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बॉक्स-बेनकेन रिस्पांस सरफेस मेथड के साथ संयुक्त क्रिटिक पर आधारित ज़ांबा के साथ टाइबांगचुई के लिए प्रसंस्करण प्रौद्योगिकी का अनुकूलन

Published: May 12, 2023 doi: 10.3791/65139
Automatic Translation
1, 1, 2, 1, 2, 2, 2
1State Key Laboratory of Southwestern Chinese Medicine Resources, School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine, 2School of Ethnic Medicine, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine

Summary

वर्तमान प्रोटोकॉल बॉक्स-बेनकेन प्रतिक्रिया सतह विधि के साथ संयुक्त क्रिटिक का उपयोग करके ज़ांबा-स्टर-फ्राइड टाईबैंगचुई के लिए एक कुशल और मानक विषहरण प्रसंस्करण विधि का वर्णन करता है।

Abstract

एकोनिटम पेंडुलम बुश की सूखी जड़, जिसे चीनी में टाईबांगचुई (टीबीसी) कहा जाता है, सबसे प्रसिद्ध तिब्बती दवाओं में से एक है। यह उत्तर पश्चिमी चीन में व्यापक रूप से इस्तेमाल की जाने वाली जड़ी बूटी है। हालांकि, टीबीसी की तीव्र विषाक्तता के कारण विषाक्तता के कई मामले हुए हैं और क्योंकि इसकी चिकित्सीय और विषाक्त खुराक समान हैं। इसलिए, इसकी विषाक्तता को कम करने के लिए एक सुरक्षित और प्रभावी तरीका खोजना एक जरूरी काम है। तिब्बती चिकित्सा क्लासिक्स के माध्यम से एक खोज से पता चलता है कि ज़ांबा के साथ तला हुआ टीबीसी स्टर-फ्राइड की प्रसंस्करण विधि "किंघाई प्रांत (2010) की तिब्बती दवा के प्रसंस्करण विनिर्देश" में दर्ज की गई थी। हालांकि, विशिष्ट प्रसंस्करण पैरामीटर अभी तक स्पष्ट नहीं हैं। इस प्रकार, इस अध्ययन का उद्देश्य ज़ानबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी की प्रसंस्करण तकनीक को अनुकूलित और मानकीकृत करना है।

सबसे पहले, चार कारकों पर एक एकल-कारक प्रयोग आयोजित किया गया था: टीबीसी की स्लाइस मोटाई, ज़ांबा की मात्रा, प्रसंस्करण तापमान और समय। ज़ानबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी में मोनोएस्टर और डायस्टर अल्कलॉइड सामग्री के साथ, क्रिटिक ने बॉक्स-बेनकेन प्रतिक्रिया सतह विधि के साथ मिलकर ज़ांबा-स्टिर-फ्राइड टीबीसी की प्रसंस्करण तकनीक को अनुकूलित करने के लिए उपयोग किया था। ज़ांबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी की अनुकूलित प्रसंस्करण स्थितियों में 2 सेमी की टीबीसी स्लाइस मोटाई, टीबीसी की तुलना में तीन गुना अधिक ज़ांबा, 125 डिग्री सेल्सियस का प्रसंस्करण तापमान और 60 मिनट स्टर-फ्राइंग शामिल थे। इस अध्ययन ने ज़ांबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी के उपयोग के लिए अनुकूलित और मानक प्रसंस्करण स्थितियों को निर्धारित किया, इस प्रकार ज़ांबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी के सुरक्षित नैदानिक उपयोग और औद्योगिक उत्पादन के लिए एक प्रयोगात्मक आधार प्रदान किया।

Introduction

सबसे प्रसिद्ध तिब्बती दवाओं में से एक एकोनिटम पेंडुलम बुश और ए फ्लेवम हैंड-माज़ की सूखी जड़को चीनी 1,2 में टाईबांगचुई (टीबीसी) कहा जाता है। टीबीसी की सूखी जड़ें ठंड और हवा को दूर करने, दर्द को कम करने और सदमे को शांत करने में सहायक होती हैं। यह पीपुल्स रिपब्लिक ऑफ चाइना के स्वास्थ्य मंत्रालय के "ड्रग स्टैंडर्ड (तिब्बती चिकित्सा) के पहले खंड में दर्ज किया गया था, जिसमें कहा गया है कि टीबीसी की सूखी जड़ें आमतौर पर रुमेटीइड गठिया, चोट और अन्यठंड रोगों के इलाज के लिए उपयोग की जाती हैं। हालांकि, टीबीसी की नैदानिक चिकित्सीय खुराक इसकी विषाक्त खुराक के समान है, औरअनुचित उपयोग के कारण विषाक्तता या मृत्यु की घटनाएं अक्सर रिपोर्ट की गई हैं। इसलिए, विषाक्तता को कम करना और टीबीसी की प्रभावकारिता को संरक्षित करना वर्षों से एक शोध हॉट स्पॉट बन गया है।

तिब्बती चिकित्सा में, टीबीसी की विषाक्तता को कम करने के लिए प्रसंस्करण सबसे प्रभावी तरीकों में से एक है। "किंघाई प्रांत की तिब्बती चिकित्सा के प्रसंस्करण विनिर्देश (2010)" के अनुसार, मूल जड़ी बूटियों (टीबीसी) को एक लोहे के बर्तन में रखा जाना चाहिए और ज़ांबा के साथ तब तक तला जाना चाहिए जब तक कि ज़ांबा पीला न हो जाए, जिसके बाद ज़ांबा को हटा दिया जाता है और जड़ी बूटियों को हवा में सुखाया जाता है 5,6। हालांकि, कोई विशिष्ट प्रक्रिया पैरामीटर प्रलेखित नहीं किए गए हैं, जो प्रसंस्करण तकनीक और ज़ांबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी की गुणवत्ता को नियंत्रित करना मुश्किल बनाता है। क्रिटिक विधि एक उद्देश्य वजन विधि है जो फ्यूज़िफिकेशन और व्यक्तिपरकता से बच सकती है, और7 वजन की निष्पक्षता को बढ़ा सकती है। बॉक्स-बेनकेन प्रतिक्रिया सतह विधि बहुपद फिटिंग8 के माध्यम से प्रत्येक कारक के बीच बातचीत को सीधे प्रतिबिंबित कर सकती है। बॉक्स-बेनकेन प्रतिक्रिया सतह और क्रिटिक विधि का संयोजन आमतौर पर अनुकूलित प्रसंस्करण प्रोटोकॉल 9,10 प्राप्त करने के लिए प्रसंस्करण प्रौद्योगिकी को अनुकूलित करने के लिए उपयोग किया जाता है। इस पेपर में, एक मोनोएस्टर-डिटरपेनोइड एल्कलॉइड (एमडीए) (बेंजोयलाकोनिटाइन) और दो डायस्टर-डिटरपेनोइड एल्कलॉइड (डीडीए) (एकोनाइटिन, 3-डीऑक्सीकोनिटिन) का उपयोग मूल्यांकन सूचकांक के रूप में किया गया था। बॉक्स-बेनकेन प्रतिक्रिया सतह विधि के साथ संयुक्त क्रिटिक को ज़ांबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी की प्रसंस्करण तकनीक को अनुकूलित करने और नैदानिक सुरक्षित उपयोग के लिए एक मानक प्रसंस्करण विधि स्थापित करने के लिए लागू किया गया था।

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Protocol

ज़ानबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी प्रसंस्करण विधि को बॉक्स-बेनकेन प्रतिक्रिया सतह विधि के साथ संयुक्त क्रिटिक द्वारा अनुकूलित और मानकीकृत किया गया था। इस प्रक्रिया के दौरान मूल्यांकन सूचकांक के रूप में बेंज़ोयलाकोनिटिन, एकोनिटाइन और 3-डीऑक्सीकोनिटाइन का उपयोग किया गया था।

1. नमूना समाधान तैयारी

  1. संदर्भ पदार्थ स्टॉक समाधान तैयार करें। इलेक्ट्रॉनिक विश्लेषणात्मक संतुलन पर 9.94 मिलीग्राम बेंजोयलाकोनिटाइन, 8.49 मिलीग्राम एकोनाइटिन, और 6.25 मिलीग्राम 3-डीऑक्सीकोनिटाइन (सामग्री की तालिका) का वजन करें और उन्हें 10 एमएल वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में रखें। फिर, ठोस पदार्थों को भंग करने के लिए 0.05% हाइड्रोक्लोरिक एसिड मेथनॉल घोल जोड़ें और मात्रा को 10 एमएल तक बनाएं। अंत में, 0.9940 मिलीग्राम / एमएल बेंजोयलाकोनिटाइन, 0.8490 मिलीग्राम / एमएल एकोनाइटिन, और 0.6250 मिलीग्राम / एमएल 3-डीऑक्सीकोनिटाइन की द्रव्यमान सांद्रता के साथ संदर्भ पदार्थ स्टॉक समाधान प्राप्त करने के लिए मिश्रण को अच्छी तरह से हिलाएं।
    सावधानी: हाइड्रोक्लोरिक एसिड एक अत्यधिक संक्षारक सामग्रीहै। उचित सुरक्षा का उपयोग करें, जैसे कि दस्ताने, एक लैब कोट, चश्मे और एक फ्यूम हुड।
  2. परीक्षण नमूना समाधान तैयार करें।
    1. शंक्वाकार फ्लास्क में ज़ांबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी पाउडर के 2 ग्राम वजन करें।
      1. 30 ग्राम टीबीसी (2 सेमी) और 90 ग्राम ज़ांबा का वजन करके ज़ांबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी तैयार करें और उन्हें पहले से गर्म स्टर-फ्राई मशीन में जोड़ें। स्टर-फ्राई मशीन का समय और तापमान क्रमशः 40 मिनट और 140 डिग्री सेल्सियस पर सेट करें। मशीन को प्रसंस्करण पूरा करने के लिए सेट करें।
      2. ज़ानबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी को पाउडर के नमूनों में अलग से पीसने के लिए एक उच्च गति स्मैशिंग मशीन का उपयोग करें जो 50 जाल (0.355 मिमी) छलनी से गुजर सकता है।
    2. पिछलेअध्ययनों के आधार पर, उपरोक्त शंक्वाकार फ्लास्क में 3 मिलीलीटर अमोनिया घोल और आइसोप्रोपिल अल्कोहल और एथिल एसीटेट (1: 1 वी / वी का अनुपात) के मिश्रित घोल के 50 मिलीलीटर जोड़ें।
      नोट: अमोनिया समाधान तैयार करने के लिए, 100 एमएल वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में 40 एमएल केंद्रित अमोनिया समाधान जोड़ें और मापने वाली लाइन में शुद्ध पानी से भरें। केंद्रित अमोनिया समाधान का उपयोग करते समय उचित सुरक्षात्मक उपाय करें क्योंकि इसमें एक मजबूत गंध है।
    3. उपरोक्त नमूने और शंक्वाकार फ्लास्क का वजन करें और वजन रिकॉर्ड करें। 30 मिनट के लिए अल्ट्रासोनिकेट (वोल्टेज: 220 वी, आवृत्ति: 40 किलोहर्ट्ज)।
      नोट: एकोनाइटिन एल्कलॉइड आसानी से गर्मी से विघटित हो जाते हैं। इस प्रकार, अल्ट्रासोनिक निष्कर्षण का तापमान 25 डिग्री सेल्सियस से नीचे होना चाहिए।
    4. अल्ट्रासोनिक निष्कर्षण के बाद नमूना और शंक्वाकार फ्लास्क का वजन करें।
    5. आइसोप्रोपिल अल्कोहल और एथिल एसीटेट (1: 1 वी / वी का अनुपात) का मिश्रण जोड़कर खोए हुए वजन की भरपाई करें।
    6. नमूना समाधान फ़िल्टर करें। 40 डिग्री सेल्सियस पर रोटरी बाष्पीकरणकर्ता का उपयोग करके 25 मिलीलीटर छानना सूखापन के लिए वाष्पित करें।
    7. 0.05% हाइड्रोक्लोरिक एसिड मेथनॉल समाधान के 5 एमएल जोड़कर अवशेषों को भंग करें, 0.2 μm सिरिंज फिल्टर के माध्यम से समाधान को फ़िल्टर करें, और उच्च प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी (एचपीएलसी) करके इसका विश्लेषण करें।
  3. एक मिश्रित संदर्भ समाधान तैयार करें जिसमें 0.1988 मिलीग्राम / एमएल बेंजोयलाकोनिटाइन, 0.0509 मिलीग्राम / एमएल एकोनाइटिन, और 0.0938 मिलीग्राम / एमएल 3-डीऑक्सीकोनिटाइन शामिल हैं।
    नोट: प्रत्येक मानक (0.9940 मिलीग्राम बेंजोयलाकोनिटाइन, 0.2545 मिलीग्राम एकोनाइटिन, और 0.4690 मिलीग्राम 3-डीऑक्सीकोनाइटिन) विघटन माध्यम के रूप में 0.05% हाइड्रोक्लोरिक एसिड मेथनॉल में 5 एमएल वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में भंग हो जाता है।
  4. 2 लीटर अल्ट्राप्योर पानी (मोबाइल चरण ए) में 6.16 ग्राम अमोनियम एसीटेट (सामग्री की तालिका) को घोलकर 0.04 एम अमोनियम एसीटेट बफर तैयार करें। अमोनिया का उपयोग करके पीएच को 8.50 तक समायोजित करें।
    सावधानी: अमोनिया एक खतरनाक सामग्री है। उचित सुरक्षा का उपयोग करें, जैसे कि दस्ताने, एक लैब कोट, चश्मे और एक फ्यूम हुड।
  5. अल्ट्राप्योर 100% एसिटोनिट्राइल (मोबाइल चरण बी) के 2 एल को फ़िल्टर करें और इसे हटा दें।
    चेतावनी: एसिटोनिट्राइल एकखतरनाक सामग्री है। उचित सुरक्षा का उपयोग करें, जैसे कि दस्ताने, एक लैब कोट, चश्मे और एक फ्यूम हुड।

2. क्रोमैटोग्राफिक स्थिति

  1. बाइनरी पंप के साथ एचपीएलसी सिस्टम में प्रीट्रीटेड नमूना समाधान ों के 10 μL इंजेक्ट करें। एमडीए और डीडीए पृथक्करण के लिए मोबाइल चरण ए और बी के साथ ओडीएस -3 कॉलम (5 μm x 4.6 मिमी x 250 मिमी; 30 डिग्री सेल्सियस पर काम करने वाले) को नियोजित करने वाली एचपीएलसी प्रणाली का उपयोग करें। तकनीकी प्रतिकृति के लिए प्रत्येक नमूने को तीन बार इंजेक्ट करें।
  2. ODS-3 स्तंभ के लिए तालिका 1 में दिखाए गए अनुसार विधि को प्रोग्राम करें। 1.0 एमएल / मिनट की प्रवाह दर और पहचान तरंग दैर्ध्य 235 एनएम के रूप में सेट करें।
  3. प्रत्येक लक्ष्य यौगिक के चरम क्षेत्रों को रिकॉर्ड करें।
    नोट: उपकरणों का विवरण सामग्री की तालिका में पाया जा सकता है।

3. सिस्टम अनुकूलनशीलता परीक्षण

नोट: चरण 3.1-3.5 करने के लिए क्रोमैटोग्राफिक स्थितियों के लिए अनुभाग 2 देखें।

  1. एकाग्रता और शिखर क्षेत्र के बीच रैखिक संबंध की जांच करें।
    1. बेंज़ोयलाकोनिटाइन समाधान की विभिन्न सांद्रता - 19.88, 39.76, 59.64, 159.04, 198.80, और 497.00 μg / mL तैयार करें।
    2. एकोनाइटिन घोल की विभिन्न सांद्रता - 8.49, 16.98, 25.47, 33.96, 50.94, और 169.80 μg / mL तैयार करें।
    3. 3-डीऑक्सीकोनिटाइन घोल की विभिन्न सांद्रता - 1.875, 12.50, 37.50, 62.50, 93.75, और 125.00 μg / mL तैयार करें।
    4. उपरोक्त संदर्भ समाधानों को कम द्रव्यमान एकाग्रता से उच्च द्रव्यमान एकाग्रता तक इंजेक्ट करें और शिखर क्षेत्रों को रिकॉर्ड करें।
    5. शिखर क्षेत्र के खिलाफ संदर्भ समाधान एकाग्रता (μg / L) के प्लॉट से तीन रैखिक प्रतिगमन समीकरण प्राप्त करें।
      नोट: सुनिश्चित करें कि बेंज़ोयलाकोनिटाइन, एकोनाइटिन और 3-डीऑक्सीकोनिटाइन की सांद्रता इस मानक वक्र की रैखिक सीमा के भीतर आती है।
  2. एचपीएलसी सिस्टम में नमूना समाधान के 10 μL के छह दोहराव को लगातार इंजेक्ट करके सटीक परीक्षण करें और अनुभाग 2 में वर्णित समान एचपीएलसी स्थितियों के तहत नमूने चलाएं। बेंजोयलाकोनिटाइन, एकोनाइटिन और 3-डीऑक्सीकोनिटाइन के चरम क्षेत्रों को रिकॉर्ड करें।
  3. तैयार नमूना समाधान के 10 μL इंजेक्ट करके स्थिरता परीक्षण प्रयोग करें और 0 घंटे, 2 घंटे, 4 घंटे, 8 घंटे, 12 घंटे और 24 घंटे के बाद चरम क्षेत्रों का निर्धारण करें।
    नोट: पीक क्षेत्रों को संदर्भित एचपीएलसी सिस्टम द्वारा स्वचालित रूप से दर्ज किया जाता है। ये समय बिंदु प्रासंगिक साहित्य15,16,17 पर आधारित थे।
  4. चरण 1.2 में विधि के अनुसार समानांतर में छह परीक्षण नमूना समाधान तैयार करने के लिए ज़ांबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी के एक ही बैच को लेकर प्रजनन क्षमता परीक्षण करें। एचपीएलसी सिस्टम में प्रत्येक नमूने के 10 μL इंजेक्ट करें और अनुभाग 2 में वर्णित नमूने चलाएं।
    नोट: छह नमूनों के बीच एकाग्रता अंतर की तुलना करके प्रजनन क्षमता का आकलन किया गया था।
  5. परीक्षण समाधान के लिए ज़ानबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी के एक ही बैच के छह भागों को तैयार करके पुनर्प्राप्ति प्रयोग करें। फिर, वसूली दर की गणना करने के लिए परीक्षण समाधान के छह भागों में प्रत्येक सूचकांक घटक के संदर्भ पदार्थ का ~ 100% जोड़ें। अनुभाग 2 में वर्णित समान शर्तों के तहत एचपीएलसी सिस्टम में इन नमूनों (10 μL) को इंजेक्ट करें और समीकरण (1) का उपयोग करके वसूली दर की गणना करें:
    Equation 1(1)
    नोट: समीकरण (1) में, ए परीक्षण समाधान में मापा जाने वाले घटक की मात्रा है, बी संदर्भ पदार्थ की मात्रा है, और सी उस समाधान का मापा मूल्य है जिसमें संदर्भ पदार्थ और ज़ांबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी नमूना शामिल है।

4. एकल-कारक प्रयोग

  1. स्लाइस मोटाई की तुलना
    1. परीक्षणों के लिए पांच समूह तैयार करें, प्रत्येक में 30 ग्राम टीबीसी है, जहां टीबीसी की मोटाई क्रमशः 0.5, 1, 2, 3 और 4 सेमी है। ज़ांबा की मात्रा का वजन करें जो टीबीसी (90 ग्राम) की तुलना में तीन गुना अधिक है।
      नोट: टीबीसी विषाक्त है। उचित सुरक्षा का उपयोग करें, जैसे दस्ताने, एक लैब कोट, चश्मे, और एक फ्यूम हुड, और काटने की प्रक्रिया के दौरान सावधान रहें। पूर्व-प्रयोग के माध्यम से, यह पाया गया कि टीबीसी और ज़ांबा के बीच पूर्ण संपर्क के लिए ज़ांबा की तीन गुना मात्रा की आवश्यकता थी। इसलिए, औपचारिक प्रयोगात्मक डिजाइन में, अध्ययन ने स्लाइस मोटाई की जांच करते समय ज़ांबा की तीन गुना मात्रा का चयन किया।
    2. स्वचालित स्टर-फ्राई मशीन का तापमान और समय क्रमशः 140 डिग्री सेल्सियस और 40 मिनट पर सेट करें।
    3. स्वचालित स्टर-फ्राई मशीन के निर्धारित तापमान तक गर्म होने के बाद मशीन में ~ 30 ग्राम टीबीसी और 90 ग्राम ज़ांबा जोड़ें।
    4. चरण 1.2 का पालन करके नमूना समाधान तैयार करें। मानक वक्र (तालिका 2) के अनुसार विभिन्न प्रसंस्करण उत्पादों में एमडीए और डीडीए की सामग्री की गणना करें। अनुभाग 6 में क्रिटिक विधि के माध्यम से परिणामों के आधार पर व्यापक स्कोर की गणना करें।
    5. इस तरह, ज़ांबा की मात्रा की तुलना करें, साथ ही स्थितियों के अनुकूलन के लिए प्रसंस्करण तापमान और समय भी।
  2. ज़ांबा की राशि की तुलना
    1. परीक्षणों के पांच समूह करें, जिनमें से प्रत्येक में 30 ग्राम टीबीसी (2 सेमी) है, जहां ज़ांबा की मात्रा क्रमशः टीबीसी से एक, दो, तीन, चार और पांच गुना अधिक है।
    2. प्रसंस्करण के लिए स्टर-फ्राई मशीन चालू करें। स्टर-फ्राई मशीन का समय और तापमान 40 मिनट और 140 डिग्री सेल्सियस पर सेट करें।
    3. चरण 1.2 का पालन करके नमूना समाधान तैयार करें। मानक वक्र (तालिका 2) के अनुसार विभिन्न प्रसंस्करण उत्पादों में एमडीए और डीडीए की सामग्री की गणना करें। अनुभाग 6 में क्रिटिक विधि के माध्यम से परिणामों के आधार पर व्यापक स्कोर की गणना करें।
  3. प्रसंस्करण तापमान की तुलना
    1. परीक्षणों के पांच समूह करें, जिनमें से प्रत्येक में 30 ग्राम टीबीसी (2 सेमी) और 90 ग्राम ज़ांबा है।
    2. प्रसंस्करण के लिए स्टर-फ्राई मशीन चालू करें। प्रसंस्करण तापमान को 100 डिग्री सेल्सियस, 120 डिग्री सेल्सियस, 140 डिग्री सेल्सियस, 160 डिग्री सेल्सियस और 180 डिग्री सेल्सियस पर सेट करें। प्रसंस्करण समय 40 मिनट के रूप में सेट करें।
      नोट: पूर्व-प्रयोगों के माध्यम से, यह पाया गया कि प्रसंस्करण तापमान 100 डिग्री सेल्सियस से नीचे होने पर ज़ांबा पीलेपन की गति बहुत कम होती है, और यदि तापमान बहुत अधिक (180 डिग्री सेल्सियस से ऊपर) होता है तो ज़ांबा को जलाना और काला होना आसान होता है। इसलिए, प्रसंस्करण के दौरान तापमान के न्यूनतम और अधिकतम मान क्रमशः 100 डिग्री सेल्सियस और 180 डिग्री सेल्सियस निर्धारित किए गए थे।
    3. चरण 1.2 का पालन करके नमूना समाधान तैयार करें। एमडीए और डीडीए के शिखर क्षेत्रों को रिकॉर्ड करें। मानक वक्र (तालिका 2) के अनुसार विभिन्न प्रसंस्करण उत्पादों में एमडीए और डीडीए की सामग्री की गणना करें। अनुभाग 6 में क्रिटिक विधि के माध्यम से परिणामों के आधार पर व्यापक स्कोर की गणना करें।
      नोट: प्रयोग में 160 डिग्री सेल्सियस और 180 डिग्री सेल्सियस का उच्च तापमान शामिल है। प्रयोगशाला के सुरक्षा कोड के अनुसार, प्रयोग के दौरान सुरक्षा पर ध्यान दें।
  4. प्रसंस्करण समय की तुलना
    1. परीक्षणों के पांच समूह करें, जिनमें से प्रत्येक में 30 ग्राम टीबीसी (2 सेमी) और 90 ग्राम ज़ांबा है।
    2. प्रसंस्करण के लिए स्टर-फ्राई मशीन चालू करें। प्रसंस्करण समय 20, 40, 60, 80 और 100 मिनट पर सेट करें। तापमान 140 डिग्री सेल्सियस पर सेट करें।
    3. चरण 1.2 में वर्णन का पालन करके नमूना समाधान तैयार करें। एमडीए और डीडीए के शिखर क्षेत्रों को रिकॉर्ड करें। मानक वक्र (तालिका 2) के अनुसार विभिन्न प्रसंस्करण उत्पादों में एमडीए और डीडीए की गुणवत्ता की गणना करें। अनुभाग 6 में क्रिटिक विधि के माध्यम से परिणामों के आधार पर व्यापक स्कोर की गणना करें।

5. प्रतिक्रिया सतह पद्धति (आरएसएम) का उपयोग करके ज़ांबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी का प्रसंस्करण प्रौद्योगिकी अनुकूलन।

  1. बॉक्स-बेनकेन प्रतिक्रिया सतह डिजाइन
    1. एकल-कारक परीक्षणों (चरण 4.1-4.4) का उपयोग करके प्रारंभिक प्रयोगों द्वारा स्लाइस मोटाई (ए, 1-3 सेमी), ज़ांबा (बी, 2-4एक्स), प्रसंस्करण तापमान (सी, 100-140 डिग्री सेल्सियस), और प्रसंस्करण समय (डी, 40-80 मिनट) की सीमा निर्धारित करें।
      नोट: चार चर के कोडित मान और उनके स्तर तालिका 3 में दिखाए गए हैं। प्रत्येक चर के तीन स्तरों को -1, 0 और 1 के रूप में कोडित किया गया था।
  2. मैट्रिक्स उत्पन्न करने और प्रतिक्रिया सतह मॉडल का विश्लेषण करने के लिए सॉफ्टवेयर का उपयोग करें।
    नोट: सॉफ्टवेयर उपयोग के लिए स्क्रीनशॉट पूरक फ़ाइल 1 में दिखाए गए हैं।
    1. 24 प्रयोगों (जैसा कि इस अध्ययन में किया गया है) से बना तीन-स्तरीय-चार-कारक बॉक्स-बेहनकेन डिज़ाइन का उपयोग करें, और वर्गों के शुद्ध त्रुटि योग की गणना करने के लिए पांच प्रतिकृतियों (रन ऑर्डर 1, 9, 14, 16 और 25) को मापें (तालिका 4)। प्रतिक्रिया के रूप में व्यापक स्कोर (वाई) सेट करें (चरण 1-4, पूरक फ़ाइल 1)।
      1. होम पेज पर, नया डिज़ाइन (चरण 1, पूरक फ़ाइल 1) पर क्लिक करें, और डिज़ाइन पृष्ठ के बाएं पैनल में, प्रतिक्रिया सतह पर क्लिक करें । बॉक्स-बेहनकेन और तालिका में चार कारकों के पैरामीटर सेट करें (चरण 2, पूरक फ़ाइल 1)।
      2. अगला (चरण 2, पूरक फ़ाइल 1) पर क्लिक करें, प्रतिक्रिया नाम सेट करें, और समाप्त करें (चरण 3, पूरक फ़ाइल 1) पर क्लिक करें।
      3. उपरोक्त ऑपरेशन के माध्यम से प्रतिक्रिया सतह डिजाइन उत्पन्न करें (चरण 4, पूरक फ़ाइल 1)।
  3. प्रतिक्रिया सतह के लिए डिज़ाइन किए गए 29 परिदृश्यों के आधार पर प्रयोग पूरा करें।
  4. चरण 1.2 का पालन करके नमूना समाधान तैयार करें।
  5. एमडीए और डीडीए के शिखर क्षेत्रों को रिकॉर्ड करें।
    नोट: पीक क्षेत्रों को संदर्भित एचपीएलसी सिस्टम द्वारा स्वचालित रूप से दर्ज किया जाता है।
  6. विभिन्न प्रसंस्करण उत्पादों में एमडीए और डीडीए की गुणवत्ता की गणना करें।
  7. चरण 6 में क्रिटिक विधि के माध्यम से परिणामों के आधार पर व्यापक स्कोर की गणना करें।
    नोट: विशिष्ट विधि चरण 6 में चित्रित किया गया है।
  8. कंप्यूटर में 29 परीक्षणों के प्राप्त व्यापक स्कोर को इनपुट करें और संदर्भित सॉफ़्टवेयर (चरण 5, पूरक फ़ाइल 1) का उपयोग करके इसका विश्लेषण करें।
  9. सॉफ्टवेयर के माध्यम से 3 डी मॉडल ग्राफ़ में प्लॉट किए गए बहुपद समीकरणों और प्रतिक्रिया सतह विश्लेषण का सांख्यिकीय सत्यापन करें (चरण 6-8, पूरक फ़ाइल 1)।
    1. बाएं नेविगेशन फलक में, विश्लेषण (+) के अंतर्गत, Y पर क्लिक करें, और तब कॉन्फ़िगर विंडो (चरण 6, पूरक फ़ाइल 1) में विश्लेषण प्रारंभ करें पर क्लिक करें.
    2. शीर्ष मेनू में एनोवा पर क्लिक करें और विचरण विश्लेषण प्रदर्शित करने वाले परिणामों की तालिका का निरीक्षण करें (चरण 7, पूरक फ़ाइल 1)।
    3. शीर्ष मेनू में, सिंथेटिक स्कोर (चरण 8, पूरक फ़ाइल 1) पर प्रसंस्करण मापदंडों के प्रभावों को दर्शाते हुए प्रतिक्रिया सतह प्लॉट प्राप्त करने के लिए मॉडल ग्राफ़ और फिर 3 डी सरफेस पर क्लिक करें।
  10. प्रसंस्करण प्रौद्योगिकी की स्थिरता को सत्यापित करने के लिए अनुमानित इष्टतम स्थितियों (चरण 9, पूरक फ़ाइल 1) के तहत तीन प्रतियों में प्रतिक्रिया सतह मॉडल का सत्यापन करें। बाएं नेविगेशन फलक में, ऑप्टिमाइज़ेशन के तहत, न्यूमेरिकल पर क्लिक करें फिर, शीर्ष मेनू में, समाधान पर क्लिक करें। अनुमानित इष्टतम स्थितियों का निरीक्षण करें।

6. मॉडल मूल्यांकन

नोट: यह चरण प्रत्येक एकल-कारक प्रयोग या प्रतिक्रिया सतह प्रयोग पूरा होने के बाद किया जाना है। प्रत्येक प्रयोग (जैसे, स्लाइस मोटाई की तुलना) पूरा होने के बाद, चरण 1.2 और खंड 2 के अनुसार, विभिन्न नमूनों में एमडीए और डीडीए की सामग्री को पांच डेटासेट प्राप्त करने के लिए मापा जाता है। डेटा पूरक तालिका एस 1 में दिखाया गया है।

  1. सूचकांक का आयाम रहित प्रसंस्करण
    नोट: यह चरण मापा मान (Xij) को एक आयाम रहित सापेक्ष मान में बदल देता है, ताकि प्रत्येक सूचकांक का मान समान मात्रा स्तर पर हो। यह ऑपरेशन विभिन्न इकाइयों या18 परिमाण के आदेशों में संकेतकों के व्यापक विश्लेषण और तुलना की सुविधा प्रदान कर सकता है। चित्रण के प्रयोजनों के लिए, स्लाइस मोटाई मानों का उपयोग नीचे दिखाए गए गणनाओं के लिए किया गया है (पूरक तालिका एस 1)।
    1. एमडीए की सामग्री को मानकीकृत करें (वाईएमडीए प्राप्त करें; एमडीए समीकरण (2) में सूत्र का उपयोग करके बेंज़ोयलाकोनिटाइन को संदर्भित करता है।
      नोट: सूचकांक "आई" चार कारकों में से एक के लिए खड़ा है, और स्लाइस मोटाई जांच किया गया पहला कारक है। इसलिए, i का मान 1 के बराबर है। सूचकांक "जे" कारकों के प्रत्येक स्तर के लिए खड़ा है; इस प्रकार, जब स्लाइस की मोटाई पहला स्तर (0.5 सेमी) है, तो जे 1 के बराबर है; जब स्लाइस की मोटाई पांचवें स्तर (4 सेमी) होती है, तो जे 5 के बराबर होता है। 0.5, 1, 2, 3, और 4 सेमी की मोटाई के साथ संसाधित टीबीसी में एमडीए (एक्सआईजे) की सामग्री क्रमशः 0.9693, 1.0876, 1.3940, 1.4185 और 1.3614 मिलीग्राम / इस प्रकार, x j,अधिकतम 1.4185 है और xj, min 0.9693 है।
      Equation 2(2)
      इस प्रकार Equation 3
      यहां, एक्सआईजे आई-टी एच कारक में और जे-थ स्तर पर प्रयोग के एमडीए की मापा सामग्री है; प्रयोगों के इस समूह में एमडीए की न्यूनतम सामग्री एक्सजे, मिन है; और xj, अधिकतम प्रयोगों के इस समूह में MDA की अधिकतम सामग्री है। इस प्रकार, i = 1, 2, ..., m, और j = 1, 2, ..., n
      नोट: इस प्रकार, MDA के मानकीकृत मान 0.0000, 0.2634, 0.9455, 1.0000, और 0.8729 Eq. (2) का उपयोग करके हैं।
    2. डीडीए की कुल सामग्री को मानकीकृत करें (डीडीए प्राप्त करें; डीडीए समीकरण (3) में सूत्र का उपयोग करके एकोनाइटिन और 3-डीऑक्सीकोनिटाइन को संदर्भित करता है।
      नोट: i चार कारकों में से एक है, और j कारकों का प्रत्येक स्तर है; एक्सआईजे आई-टी एच कारक में और जे-थ स्तर पर प्रयोग के डीडीए की मापा सामग्री है; डेटा के इस समूह प्रयोग में डीडीए की न्यूनतम सामग्री xj, min है; और xj, अधिकतम डेटा के इस समूह प्रयोग में DDA की अधिकतम सामग्री है। इस तरह, i = 1, 2, ..., m, और j = 1, 2, ..., n संसाधित टीबीसी में 0.5, 1, 2, 3 और 4 सेमी की मोटाई के साथ डीडीए (एक्सआईजे) की सामग्री क्रमशः 0.3492, 0.2692, 0.2962, 0.5354, 0.5124 मिलीग्राम / जी थी। इस प्रकार, x j,अधिकतम 0.5354 है और xj, min 0.2692 है।
      Equation 4(3)
      Equation 5
      नोट: मानकीकृत मान 0.6995, 1.0000, 0.8986, 0.0000, और 0.0864 समीकरण (3) का उपयोग करके हैं।
  2. ईक्यूएस के अनुसार संबंधित कंट्रास्ट तीव्रता (एस आई), संघर्ष (δ आई), सूचना (सी आई), और इंडेक्स वजन (डब्ल्यू आई) की गणना करें। (4) से (7), क्रमशः19,20।
    नोट: i = 1, 2, ..., m. yij i-th कारक में और j-th स्तर पर प्रयोग की MDA या DDA सामग्री का मानकीकृत डेटा है।
    1. कंट्रास्ट तीव्रता का अनुमान लगाने के लिए, पहले औसत एमडीए मान की गणना करें।
      Equation 6
      एमडीए का औसत मूल्य कहां Equation 7 है।
      Equation 8(4)
      Equation 21
    2. संघर्ष मान की गणना करने के लिए, पहले Excel21 में CORREL फ़ंक्शन का उपयोग करकेij γ सहसंबंध गुणांक का अनुमान लगाएं।
      Equation 9(5)
      Equation 10
    3. निम्नानुसार जानकारी मानों की गणना करें।
      Equation 11(6)
      Equation 12
      नोट: इसी तरह, सी1, डीडीएस = 0.7210
    4. सूचकांक भार की गणना निम्नानुसार करें।
      Equation 13(7)
      Equation 14
      नोट: इसलिए, स्लाइस मोटाई की तुलना में एमडीए और डीडीए के वजन गुणांक क्रमशः 0.4945 और 0.5055 के रूप में स्थापित किए गए थे।
  3. स्लाइस मोटाई के व्यापक स्कोर की गणना करें।
    Equation 15
    Equation 16
    Equation 17
    Equation 18
    Equation 19
    नोट: Y13 अधिकतम मान है। इसलिए, मोटाई के टुकड़े करने का सबसे अच्छा पैरामीटर तीसरा स्तर है - 2 सेमी।

   

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Representative Results

इस अध्ययन में, उपयोग किए गए क्षालन ढाल में ज़ांबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी में तीन सूचकांक घटकों के लिए एक अच्छा रिज़ॉल्यूशन (चित्रा 1) था, जैसा कि बार-बार डिबगिंग के बाद निर्धारित किया गया था। ज़ानबा-स्टिर-फ्राइड टीबीसी में तीन सूचकांक घटकों का एक विशिष्ट एकाग्रता सीमा (तालिका 2) के भीतर एक अच्छा रैखिक संबंध था। ज़ांबा-स्टिर-फ्राइड टीबीसी की परिशुद्धता (तालिका 5), स्थिरता (तालिका 6), पुनरावृत्ति (तालिका 7), और नमूना वसूली (तालिका 8) सभी चीनी फार्माकोपिया (वॉल्यूम 4, 2020)22 में निर्दिष्ट पद्धतिगत सीमा के भीतर थे, यह दर्शाता है कि विधि संभव थी। इसलिए, एचपीएलसी विधि ज़ांबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी के विश्लेषण का संचालन करने के लिए विश्वसनीय थी।

प्रसंस्करण प्रौद्योगिकी पर प्रत्येक कारक के प्रभाव को एकल-कारक परीक्षणों का उपयोग करके स्पष्ट किया गया था, जिसके परिणाम चित्रा 2 में दिखाए गए हैं। विभिन्न परिस्थितियों में ज़ांबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी के व्यापक स्कोर की प्रवृत्ति की कल्पना की गई थी। स्लाइस मोटाई (ए, 1-3 सेमी), ज़ांबा की मात्रा (बी, 2-4एक्स), प्रसंस्करण तापमान (सी, 100-140 डिग्री सेल्सियस), और प्रसंस्करण समय (डी, 40-80 मिनट) की सीमा एकल-कारक परीक्षणों (चित्रा 2) का उपयोग करके निर्धारित की गई थी।

क्रिटिक विधि एक उद्देश्य मूल्यांकन विधि है जो मापा डेटा19,20 का लाभ उठाती है। जब प्रत्येक सूचकांक में बहुत अलग स्तर होते हैं, तो विश्लेषण के लिए सीधे मूल सूचकांक मूल्य का उपयोग करने से व्यापक विश्लेषण में उच्च मूल्य के साथ सूचकांक की एक बड़ी भूमिका और कम मूल्य के साथ सूचकांक की एक छोटी भूमिका होती है। इसलिए, परिणामों की विश्वसनीयता सुनिश्चित करने के लिए मूल संकेतक डेटा को मानकीकृत किया जाना चाहिए, जैसा कि इस अध्ययन में प्रयोगात्मक मूल्यों पर लागू होता है। प्रतिक्रिया सतह परीक्षण परिणामों और क्रिटिक विधि के अनुसार, प्रतिक्रिया सतह प्रयोग में एमडीए और डीडीए के वजन गुणांक क्रमशः 0.5295 और 0.4705 के रूप में स्थापित किए गए थे। व्यापक स्कोर (Y) की गणना समीकरण (8) के अनुसार की जा सकती है।

Equation 20(8)

बॉक्स-बेहनकेन प्रयोगात्मक डिजाइन के परिणाम तालिका 4 में दिखाए गए हैं , जबकि तालिका 9 एनोवा और प्रतिगमन गुणांक के परिणाम प्रस्तुत करता है। सॉफ्टवेयर विश्लेषण के बाद व्यापक स्कोर के बहुपद समीकरण भी प्राप्त किए गए थे। 0.05 से कम संभावना के मूल्यों ने सुझाव दिया कि मॉडल महत्वपूर्ण था (पी < 0.0001)23; वास्तविक कारकों के संदर्भ में समीकरण समीकरण (9) (वाई: व्यापक स्कोर; एक: टुकड़ा मोटाई; बी: ज़ांबा की मात्रा; सी: प्रसंस्करण तापमान; और डी: प्रसंस्करण समय)। समीकरण ने संकेत दिया कि व्यापक स्कोर पर प्रभाव की तीव्रता इस क्रम का पालन करती है: प्रसंस्करण समय > प्रसंस्करण तापमान > चार अलग-अलग कारकों के लिए स्लाइस मोटाई > ज़ांबा की मात्रा।

Y = 89.05 + 4.57 A + 2.88 B + 4.63 C - 4.83 D + 5.19AB + 4.91AC + 6.97AD + 6.69BC - 7.05BD - 1.17CD - 22.80A 2 - 21.93 B 2 - 19.58 C 2 - 27.19D 2 (9)

प्रतिक्रिया सतहों और समोच्च भूखंडों को चित्रा 3 में दिखाया गया है, जो चार चर के कार्य के रूप में सिंथेटिक स्कोर में परिवर्तन का प्रदर्शन करता है। प्रयोगात्मक परिणामों के आधार पर, ज़ांबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी के इष्टतम प्रसंस्करण पैरामीटर निम्नानुसार निर्धारित किए गए थे: 2.117 सेमी की स्लाइस मोटाई, टीबीसी की तुलना में 3.118 गुना अधिक ज़ांबा, 123.106 डिग्री सेल्सियस का प्रसंस्करण तापमान और 58.156 मिनट का प्रसंस्करण समय। ऑपरेशन की व्यवहार्यता के आधार पर, ज़ांबा की इष्टतम प्रसंस्करण तकनीक को समायोजित किया गया था - टीबीसी की इष्टतम स्लाइस मोटाई 2 सेमी थी, ज़ांबा की मात्रा तीन गुना थी, प्रसंस्करण तापमान 125 डिग्री सेल्सियस था, और प्रसंस्करण समय 60 मिनट था। मॉडल की विश्वसनीयता तीन परीक्षणों के माध्यम से साबित हुई थी जो प्राप्त प्रसंस्करण मापदंडों (तालिका 10) के अनुसार आयोजित किए गए थे।

Figure 1
चित्र 1: क्रोमैटोग्राम। नमूना समाधान (ए) और मिश्रित मानक समाधान (बी) का क्रोमैटोग्राम (1: बेंजोयलाकोनिटाइन; 2: एकोनाइटिन; 3: 3-डीऑक्सीकोनाइटिन)। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 2
चित्रा 2: सभी एकल कारकों के सिंथेटिक स्कोर। (ए) स्लाइस मोटाई; (ख) जांबा की राशि कितनी है; (सी) प्रसंस्करण तापमान; और (डी) प्रसंस्करण समय। परिणामों से पता चला है कि ज़ांबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी के व्यापक स्कोर उच्चतम होते हैं जब स्लाइस मोटाई 2 सेमी होती है, ज़ांबा की मात्रा तीन गुना होती है, प्रसंस्करण तापमान 120 डिग्री सेल्सियस होता है, और प्रसंस्करण समय 60 मिनट होता है। तो, परिणामों ने अगले प्रयोग को डिजाइन करने के लिए उपयोग किए जाने वाले स्लाइसिंग मोटाई (ए, 1-3 सेमी), ज़ांबा (बी, 2-4एक्स), प्रसंस्करण तापमान (सी, 100-140 डिग्री सेल्सियस), और प्रसंस्करण समय (डी, 40-80 मिनट) की सीमा दिखाई। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 3
चित्रा 3: प्रतिक्रिया सतह भूखंड (3 डी) व्यापक स्कोर पर प्रसंस्करण मापदंडों के प्रभाव को दर्शाता है। कृपया इस आंकड़े का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

तालिका 1: एचपीएलसी ढाल। कृपया इस तालिका को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें।

तालिका 2: ज़ानबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी में सूचकांक घटकों का रैखिक संबंध। परिणामों ने सुझाव दिया कि ज़ांबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी में तीन सूचकांक घटकों में एक निश्चित एकाग्रता सीमा के भीतर एक अच्छा रैखिक संबंध था। कृपया इस तालिका को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें।

तालिका 3: प्रयोगात्मक डिजाइन के लिए चर के स्तर। कृपया इस तालिका को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें।

तालिका 4: प्रतिक्रियाओं के साथ बॉक्स-बेनकेन प्रयोगात्मक डिजाइन। कृपया इस तालिका को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें।

तालिका 5: सटीक माप के परिणाम। बेंज़ोयलाकोनिटाइन, एकोनाइटिन और 3-डीऑक्सीकोनिटाइन के चरम क्षेत्रों के सापेक्ष मानक विचलन (आरएसडी) मान क्रमशः 0.42%, 0.71%, और 2.95% (एन = 6) थे। संक्षिप्त नाम: आरएसडी = सापेक्ष मानक विचलन। कृपया इस तालिका को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें।

तालिका 6: स्थिरता परीक्षण के परिणाम। बेंज़ोयलाकोनिटाइन, एकोनाइटिन और 3-डीऑक्सीकोनिटाइन के चरम क्षेत्रों के आरएसडी मान क्रमशः 1.86%, 0.54%, और 2.81% (एन = 6) थे। संक्षिप्त नाम: आरएसडी = सापेक्ष मानक विचलन। कृपया इस तालिका को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें।

तालिका 7: प्रजनन क्षमता परीक्षण के परिणाम। बेंज़ोयलाकोनिटाइन, एकोनाइटिन और 3-डीऑक्सीकोनिटाइन के चरम क्षेत्रों के आरएसडी मान क्रमशः 1.99%, 1.84%, और 2.41% (एन = 6) थे। संक्षिप्त नाम: आरएसडी = सापेक्ष मानक विचलन। कृपया इस तालिका को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें।

तालिका 8: नमूना वसूली दर माप। बेंजोयलाकोनिटाइन, एकोनाइटिन और 3-डीऑक्सीकोनिटाइन की वसूली दर के आरएसडी मूल्य क्रमशः 2.47%, 1.88% और 2.33% थे। संक्षिप्त नाम: आरएसडी = सापेक्ष मानक विचलन। कृपया इस तालिका को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें।

तालिका 9: प्रयोग मॉडल के विचरण (एनोवा) परिणामों का विश्लेषण। कृपया इस तालिका को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें।

तालिका 10: परीक्षणों को सत्यापित करने के परिणाम। कृपया इस तालिका को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें।

पूरक फ़ाइल 1: बॉक्स-बेहनकेन डिजाइन सॉफ्टवेयर के निर्देश कृपया इस फ़ाइल को डाउनलोड करने के लिए यहां क्लिक करें।

पूरक तालिका एस 1: स्लाइस मोटाई का गणना परिणाम। कृपया इस फ़ाइल को डाउनलोड करने के लिए यहाँ क्लिक करें.

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Discussion

टीबीसी ठंड को दूर करने और दर्द से राहत देने के प्रभावों के साथ एक महत्वपूर्ण तिब्बती दवा है। यह ज्यादातर हजारों वर्षों से चीन में दर्दनाक चोट और आमवाती आर्थ्राल्जिया के इलाज के लिए इस्तेमाल किया गया है24,25,26. डिटरपेनॉइड एल्कलॉइड टीबीसी27,28,29 के सक्रिय और विषाक्त तत्व दोनों हैं। टीबीसी के एकोनिटम एल्कलॉइड के मुख्य विषाक्त प्रभाव न्यूरोटॉक्सिसिटी, कार्डियोटॉक्सिसिटी और गैस्ट्रोइंटेस्टाइनल विषाक्तता30,31 हैं। टीबीसी को आमतौर पर विषाक्तता के जोखिम को कम करने के लिए मौखिक उपयोग से पहले संसाधित किया जाता है। विभिन्न प्रसंस्करण विधियां, जैसे स्टीमिंग, काढ़ा, और रेत-तलना, साथ ही हेज़ी काढ़ा, क़िंगके वाइन और ज़ांबा के साथ प्रसंस्करण, इसकी प्रभावकारिताको संरक्षित करते हुए टीबीसी की विषाक्तता को कम करने में उपयोगी रहे हैं। उनमें से, ज़ांबा-स्टर-फ्राइंग एक महत्वपूर्ण प्रसंस्करण विधि है। ज़ांबा का उत्पादन हाइलैंड जौ (होर्डियम वल्गारे एल. वर. नुदुम हुक एफ) से किया जाता है, जो किंघाई-तिब्बत पठार32,33 में रहने वाले लोगों के लिए एक महत्वपूर्ण अनाज है। हालांकि, ज़ांबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी तैयार करने के सटीक पैरामीटर अभी भी स्पष्ट नहीं हैं, यही कारण है कि इस प्रसंस्करण तकनीक को इसकी गुणवत्ता नियंत्रण और सुरक्षित अनुप्रयोग सुनिश्चित करने के लिए मानकीकृत करने की आवश्यकता है।

विधि का सबसे महत्वपूर्ण पहलू यह है कि मूल्यांकन सूचकांक क्रिटिक विधि के साथ निर्धारित किया गया था। हाल के अध्ययनों के अनुसार, अत्यधिक विषाक्त डीडीए को हीटिंग प्रक्रिया34,35 के दौरान मध्यम विषाक्तता के साथ एमडीए में हाइड्रोलाइज्ड या पायरोलाइज किया जा सकता है। अध्ययनों से पता चला है कि बेंज़ोयलाकोनिन के लिए एकोनाइटिन हाइड्रोलिसिस विशिष्ट उदाहरण36 है। इसलिए, प्रसंस्करण प्रक्रिया में संरचना परिवर्तन को प्रक्रिया प्रौद्योगिकी अनुकूलन में मूल्यांकन सूचकांक के रूप में लिया गया था। क्रिटिक विधि एक उद्देश्य वजन विधि है जो मुख्य रूप से संकेतकों की भिन्नता और संकेतकों के बीच संघर्ष पर विचार करती है, जो क्रमशः मानक विचलन और सहसंबंध गुणांक द्वारा व्यक्त की जाती है। यह पारंपरिक चीनी चिकित्सा37,38 के प्रसंस्करण में व्यापक रूप से लागू किया गया है। इस प्रोटोकॉल में, ज़ांबा-स्टिर-फ्राइड टीबीसी के मुख्य घटकों के वजन, जिसमें बेंज़ोयलाकोनिटाइन, एकोनाइटिन और 3-डीऑक्सीकोनिटाइन शामिल हैं, की गणना उद्देश्य असाइनमेंट की क्रिटिक वजन विधि का उपयोग करके की गई थी, जिसका उपयोग ज़ानबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी के मूल्यांकन मानक के रूप में किया गया था।

प्रमुख प्रयोगात्मक प्रक्रियाओं में से एक प्रसंस्करण के दौरान एक निरंतर प्रसंस्करण तापमान सुनिश्चित करना है, क्योंकि प्रसंस्करण तापमान डीडीए के अपघटन को बहुत प्रभावित करता है। इसलिए, पूर्व-प्रयोग में कई प्रकार के हीटिंग उपकरणों का उपयोग शामिल था, जैसे कि इंडक्शन कुकर, इलेक्ट्रिक सिरेमिक स्टोव और मल्टीफंक्शनल स्टर-फ्राई मशीन। बहुक्रियाशील स्टर-फ्राई मशीन एक निरंतर तापमान बनाए रख सकती है और संसाधित उत्पाद की गुणवत्ता को स्थिर कर सकती है।

यद्यपि अनुकूलित प्रसंस्करण तकनीक टीबीसी की विषाक्तता को प्रभावी ढंग से कम कर सकती है, सीमाएं अभी भी मौजूद हैं। सबसे पहले, ज़ांबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी में कुछ सक्रिय तत्व अज्ञात रहते हैं। इसलिए, गुणात्मक और मात्रात्मक विश्लेषण नहीं किया जा सकता है क्योंकि प्रासंगिक संदर्भ उत्पाद उपलब्ध नहीं है। लक्ष्य गुणवत्ता नियंत्रण घटकों को प्राप्त करने के लिए फाइटोकेमिकल जांच पर अधिक ध्यान दिया जाना चाहिए। इसके अलावा, कच्चे और ज़ांबा-स्टर-फ्राइड टीबीसी की औषधीय तुलना स्पष्ट नहीं है। पशु मॉडल में प्रभावकारिता आरक्षण प्रभावों का विषहरण और मूल्यांकन अगले उद्देश्य होंगे।

पारंपरिक चीनी चिकित्सा प्रसंस्करण संस्कृति मुख्य रूप से मास्टर से प्रशिक्षु तक पारित की जाती है, और प्रसंस्करण का अंतिम बिंदु आम तौर पर लोगों की व्यक्तिपरक चेतना द्वारा आंका जाता है, जो मानकीकृत प्रसंस्करण विधि की स्थापना के लिए अनुकूल नहीं है। इस अध्ययन में, प्रसंस्करण समापन बिंदु को निर्दिष्ट करने के लिए डिजिटल प्रक्रिया मापदंडों का उपयोग किया गया था, जो एक निश्चित सीमा तक आधुनिक तकनीक के संयोजन का एहसास कर सकता है। सारांश में, इस अध्ययन ने टीबीसी के विषाक्त क्षीणन और प्रभावकारिता आरक्षण के लिए ज़ांबा-स्टर-फ्राइड प्रसंस्करण तकनीक को मानकीकृत किया। यह दृष्टिकोण अन्य जहरीली जातीय दवाओं की प्रसंस्करण तकनीक के लिए उपयोगी जानकारी और मार्गदर्शन प्रदान कर सकता है।

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Disclosures

लेखकों के पास खुलासा करने के लिए हितों का कोई टकराव नहीं है।

Acknowledgments

इस काम को चीन के राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (नंबर 82130113), चीन पोस्टडॉक्टरल साइंस फाउंडेशन (नंबर 2021एमडी 703800), सिचुआन प्रांत के विज्ञान और प्रौद्योगिकी विभाग के युवाओं के लिए साइंस फाउंडेशन (संख्या 2022 एनएसएफएससी 1449), और चेंगदू यूनिवर्सिटी ऑफ ट्रेडिशनल चाइनीज मेडिसिन के "जिंगलिन स्कॉलर्स" रिसर्च प्रमोशन प्रोग्राम द्वारा वित्तीय रूप से समर्थित किया गया था। BSH2021009)।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
3-Deoxyaconitine Chengdu Desite Biotechnology Co., Ltd. DST221109-033
Aconitine Chengdu Desite Biotechnology Co., Ltd. DSTDW000602
Ammonium acetate Tianjin Kermel Chemical Reagent Co., Ltd Chromatographic grade
Benzoylaconitine Chengdu Desite Biotechnology Co., Ltd. DSTDB005502
Design-Expert software Stat-Ease, Inc., Minneapolis, MN, USA version 13.0
Electronic analytical balance Shanghai Liangping Instruments Co., Ltd. FA1004
High performance liquid chromatography SHIMADZU Co., Ltd. LC-20A
High-speed smashing machine Beijing Zhongxing Weiye Instrument Co., Ltd. FW-100
Millipore filter Tianjin Jinteng Experimental Equipment Co., Ltd φ13 0.22 Nylon66
stir-Fry machine Changzhou Maisi Machinery Co., Ltd Type 5
Tiebangchui Gannan Baicao Biotechnology Development Co., Ltd 20211012
Ultra pure water systemic RephiLe Bioscience, Ltd. Genie G
Ultrasonic cleansing machine Ningbo Xinyi Ultrasonic Equipment Co., Ltd SB2200
Zanba 27 Chuanzang Road, Ganzi County -

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References

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