Summary
הפרוטוקול הנוכחי מתאר את ההשרייה והניקוי של עצם הגופה באמצעות טכניקת טבילה באמבט מים חמים אטומה בוואקום. זוהי שיטה זולה, בטוחה ויעילה לייצור דגימות אנטומיות לתכנון כירורגי וחינוך רפואי כחלופה למודלים מודפסים תלת מימדיים (תלת ממדיים).
Abstract
מודלים של עצמות משרתים מטרות רבות, כולל שיפור ההבנה האנטומית, תכנון כירורגי טרום ניתוחי והפניה תוך ניתוחית. תוארו מספר טכניקות להשרייה של רקמות רכות, בעיקר לניתוח פורנזי. עבור מחקר קליני ושימוש רפואי, שיטות אלה הוחלפו על ידי מודלים מודפסים תלת מימדיים (3D), אשר דורשים ציוד משמעותי ומומחיות, והם יקרים. כאן, עצם חוליית הכבשה הגופית נוקתה על ידי אטימת ואקום של הדגימה עם חומר ניקוי מסחרי לשטיפת כלים, טבילה באמבט מים חמים, ולאחר מכן הסרה ידנית של הרקמה הרכה. זה ביטל את החסרונות של שיטות השרייה שהיו קיימות בעבר, כגון קיומם של ריחות רעים, שימוש בכימיקלים מסוכנים, ציוד משמעותי ועלויות גבוהות. הטכניקה המתוארת הפיקה דגימות נקיות ויבשות תוך שמירה על פרטים ומבנה אנטומיים כדי למדל במדויק את מבני הגלוסקמאות שיכולים להיות שימושיים לתכנון טרום ניתוחי והפניה תוך ניתוחית. השיטה פשוטה, זולה ויעילה להכנת מודל עצם לחינוך ותכנון כירורגי ברפואה וטרינרית ואנושית.
Introduction
הסרת רקמות רכות וניקוי עצמות נדרשים לזיהוי פלילי, מחקר רפואי וביולוגי וחינוך וטרינרי ורפואי. רוב הטכניקות פותחו למטרות פורנזיות, למזער את הנזק לעצם כדי לשמר פרטים רבים ככל האפשר. זה יכול לספק מודל עצם מדויק ומוחשי לתכנון כירורגי לפני הניתוח, כמו גם קבלת החלטות תוך ניתוחית כדי לסייע במזעור סיבוכים 1,2,3. זה מועיל בניתוח על ידי קיצור זמני הניתוח ואיבוד דם ושיפור התקשורת בין המנתחים, בהשוואה לתכנון עם תמונות דו-ממדיות4. השימוש במודלים אלה עשוי גם להפחית את ההסתמכות על הדמיה תוך ניתוחית, כגון פלואורוסקופיה, אשר עשויה להפחית את החשיפה לקרינה לאנשי צוות.
עצמות שלד מגופות שימשו בעבר לדגמים אלה; עם זאת, ההתקדמות הטכנולוגית דחפה לשימוש בדגמים מיוצרים, ולאחרונה, מודלים מודפסים תלת מימדיים (3D). מודלים של עצמות מסתמכים על זמינותן של דגימות גופות ועל יעילות עיבוד דגימות אלה למודלים שמישים. להדפסה תלת-ממדית יש יתרון של חופש יצירתי, המאפשר מודלים אנטומיים וספציפיים למטופל, במיוחד כאשר קיימות הפרעות אנטומיות או גידולים, או אם יש צורך לייצר או להגדיל את החומרה כך שתתאים למטופל1. דגימות אלה ניתנות גם לעיקור ומניפולציה על ידי מנתחים במהלך הליך. עם זאת, חופש זה מגיע עם עלות, כפי שהוא דורש סריקות טומוגרפיה ממוחשבת (CT), החומרים והציוד הנדרש יכול להיות יקר, ומומחיות חיונית כדי ליצור את המודלים בתוכנה הנדרשת 1,4. בנוסף, גורמים אלה יכולים להגביל את הדיוק והאיכות של המודל, ומכאן התכנון הניתוחי והצלחתו1. מודלים מודפסים בתלת-ממד עשויים שלא להיות הבחירה הטובה ביותר במקרים בהם אין צורך באנטומיה ספציפית למטופל וכאשר יש דרישה מיידית לדגם.
שיטות נפוצות להסרת רקמות רכות מעצם cadaveric כוללות ניקוי ידני, maceration חיידקים, maceration כימי, בישול, ו macerationחרקים 5,6. ההצלחה של שיטות אלה מבוססת בדרך כלל על עלות, זמן, עבודה, ציוד, בטיחות ואיכות המוצר הסופי 5,7. ניקוי ידני דורש את מירב העבודה וכמות משמעותית של זמן, אך כרוך בציוד מינימלי5. מקרציה חיידקית מורכבת מהשארת הדגימה באמבט מים קרים או חמים לפרקי זמן ארוכים, לעתים קרובות עד 3 שבועות, מה שמאפשר לחיידקים לפרק את הרקמה6. זה יוצר ריחות לא נעימים, דורש ציוד נוסף לטיפול בחיידקים, ויוצר סיכון ביטחוני ביולוגי למשתמש 5,6. השימוש בחיפושיות דרמסטיות יעיל מאוד עם עבודה מינימלית, אך דורש רכישת מושבה וגידול בעלי חיים, ואינו נחשב להשקעה כלכלית אם משתמשים בו לעתים רחוקות 6,7. השרייה כימית כרוכה בדרך כלל בשימוש באנזימים כגון טריפסין, פפסין ופפאין, או דטרגנטים מסחריים המכילים חומרים כגון פעילי שטח ואנזימים 5,8. למרות ששיטה זו מספקת תוצאות מהירות יותר, הכימיקלים המשמשים, כגון נתרן הידרוקסידי, אמוניה, אקונומיקה ובנזין, עלולים להוות סיכון בריאותי ובטיחותי ולייצר ריחות מזיקים הדורשים ציוד מגן אישי (PPE) ומכסה אדים 5,7,8,9. לבסוף, חימום ממושך מספק שיטה נוספת בעלת אינטנסיביות מינימלית אך עלול לייצר ריחות הדורשים אוורור10.
שיטה פשוטה, בטוחה וזולה להכנת מודלים אנטומיים של עצמות תספק כלי שימושי למנתחים, סטודנטים, מחנכים וחוקרים. מאמר זה מתאר שיטה חדשנית להכנת מודלים של עצמות שלד המונעת ריחות לא נעימים וכימיקלים מזיקים, ומייצרת מודל כירורגי מפורט עם מינימום ציוד ועבודה.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
קוצים מותניים נקטפו ממרינו קרוס בוגר בן 4 (Ovis aries) בהתאם להנחיות האתיות של ועדת הטיפול והאתיקה בבעלי חיים של מעבדות המחקר הכירורגיות והאורתופדיות. בעקבות השיטה המאושרת במוסד של המתת חסד הומנית, קוצרו עמוד השדרה המותני באמצעות כלי דיסקציה חד, תחילה דרך העור והרקמות התת עוריות, ולאחר מכן הפאשיה והשרירים לפני פירוק בצומת תורקולומבר ובלומבוסקרל. דגימה שנקטפה מוצגת באיור 1A.
1. הכנה לאמבטיה הראשונית
- יש להסיר ידנית רקמות רכות (שריר, רקמת חיבור, שומן וכו') באמצעות כלי דיסקציה חדה (להב אזמל מספר 22) מדגימת העצם לפני המשך העיבוד.
הערה: שלב זה הוא אופציונלי; עם זאת, הסרת רקמות רכות רבות ככל האפשר מפחיתה את הזמן שלוקח לאמבט המים להייס את הרקמות. גודל הדגימה (~ 20 ס"מ x 10 ס"מ x 8 ס"מ) מצטמצם גם הוא; לכן, ניתן להכניס דגימות נוספות לאמבטיה. - אטמו את הדגימה בשקית ניילון אטומה הניתנת לאטימה בחום לאחר הוצאת האוויר. מומלץ להשתמש בשקית ואקום באמצעות מכשיר מסחרי לאיטום ואקום (ראו טבלת חומרים).
הערה: אין צורך בתוספים עבור האמבטיה הראשונית של 24 שעות. אם יש שריר משמעותי שמכסה את כל משטחי העצם, ואם יש כבר רקמה רכה מינימלית ורוב משטחי העצם בדגימה חשופים, המשיכו לשלב 3.2 (איור 1B).
2. נוהל האמבטיה הראשונית
- יש לטבול לחלוטין את הדגימה האטומה באמבט מים בטמפרטורה של 70 מעלות צלזיוס למשך 24 שעות.
- לאחר 24 שעות, הוציאו את השקית מהאמבטיה, פתחו את השקית והניחו לדגימה להתקרר עד שניתן יהיה לטפל בה.
3. הכנה לאמבטיות הבאות
- הוציאו כמה שיותר רקמות רכות מהעצם בעזרת אזמל חד ומים זורמים לפי הצורך.
- לפרק את כל המפרקים באמצעות אזמל חד כדי לחשוף את רקמת הסחוס.
- שמור את החלקים המפורקים באתרם באמצעות חומר כגון חוט אורתופדי או אזיקונים (ראה טבלת חומרים) כדי לשמור על המיקום האנטומי.
- אטמו את הדגימה בשקית ואקום יחד עם 10 מ"ל חומר ניקוי לשטיפת כלים (ראו טבלת חומרים) ו-10 מ"ל מי ברז.
הערה: נפח חומר הניקוי תלוי בחוזק, בריכוז ובגודל הדגימה.
4. נוהל לאמבטיות הבאות
- יש לטבול לחלוטין את הדגימה האטומה באמבט מים בטמפרטורה של 70 מעלות צלזיוס למשך 24 שעות.
- לאחר 24 שעות, הוציאו את השקית מהאמבטיה, פתחו את השקית והניחו לדגימה להתקרר עד שניתן יהיה לטפל בה.
- הימנעו מלתת לדגימה להתקרר לחלוטין, מכיוון שהדבר מאפשר לסחוס מרוכך להתקשות ולהיצמד לעצם, מה שהופך קשה יותר להסרה.
הערה: הזמן הדרוש לעיבוד הדגימה עשוי להשתנות בהתאם לגודל ולסוג, והסרה חוזרת ונשנית של אמבטיות עוקבות עשויה להיות מיותרת. בנוסף, הדגימה יכולה להישאר באמבטיה לפרקי זמן ממושכים, מה שעשוי לסייע בהסרת ביניים של רקמות.
- הימנעו מלתת לדגימה להתקרר לחלוטין, מכיוון שהדבר מאפשר לסחוס מרוכך להתקשות ולהיצמד לעצם, מה שהופך קשה יותר להסרה.
- הסר כמה שיותר רקמות רכות באמצעות כלי דיסקציה חדה (להב אזמל מספר 22 על ידית אזמל ייעודית) ומים זורמים.
- חזור על שלב 4 לפי הצורך עד שהעצם נקייה מחומר רקמה רכה. מניסיוננו, זה נדרש לחזור על עצמו רק פעם אחת.
5. השלמת ההליך
- שטפו את הדגימה בחומר ניקוי נוזלי ושטפו היטב במים.
הערה: ניתן להשתמש באלכוהול כדי לזרז את הייבוש. - הניחו לדגימה להתייבש במשך כ-48 שעות.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
בעקבות פרוטוקול זה, נוצרו מודלים של עמוד חוליות מותני נקי ויבש של כבשים לצורך תכנון והתייחסות כירורגית. דגימות המורכבות משבע חוליות מותניות עובדו תוך 4 ימים בשיטה זו, עם אמבטיה ראשונית אחת להסרת עיקר השריר ושלוש אמבטיות עוקבות. השלמת האמבטיות התבטאה בקלות שבה הוסרו הסחוס ורקמת החיבור מהעצם. זה השתנה בהתאם לסוג ומיקום הסחוס; שכבות דקות הוסרו בקלות לאחר אמבטיה אחת או שתיים, אך חומר עבה מוקף ברקמה אחרת, כגון דיסקים בין-חולייתיים, עבר שלוש או ארבע אמבטיות. לאחר ייבוש במשך 48 שעות, העצמות היו צפויות להיות הרבה יותר קלות בצבע ובמשקל ולהרגיש יבשות ולא שמנוניות. דגמי העצם המיוצרים מספקים ייצוג מדויק של האנטומיה, תוך שמירה על המבנים וקווי המתאר העדינים של העצם, במיוחד פאות מפרקיות, לוחית קצה החוליות ותהליכים רוחביים, בהשוואה למודלים מודפסים בתלת-ממד. לשם השוואה, עמוד שדרה של כבשה מותנית בשחלות נסרק CT בעובי פרוסה של 0.5 מ"מ, יובא לתוכנת מידול תלת ממדית (ראו טבלת חומרים), וחולק כדי לייצר מודל של חוליה בודדת. לאחר מכן הודפס זה באמצעות נימה אקרילוניטריל בוטאדיאן סטירן (ABS) במדפסת תלת מימד. איור 2 מציג את המודל המודפס בתלת-ממד של עמוד שדרה מותני של כבשה בהשוואה למודל הגווארי האנטומי המופק מטבילות אמבט מים חמים אטומות בוואקום. התמונות ההשוואתיות מראות כי המודל המודפס בתלת-ממד אינו מפרט במדויק פרטים עדינים של דגימות הגופות, עם אובדן פרטים עדינים יותר כגון קווי מתאר של העצם, במיוחד בתהליכים הרוחביים.
איור 1: דגימות עמוד השדרה המותני של כבשים בשלבים שונים במהלך העיבוד. (A) עמוד השדרה המותני שזה עתה נקטף דורש הכנה ואמבטיה ראשונית (שלבים 1-2), ואילו (B) הדגימה עם רקמה רכה מינימלית יכולה להמשיך לאמבטיות הבאות (שלב 3.2). אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 2: השוואה איכותנית בין מודלים של עצמות מודפסות בתלת-ממד לבין מודלים של עצמות גופות. השוואה בין (A,B) מודל מודפס בתלת-ממד לבין (C,D) מודל עצם גוואלית מדגימה אובדן פרטים בנקודות עדינות יותר, כגון קצות תהליכים רוחביים ופרטי פאות במודל המודפס בתלת-ממד ביחס לעצם. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
איור 3: קוצים מותניים של כבשים שעובדו באמצעות טבילה באמבט במים חמים. מודלים מעובדים של עמוד שדרה מותני של כבשים באותו שלב של העיבוד; עם זאת, הדגימה משמאל (A) עובדה עם חומר ניקוי, והדגימה בצד ימין (B) הייתה ללא. יש לציין את ההבדל בצבע ובמרקם. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
הערה טכנית זו נועדה לתאר שיטה פשוטה, בטוחה וזולה לייצור מודל עצם אנטומי לטובת חינוך וטרינרי ורפואי ולשימוש בחינוך אנטומי ותכנון כירורגי.
בדיקות פיילוט מצאו כי טמפרטורת אמבטיה של 70 מעלות צלזיוס סיפקה את זמן העיבוד המהיר ביותר מבלי לגרום נזק לדגימות. טמפרטורות גבוהות יותר גרמו לפירוק נרחב של קולגן בתוך העצם, וכתוצאה מכך נוצרו דגימות שבירות עם מרקם גירי. האמבטיה החמה בניסוי זה נועדה במיוחד לעיבוד דגימות שהודפסו בתלת-ממד ושימשה בשל הנוחות שלה; עם זאת, אפשרויות מסחריות אחרות פחות יקרות, כגון תנורים איטיים או מכשירי סו-ויד, עשויות להיות נגישות יותר.
הוספת חומר ניקוי הייתה צעד קריטי בפרוטוקול. בהשוואה לדגימות ללא חומר ניקוי, הוספת חומר ניקוי קיצרה את זמן ההשלמה מ-168 שעות ל-96 שעות. דגימות ללא חומר ניקוי לא התייבשו לחלוטין ונראו כהות יותר באופן ניכר עם תחושה שמנונית, ככל הנראה בשל הצטברות שומנים בתוך פני העצם. דגימות שהושלמו ונראות כהות או שמנוניות יכולות להצביע על צורך בחומר ניקוי נוסף (איור 3). במהלך ניסויי הפיילוט, חומר הניקוי לבדו לא התפזר באופן שווה לאורך הדגימות לאחר אטימותן, מה שהצריך שימוש נוסף במים. כאשר הוסיפו מים וחומר ניקוי לשקיות לפני האיטום, היה לעיתים קושי ליצור אטם ואקום אמין, ממנו ניתן להימנע על ידי הקפאת נוזלים מראש. חומר הניקוי המשמש בפרוטוקול זה, חומר ניקוי כללי לשטיפת כלים, נבחר על בסיס עלות וזמינות. שיטה זו יכולה להתבצע באמצעות כל חומר ניקוי לשטיפת כלים כדי להשיג תוצאות דומות. חומרי ניקוי ביתיים רב-תכליתיים אחרים המכילים 2-בוטוקסיאתנול עשויים לסייע בפירוק שומנים ופירוק רקמות רכות בצורה יעילה יותר, ולכן עשויים להועיל לדגימות עם סחוס מוגזם או קשה, כגון דיסקים בין-חולייתיים7. ניתן להשתמש בדטרגנטים אנזימטיים המעכלים באופן פעיל רקמות רכות כדי להפחית את זמן ההשרייה בהשוואה לחומרי ניקוי רגילים, אך ההשפעות יכולות להיות בלתי צפויות, במיוחד אם המשתמש אינו מכיר את השימוש בהם 6,10. בעוד maceration אנזימטי מהווה סיכון בריאותי גבוה יותר, יש לו את הפוטנציאל להפחית את זמן העיבוד מימים לשעות 5,6. שיטה זו גם מרוויחה באופן משמעותי מערבוב לקידום תגובה אנזימטית עם רקמות רכות, אשר עלולה להיות מעוכבת על ידי חוסר זרימה בתוך השקית האטומה בוואקום.
פירוק החוליות היה קל יותר באופן ניכר כאשר הוסיפו חומר ניקוי; יתר על כן, לאחר אמבטיות חומרי ניקוי לאחר מכן, הדיסקים הבין חולייתיים היו רכים וקלים יותר להסרה, ככל הנראה בשל שטח פנים גבוה יותר לחדירת חומרי ניקוי לאחר פירוקם. לכן, הדגימות הושלמו בזמן קצר יותר כאשר פורקו מראש. באופן דומה, אם הדגימות הראשוניות הכילו אזורים עבים של סחוס, ייתכן שיהיה צורך בהסרה ידנית בין אמבטיות כדי לקדם חדירת חומרי ניקוי. בנוסף, בחישה באמבט השרייה טיפוסי הוכחה כמפחיתה את הזמן הנדרש באופן משמעותי, אך הדבר אינו אפשרי עם דגימות בשקית10. הוספת חומר ניקוי עם כמויות קטנות של מים בשקית ופירוק המפרקים מוקדם ככל האפשר עשויים להפחית את ההשפעה של מגבלות אלה.
צעד קריטי נוסף היה להימנע מלתת לדגימות להתקרר לטמפרטורת החדר לאחר הוצאתם מהאמבטיה החמה, שכן החום השיורי איפשר הסרה קלה יותר של הסחוס המרוכך מהדגימות. כאשר אפשרו לו להתקרר, סחוס זה יצר ציפוי ג'לטיני קשיח על העצם שהיה קשה להסיר מבלי לחמם מחדש את הדגימה. מאותה סיבה, אם מים זורמים משמשים לסיוע בהסרת רקמות רכות, מומלץ להשתמש במים חמים.
בניגוד למודלים מודפסים בתלת מימד, שיטה זו מייצרת דגימות עצם כדי לשכפל נושאים אמיתיים לתכנון כירורגי. השימוש בדטרגנטים עדינים בשיטה זו עשוי למנוע שינויים בשלמות פני העצם, כפי שניתן לראות בעת שימוש במוצרים חלופיים כגון אקונומיקה ומי חמצן6. עם התפתחויות נוספות בהדפסה תלת ממדית למחקר רפואי, ניתן להדפיס מודלים עם פרמטרים מותאמים אישית כגון עובי קליפת המוח, אשר הוכחו כמספקים סימולציה הפטית חיובית של מיקום בורג פדיקל בניתוחי עמוד שדרה11. עם זאת, דגימות אלה יכולות להיות יקרות לייצור ודורשות תוכנה וציוד ספציפיים, כמו גם תכנון ועיבוד קפדניים11,12. בנוסף, האיכות של מודלים מודפסים בתלת-ממד מוגבלת על ידי הציוד ועלולה להסתכן באובדן פרטים עדינים יותר שנשמרים בתוך דגימת העצם13. למודלים ספציפיים למטופל ולמודלים מודפסים בתלת-ממד יש מספר יישומים מעשיים, בעוד שמודלים אנטומיים שמקורם בעצם יכולים לספק פרטים אנטומיים ללא תחרות עם עלות וציוד מינימליים.
מגבלות של שיטה זו כוללות את הזמינות של דגימות cadaveric ספציפיים היישום שלהם. השיטה המתוארת מסירה לחלוטין רקמות רכות מהעצם, ויוצרת מודלים שניתן להשתמש בהם רק לתכנון כירורגי הקשור לעצם, והיא פחות מעשית להדמיית ביטוי, ביומכניקה או מבנים מסביב. בשל אובדן זה של ביטוי, שחזור של מודלים עשוי להידרש. שיטת השחזור משתנה בהתאם לסוג העצם, ויכולה לכלול סיליקון, חוט, אזיקונים או דבק. תוך קירוב המיקומים היחסיים של העצמות, טכניקות אלה אינן יכולות לשכפל את מכניקת in vivo ולהפחית את התרגום לפרקטיקה כירורגית. מגבלות אחרות כוללות את הזמן שלוקח להסיר רקמות רכות עודפות מדגימות גדולות, כמו גם סחוס ורקמות רכות אחרות, אם קיימות, בהתבסס על האזור האנטומי של הדגימה.
היכולת לייצר מודלים פשוטים של עצמות יכולה להשפיע באופן משמעותי על הצלחת הניתוח. למודלים לתכנון כירורגי יש יתרונות מוכחים, כולל קיצור זמן הניתוח, מיקום מדויק יותר של בורג ושתלים, ופחות סיבוכים כגון איבוד דם4. זה שימושי במיוחד במקרה של ניתוח וטרינרי, שבו האנטומיה משתנה מאוד לפי מין. לפרוטוקול פשוט זה יש פוטנציאל לייצר מודלים של עצמות נקיות מגופות ללא כימיקלים מסוכנים וריחות קבועים ודורש ציוד ועבודה מינימליים, במיוחד בהשוואה לטכניקות הדפסה תלת ממדיות מודרניות.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
המחברים חייבים לחשוף.
Acknowledgments
ללא.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Dimension Elite 3D printer | Stratasys, Eden Prairie, MN, United States | 3D printer for production of surgical bone models based on reconstructed CT scans | |
| Mimics Innovation Suite | Materialise NV, Leuven, Belgium | Suite 24 | Software to create 3D models from imaging scans |
| Nylon cable ties | 4Cabling, Alexandria, NSW, Australia | 011.060.1042/011.060.1039 | Used to maintain connection between vertebral bodies |
| Orthopaedic wire | B Braun, Bella Vista, NSW, Australia | Used to maintain connection between vertebral bodies | |
| Support Cleaning Apparatus | Phoenix Analysis and Design Technologies, Tempe, AZ, United States | SCA-1200 | Hot water bath for immersion of the sealed sample. |
| Ultra Strength Original Dishwashing Liquid | Colgate-Palmolive, New York, NY, United States | Dishwashing liquid added to sealed bag with sample for cleaning of the bone model. | |
| Vacuum bags | Pacfood PTY LTD | Heat safe, sealable plastic bags | |
| Vacuum Food sealer | Tempoo (Aust) PTY LTD | Vacuum food sealer to seal vacuum bags prior to bath immersion |
References
- Leary, O. P., et al. Three-dimensional printed anatomic modeling for surgical planning and real-time operative guidance in complex primary spinal column tumors: single-center experience and case series. World Neurosurgery. 145, 116-126 (2021).
- Tack, P., Victor, J., Gemmel, P., Annemans, L. 3D-printing techniques in a medical setting: a systematic literature review. BioMedical Engineering OnLine. 15 (1), 115 (2016).
- Ventola, C. L. Medical applications for 3D printing: current and projected uses. Pharmacy and Therapeutics. 39 (10), 704-711 (2014).
- Wilcox, B., Mobbs, R. J., Wu, A. M., Phan, K. Systematic review of 3D printing in spinal surgery: the current state of play. Journal of Spinal Surgery. 3 (3), 433-443 (2017).
- Mairs, S., Swift, B., Rutty, G. N. Detergent: an alternative approach to traditional bone cleaning methods for forensic practice. The American Journal of Forensic Medicine and Pathology. 25 (4), 276-284 (2004).
- Husch, C., Berner, M., Goldammer, H., Lichtscheidl-Schultz, I. Technical note: A novel method for gentle and non-destructive removal of flesh from bones. Forensic Science International. 323, 110778 (2021).
- Couse, T., Connor, M. A comparison of maceration techniques for use in forensic skeletal preparations. Journal of Forensic Investigation. 3, 1-6 (2015).
- Mahon, T. J., Maboke, N., Myburgh, J. The use of different detergents in skeletal preparations. Forensic Science International. 327, 110967 (2021).
- Hussain, M., Hussain, N., Zainab, H., Qaiser, S. Skeletal preservation techniques to enhance veterinary anatomy teaching. IJAVMS. 1, 21-23 (2007).
- Simonsen, K. P., Rasmussen, A. R., Mathisen, P., Petersen, H., Borup, F. A fast preparation of skeletal materials using enzyme maceration. Journal of Forensic Science. 56 (2), 480-484 (2011).
- Burkhard, M., Furnstahl, P., Farshad, M. Three-dimensionally printed vertebrae with different bone densities for surgical training. European Spine Journal. 28 (4), 798-806 (2019).
- Rose, A. S., et al. Multi-material 3D models for temporal bone surgical simulation. The Annals of Otology, Rhinology, and Laryngology. 124 (7), 528-536 (2015).
- Werz, S. M., Zeichner, S. J., Berg, B. I., Zeilhofer, H. F., Thieringer, F. 3D printed surgical simulation models as educational tool by maxillofacial surgeons. European Journal of Dental Education. 22 (3), 500-505 (2018).
