשרית; הקשירה הישירה מפשטת את רכישת האיברים ומקצרת את זמני הניתוח מבלי להשפיע לרעה על תוצאות ההשתלה. (7) הורדת ריכוז האיזופלורן ל-1%-1.5% נפח מיד לאחר הידוק הווריד האיליאק המשותף (שלב 2.4.3) היא גם קריטית, אחרת עלול להתרחש מוות לבבי.
הנקודות לעיל הן המרכיבים העיקריים המבדילים את הפרוטוקול הנוכחי מהגישה אולי הנפוצה ביותר שתוארה על ידי הקבוצה השבדית10,12,13. אמצעים אלה היטיבו עם נקודת הקצה הסופית של UTx, לידת החי, כפי שעולה מההשוואה הקבוצתית (פרוטוקול מקורי לעומת פרוטוקול שונה; ראה טבלה 1). ברור שעקומת הלמידה הכירורגית לאורך זמן הוסיפה גם היא לתוצאות טובות יותר; עם זאת, קשה להעריך את תרומתו.
בנוסף לטכניקה כירורגית קפדנית, טיפול לאחר הניתוח הוא גם קריטי לתוצאה הסופית. טיפולים לאחר הניתוח עוקבים אחר הפרוטוקול המקומי המתאים; ההוראות כאן ממליצות על 0.05 מ"ג/ק"ג בופרנורפין לאחר שהמושתל מתעורר מההרדמה, ובמהלך היום הראשון שלאחר הניתוח אם הוא סובל מכאב כפי שהוגדר בהערכת הניקוד שלנו. קריטריוני הניקוד מבוססים על התנהגות (פעילות, נשימה, פרווה, יציבה, פצע) ומשקל גוף. מיד לאחר הניתוח, סימנים חיוביים של התאוששות הם חזרה של צבע ורוד של הגפיים והאוזניים, כמו גם חזרה של צבע אדום של העיניים. בהתחשב באורכו של הליך ההשתלה, מעקב קבוע במהלך 3 השעות הראשונות לאחר ההשתלה הוא קריטי. אם קריטריוני ההערכה אינם מתקיימים במהלך 3 שעות אלה, בעל החיים מורדם כדי למנוע סבל נוסף. המעקב נמשך שלוש פעמים ביום במשך 3 הימים הראשונים לאחר הניתוח. אם החיה אינה מתאוששת לחלוטין במהלך היומיים הראשונים, היא מורדמת. בהתאם למצבו, החיה נשארת בדיור אחד במשך 2-3 ימים לאחר הניתוח.
תנאים סטריליים במהלך הניתוח הם היבט נוסף הרלוונטי לתוצאות מוצלחות. שגרת היגיינה קפדנית היא חובה כדי למזער את סיכוני הזיהום. בעת הכניסה למתקן בעלי החיים, יש לשטוף היטב את הידיים לפני שמתלבשים בסרבל נקי, מסכת פנים, כפפות וכובע. כל אזור הניתוח מחוטא במטוש מיוחד המכיל בנזיל-C12-18-אלקילדימתילאמוניום כלוריד, דידצילדימתילאמוניום כלוריד וגלוטאראלדהיד. לאחר מכן מתבצע חיטוי נוסף באתנול 70%. לפני כל מניפולציה כירורגית, הכפפות מנוקות לזמן קצר עם 70% אתנול, והאזור המקיף את אתר הניתוח מכוסה בשפשוף סטרילי. אמצעים אלה מסייעים מאוד למזער את סיכוני הזיהום.
אחת הבעיות עם הצלחת צאצאים היא הקושי לעקוב אחר הריון בפועל. עלייה במשקל הגוף עשויה להעיד על הריון, אך יכולה לנבוע גם מרצח תינוקות ובדרך כלל אינה משקפת באופן אמין את מצב הנקבה. לדוגמה, רק שינויים מתונים במשקל הכללי נראו עבור קבוצה 1 במהלך הניטור. חיות 3 ו-4 הציגו עליות משקל דומות במהלך שני מחזורי ההזדווגות, אולם רק חיה 4 הייתה בהריון לאחר רלפרוטומיה (איור 3 ואיור 4). יתר על כן, ירידה במשקל לאחר מחזור ההזדווגות הראשון עם לידה נעדרת עשויה להצביע על ספיגת הריון. למרות שעדיין לא ברור מדוע ספיגת רקמות גורמת לירידה במשקל, תופעה זו נצפתה שוב ושוב בקרב מושתלי UTx חולדות12. גם היווצרות פקק נרתיקי לאחר הזדווגות מוצלחת (איור 11) נעדרה לעתים קרובות ולא הראתה מתאם לשינויים מאוחרים יותר במשקל הגוף. בהתחשב בערך הקטן בסימון הריון, תדירות ניטור משקל הגוף הופחתה בקבוצה 2 כדי למזער את החשיפה ללחץ של בעלי חיים. תוצאה נוספת של נוכחות תקע לא עקבית ושינויים במשקל הייתה הגדרה לא אמינה של זמן ההתעברות. תאריכי היעד ללידות חושבו אפוא באמצעות היוםהשני לאחר חשיפת הזכר כיום ההתעברות. באופן מעניין, שינויים במשקל הגוף בקבוצה 2 היו בקורלציה טובה יחסית עם מהלך ההריון, כאשר הלידה התאפיינה בירידה ברורה במשקל (איור 6).
השוואת שינויים במשקל הגוף (איור 6) של חיות 1, 2 ו-3 (בהריון) עם חיות 5 ו-6 (שמעולם לא היו בהריון) ממחישה יפה את ההשפעות של הריון ולידות חי לעומת הזדווגות לא מוצלחת. הסיבה מאחורי התנהגות משקל הגוף השונה בקבוצה 2 בהשוואה לקבוצה 1 עדיין אינה ברורה. עם זאת, שינויים במשקל עשויים להיות אמינים יותר פשוט בשל המספר הגבוה יותר של הריונות לטווח מלא בקבוצה 2. שיעור ההריונות הנמוך בקבוצה 1 עשוי להיות קשור להיצרות הנרתיק, שהייתה מיוצגת יתר על המידה ביחס לקבוצה 2 (טבלה 3) ומהווה גורם לפגיעה בהתעברות. השכיחות הסטנוטית המופחתת בקבוצה 2 עשויה לנבוע משימוש בתפרים שאינם נספגים במקום נספגים עבור אנסטומוזה נרתיקית, ככל הנראה יחד עם מניפולציה כירורגית משופרת במהלך דיסקציה נרתיקית בקבוצה זו.
בניגוד לגישה השוודית10,12, הפרוטוקול המתואר כאן משתמש בפתרון IGL-1 (מכון ז'ורז' לופז) לאחסון שתלים במקום רינגר או פתרונות אחרים. בעוד ההשפעה המדויקת של פתרון IGL-1 על תוצאות UTx אינה ידועה, דיווחים שונים מציעים יתרונות כוללים בהשתלה ניסיונית עבור פתרוןזה 22,23,24,25. לבסוף, כמה שלבי פרוטוקול שבוצעו בדרך כלל עבור UTx12 לא השפיעו על התוצאות אם דילגו עליהם. אלה כוללים את הגזירה בקרן הרחם השמאלית או הימנית ואת החלפת הפרין לאחר הניתוח, אשר המחברים רואים אופציונלי.
מגבלה אחת הטבועה ב- UTx ניסיוני תקפה גם לפרוטוקול המוצג. ההליך גוזל זמן, ושאיבת איברים ואחריה השתלה יכולה להימשך עד 6 שעות. לכן, UTx חולדה דורש ריכוז מלא במשך מספר שעות על מנת לבצע כל צעד ללא רבב. האחרון נשאר ההיבט החשוב ביותר של הצלחה. תשומת לב כזו יכולה להיות מושגת בתנאי שהמיומנויות המיקרוכירורגיות מפותחות במלואן ומתורגלות ברציפות. כמו כן, סבלנות וסיבולת הן תכונות מפתח כדי למנוע טעויות במהלך ההליך כולו. תוצאה נוספת של ההליך הממושך היא שניתן לנתח רק בעל חיים אחד ביום. תכנון קפדני והתמקדות בשאלות מפתח מסייעים לפתח עיצוב מחקר פרודוקטיבי. באופן כללי, מומלץ להשיג הישרדות השתל מעל 70% לפני התחייבות לסדרת הניסויים בפועל כדי להבטיח שהממצאים יהיו חזקים מספיק. לבסוף, ייתכן שתרצה לשקול מחדש לידת חי כנקודת סיום. השכיחות הגבוהה של היצרות נרתיקית וספיגת הריון12 מגדילות באופן משמעותי את מספר UTxs הדרוש להשגת תוצאות משמעותיות. תלוי בשאלת הניסוי, נקודות קצה אחרות, כגון הישרדות השתל, עשויות להיות יעילות יותר.
למרות היישום הגובר שלה, UTx נשאר יישום ניסיוני גם במרפאה. מלבד הצורך בגישות כירורגיות משופרות ובאסטרטגיות לדיכוי מערכת החיסון, השימוש בשתלים מתורמים שנפטרו, בפרט, הוא תחום הדורש מחקר נוסף. אסטרטגיות להפחתת פגיעה איסכמית אינן מבוססות, אך יתקבלו בברכה להרחבת מאגרי תורמים פוטנציאליים. ואכן, ההשפעה של איסכמיה על הרחם אינה נחקרת כראוי, כאשר הידע היישומי מסתמך על ממצאים מאיברים אחרים26,27. Rat UTx מציעה אמצעי לחקור פגיעה איסכמית בסביבה מבוקרת תוך שימוש בגישות המותאמות למרפאה28,29. יש לציין כי תרומה חיה קשורה לסיכונים מסוימים; לתורמים יש שיעור גבוה של סיבוכים כירורגיים, כגון טראומה בדרכי השתן ובמעיים. בהתאם לכך, הביקוש לתרומות מתות ולמחקריו גדלב-5,30.
שאלות רבות נוספות קיימות כאשר UTx חולדה יכול להיות אינפורמטיבי. לדוגמה, מערכת החולדות מציעה הזדמנות לזהות ו / או לאמת סמנים ביולוגיים שניתן להשתמש בהם כדי לפקח באופן לא פולשני על מהלך השתלות הרחם במרפאה. התפתחויות חברתיות אחרונות עשויות ליצור שאלות חדשות היכן מודל החולדות עשוי להיות שימושי. UTx מקודם כעת גם עבור אנשים טרנסג'נדרים, כאשר האנטומיה הגברית מבקשת גישות כירורגיות מותאמות31.
לסיכום, מוצג פרוטוקול חדש של UTx חולדות המבוסס על עבודת מכרסמים קיימת ושונה על ידי ניסיון מעשי. לפרוטוקול המתוקן יש סבירות גבוהה ל- UTx של חולדות וכתוצאה מכך ללידות חי - בתנאי מיומנויות מיקרוכירורגיות מספיקות ותרגול. UTx הוא אולי המורכב ביותר מבין הליכי ההשתלה הגדולים. ההוראות המתוארות יתווספו לפרוטוקול משותף, שחסר כיום אך נחוץ כדי לבסס את הנוהל התובעני של UTx חולדות בקרב קהילת המחקר.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
המחברים מצהירים כי אין להם אינטרסים מתחרים.
Acknowledgments
מחקר זה נתמך על ידי הקרן הלאומית השוויצרית למדע (מענק פרויקט מס' 310030_192736). ברצוננו להודות לד"ר פראוקה סיהוסן מהמכון לפתולוגיה וטרינרית של אוניברסיטת ציריך על תמיכתה ההיסטופתולוגית.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Angled to Side Scissor 5 mm | F.S.T | 15008-08 | |
| Big Paper Clip | No specific | Used as retractor | |
| Blunt Bend Needle G30 | Unimed S.A. | ||
| Bupivacain 0.5% | Sintetica | ||
| Buprenorphine 0.3 mg/mL | Temgesic | ||
| Dosiernadel G25 | H.SIGRIST& PARTNER AG | ||
| Dumont #5SF Forceps | F.S.T | 11252-00 | |
| Ethilon 10/0 | Ethicon | 2810G | |
| Ethilon 6/0 | Ethicon | 667H | |
| Ethilon 7/0 | Ethicon | EH7446H | |
| Ethilon 8/0 | Ethicon | 2808G | |
| Femal Brown Norway Rats (150-170 g) | Janvier | ||
| Femal Lewis Rats (150-170 g) | Charles River Deutschland | ||
| Fine Scissors - Sharp | F.S.T | 14060-09 | Any other small scissor works too |
| Halsey Micro Needle Holder | F.S.T | 12500-12 | Any other small needholder works too |
| Heparin Natrium 25000 I.E./ 5 mL | B. Braun | ||
| Institute Georges Lopez Perfusion Solution (IGL) | Institute Georges Lopez | Organ preservation solution | |
| Male Lewis Rats (300-320 g) | Charles River Deutschland | ||
| Micro Serrefines 13 mm | F.S.T | 18055-04 | |
| Micro Serrefines 16 mm gebogen | F.S.T | 18055-06 | |
| Micro-Serrefine Clamp Applicator with Lock | F.S.T | 18056-14 | |
| Mölnlyncke Op Towel | Mölnlyncke | 800300 | Sterile drape |
| NaCl 0.9% | B.Braun | ||
| Octenisept | Schülke | ||
| Paper Tape | Tesa | For fixing the animal | |
| Philips Avent Schneller Flaschenwärmer SCF358/02 | Philips | 12824216 | |
| Ringerfundin | B.Braun | ||
| Rompun 2% | Bayer | Xylazine | |
| Round Handled Needle Holders | F.S.T | 12075-12 | |
| Round Handled Needle Holders | F.S.T | 12075-12 | |
| S&T Vessel Dilating Forceps - Angled 45° | F.S.T | 00276-13 | |
| Sacryl Naht | KRUUSE | 152575 | |
| Scapel No 10 | Swann Morton | 201 | |
| Small Histo-Container | Any small histo-container works fine-for coldstorage of the graft | ||
| Small Plastik Bags | Any transparant plastic bags are fine | ||
| Steril Cotton swab | Lohmann-Rauscher | Any steril cotton swab is fine | |
| Sterile Gauze | Lohmann-Rauscher | Any steril gauze is fine | |
| Straight Scissor 8mm | F.S.T | 15024-10 | |
| Surgical microscope – SZX9 | Olympus | OLY-SZX9-B | |
| Sutter Non Stick GLISS 0.4 mm | Sutter | 78 01 69 SLS | |
| Suture Tying Forceps | F.S.T | 00272-13 | |
| ThermoLux warming mat | ThermoLux | ||
| Tissue Forceps for Skin | Any tissue forceps are fine | ||
| Vesseldilatator Forceps | F.S.T | 00125-11 | |
| Vicryl plus 4/0 | Ethicon | VCP292H |
References
- Richards, E. G., et al. Uterus transplantation: state of the art in 2021. Journal of Assisted Reproduction and Genetics. 38 (9), 2251-2259 (2021).
- Jones, B. P., et al. Options for acquiring motherhood in absolute uterine factor infertility; adoption, surrogacy and uterine transplantation. The Obstetrician & Gynaecologist. 23 (2), 138-147 (2021).
- Brannstrom, M., et al. The first clinical trial of uterus transplantation: surgical technique and outcome. American Journal of Transplantation. 14, 44 (2014).
- Ejzenberg, D., et al. Livebirth after uterus transplantation from a deceased donor in a recipient with uterine infertility. Lancet. 392 (10165), 2697-2704 (2018).
- Lavoue, V., et al. Which donor for uterus transplants: brain-dead donor or living donor? A systematic review. Transplantation. 101 (2), 267-273 (2017).
- O'Donovan, L., Williams, N. J., Wilkinson, S. Ethical and policy issues raised by uterus transplants. British Medical Bulletin. 131 (1), 19-28 (2019).
- Kisu, I., et al. Long-term outcome and rejection after allogeneic uterus transplantation in cynomolgus macaques. Journal of Clinical Medicine. 8 (10), 1572 (2019).
- Ozkan, O., et al. Uterus transplantation: From animal models through the first heart beating pregnancy to the first human live birth. Womens Health. 12 (4), 442-449 (2016).
- Favre-Inhofer, A., et al. Involving animal models in uterine transplantation. Frontiers in Surgery. 9, 830826 (2022).
- El-Akouri, R. R., Wranning, C. A., Molne, J., Kurlberg, G., Brannstrom, M. Pregnancy in transplanted mouse uterus after long-term cold ischaemic preservation. Human Reproduction. 18 (10), 2024-2030 (2003).
- Sahin, S., Selcuk, S., Eroglu, M., Karateke, A. Uterus transplantation: Experimental animal models and recent experience in humans. Turkish Journal of Obstetrics and Gynecology. 12 (1), 38-42 (2015).
- Wranning, C. A., Akhi, S. N., Diaz-Garcia, C., Brannstrom, M. Pregnancy after syngeneic uterus transplantation and spontaneous mating in the rat. Human Reproduction. 26 (3), 553-558 (2011).
- Wranning, C. A., Akhi, S. N., Kurlberg, G., Brannstrom, M. Uterus transplantation in the rat: Model development, surgical learning and morphological evaluation of healing. Acta Obstetricia et Gynecologica Scandinavica. 87 (11), 1239-1247 (2008).
- Brannstrom, M., Wranning, C. A., Altchek, A.
- Diaz-Garcia, C., Akhi, S. N., Wallin, A., Pellicer, A., Brannstrom, M. First report on fertility after allogeneic uterus transplantation. Acta Obstetricia et Gynecologica Scandinavica. 89 (11), 1491-1494 (2010).
- R, E., Brown, M. J., Karas, A. Z. Anesthesia and Analgesia in Laboratory Animals. 2nd edn. , Elsevier. (2008).
- Donovan, J., Brown, P.
- Rutledge, C., Raper, D. M. S., Abla, A. A. How I do it: superficial temporal artery-middle cerebral artery bypass for flow augmentation and replacement. Acta Neurochirurgica. 162 (8), 1847-1851 (2020).
- Kuo, S. C. -H., et al. The multiple-U technique: a novel microvascular anastomosis technique that guarantees everted anastomosis sites with solid intima-to-intima contact. Plastic and Reconstructive Surgery. 149 (5), 981 (2022).
- Magee, D. J., Manske, R. C. Pathology and Intervention in Musculoskeletal Rehabilitation. 2nd edn. , Elsevier. 25-62 (2016).
- Diaz-Garcia, C., Johannesson, L., Shao, R. J., Bilig, H., Brannstrom, M. Pregnancy after allogeneic uterus transplantation in the rat: perinatal outcome and growth trajectory. Fertility and Sterility. 102 (6), 1545-1552 (2014).
- Canovai, E., et al. IGL-1 as a preservation solution in intestinal transplantation: a multicenter experience. Transplant International. 33 (8), 963-965 (2020).
- Habran, M., De Beule, J., Jochmans, I. IGL-1 preservation solution in kidney and pancreas transplantation: A systematic review. PLoS One. 15 (4), 0231019 (2020).
- Mosbah, I. B., et al. IGL-1 solution reduces endoplasmic reticulum stress and apoptosis in rat liver transplantation. Cell Death & Disease. 3 (3), 279 (2012).
- Wiederkehr, J. C., et al. Use of IGL-1 preservation solution in liver transplantation. Transplantation Proceedings. 46 (6), 1809-1811 (2014).
- Tilney, N. L., Guttmann, R. D. Effects of initial ischemia/reperfusion injury on the transplanted kidney. Transplantation. 64 (7), 945-947 (1997).
- de Rougemont, O., Dutkowski, P., Clavien, P. A. Biological modulation of liver ischemia-reperfusion injury. Current Opinion in Organ Transplantation. 15 (2), 183-189 (2010).
- Jakubauskiene, L., et al. Relaxin and erythropoietin significantly reduce uterine tissue damage during experimental ischemia-reperfusion injury. International Journal of Molecular Sciences. 23 (13), 7120 (2022).
- Wang, Y., Wu, Y., Peng, S. Resveratrol inhibits the inflammatory response and oxidative stress induced by uterine ischemia reperfusion injury by activating PI3K-AKT pathway. PLoS One. 17 (6), 0266961 (2022).
- Kisu, I., et al. Risks for donors in uterus transplantation. Reproductive Sciences. 20 (12), 1406-1415 (2013).
- Jones, B. P., et al.
